提高棉花花药愈伤组织诱导率的研究

研究了棉株不同节位,低温预处理,激素等条件对５０个棉花品种（系）花药愈伤组织诱导率的影响。结果表明,以５￣８果枝上１￣２果的花药做材料,低温处理６ｄ后在附加１．５ｍｇ／Ｌ ２,４－Ｄ＋０．５ｍｇ／Ｌ ＺＴ的ＭＳ培养基在培养,愈伤组织发生最好。     

不同筛选剂对大豆原生质体愈伤组织生长的影响

利用低温、低氮、低磷、低钾及各种氨基酸类似物等筛选剂对大豆原生质体愈伤组织进行筛选，以探索大豆原生质体对筛选因子的敏感性。结果表明：（1）愈伤组织对低温十分敏感；（2）愈伤组织对低氮、低磷、低钾敏感性不一．（3）愈伤组织对各种氨基酸类似物的敏感性不一，基本趋势是随着浓度的升高愈伤组织的鲜重、成活率下降。     

(木奈)幼胚胚性愈伤组织诱导的研究

试验以油（木奈）幼胚为材料，研究外植体大小、低温处理、基本培养基类型、碳源、培养基中的2，4-D浓度、AgNO3的添加与否对胚性愈伤组织诱导的影响，结果表明，长轴为5—7．9mm低温处理18h的幼胚，诱导胚性愈伤组织的效果最好；使用山梨醇（浓度为3％）为碳源、含氮量低的WPM培养基，胚性愈伤组织的诱导效果优于蔗糖为碳源、含氮量高的MS培养基；幼胚胚性愈伤组织诱导的最适2，4-D浓度为2．0mg／L，培养基中附加5．0mg／LAgNO3有助于提高胚性愈伤组织的诱导率。     

温度处理对春小麦花药愈伤组织诱导率影响初报

小麦愈伤组织的诱导频率在小麦花药组培中有着极其重要的作用。本文探讨了三种温度处理（低温处理、包括预处理和后处理；高温后处理；低温预处理和高温后处理两者的配合处理）对春小麦愈伤组织的诱导频率后发现；多数品系的接种穗在４℃冰箱内进行三￣六天的低温预处理，能够提高出愈率，预处理超过六天，大部分花粉都已过了最佳接种时期，使出愈率下降。低温预处理的诱导效果明显地要比低温后处理的好。接种后的花药经过六￣九天的     

棉花胚性愈伤组织长期保持的研究（简报）

棉花胚性愈伤组织长期保持的研究（简报）张宝红，李秀兰，李付广，王武，李凤莲（中国农业科学院棉花研究所，河南安阳４５５１１２）在继代培养过程中，因部分胚性细胞转化为非胚性细胞，丧失了胚胳发生能力。棉花胚性愈伤组织长期保持的最适宜继代周期为２０～３０天。...     

关中地区不同小麦品种幼胚离体培养特性差异比较

以陕西关中地区15个小麦品种为材料,对其幼胚离体培养特性进行了研究,并讨论了不同培养基、不同蔗糖浓度及接种前低温处理时间等对小麦幼胚培养效果的影响。结果表明：（1）不同品种愈伤组织形成速度明显不同且愈伤组织诱导率存在差异;（2）4种不同培养基（MS、C17、N6、W14）中,以MS培养基对愈伤组织诱导效果较好;（3）未成熟种子低温储藏时不易超过3d,时间太长会影响愈伤组织诱导率;（4）蔗糖浓度在6%～9%时,形成的愈伤组织质量较好。     

低温预处理对西瓜花药愈伤组织诱导的影响

以 Ｍ Ｓ为基本培养基附加 Ｎ Ａ Ａ、６ Ｂ Ａ 和 Ｋ Ｔ，对在 ４ ℃和 １０ ℃低温下处理 ２４ ｈ 和 ７２ ｈ 的西瓜花药组织的影响及花药愈伤组织的形成作了观察。结果发现处理后的花药经过前期的褐变，在 ２ 个月时开始形成愈伤组织。其中“西农 ８ 号”在 ４ ℃低温下处理 ７２ ｈ 后的愈伤组织诱导率高达 ３５０１％ ； Ｎ Ａ Ａ 在花药愈伤组织的形成中起主要作用，而不同基因型材料花药的抗冻性表现出一定差异。     

牡丹花药培养的初步研究

研究了不同低温预处理和高温预处理时间以及不同浓度激素组合对牡丹花药培养的影响。结果表明，未作任何处理的花药，其愈伤组织平均诱导率明显高于经过低温和高温预处理的花药（P〈0．05）；愈伤组织最佳诱导培养基为：MS＋2，4-D2．0mg/L＋6-BA 1．0mg/L，愈伤组织的平均诱导率最高达36．87％。     

棉花新陆早17号愈伤组织中盐响应相关基因的表达分析

[目的]愈伤组织是一种研究植物生长发育及基因调控的理想实验材料,开展盐胁迫对棉花愈伤组织基因表达影响的研究,有助于阐明棉花愈伤组织基因的表达特性.[方法]对棉花新陆早17号品种非胚性愈伤和胚性愈伤进行盐胁迫处理,采用半定量RT-PCR技术,对棉花不同基因GhATPase-b、GhBADH、GhNHX1和GhP5 CS盐响应相关基因在不同NaC1浓度胁迫0、14和28 d时的表达情况进行分析.[结果]100 mmol/LNaC1促进棉花非胚性愈伤和胚性愈伤的生长分化;在新诱导的非胚性愈伤中,GhNHX1的表达水平先降低后小幅升高,而GhA TP ase-b、GhBADH及GhP5CS相对表达量随处理时间延长均呈上调表达;在继代多次的非胚性愈伤中,GhNHX1与GhBADH在处理期间相对表达量先降低后升高,GhATPase-b与GhP5CS相对表达量随处理时间延长均呈上调表达;胚性愈伤中,仅GhA TPase-b的表达量随处理时间增加持续升高,其余基因在处理期间相对表达量先降低后升高.[结论]适量NaC1可促进棉花非胚性愈伤和胚性愈伤的生长分化;不同阶段的棉花愈伤组织基因表达模式的不同,表明这些愈伤组织可能采用不同的机制响应NaCl的胁迫.     

低温及碳源对拟南芥菜胚愈伤组织诱导和植株再生的影响

以低温处理1～4d的野生型拟南芥菜种子胚为外植体，分别培养在附加激素为2，4－D（0．05mg／L），BA（0．05mg／L）的B5和MS两种基础培养基上，每种培养基的碳源分别为蔗糖和葡萄糖．结果发现均有愈伤组织的形成，其中B5＋蔗糖培养基有较高的诱导频率；当蔗糖为碳源时，胚外植体先萌发出子叶，然后在下胚轴长出愈伤组织，而改用葡萄糖时，整个胚外植体都形成愈伤组织；将诱导出的愈伤组织转移到B5、MS和1／2MS3种附加2，4－D（0．05mg／L）和BA（0．5mg／L）培养基上进行植株的再生，发现在MS和1／2MS两种培养基上有芽的生成．再将生芽组织转接到1／2MS生根培养基上，均可诱导生根．剥去种皮与低温处理种子有相同的效应，都能打破种子的休眠，这表明低温打破种子休眠的效应部位不是在胚．     

棉花胚性愈伤的快速诱导和繁殖

棉花（Gossypium hirsutum L.）是世界上最重要的商业纤维作物。与其他作物相比,棉花再生体系较难。通过生物技术对棉花进行遗传改良往往受制于缺乏高效的再生体系。高效、快速的再生体系的开发有助于提高棉花转化效率。在0.10 mg/L的吲哚乙酸（IAA）、0.09 mg/L细胞分裂素（KT）和0.09 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）的MSB5培养基上产生高效愈伤组织。胚性愈伤组织可在愈伤组织基础上与SM2培养基中诱导出来,也可在“M1-SM1-SM2”培养基交替使用过程中诱导出来。利用此方法可在2~3月内诱导出胚性愈伤,大大缩短再生周期。胚性愈伤在PM1或PM2培养基中可以维持良好的再生状态。可见建立的快速诱导和繁殖胚性愈伤的方法可以用于棉花基因工程遗传改良。     

低温对小麦花培愈伤组织绿苗分化率的影响

小麦花药培养的技术关键在于提高花粉植株诱导率。花粉植株诱导率由花药愈伤组织诱导率和愈伤组织绿苗分化率共同决定。本试验以12个不同小麦杂交组合的F2代为材料，研究了在转愈初期短期低温处理对小麦愈伤组织绿苗分化率的影响。结果表明，在转愈伤组织初期，采用了4℃和6℃低温培养1～3d能大幅度提高小麦花培愈伤组织绿苗分化率，提高育种效率。     

不同影响因子诱导葫芦花药愈伤组织

为研究葫芦花药愈伤组织诱导的影响因素,筛选出最适宜诱导葫芦花药愈伤组织的培养条件,以3个葫芦品种为试验材料,观察不同低温预处理、热激处理以及激素和活性炭处理对花药愈伤组织诱导率及生长的影响。结果表明,不同基因型愈伤组织诱导率差异显著;最佳预处理方法是4℃低温预处理2 d,33℃高温热激暗培养1 d;MS培养基添加2,4-D和6-BA能诱导出愈伤组织,愈伤组织按外观和质地分为6种类型,随着激素浓度增加愈伤组织诱导率递增,添加1.5 mg/L 2,4-D+2.0 mg/L 6-BA和2.0 mg/L 2,4-D+2.0 mg/L 6-BA的培养基最有利于诱导愈伤组织;MS基本培养基不能诱导愈伤组织,活性炭抑制花药诱导愈伤组织。说明,在添加了适量浓度的2,4-D和6-BA的MS培养基上能成功诱导出葫芦花药愈伤组织。     

不同预处理对小麦成熟胚愈伤组织形成的影响

研究了低温、CaCl2 、PEG 3种预处理对 18个小麦品种成熟胚愈伤组织形成的影响 ,结果表明 :不同预处理对小麦成熟胚愈伤组织的形成有显著影响。PEG处理对小麦成熟胚愈伤组织的形成具有显著促进作用 ;低温和CaCl2 溶液处理对小麦成熟胚愈伤组织的影响和小麦品种关系密切 ,品种间差别较大。     

化学诱变对羊草与灰色赖草杂种F1愈伤组织生长和分化的影响

以羊草与灰色赖草杂种F1愈伤组织为材料，用秋水仙素和氟乐灵（Trifluralin）两种化学诱变剂对其进行加倍处理。不同加倍途径、诱导剂、诱导剂浓度、处理时间以及不同的谤导剂灭菌方法对愈伤组织生长和分化有不同的影响。试验中秋水仙素处理愈伤组织绿芽分化率为0—80％：氟乐灵处理愈伤组织绿芽分化率为6％-93％。     

利用禾谷镰刀菌粗毒素筛选抗小麦赤霉病突变体

以赤霉粗毒素为选择剂筛选小麦抗赤霉病的细胞突变体，结果表明：小麦幼胚（穗）愈伤组织抗（耐）赤霉粗毒素的最佳选择浓度为（０．５～０．６）ｘ１０￣（－４）ｍｏｌ／Ｌ。在此浓度下，不同基因型的幼胚（穗）出愈率和愈伤组织对粗毒素的反应有差异，在１０￣（－３）～１０￣（－５）ｍｏｌ／Ｌ浓度范围内，愈伤组织的存活率随浓度的升高而下降。经毒素处理后的耐毒素愈伤组织较对照稍小、略紧密、微黄色，继代于不含毒素的培养基上能很快恢复生长，与对照相当，但继代于含同样浓度毒素培养基上，存活率下降９５．２％。经０．６ｘ１０￣（－４）ｍｏｌ／Ｌ毒素处理３０ｄ后，各基因型的耐毒素愈伤组织成苗率在２０％～３５％之间，多数耐毒素愈伤组织生理上受到伤害，失去分化成苗的能力，从抗（耐）毒素的细胞系中已筛选获得田间抗性优于原供体品种的Ｒ＿１代植株９株，Ｒ＿２代植株２５株。     

低温预处理对油茶花药愈伤组织诱导的影响

以普通油茶、小果油茶、越南油茶、攸县油茶、腾冲红花油茶、宛田红花油茶、浙江红花油茶、广宁红花油茶8个油茶物种为实验材料，初步研究了低温（4℃）顶处理方法对油茶花药愈伤组织诱导效率的影响．结果得出，低温预处理有利于油茶花药愈伤组织的诱导，但不同的油茶物种最适宜的预处理时间不同，普通油茶为10d左右．攸县油茶为5-10d，越南油茶为15d左右。浙江红花油茶为10d左右。广宁红花油茶为15d左右．腾冲红花油茶为10d左右，宛田红花油茶为15d；小果油茶经过低温预处理诱导事没有明显提高，普通油茶和小果油茶的花药愈伤组织诱导效率均达到了70％以上，可以作为花药培养的桥粱物种在以后的研究及技术推广中加以应用．     

糖源在棉花愈伤组织诱导,胚胎发生与发育中的作用

研究了蔗糖、葡萄糖、麦芽糖、半乳糖、可溶性淀粉、乳糖、山梨糖、果糖等８种糖源在棉花组织培养愈伤组织诱导、胚性愈伤组织增殖、胚胎发生和发育中的作用。结果表明：在愈伤组织诱导和增殖中，葡萄糖效果较好，蔗糖次之，山梨糖和果糖不利于愈伤组织诱导和增殖，其它糖源效果一般；在棉花胚胎发生和发育中，蔗糖和葡萄糖的效果较佳，可溶性淀粉、麦芽糖、乳糖、山梨糖较差；不同基因型对糖源的反应不尽相同。本文讨论了糖源在棉花组织培养中的效应。     

玉米成熟胚愈伤组织的诱导

以玉米自交系齐319、郑58、昌7-2、Lx9801和81162的成熟胚为外植体诱导愈伤组织,研究了基因型、外源激素组合、低温处理对愈伤组织诱导的影响。结果表明,基因型对玉米成熟胚愈伤组织诱导的影响显著。在供试的5个基因型中,齐319的愈伤组织诱导率最高,诱导出的愈伤组织质量也较好,为致密、松脆、淡黄色或乳白色,昌7-2不仅愈伤组织诱导率低而且不能产生胚性愈伤组织：在所试验的外源激素组合中,以4,0 mg/L 2,4-D＋0.5 mg/L 6-BA对愈伤组织的诱导最为有效;4℃低温预处理3 d对愈伤组织的诱导具有明显的促进作用。经处理,齐319愈伤组织的诱导率由67.5%提高到78.3%。研究确定了愈伤组织诱导的最佳条件,为建立高效的玉米成熟胚再生体系奠定了基础。     

当归愈伤组织低温保存试验

在３～１０℃的低温条件下对继代９～１０代的当归愈伤组织进行了保存试验。结果表明：当归愈伤组织对低温环境具有较好的内在适应机制，处理后染色体倍性亦较为稳定。同时，培养基的损失量极少，从而延长了每次继代所需的时间周期。