Ghrelin在成年皖西白鹅小肠内的免疫组化定位研究

采用免疫组化SABC法并结合DAB显色技术研究了皖西白鹅小肠内Ghrelin阳性细胞及其分布。结果：①Ghrelin免疫阳性细胞主要位于小肠的黏膜层，而黏膜下层和肌层未见Ghrelin阳性细胞。这些阳性细胞，胞浆着色，主要有两类，一类为“闭合型”细胞，呈圆形或椭圆形，其顶部不露于腔面，另一类为“开放型”细胞，呈锥体型，细胞顶部达到腔面。②在十二指肠，“开放型”和“闭合型”两种阳性细胞均可观察到，而在空肠和回肠，主要为“闭合型”阳性细胞。产生Ghrelin的细胞在成年皖西白鹅小肠黏膜层有广泛的分布，揭示Ghrelin可能调节小肠的功能。     

产蛋期皖西白鹅生殖系统的形态学观察

研究采用大体解剖法、石蜡切片法、HE染色法等对20只产蛋期的皖西白鹅母鹅生殖系统的形态结构和组织结构进行了观察,结果如下:皖西白鹅母鹅的生殖系统包括卵巢和输卵管两部分,仅左侧发育正常,右侧早已退化,卵巢表面被覆生殖上皮,下方是白膜,其实质由皮质和髓质组成,皮质内含有不同发育阶段的卵泡和萎缩卵泡,大卵泡突出了卵巢表面,卵泡无卵泡腔,也无卵泡液,排卵后不形成黄体。输卵管分为漏斗部、蛋白分泌部、峡部、子宫部和阴道部5个部分,各段均由黏膜层、肌层和外膜构成,黏膜上皮有纤毛,固有层内有腺体和淋巴组织,无黏膜肌层,肌层由内环外纵两层平滑肌组成,外膜为浆膜。     

FSH分泌细胞在皖西白鹅脑垂体中的分布与定位

采用免疫组化SABC法并结合DAB显色技术时皖西白鹩脑垂体结构和促卵泡素(follicular stimulating hormone,FSH)分泌细胞进行了研究和定位.结果发现,皖西白鹅的垂体前叶由远侧部和结节部构成,没有中间部.垂体FSH免疫阳性细胞分布广泛,但前叶远侧部分布较多,从而表明皖西白鹅整个垂体都有FSH分泌,主要分泌部位在垂体前叶的远侧部.     

雄性食蟹猴生殖系统中Ghrelin的分布定位

本文采用免疫组织化学染色方法,探讨ghrelin在雄性食蟹猴生殖系统内的分布定位。通过对ghrelin免疫阳性细胞在生殖系统中分布部位、含量及细胞形态等方面的研究,为今后ghrelin在食蟹猴体内的功能研究奠定形态学基础。免疫组化染色发现,ghrelin阳性细胞在食蟹猴的生殖系统中有分布。Ghrelin免疫阳性细胞被染为棕色到棕黑色,主要分布于睾丸、附睾及输精管中,精囊腺中无ghrelin阳性细胞分布。Ghrelin阳性细胞在组织中多呈散在分布。细胞大小不一、形态各异,多呈圆形、卵圆形、锥体形、长柱形及其他不规则形。     

Ghrelin在成年皖西白鹅大、小脑内的免疫组化定位

采用免疫组化技术链酶亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(StreptAvidin-Biotin-Complex,SABC)法,对成年皖西白鹅大脑和小脑中ghrelin神经元的定位和分布进行了研究。结果显示,大脑分泌ghrelin的神经元和神经纤维主要分布在大脑皮质内,其中锥体层阳性神经元数量最多,多为锥体细胞;小脑分泌ghrelin的神经元主要分布在小脑皮质内,其中蒲肯野细胞层和分子层免疫阳性神经元数量最多,颗粒层阳性神经元数量较少;而大脑和小脑白质内均未见分布。这表明ghrelin在成年皖西白鹅大脑和小脑皮质中分布广泛,可能以自分泌/旁分泌的形式调节中枢神经系统。     

皖西白鹅母鹅生殖器官的解剖观察

本试验研究了皖西白鹅母鹅生殖器官的形态特征。试验应用１０只皖西白鹅母鹅，鹅放血致死后，标本用１０％辐尔马林溶液固定，通过肉眼和放大镜观察生殖器官的形态特征，。结果表明成年皖西白鹅母鹅的生殖器官包括卵巢和输卵管两部分，仅左侧发育正常，右侧早已退化，卵巢大小随鹅的年龄和季节有很大变化；输卵管分漏斗部、蛋白分泌部、峡部、子宫部和阴道部五个部分。     

血管活性肠肽在皖西白鹅中脑和脑桥内的分布

应用免疫组织化学SABC染色法，对血管活性肠肽(VIP)免疫反应阳性细胞在皖西白鹅中脑和脑桥内的分布进行了观察。结果发现，在皖西白鹅中脑的被盖视性核、峡视核、动眼神经核、红核、三叉中脑核和脑桥的脑桥核、桥外侧核、斜方体核、前庭背外侧核均分布有VIP免疫阳性细胞。     

Ghrelin在梅花鹿体内的免疫组化定位研究

为了阐明胃饥饿素(Ghrelin)在梅花鹿体内的表达规律,采用免疫组织化学方法检测Ghrelin在梅花鹿食管、瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、肝、胰、甲状腺、垂体前叶、卵巢、肺、肾和脾等组织中的分布规律。结果显示:Ghrelin免疫阳性细胞在食管和皱胃内主要分布于黏膜层、黏膜下层和肌层;在网胃、瓣胃和瘤胃的黏膜层及黏膜下层中均可见Ghrelin免疫阳性细胞,但肌层中未见表达;在肠道主要定位于黏膜层、黏膜下层和肌层,尤其在肠绒毛和黏膜下层分布较多;在肝、胰、甲状腺、垂体前叶、卵巢、肺、肾、脾等实质器官中同样发现有Ghrelin免疫阳性信号的表达。结果提示,Ghrelin在梅花鹿体内广泛表达且在食管和胃肠道内分布范围最广。     

促凋亡基因(Bad)在卵泡期绵羊生殖器官中的表达

以卵泡期小尾寒羊和萨福克羊为研究对象,采用免疫组织化学技术,对促凋亡基因(Bad)在生殖器官卵巢、输卵管和子宫中的表达与定位进行初步研究。结果表明,在卵巢组织中Bad基因在原始卵泡、初级卵泡和次级卵泡中呈中度着染,在三级卵泡中呈轻度着染,阳性细胞在卵泡上皮细胞和颗粒细胞中分散分布,呈轻度着染;输卵管上皮分泌细胞和部分纤毛细胞胞质中见Bad基因中等强度表达,输卵管壶腹部上皮中,Bad基因多表达于分泌细胞,纤毛细胞中有部分呈阳性且强度弱,宫管结合部、峡部和壶腹部Bad基因阳性细胞染色强度弱,均呈中度着染;子宫内膜子叶和基质中的阳性细胞数量极少,阳性细胞呈轻度着色。利用计算机图像分析技术测量小尾寒羊和萨福克羊生殖器官各组织细胞中Bad基因表达的阳性细胞率和平均光密度,结果Bad基因在这2品种绵羊组织中的表达规律大体相似,但也存在一些明显的差异:萨福克羊三级卵泡颗粒细胞Bad基因阳性细胞率显著高于小尾寒羊(P0.01);萨福克羊三级卵泡和成熟卵泡膜细胞Bad基因阳性细胞率和平均光密度均显著高于小尾寒羊(P0.01);萨福克羊子宫内膜腺体卵泡期Bad基因阳性细胞平均光密度显著高于小尾寒羊(P0.01);由此表明,小尾寒羊和萨福克羊卵泡期生殖器官中细胞凋亡的差异与Bad基因表达的差异,可能是造成两者繁殖力高低差异的基础。     

Ghrelin在驯鹿胃肠道的表达及定位检测

通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和免疫组织化学技术对Ghrelin在驯鹿胃肠道的表达及定位进行初步研究。RT-qPCR结果显示,Ghrelin在驯鹿胃肠道内均有表达,且在皱胃内表达量极显著高于其他组织(P0.01),其次是十二指肠、回肠和结肠;免疫组织化学结果显示,Ghrelin免疫阳性细胞在皱胃内主要分布于黏膜层、黏膜下层和肌层;在瘤胃、网胃、瓣胃的黏膜层、黏膜下层中也可见Ghrelin的免疫阳性细胞,但肌层中未见表达;在十二指肠、空肠、回肠、结肠的黏膜层、黏膜下层和肌层均有Ghrelin免疫阳性细胞分布,且在肠绒毛和黏膜下层分布较多。RT-qPCR和免疫组织化学结果显示,Ghrelin在胃肠道内表达量及分布范围基本一致,这表明Ghrelin对驯鹿的消化可能具有潜在的调控作用。     

Immunolocalization of ghrelin in the stomach of Sprague-Dawley rat

To investigate the distribution of ghrelin in different regions of stomach in Sprague-Dawley rat, and attempt to compare with those of humans and other mammalian species in this study, the stomach of rats was divided into five sections, cardia, fundus, greater curvature, lesser curvature and pylorus. Immunohistochemistry and Western blotting were performed to investigate the ghrelin-producing cells. The immunolocalization and protein levels of ghrelin differed significantly in different regions of stomach in rats. It was present at a high level in the greater curvature of the pars glandularis, and the lesser curvature. In the fundus and pylorus, no ghrelin immunoreactive cells were detected. In this study, we elucidated the distribution of ghrelin-producing cells in different regions of rat stomach in detail for the first time. It is further considered that the differences of ghrelin distribution in stomach of different species may induce different stimulatory effects on fat accumulation and metabolism.     

Distribution of Eosinophils and Mast Cells in the Cervical Tissue of Non-Gravid Mares during Dioestrus

Little is known about the local cellular immune system of the equine cervix. In this study we characterize the distribution of eosinophilic granulocytes and mast cells in the cervical tissue of non-gravid mares during dioestrus. For this purpose cervices of 10 mares were histologically examined after Sirius red and Toluidine blue staining. Both cell types could be found in the lamina propria mucosae. In the tunica muscularis the two cell populations were only rarely detected. No cells could be found in the epithelium mucosae. There was a decreasing cell density from the vaginal to uterine side of the cervix (p < 0.01). Therefore, eosinophils might be a part of the local cellular immune system of the equine cervix during dioestrus, unlike in animals studied so far as cows and rats.     

禁食对生长期北京鸭腺胃ghrelin免疫阳性细胞的影响

本研究旨在观察禁食是否对生长期北京鸭腺胃ghrelin免疫阳性细胞生成有影响。用免疫组织化学的方法检测25、35、50日龄的北京鸭(已经禁食72 h)单位面积(mm2)腺胃组织中ghrelin阳性细胞数目。研究发现在这3个时期,不管是禁食组还是自由采食组,大量ghrelin阳性细胞多分布于腺胃深层复管状腺中;禁食组腺胃中gh-relin阳性细胞数目比自由采食组极显著增加(P0.01)。结果提示:禁食是影响腺胃产生有活性ghrelin的重要因素。     

Morphological and immunocytochemical investigations on mast cells in porcine ureter

Morphological, morphometric, histochemical and immunocytochemical investigations on mast cells, located in the wall of ureter of 8 months aged pigs were performed. Mast cells were found in all three layers of ureteral wall, but their distribution was irregular and the number unequal. It was established that alcian blue (AB)-positive mast cells were significantly more than toluidine blue (TB)-positive mast cells. A statistically significant smaller number of both AB and TB-stained mast cells were observed in the tunica mucosa. The largest number of mast cells was found in the tunica muscularis. In the adventitia, mast cells were higher in number in the main connective tissue than in the connective tissue near the blood vessels. Mast cells stained with TB showed variably expressed gamma-metachromasia, which was best visible in those situated in the lamina propria of the mucosa. The prevailing parts of mast cells, however, were AB-positive after AB-safranin staining. This was mostly found in mast cells of the tunica muscularis and in mast cells of perivascular location in the tunica adventitia. Immunocytochemically, mast cells were found to be positive for histamine and vasoactive intestinal polypeptide in the muscle coat, and to histamine in the adventitia, as well. On the basis of obtained results it was presumed that the mast cells in porcine ureter most probably took part not only in keeping of local homeostasis, but played also an important role of mobility of smooth muscle cells in the middle layer of ureter on one hand, and, on the other, in the adventitial blood vessels.     

大雁生殖系统的解剖学和组织学研究

实验对生殖季节与非生殖季节的大雁生殖系统进行了组织学研究。大雁雌性生殖系统左侧发育，右侧退化。生殖系统由卵巢、输卵管、交际器组成。输卵管包括漏斗部、蛋白分泌部、峡部、子宫与阴道五个部分。卵巢表面无浆膜覆盖，覆以单层生殖上皮，由浅部的皮质和深部髓质组成，皮质内含各级卵泡。雄性生殖系统由精巢、输精管、睾丸旁导管系统和交接器组成。精巢的基本结构单位为曲精细管，外层包被着浆膜，其下是白膜，白膜结缔组织伸入精巢实质部，呈网状分布，繁殖季节的睾丸实质内充满曲细精管。     

雌性空怀双峰驼生殖道的形态结构

应用组织学方法观察了雌性空怀双峰驼生殖道的形态结构。结果显示，双峰驼生殖道的基本结构与其他哺乳动物相似，但微细结构有差异。双峰驼输卵管粘膜皱襞极其发达，分支多而呈复杂的网状迷路。皱襞基部的迷路酷似固有膜而存在腺体，迷路网格内常见细胞团块。虽然双峰驼怀孕时胎儿位于左侧子宫角，但左、右子宫角以及子宫体的组织结构基本相同。子宫内膜无肉阜，上皮下陷于固有膜内，形成大量长而弯曲的单管状腺。子宫颈固有膜浅层分布有许多小腺体，深层分布有成群的较大腺体。这些腺体为分支管状腺，腺上皮PAS强阳性。阴道粘膜上皮为复层上皮。从输卵管到阴道，粘膜上皮主要为单层柱状上皮，由纤毛细胞和分泌细胞组成，局部可见假复层柱状纤毛上皮。纤毛细胞由前向后逐渐减少，但在子宫颈仍可见到。粘膜上皮和腺上皮内夹有许多淋巴细胞或中性粒细胞，后段局部甚至见到这些免疫细胞浸润于上皮细胞间。固有膜内分布有大量淋巴细胞、中性粒细胞、肥大细胞、浆细胞和巨噬细胞，有时出现淋巴滤泡。     

蒙古绵羊卵丘细胞ghrelin部分序列的鉴定

为了研究生长激素释放多肽(ghrelin)mRNA是否在蒙古绵羊卵丘细胞中表达,试验根据Gen-Bank中报道的绵羊ghrelin序列设计1对特异性引物,以蒙古绵羊卵丘细胞中的RNA为模板,采用实时定量RT-PCR技术扩增蒙古绵羊ghrelin的cDNA,并进行测序分析。结果表明:扩增得到的蒙古绵羊ghrelin cDNA为ghrelin的部分序列,将测序结果与已发表的绵羊ghrelin序列进行比对发现,233个碱基中有1个碱基的差异,该差异不影响翻译后多肽的序列;该cDNA片段包含长度为231 bp的开放读码框(ORF),编码77个氨基酸的绵羊ghrelin前原肽。     

余干乌骨鸡胃和小肠肥大细胞的分布特点

通过石蜡切片、改良甲苯胺蓝染色的方法对余干乌骨鸡主要胃肠道内的肥大细胞进行鉴定和分布特点分析。结果显示,在余干乌骨鸡的腺胃、肌胃、十二指肠、空肠和回肠管壁内皆有肥大细胞的分布,尤其是腺胃和肌胃内肥大细胞尤为丰富。肥大细胞主要位于胃肠道管壁内的黏膜固有层和肌层中,有些围绕着血管周围分布。黏膜下层极少有肥大细胞分布。外膜内无肥大细胞,但空肠外膜外附有的结缔组织中,脂肪细胞周围有肥大细胞分布。肥大细胞体积较大,多数呈卵圆形,有的细胞形态不规则,甚至有突起。胞质中含有紫红色颗粒。结果表明,余干乌骨鸡胃肠道管壁内具有丰富的肥大细胞,余干乌骨鸡胃肠道具有较强的抗病原微生物和抗寄生虫功能,肠道免疫屏障较为完善。同时,大量的肥大细胞在胃肠道内的分布可能与黑色素的生成具有相关性。