从生物转化液中分离提取11-α羟基-坎利酮的工艺研究

[目的]考察了4种分离提取方法对生物转化液中转化产物11-α-羟基-坎利酮提取率的影响。[方法]4种分离提取方法分别为文献法、浸泡法、洗脱法和匀浆法。[结果]11-α-羟基-坎利酮主要游离于转化液或附着于菌丝体外表面,洗脱法和浸泡法对11-α-羟基-坎利酮具有较好的分离效果。采用400 ml乙酸乙酯洗脱,11-α-羟基-坎利酮提取率为96.0%;经乙酸乙酯浸泡90 min,11-α-羟基-坎利酮提取率达到98.8%。[结论]该方法简单高效,具有工业化应用潜力。     

17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮的分离及晶体结构

[目的]研究17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮的分离方法及晶体结构。[方法]利用液液萃取、硅胶柱色谱、重结晶等方法进行目标物的分离,并通过IR、NMR、ESI-MS、X-射线单晶衍射等手段鉴定晶体结构。[结果]晶体结构分析结果表明,该化合物为单斜晶系,空间群P2（1）/c,晶胞主要参数：a=10.881 3（16）nm,b=9.795 4（14）nm,c=13.347 3（19）nm,V=1 382.2（3）nm3,Z=4,Dc=1.414mg/m3,F（000）=616,μ=0.100/mm。[结论]从玉郎伞[Millettia Pulchra Kurz var.Laxior（Dunn）Z.Wei]的60%（体积分数）乙醇水提取物中首次分离并鉴定了17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮。     

3β,7α,11α-三羟基-孕甾-5-烯-20-酮-20-肟的合成

利用毛霉516对孕甾烯醇酮进行生物转化,得到了两个转化产物。通过IR、MS、1HNMR、13CNMR和2DNMR等波谱方法检测化合物结构,确证其结构分别为3β,7α,11α-三羟基-孕甾-5-烯-20-酮(2)和3β,7α,-二羟基-孕甾-5-烯-20-酮(3)。对生物转化产物(2)进行化学修饰,得到一个新化合物,通过波谱学方法,确证其结构为3β,7α,11α-三羟基-孕甾-5-烯-20-酮-20-肟(4)。     

14α-羟基甾体衍生物的波谱学结构表征

利用总状毛霉对黄体酮进行生物转化得到14α-羟基-4-孕甾烯-3,20-二酮和7α,14α-二羟基-4-孕甾烯-3,20-二酮。利用IR、MS和2D-NMR实验技术（HMBC、HSQC、^1H-1H COSY）等波谱方法对生物转化产物的结构进行了详细研究,对14α-羟基甾体衍生物的^13C化学位移进行了归属。运用X-射线单晶衍射方法确定7α,14α-二羟基-4-孕甾烯-3,20-二酮的空间构型,并进行了晶体结构分析。     

2-羟基-4’-氯-4-二异戊烯氧基查尔酮的合成工艺研究

研究了2-羟基-4-异戊烯氧基查尔酮类化合物的合成方法。在本文报道两种合成方法,方法一,经过羟基保护、醇醛缩合、水解及异戊烯基取代四步反应;方法二,采用异戊烯基取代、醛酮缩合两步反应合成目标化合物。其结构经IR、1H—NMR和MS等确证。结果本实验采用第二种合成方法,此方法得到标题化合物产率高、反应时间短、操作简便、收率高等优点。     

银杏叶黄酮的酶法提取及生物转化研究

研究了银杏叶黄酮的酶法提取及生物转化工艺。结果证明,酶法提取能够显著提高银杏叶黄酮提取率,生物转化能够显著提高银杏叶黄酮中苷元黄酮的含量。     

产3-羟基丁酮菌株的分离·筛选与鉴定

从土壤中分离获得一株高产3-羟基丁酮的菌株ME-N11。该菌株3-羟基丁酮转化率高,仅产生少量的2,3-丁二醇、乙醇、乙酸等副产物,具有重要开发应用价值。在对其形态特征及生理生化特性分析的基础上,采用PCR扩增了其16S rRNA基因,并进行了测序。基于该菌的生理生化特性与16S rRNA基因的同源性进行比较及系统发育分析,发现该菌株和Bacillus subtilis同源性达99%,命名为Bacillus subtilis ME-N11。     

总状毛霉对17α-羟基孕甾-4-烯-3,20-二肟的生物转化

为了获得具有较强生物学活性或结构新颖的羟基甾体肟衍生物,利用总状毛霉对合成的17α-羟基孕甾-4-烯-3,20-二肟进行转化研究。转化产物经柱层析分离纯化后鉴定为7α,17α-二羟基-20-肟-孕甾-4-烯-3-酮(3)和11α,17α-二羟基-20-肟-孕甾-4-烯-3-酮(4)。目前微生物转化甾体研究领域对于甾体肟的转化研究少见报道,研究结果为甾体肟衍生物的发展奠定了基础。     

酵母R6中α-酮戊二酸的筛选、鉴定和发酵性能的研究（英文）

该研究通过硫胺素(VB1)营养缺陷型负选择法,从中国淄博食用油污染的土壤中获得一株酵母属菌株R6。该菌株具有累积胞外α-酮戊二酸(α-KG)的能力。生理学和生物化学实验表明该R6菌株与已测试的API 20 C AUX酵母鉴别系统中的胶红酵母具有共同特征。此外,R6菌株的18S r DNA基因已经获得并测序,基于该序列以及同源菌属所得到的系统进化学分析表明菌株R6与胶红酵母属成员具有99%的同源性。因此,菌株R6被鉴别为胶红酵母属的一员。随后,本实验通过控制单一发酵变量以及高效液相色谱法(HPLC)检测优化了R6累积α-KG的发酵条件。当发酵培养基中添加的VB1和Ca CO3的浓度分别为0.03 mg/L和60 g/L时,α-KG达到6.035 g/L的最高产量。天然营养缺陷型的R6菌株的发现不仅丰富了通过发酵生产α-KG的微生物来源,而且为进一步的发酵调控奠定了基础,从而实现过量的α-KG的累积。     

猕猴桃籽中α-亚麻酸提取工艺研究

传统猕猴桃加工工艺中大量富含α-亚麻酸的猕猴桃籽残渣被丢弃而造成极大浪费,为了研究猕猴桃籽中α-亚麻酸的提取工艺,进行了利用有机溶剂萃取技术和超临界CO2流体萃取技术萃取猕猴桃籽中α-亚麻酸试验。试验结果表明,猕猴桃籽中α-亚麻酸的最佳萃取工艺为超临界CO2流体萃取工艺,其工艺条件为:猕猴桃籽粉碎过40目筛,萃取温度38℃,萃取压力32 MPa,萃取时间2.5 h,分离压力5 MPa,温度50℃,α-亚麻酸的得率达22.23%,萃取物α-亚麻酸含量达59.40%。     

正交设计优选喜树碱及10-羟基喜树碱的提取工艺

[目的]优选喜树果中喜树碱及10-羟基喜树碱的超声提取工艺。[方法]采用高效液相色谱测定喜树果中喜树碱及10-羟基喜树碱的含量,并在单因素试验的基础上采用L9(34)正交试验确定最佳提取条件。[结果]喜树碱最佳提取条件为:甲醇浓度70%,料液比1∶30(g/ml),提取温度60℃,提取时间25 min;10-羟基喜树碱的最佳提取条件为甲醇浓度60%,料液比1∶30(g/ml),提取温度60℃,提取时间20 min。验证试验表明,喜树碱及10-羟基喜树碱的平均提取率分别为0.719‰和0.238‰,RSD分别为1.99%和1.79%。[结论]该工艺稳定可行,优选出了喜树果中喜树碱及10-羟基喜树碱的超声提取工艺。     

白芸豆中α-淀粉酶抑制剂的提取及其产品研发

【目的】白芸豆的α-淀粉酶抑制剂(α-AI)对抑制淀粉分解有明显作用,为研发一款能够抑制淀粉分解的休闲食品。【方法】以白芸豆为主要原料,经过一系列单因素试验和正交试验优化了α-AI提取参数。【结果】确定了最佳提取工艺为过筛粒径0.150 mm,温度为45℃、pH为8、料液比为1∶8。将提取液用于研制一种白芸豆产品-果冻,经过单因素微波杀菌时间的研究,确定了抑制率高的微波杀菌时间为20 s;根据对成品果冻的α-AI的抑制率和感官评定双指标,确定最优的豆液添加比例为30%。【结论】开发的该果冻产品能具有抑制淀粉分解的功能。     

8-羟基喹啉酮对扁桃流胶病病菌的室内毒力测定

采用菌丝生长速率法,测定了5种杀菌剂对从感染流胶病病菌的扁桃植株上分离的葡萄座腔菌Botryo-sphaeria dothidea菌丝生长的毒力。结果表明：8-羟基喹啉酮对扁桃流胶病病菌有显著的抑制作用,EC50值为1.272μg/mL,抑菌效果明显优于甲基托布津、多菌灵、百菌清和代森锰锌。     

HPLC法测定柴胡舒肝丸(大蜜丸)中香附烯酮和α-香附酮的含量

本研究建立了柴胡舒肝丸中香附烯酮和α-香附酮含量测定方法。利用ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250mm,5μm)色谱柱,以甲醇-水(64:36)作为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为254nm,柱温30℃,进样体积5μL。采用HPLC法,测定香附烯酮和a-香附酮含量分别在0.211～2.112μg(R²=1.000)和0.080～0.804μg (R²=1.000)的范围呈良好线性;香附烯酮和α-香附酮的精密度、稳定性(24 h)、重复性试验的RSD均小于2.0%(n=6);加样回收率分别为94.9%(RSD=2.0%)和98.1%(RSD=1.6%)。测定样品4批,香附烯酮的含量为0.10～0.41 mg/丸,α-香附酮含量为0.19～0.28mg/丸。本方法简单易操作,专属性和准确度良好,为提高柴胡舒肝丸的质量标准提供参考依据。     

HPLC法测定哈蟆油中3β-羟基胆甾-5-烯-7-酮

建立哈蟆油中3β-羟基胆甾-5-烯-7-酮的反相高效液相色谱含量测定方法。采用Aglient ZORBAX Bonus-RP（250mm×5mm5μm）色谱柱;检测波长：250nm;流动相：乙腈-水（87：13）;体积流量：1．0mL／min。3β-羟基胆甾-5-烯-7-酮在0．01004-0．11044μg与峰面积值呈良好线性关系（r=0．9998）。平均回收率为96．48％,RSD为1．66％。本方法简便、稳定、精密度高、重复性好,可用于测定哈蟆油中3β-羟基胆甾-5-烯-7-酮的含量。     

(S)-α,α-二苯基-2-吡咯烷甲醇合成中氨基脱保护的探讨

以L-脯氨酸甲酯盐酸盐为原料, 通过氨基保护、格氏反应、脱除保护基三步反应合成光学纯化合物(S)-α,α-二苯基-2-吡咯烷甲醇. 对脱除保护基团时酰胺水解条件进行了探讨, 进一步优化了(S)-α,α-二苯基-2-吡咯烷甲醇的合成条件.     

酵母 R6中α-酮戊二酸的筛选、鉴定和发酵性能的研究

该研究通过硫胺素（ VB1）营养缺陷型负选择法,从中国淄博食用油污染的土壤中获得一株酵母属菌株 R6。该菌株具有累积胞外α-酮戊二酸(α-KG)的能力。生理学和生物化学实验表明该 R6菌株与已测试的 API 20 C AUX酵母鉴别系统中的胶红酵母具有共同特征。此外,R6菌株的18S rDNA 基因已经获得并测序,基于该序列以及同源菌属所得到的系统进化学分析表明菌株 R6与胶红酵母属成员具有99%的同源性。因此,菌株 R6被鉴别为胶红酵母属的一员。随后,本实验通过控制单一发酵变量以及高效液相色谱法(HPLC)检测优化了R6累积α-KG的发酵条件。当发酵培养基中添加的 VB1和 CaCO3的浓度分别为0.03 mg/L和60 g/L时,α-KG达到6.035 g/L的最高产量。天然营养缺陷型的 R6菌株的发现不仅丰富了通过发酵生产α-KG的微生物来源,而且为进一步的发酵调控奠定了基础,从而实现过量的α-KG的累积。     

(S)-α,α-二苯基-2-吡咯烷甲醇合成中氨基脱保护的探讨

以L-脯氨酸甲酯盐酸盐为原料,通过氨基保护、格氏反应、脱除保护基三步反应合成光学纯化合物（s）-α,α-二苯基-2-吡咯烷甲醇,对脱除保护基团时酰胺水解条件进行了探讨,进一步优化了（s）-α,α-二苯基-2-吡咯烷甲醇的合成条件。     

从露水草中提取纯化β-蜕皮激素工艺研究

以露水草为原料，用水提取，加澄清剂一大孔树脂法，通过重结晶，分离出β蜕皮激素，经光谱鉴定，理化数据分析和标样对照，证明是该化合物．     

喜树碱和10-羟基喜树碱提取方法的比较与优化

以乙醇为溶剂,比较了浸提法、超声波法、微波法和匀浆提取法从喜树(Camptotheca acuminata Decaisne)幼叶中提取喜树碱和10-羟基喜树碱的效果,并通过正交试验设计对提取温度、提取时间以及匀浆时间对提取效率的影响进行了分析。利用反向-高效液相荧光法检测喜树碱和10-羟基喜树碱的浓度。结果显示提取10-羟基喜树碱的最优条件为匀浆12 min、60℃浸提30 min、超声处理30 min;提取喜树碱的最优方案为匀浆12 min、60℃浸提30 min、超声处理15 min。多种提取工艺混合使用能显著提高喜树碱和10-羟基喜树碱的产率。