水牛慢性感染肝片吸虫后血液免疫功能指标及激素水平的动态变化

将８头经粪便检查和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测确认无肝片吸虫感染的雄性去势水牛随机分成感染组（ｎ＝５）和对照组（ｎ＝３）。感染组每天每头经口感染６０个囊蚴,连续２０ｄ。结果表明：水牛慢性感染肝片吸虫后,红细胞ＣＲ１花环率从感染后第２周即显著降低,而红细胞免疫复合物花环率则显著升高;白细胞数的总体水平在１９周前高于对照组,其中嗜酸性粒细胞显著增加,而淋巴细胞则有所下降;在淋巴细胞中可见Ｔ细胞比例显著下降,Ｂ细胞比例显著升高,并引起血清白细胞介素－２水平的降低和抗肝片吸虫的ＩｇＧ含量的显著升高。激素变化主要表现为皮质醇水平在感染初期升高,胰岛素在高于对照组的水平上波动,甲状腺激素Ｔ３、Ｔ４水平未见与对照组有明显差异。提示水牛在慢性感染肝片吸虫后,红细胞免疫功能下降,机体主要依靠嗜酸性粒细胞增加和产生特异性的ＩｇＧ抗感染,某些内分泌激素可能参与抗感染的调节机制。     

瘦素对水牛卵母细胞体外成熟和体外受精胚胎发育的影响

[目的]探讨瘦素在水牛体外胚胎生产体系中的作用机理,提高体外胚胎生产效率,为利用分离精子加速水牛品种改良及良种群的扩繁奠定基础.[方法]分别在水牛卵母细胞成熟培养液和胚胎培养液中添加瘦素,研究其对水牛卵母细胞体外成熟率和体外受精胚胎发育率的影响.[结果]在水牛卵母细胞体外成熟液阶段,添加瘦素不仅能促成熟,还能提高其胚胎发育潜能;在体外受精后的胚胎培养阶段,添加瘦素也能显著提高囊胚发育率,二者的最佳瘦素浓度均为10 ng/mL.在最佳瘦素浓度(10 ng/mL)下,常规精子体外受精后的囊胚发育率从19.7%(空白对照组)提高到27.0%,分离精子体外受精后的囊胚发育率从12.3%(空白对照组)提高到17.4%.[结论]瘦素能促进水牛卵母细胞体外成熟及体外受精胚胎发育,并以添加10 ng/mL瘦素的促进效果最明显.     

水牛胚胎附植过程中瘦素及其受体在子宫内膜中的表达

[目的]探讨瘦素及其受体ob-Rb在水牛子宫内膜中的表达规律及其对水牛胚胎附植的影响。[方法]母水牛经孕马血清促性腺激素(PMSG)超排后与公牛交配,分别在交配后第0、5、7、9和15天各屠宰10头水牛,分别取胚胎附植部位的子宫组织,提取瘦素及其受体总RNA。利用RT-PCR方法检测不同时期瘦素mRNA及其受体表达情况。[结果]瘦素在胚胎附植过程中在水牛子宫内膜都有表达,各时期的表达水平差异不明显(P>0.05),Ob-Rb在胚胎附植过程中亦有表达,但是交配后第7、9和15天的表达水平与0和5天差异显著(P<0.05),并且在妊娠期0～7天内表达水平上升,7天达到峰值,然后下降。[结论]瘦素及其受体Ob-Rb可能不仅参与胚胎的附植,而且也可能参与附植后胚胎的生长发育。     

室温与水牛瘤胃液稀释率相关性分析

实验采用６头装有永外性瘤胃瘘管的中国水牛，舍饲稻草日粮，在秋－冬季节不同室温条件下测定水牛瘤胃液稀释率，分析室温与瘤胃液稀释率之间的相关性。结果表明，平均室温在１８－４℃变化范围内，室温与瘤胃液稀释率呈极显著负相关性（ｒ：－０．９７０２ｍ，Ｐ〈０．０１）。     

广西沼泽型母水牛发情淡季生殖激素的变化规律研究

[目的]研究发情淡季母水牛生殖激素的变化规律及各激素之间的相互关系。[方法]采用酶联免疫分析方法(ELISA)测定了发情淡季广西沼泽母水牛血样中促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、抑制素(INH)、雌二醇(E2)和孕酮(P4)的浓度变化,并结合B超技术检测了母水牛卵泡在发情周期中的变化。[结果]广西沼泽型母水牛血样中E2和P4浓度呈波动式变化。其中,E2分别在排卵后第13天d下降到基础水平。FSH在排卵后的第10天出现峰值;LH在排卵前2天出现峰值;INH在排卵后第4天出现峰值。各种激素之间存在相关性。FSH、LH和INH三者两两之间存在极显著相关性,INH与E2、P4存在显著相关性,E2与P4存在极显著相关性。[结论]该研究可为指导适时配种、提高广西本地沼泽型母水牛的繁殖力提供理论参考。     

水牛感染肝片吸虫后血清抗氧化功能的动态变化

经粪便和Ｄｏｔ－ＥＬＩＡ检查确认无肝片吸虫感染的２０头雄性去势水牛,分两系列试验。系列Ⅰ实验中８头水牛随机分成感染组（５头）和对照组（３头）,感染组每头每天口服６０个肝片吸虫囊蚴,连续２０ｄ;系列Ⅱ实验中１２头水牛分成感染组（９头）和对照组（３头）,感染组每头一次口服１６００个肝片吸虫囊蚴。在感染前及感染后每周颈静脉采血,分离血清,测定丙二醛（ＭＤＡ）、过氧化物酶（ＣＡＴ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）的活力。在系列Ⅱ实验中,ＭＤＡ在感染后１５周内显著高于对照组,以后下降,至１９～２２周显著低于对照组;ＧＳＨ－Ｐｘ、ＳＯＤ和ＣＡＴ均表现在感染初期显著低于对照组,以后呈波动性变化,至感染后期显著高于对照组。在系列Ⅰ实验中,ＭＤＡ仅在感染后第７和第８周显著高于对照组,以后则显著低于对     

农村散养黄牛和水牛同期发情效果的比较

用肌注PMSG＋ PGF2α方法对广西农村散养黄牛、本地水牛进行同期发情处理,并对发情的母牛进行人工授精配种.共对黄牛品种18头和本地水牛品种18头进行同期发情处理,结果发现黄牛品种的同期发情处理发情率为83％,情期受胎率为80％;本地水牛的同期发情44.44％;情期受胎37.5％.这说明农村散养黄牛和水牛母牛的同期发情率和情期受胎率均差异极显著（P＜0.01）.     

小鼠胚胎附植前后瘦素水平与胃瘦素长型受体相关性研究

为了对小鼠胚胎附植前后瘦素与脂肪细胞变化的相关性进行研究,本研究采用ELISA方法对小鼠生殖周期不同阶段的血清中的瘦素浓度进行了检测,皮下脂肪组织冰冻切片用苏丹(Ⅲ)染色计量脂肪细胞数量和大小的变化,用免疫组织化学染色法对胃瘦素长型受体进行定位分析。结果显示:妊娠期血清瘦素浓度高于间情期,且瘦素浓度从间情期到妊娠4日龄,呈上升趋势,妊娠5日龄稍下降,然后随妊娠日龄逐渐增加,与单位面积内脂肪细胞数量的变化趋势一致。妊娠7日龄,单位面积内脂肪细胞比间情期少,单个细胞面积大。胃底腺中下部部分胞质和细胞核有棕褐色阳性颗粒且阳性率随妊娠日龄的增加而增加。表明小鼠胚泡附植前后脂肪组织越多血清瘦素水平越高,瘦素及其长型受体可能通过影响胃的消化吸收达到调节机体能量平衡的目的。     

乏情季节诱导水牛同期发情的研究

对镇远县江古乡由农户饲养的经产母水牛共480头进行分组(A组:268头,B组:212头),A组用孕激素阴道栓同期发情处理9d,撤栓后清宫(生理盐水和青霉素G钾160万IU),再给每头母牛注射前列氯烯醇1支(0.2 ml/支);B组未用孕激素阴道栓,直接通过直肠检查(选健康、未受孕、中等膘情、体况良好的水牛)后清宫注射前列氯烯醇。结果表明:A组3～5 d内同期发情效果明显,同期发情率85.8%,4 d为发情高峰期,通过人工授精,受胎率为40%;B组同期发情效果不明显,同期发情率为42.4%,没有发情高峰期,通过人工授精,受胎率为36%。A、B组间发情率差异显著,发情高峰期差异显著,但受胎率差异不显著。     

去势对公猪生殖轴上Ghrelin和功能性Ghrelin受体mRNA的影响

【目的】探讨手术去势(阉割)、免疫去势对公猪下丘脑-垂体-睾丸轴上Ghrelin mRNA和功能性Ghrelin受体1a mRNA表达的影响。【方法】将21头公猪随机均分为免疫去势组、未去势组和手术去势组,免疫去势组于9周龄初次接种免疫去势疫苗,17周龄加强免疫;手术去势组在仔猪出生7d内进行阉割去势;未去势组不作任何处理。25周龄时屠宰所有公猪,取下丘脑、垂体和睾丸组织,以β-actin为内参基因,采用实时荧光定量PCR法检测公猪下丘脑-垂体-睾丸轴Ghrelin及其受体mRNA基因的相对表达量。【结果】手术去势、免疫去势和未去势公猪下丘脑Ghrelin及其功能性受体mRNA基因相对表达量的差异不显著(P0.05),未去势公猪垂体Ghrelin mRNA的相对表达量显著低于手术阉割去势公猪(P0.05),免疫去势公猪睾丸中Ghrelin受体mRNA的相对表达量显著高于未去势公猪(P0.05)。【结论】公猪生殖轴存在Ghrelin mRNA和功能性Ghrelin受体mRNA,且手术阉割去势导致垂体中Ghrelin mRNA的相对表达量增加,免疫去势增加了睾丸Ghrelin受体mRNA的相对表达量,提示Ghrelin可能对生殖轴有调节功能。     

小鼠胸腺Ghrelin阳性细胞的定位分布

以小鼠胸腺组织和原代培养的胸腺上皮细胞为研究材料,采用免疫组织化学和免疫荧光组织化学技术对Ghrelin阳性细胞在小鼠胸腺中的定位分布进行了研究。结果显示,小鼠胸腺中存在大量的Ghrelin免疫反应阳性细胞,主要分布在髓质,而皮质中只有少量呈零星分布的阳性细胞;这些阳性细胞为胸腺上皮细胞和巨噬细胞,其中不同表型的胸腺上皮细胞着色程度存在差异,表明Ghrelin是胸腺微环境的组成部分。     

连香树单叶生长动态及其相关性研究

对连香树一年生实生苗一个展叶时期内的单叶生长动态及其叶绿素含量相关性进行了研究,结果表明,单叶叶面积增加持续时间为22 d,平均增长幅度1.98 cm2/d,叶长、叶宽、叶柄长、叶绿素含量、成熟叶面积的发育趋势为8月份〉7月份〉6月份,展叶速率在展叶期间呈现波动变化,最高每天达41.4%。成熟叶面积越大,其展叶速率越慢。对展叶速率与叶长、叶宽、叶柄长、叶面积、叶绿素含量的相关分析显示,在P=0.01水平上,展叶速率与叶长、叶宽、叶柄长、叶面积、叶绿素含量呈极显著负相关,叶面积与叶长、叶宽、叶柄长、叶绿素含量呈极显著正相关。叶面积与生长时间的关系符合S型曲线模型。     

生长素及其mRNA在大鼠性腺中的分布

【目的】阐明生长素(Ghrelin)及其mRNA在大鼠卵巢和睾丸中的分布。【方法】取成年SD大鼠的睾丸和卵巢,制成石蜡切片,采用免疫组化和原位杂交方法,分别检测Ghrelin和Ghrelin mRNA在大鼠性腺组织中的定位。【结果】雄性大鼠睾丸间质细胞、支持细胞、初级精母细胞、次级精母细胞中均有Ghrelin分布,而精原细胞、精子细胞、肌样细胞中均无Ghrelin分布;Ghrelin mRNA的分布规律与Ghrelin一致。在雌性大鼠卵巢中,Ghrelin主要分布在黄体细胞、卵巢门间质细胞、卵母细胞上;Ghrelin mRNA在黄体细胞、卵巢门间质细胞、原始卵泡、初级卵泡的颗粒层细胞、次级卵泡的卵泡膜层细胞和颗粒层细胞中均有分布。【结论】Ghrelin及其mRNA在大鼠性腺中均有分布,可能对大鼠性腺的发育及其功能有一定的调控作用。     

瘦素(Leptin)受体基因敲除小鼠繁育及子代小鼠基因型鉴定

将瘦素(Leptin,LP)受体基因杂合型小鼠按4种方式进行配对,从子鼠鼠尾中提取基因组DNA,用PCR方法扩增LP受体基因片段,琼脂糖凝胶电泳后观察。结果表明,LP+/+、LP+/-、LP-/-各表型小鼠互交繁殖结果基本符合孟德尔遗传规律,且雌、雄性LP-/-小鼠(即DB/DB小鼠)无繁殖能力。雌、雄性LP+/-小鼠交配能高效地繁殖LP-/-小鼠;PCR方法能够精确地鉴定LP-/-小鼠。     

马铃薯叶片叶绿素动态变化及其与产量的相关性

本试验对马铃薯生长过程中叶绿素动态变化、SPAD值与叶绿素含量和产量的相关性进行研究,利用SPAD-502测定仪和乙醇:丙醇混合法提取叶绿素测定马铃薯叶片SPAD值、叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素和产量指标(单株块茎数和单株块茎重).运用相关回归统计分析等方法建立各指标间相关性的数学模型.试验结果显示:各叶绿素含量变化趋势相似,SPAD值与叶绿素b相关程度最高,R2=0.877,叶绿素b和总叶绿素含量与单株块茎数具有极显著正相关关系.说明通过SPAD值能很好预测叶绿素含量和产量,为马铃薯育种早期选择提供理论依据.     

鱼类Ghrelin的研究进展

Ghelin是1条N末端第3个氨基酸被脂肪酸链修饰含有28个氨基酸的多肽。Ghrelin的发现扩展了其在脊椎动物调节能量动态平衡中的作用。Ghrelin不仅具有刺激鱼类生长激素的释放、提高摄食量和引起肥胖等生物作用,还能影响多种激素释放以及调节GH/IGF-1轴。其生物学作用主要通过与体内的内源性配体生长激素促分泌素受体-1a(GHSR-1a)结合而实现。针对以上这些重要的生物学作用,介绍了鱼类Ghrelin的研究进展。     

瘦素的生物学功能及其对脂肪代谢调控的研究进展

瘦素（Leptin）是由肥胖基因（Obese gene）编码、脂肪组织合成并分泌的一种激素，具有调节动物摄食行为、减少能量消耗和降低动物采食量的作用，从而提高动物生产的经济效益。文章阐述了Leptin的结构特点、作用机理、能量代谢调控，并对Leptin在畜牧业中的应用前景进行了展望。     

绵羊Ghrelin基因的克隆和生物信息学分析

根据GenBank中报道的绵羊Ghrelin基因mRNA序列设计特异性引物,以甘肃肉用绵羊新品种选育群羔羊皱胃组织RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增出绵羊Ghrelin基因并克隆到pMD18-T载体中进行测序验证.用生物信息学软件预测其结构,并构建系统进化树,探讨了绵羊Ghrelin基因的生物学功能.结果表明:克隆的绵羊Ghrelin基因序列共409bp,包含完整的编码区序列,含有1个351bp的完整开放阅读框,编码116个氨基酸;Ghrelin蛋白分子质量为12 975.74u,理论等电点为4.70,信号肽切割点位于第23～24位氨基酸之间,整条多肽链表现为疏水性,是一种典型的跨膜脂溶性蛋白;Ghrelin基因编码产物的二级结构主要以α-螺旋和无规则卷曲为主,主要位于胞外(包括细胞膜),作为一种激素参与机体胁迫应答、免疫应答和转录调控.     

Ghrelin对奶山羊下丘脑神经肽Y(NPY)和刺鼠相关蛋白(AGRP)mRNA表达的影响

研究Ghrelin对奶山羊下丘脑神经肽Y(NPY)和刺鼠相关蛋白(AGRP)mRNA表达的影响。10只泌乳期莎能奶山羊随机分为试验组和对照组,每组5只。试验组静脉注射Ghrelin(3.0μg/kg),3h后宰杀,迅速取下丘脑,检测下丘脑脑神经肽Y和刺鼠相关蛋白mRNA的表达。结果表明,一定剂量的Ghrelin对NPY mRNA的表达具极显著上调作用(P0.01);对AGRP mRNA的表达也有显著促进作用(P0.01)。以上结果提示Ghrelin可能通过对这些神经肽的作用参与对奶山羊摄食和能量代谢等生理活动的调节。