分子标记在猕猴桃性别基因研究中的应用

概述了猕猴桃性别分化的研究情况,简单介绍了几种常用的DNA分子标记技术,并概括了分子标记技术在猕猴桃性别基因研究中的研究进展。     

Ag+对猕猴桃愈伤组织再分化培养的影响

以秦美猕猴桃茎段为外植体诱导猕猴桃愈伤组织,进行再分化及生根试验.通过在再分化及生根培养基中分别添加不同浓度Ag+进行筛选试验,确定了适于猕猴桃愈伤组织再分化及生根的最佳Ag+浓度.结果表明:适度增加Ag+浓度,可明显提高猕猴桃愈伤组织绿苗再分化率和生根率.     

猕猴桃实生苗性别比例和花器官分化研究

调查研究了红阳和武植3号猕猴桃种子实生苗高位嫁接后性别比例和花器官分化情况,结果表明:红阳与武植3号猕猴桃实生苗接穗性别完全分化确定后,其雌雄性别比例均接近1∶1。红阳实生苗的整个花期在3月中旬至3月底,从始花期至终花期为17 d左右,武植3号猕猴桃的始花期至终花期在4月上旬至4月中下旬,花期时间长达25 d。总的来看,2个品种猕猴桃的实生苗接穗雄花花期总体上比雌花花期稍早,但2个品种猕猴桃亲代和F1代花器官性状遗传较为稳定。红阳的雌花花瓣数略高于雄花,但没有显著差异,雄花的雄蕊数个体差异较大;而武植3号的雌雄之间花瓣数并无差异,且雄花的雄蕊数个体差异较小。红阳花粉萌发率要低于武植3号,且红阳不同花朵个体间的花粉萌发率的差异略大于武植3号。     

铜离子对猕猴桃愈伤组织再分化培养的研究

以秦美猕猴桃茎段为外植体,诱导愈伤组织并进行猕猴桃再分化及生根试验。在分化培养基中分别添加不同浓度的铜离子进行筛选,以确定适于猕猴桃愈伤组织分化的最佳铜离子浓度。结果表明:再分化培养基中添加1.0 mg.L-1的铜离子时,可明显提高猕猴桃愈伤组织绿苗再分化率及生根率。但当铜离子浓度超过2.0 mg.L-1时,猕猴桃愈伤组织绿苗再分化率显著降低。     

性别分子标记在毛花猕猴桃中的通用性验证

【目的】猕猴桃是雌雄异株多年生木质藤本植物,其经济价值的主要载体为雌性植株的果实,将性别鉴定技术应用于早期实生苗对育种工作意义重大。目前已开发出可稳定鉴别中华猕猴桃和山梨猕猴桃种群性别的分子标记,可以检测出生物个体之间在核苷酸序列水平上的差异,极大降低了环境因素的干扰,验证这些标记在毛花猕猴桃种质资源中的通用性可扩大这些标记在猕猴桃属植物中的应用范围,从而在植株早期鉴定出其性别,以提高猕猴桃资源利用率。【方法】利用已知性别的10份江西野生毛花猕猴桃DNA样品作为材料,用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对PCR扩增产物进行检测,对退火温度进行多次筛选,确定最佳退火温度,对已报道的适用于某些猕猴桃品种的性别分子标记A001、A002、UDK96-009及UDK96-013等8个标记在毛花猕猴桃中的通用性进行验证。【结果】(1)8个分子标记中,A001、A002、UDK96-013和UDK96-019这4个标记均在毛花猕猴桃中能扩增出清晰明亮的多态性片段,但未能鉴别出有效的性别特异片段,因此不具备鉴定毛花猕猴桃性别的作用;(2)分子标记UDK96-009只在少量几个样品中扩增出较清晰的条带,但多态性较...     

秦美猕猴桃高频遗传转化再生体系的建立

以秦美猕猴桃茎段为外植体,在原代培养成功获得无菌试管苗的基础上,进行愈伤组织诱导培养。将获得的秦美猕猴桃愈伤组织转入再分化培养基中,采用正交设计试验,添加不同种类及不同浓度的植物生长调节物质,组成9种不同的再生植株分化培养基,对秦美猕猴桃愈伤组织进行再分化培养。结果表明,诱导培养基中添加1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA暗培养,有利于秦美猕猴桃愈伤组织的形成,诱导率达100.0%;再分化培养基中添加3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+50 g/L蔗糖,能明显提高秦美猕猴桃愈伤组织再分化率。这种方法把诱导愈伤组织与再分化分开进行,可以获得更多的愈伤组织进行再分化培养基的优化,也有利于进行秦美猕猴桃的遗传转化研究。     

广东省猕猴桃种质资源rbcL基因的多样性分析

利用clustal W软件对42个猕猴桃(Actinidia spp.)品种及种内不同性别间的rbcL基因序列进行了亲缘关系分析,还根据"和平红阳"猕猴桃雌株和雄株的叶绿体基因rbcL序列与GenBank的其他猕猴桃rbcL基因序列进行UPGMA聚类比对.结果表明,广东省野生猕猴桃种质资源中rbcL基因序列具有一定的多样性,猕猴桃野生种rbcL基因的多样性高于栽培品种和种内不同性别.通过对猕猴桃clustal W亲缘关系分析和UPGMA聚类比对,显示猕猴桃种间的rbcL基因差异性明显,可分为4组类群.认为rbcL基因的DNA条形码技术适用于猕猴桃属植物的多样性研究,将为猕猴挑的系统发育研究和猕猴桃资源保育提供一种研究思路和技术方法.     

Zn2+对猕猴桃再生体系的影响

以秦美猕猴桃实生苗叶片为外植体,进行愈伤组织诱导培养;在已经筛选出的最适增殖、分化及生根培养基中添加不同浓度的Zn2+进行增殖、分化及生根培养试验.结果表明,适当提高Zn2+的浓度,能提高猕猴桃愈伤组织的增殖生长量;对猕猴桃愈伤组织分化率及再生植株生根率的提高效果显著.     

狗枣猕猴桃花芽分化的观察

对狗枣猕猴桃花芽分化的形态特征进行了观察。结果表明 ,狗枣猕猴桃花芽为混合芽 ,分化时期为当年的 3月中旬至 4月上旬 ,且具有分化时间短、速度快的特点。其形态分化可分为 5个时期 ,即未分化期、花芽分化始期、花被原基分化期、雄蕊原基分化期、雌蕊原基分化期。雌、雄花形态差异出现在雌蕊原基开始化时期。     

毛花猕猴桃(Actinidia eriantha Benth.)的染色体与花粉母细胞减数分裂的观察

毛花猕猴桃是雌雄异株植物,但雌株和雄株的花器结构,仍分别保留着雄性或雌性的退化器官。毛花猕猴桃的染色体数2n=58。无论雌花或雄花,花粉母细胞均能进行减数分裂。在第一次分裂的终变期或中期,有29个二价体。减数分裂的整个过程,染色体行为正常,但雌花的花粉最终则完全败育。花粉母细胞的减数分裂,是在雌雄花形态上分化之后才进行的,表明雌雄株花粉发育的差异,是由各个体的基因型所决定的。毛花猕猴桃各个植株的性别功能表现相当稳定,但性别的决定机制至今仍未搞清,深入研究其性别决定的机制,在学术上和育种实践上均有重要意义。