天蚕、柞蚕线粒体DNA（mtDNA）的限制性酶切电泳图谱

采用差速离心和碱变性法，以９种限制性内切核酸酶对天蚕和柞蚕ｍｔＤＮＡ进行了单酶切分析，发现这两种蚕的ｍｔＤＮＡ在分子长度和酶切类型上存在明显差异。还对天蚕、柞蚕、蓖麻蚕和家蚕的ｍｔＤ－ＮＡ限制性酶切电泳图谱进行了比较研究。     

天蚕和柞蚕核多角体病毒DNA限制性内切酶酶解图谱的比较试验

天蚕和柞蚕核多角体病毒ＤＮＡ限制性内切酶酶解图谱的比较试验张秀珍，张显博，孙芳义，邹碧珍，齐云翔，李鹤（黑龙江省蚕业研究所）（黑龙江省应用微生物研究所）用酚法提取天蚕和柞蚕ＮＰＶ－ＤＮＡ，并用限性内切酶ＥｃｏＲⅠ水解两种蚕的ＮＰＶ－ＤＮＡ，其酶切图谱...     

几种鸟类mtDNA限制性酶切图谱的比较研究

本文用５种限制内切酶（ＨｉｎｄⅢ，ＢｇＬＩ，ＰｓｔＩ和ＢａｍＨＩ）初步建立了头鹅、白鹅、火鸡和鹌鹑的肝脏线粒体ＤＮＡ的内切酶图谱。结果表明白鹅和狮头鹅的ｍｔＤＮＡ的酶切图谱极为相似。山鸡、火鸡和鹌鹑的ｍｔＤＮＡ限制性性内切酶图谱之间的差异是很大的，以上事实说明驯化中的鹅类的不同品种间ｍｔＤＮＡ差异不在。而鸡形目中的不同物种间的ｍｔＤＮＡ是有很大的差异的。     

牦牛mtDNA限制性类型及与其它牛种分化研究

用２０种限制性内切酶分析了２１头牦牛ｍｔＤＮＡ限制性片段长度多态性，通过双酶切制定出春内切酶物理图谱，发现牦牛ｍｔＤＮＡ存在４种限制性类型计算出牦牛与普通牛，瘤牛分化时间大约分别在１．１－２．２，１。０１－２．０１百万年前。     

四川白鹅郎德鹅及杂交后代线粒体DNA多态研究

采用ＲＦＬＰ技术 ,对四川白鹅和郎德鹅及其杂交后代进行了线粒体ＤＮＡ多态分析。在所使用的１９种限制性内切酶中 ,有４个酶检测出多态 ,共获得两种ｍｔＤＮＡ单倍型 ,四川白鹅和以四川白鹅为母本杂交后代的ｍｔＤＮＡ为Ⅰ型 ,郎德鹅的ｍｔＤＮＡ为Ⅱ型。以上结果为中国鹅和欧洲鹅存在两种不同起源学说提供了分子遗传学的证据。ＥｃｏＲＶ、ＨａｅⅡ、ＨｉｕｃⅡ和ＫｐｎⅠ四种限制性内切酶的两种限制性态型可以作为鉴别两种不同起源家鹅的母系分子遗传标记。线粒体ＤＮＡ在家鹅中也遵循严格的母系遗传。（摘自《畜牧兽医学报》１９９８，…     

福建黄兔线粒体DNA的限制性内切酶分析

本文用差速离心法分离福建黄兔线粒体，氯化铯超速离心法纯化线粒体ＤＮＡ。对纯化的ｍｔＤＮＡ用ＢａｇＩＩ，ＢａｍＨＩ，ＣｌａＩ，ＥｃｏＲＩ，ＥｃｏＲＶ，ＭｌｕＩ，ＰｓｔＩ，ＰｖｕＩ，ＳａｃＩ等９种限制性内切酶进行酶切分析。共识别了１７个酶切位点。经测算福建黄兔ｍｔＤＮＡ的分子量约为１８．４５Ｋｂ。     

四川白鹅朗德鹅及杂交后代线粒体DNA多态研究

采用ＲＦＬＰ技术，对四川白鹅和朗德鹅及其杂交后代进行了线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）多态分析，在所使用的１９种限制性内切酶中，有４个酶（ＥｃｏＲＶ，ＨａｅⅡ，ＨｉｎｃⅡ和ＫｐｎＩ）检测出多态，共获得两种ｍｔＤＮＡ单倍型，四川白鹅和以四川白鹅为母本杂交后代ｍｔＤＮＡ为Ｉ型，朗德鹅的ｍｔＤＮＡ为Ⅱ型，以上结果为中国鹅和欧洲鹅存在两种不同起源学说提供了分子遗传学的证据，ＥｃｏＲＶ，ＨａｅⅡ，ＨｉｎｃⅡ和Ｋｐ     

蜜蜂线粒体DNA碱变性提取法

一、前言线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）已被广泛应用于动植物群体遗传学和进化生物学的研究中，并为分子系统学提供了有价值的比较生物学的数据，取得了许多非常有意义的结果。有效的ｍｔＤＮＡ提取方法，无疑是开展这方面研究的前提。而ｍｔＤＮＡ提取实验成功的标志是把染色体ＤＮＡ（即核ＤＮＡ）、蛋白质与ＲＮＡ尽量去除干净，从而获得一定得率和纯度的ｍｔＤＮＡ，以满足ｍｔＤＮＡ用于限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析中的酶切及聚合酶链式反应（ＰＣＲ）中酶切、拷贝和连接的需要。本试验用碱变性提取法，ＣｓＣｌ超速离心法和蛋…     

藏绵羊线粒体DNA遗传多样性研究

本文用ＡｐａＩ,ＡｖａⅡ,ＢａｍＨＩ,ＢｃｌⅡ,ＣｌａＩ,ＥｃｏＲⅤ,ＨｉｎｄⅢ,ＨｐａＩ,ＫｐｎＩ,ＰｓｔＩ,ＰｖｕⅡ,ＸｂａＩ,ＸｈｏＩ等１４种内切酶,分析了１２头藏绵羊ｍｔＤＮＡ的限制性片断长度多态性,共检测了３５个酶切位点,发现ＡｖａⅡ,ＣｌａＩ,ＰｖｕⅡ三种酶切类型具有多态性,根据不同个体的ｍｔＤＮＡ的酶切类型,发现藏绵羊存在三种ｍｔＤＮＡ单倍型,计算ｍｔＤＮＡ多态度π值为０．００１２,     

实验兔线粒体DNA多态性研究

用ＥＣＯＲＩ，ＥＣＯＲＶ，ＢａｍＨＩ，ＨｉｎｄⅢ，ＰｔｕＩ，ＳｍａＩ，Ｘｂｏｌ，ＣｌａＩ，ＳａｃＩ，ＢｇｌⅡ等１１种酶，用ｍｔＤＮＡ限制性内切酶片段长度多态性（ＲＦＬＰ）技术，分析了国内几个省区的实验用兔ｍｋＤＮＡ多态性。结果表明，在研究的６４个个体中，共检出１５种限制性态型，归结为４种不同的限制性类型，限制性类型的差异主要来源于少数几个限制 位点的偶然突变，提示这些免疫ｍｔＤＮＡ变异度很低，遗传     

家畜线粒体DNA（mtDNA）的研究

本文概述了家畜特别是牛和猪线粒体ＤＮＡ研究的概况和取得的成果，介绍了家畜线粒体ＤＮＡ的一些特征，限制性酶及限制性酶分析以及线粒体ＤＮＡ在家畜种间和品种间的多态性，并讨论了这种多态性，作为一个重要的母性遗传标记在考查家畜种及品种起源和演化上的意义。     

几个地方绵羊品种线粒体DNA(mtDNA)细胞色素b基因多态性研究

用12种限制性内切酶分析了6个地方绵羊品种线粒体DNA（mtDNA）细胞色素b（cytb）基因的RFLP。结果表明，在71只绵羊个体中，检出的14种限制性态型可归结成4种单倍型，其间的差异主要来源于几个限制性位点的点突变；4种单倍型间和6个绵羊群体间的平均遗传距离（D）分别为0．412％和0．041％，遗传多态程度（π）为0．028％，说明遗传多样性较为贫乏；单倍型聚类结果和群体聚类结果提示，我国地方绵羊品种的起源可能是单一的。     

应用多重PCR同时检测牛、羊源性成分

我们选择了3对引物A,B,C.A可扩增大多数脊椎动物(哺乳类、鸟类、爬行类、两栖类和鱼类)细胞色素b基因上一个371 bp的区段,B可扩增位于牛mtDNAD-loop区段内的一个274 bp的区段,C可扩增羊mtDNA基因上一个199bp的区段.由于3对引物扩增的产物分别相差约100 bp左右,可通过琼脂糖凝胶电泳分离来并观察结果,建立了基于内对照的同时检测牛、羊源性成分的三重PCR方法.     

家蚕蛹线粒体DNA EcoRⅠ 1.9kb片段的克隆及序列分析

克隆了二化性家蚕蛹体的线粒体DNAEcoRⅠ酶解 1 .9kb片段 ,并进行了序列测定。结果表明 :克隆片段中包含完整的线粒体赖氨酸转移RNA(tRNA Lys)基因、天冬氨酸转移RNA(tRNA Asp)基因、ATP合酶亚基Ⅷ基因和细胞色素C氧化酶亚基Ⅱ、ATP合酶亚基Ⅵ基因的部分序列。并与果蝇线粒体DNA的同源性和参照果蝇线粒体DNA密码子翻译的氨基酸顺序进行了比较 ,由tRNA的一级结构推断出可能的二级结构模型     

Restriction-endonuclease analysis of Australian isolates of Leptospira interrogans serovar hardjo from cattle with agalactia and abortion

SUMMARY Polyacrylamide gel electrophoresis and agarose gel electrophoresis were used to resolve restriction endonuclease digests of 20 Australian isolates of Leptospira interrogans cultured from urine samples of cattle with agalactia and abortion. The restriction endonuclease profiles of 19 isolates closely matched the profiles of L interrogans serovar hardjo subtype hardjobovis reference strains. The remaining isolate had a different restriction profile from subtype hardjobovis and subtype hardjoprajitno reference strains and was serologically identified as serovar pomona. Silver staining of polyacrylamide gels gave enhanced resolution of restriction fragments compared with the traditional method of ethidium bromide staining of agarose gels.     

旋毛虫肌幼虫RNA的提取及目的基因的PCR扩增

用改进的ＡＧＰＣ法成功地提取出旋毛虫肌幼虫总ＲＮＡ。每０．１ｍｌ压积虫体可获得１００μｇ的ＲＮＡ，其Ａ２６０与Ａ２８０及Ａ２６０与Ａ２３０的比值均接近于２，变性琼脂糖凝胶电泳显示，旋毛虫肌幼虫总ＲＮＡ缺少大部分真核生物所具有的２８Ｓ ｒＲＮＡ．通过比较研究，筛选出理想的虫体处理方法。用聚合酶链式反应直接从总ＲＮＡ中进行目的基因的扩增，得到一分子量为０．７ｋｄ的ＤＮＡ。通过限制性内切酶对其消化鉴定，     

Analysis of chromosome-sized DNA and genome typing of isolated strains ofTaylorella equigenitalis

Analysis of chromosome-sized DNA and genome typing ofTaylorella equigenitalis NCTC11184, Kentucky 188, and five strains ofT. equigenitalis isolated in Japan were carried out. The three restriction enzymes used,ApaI,NaeI andNotI, cleaved the genomic DNAs of five Japanese strains ofT. equigenitalis into relatively limited numbers of restriction fragments, which were well resolved on crossed-field gel electrophoresis (CFGE). The respective profiles after CFGE of the restriction fragments from all five strains were essentially identical to each other after digestion byApaI,NaeI orNotI. Hence it appears that these strains have a common genome type with respect to these three restriction enzymes. It was also shown that the respective profiles from these strains were essentially different from those ofT. equigenitalis NCTC11184 and those of Kentucky 188 after digestion withApaI,NaeI orNotI.Abbreviations CFGE crossed-field gel electrophoresis - FIGE field inversion gel electrophoresis - PFGE pulsed-field gel electrophoresis     

河北省山羊品种mtDNA遗传多样性研究

用 1 2种识别 6碱基的限制性内切酶ApaⅠ、BamHⅠ、Bg1Ⅰ、DraⅠ、EcoRⅠ、EcoRⅤ、KpnⅠ、PvuⅡ、PstⅠ、SacⅠ、SmaⅠ和XhoⅠ研究了河北省 5个山羊品种和类群共计 61个个体mtDNA的RFLP。结果检测到 3 3个酶切位点 ,1 4种限制性态型 ,3种基因单倍型 ,其中EcoRⅠ和CalⅠ表现出多态。基因单倍型间平均遗传距离为 0 .0 0 3 9,群体平均遗传多态度π值为 0 .1 2 %,表明其遗传分化程度较低     

云南保种山羊线粒体DNA限制性酶切研究

采用碱变性法,提取来自云南省不同地区４个保种山羊的１３个个体的线粒体ＤＮＡ（ｍｔＤＮＡ）,并用ＡｐａⅠ,ＡｖａⅠ,ＢａｍＨⅠ,ＢｃｌⅠ,ＢｃＩⅠ,ＢｇｌⅡ,ＣｌａⅠ,ＤｒａⅠ,ＥｃｏＲⅠ,ＥｃｏＲⅤ,ＨａｅⅠ,ＨｉｎｄⅢ,ＫｐｎⅠ,ＰｓｔⅠ,ＰｖｕⅡ,ＳａｃⅠ,ＳａｌⅠ,ＳｍａⅠ,ＳｔｕⅠ和ＸｈｏⅠ等２０种限制性内切酶进行酶切分析。结果发现它们的线粒体ＤＮＡ的分子量大小约为１５．８Ｋｂ;不同限制性内切酶的酶切位点分别为：ＤｒａⅠ有７个酶切位点,ＡｖａⅢ有６个酶切位点,ＥｃｏＲⅤ和ＳｔｕⅠ共有５个酶切位点,ＨｉｎｄⅡ和ＨａｅⅡ有４个酶切位点,ＢａｍＨⅠ,ＢｇｌⅡ,ＰｓｔⅠ和ＰｖｕⅡ有３个酶切位点,ＡｐａⅠ,ＣｌａⅠ有两个酶切位点,其余有１个酶切位点。各保种山羊间未发现变异,说明云南的４个保种山羊极可能来自于共同的母性祖先。