崇明白山羊超数排卵和胚胎冷冻初步研究

采用CIDR-FSH-PG-hCG法对崇明白山羊进行超数排卵,比较不同来源FSH的超数排卵效果,并对获得的胚胎进行冷冻保存和解冻后胚胎移植.结果表明:新西兰和宁波产FSH组分别获得75.0%和85.7%的发情率.新西兰FSH组左右卵巢平均分别获得8.67个和9.67个排卵点,宁波FSH组平均获得7.33和6.33个排卵点.新西兰FSH和宁波FSH组分别平均获得9.67枚和8.00枚可用胚胎.OPS冷冻胚胎经解冻后,获得了80.77%的形态正常率.经胚胎移植,3头(3/5)山羊顺利妊娠,产下5头小羊.     

ISSR分析崇明白山羊的遗传多样性及亲缘关系

为查明崇明白山羊群体的遗传多样性水平和亲源关系,应用ISSR分子标记技术,使用12条多态性较好的ISSR引物对206只崇明白山羊进行PCR扩增。结果表明:总计扩增出181条谱带,平均每条引物扩增产生15.08条,其中含有多态性条带163条;经统计分析,崇明白山羊呈现出丰富的多样性,检测到的观测等位基因数(Na)为1.900 6±0.300 1,有效等位基因数(Ne)为1.477 8±0.365 6,Nei's基因多样度(h)为0.278 5±0.184 9,多态位点百分率(PPB)为90.06%,Shannon's信息指数(I)为0.418 6±0.251 0,群体总基因多样性(Ht)为0.279 7±0.034 0,群体内基因多样性(Hs)为0.226 7±0.025 8,遗传分化值(Gst)为0.189 4,崇明白山羊的遗传变异81.06%来源于种群内部。崇明白山羊的基因流(Nm)为2.1397,说明崇明白山羊群体间存在一定的基因流。UPGMA聚类分析显示:样本相似系数为0.519 3-0.989 0,206个个体可分为11个群体,个体间虽然呈现差异,但具有较好的同质性。     

影响绵羊、山羊超数排卵及胚胎移植效果因素分析

在生产条件下，对3个优良品种的127只绵羊（道塞特47只、萨福克49只、杜泊31只）和111只波尔山羊供体使用不同国别生产的促卵泡素（FSH）实施超数排卵处理，然后对1231只小尾寒羊和奶山羊受体实施不同方法的胚胎移植，旨在筛选出切合于生产实际成本低、效率高的超数排卵和胚胎移植方案。实验结果表明，使用新西兰产FSH对波尔山羊超数排卵后平均获得可用胚胎14枚／只，显著高于澳大利亚产FSH效果（平均7．59枚／只）（P〈0．05）．而中国科学院产FSH的超排效果（平均10．38枚／只）与新西兰产无显著性差异（P〉0．05）；进一步采用中国科学院产和新西兰产FSH分别对道塞特、萨福克和杜泊3个品种绵羊实施超数排卵结果，获得平均可用胚胎数均无显著性差异（P〉0．05）；使用腹腔内窥镜法和常规手术法胚胎移植结果表明，移植妊娠率分别为57．44％和60．20％．2种方法间无显著性差异（P〉0．05）。由于中国科学院产FSH价格便宜，而腹腔内窥镜法胚胎移植可大大缩短操作时间，两者结合可降低成本、提高效率，适宜羊胚胎移植产业化应用。     

崇明白山羊遗传多样性的ISSR分析

应用ISSR分子标记对崇明白山羊3个群体和黄淮山羊群体进行遗传多样性分析。用筛选出的12条引物对127个个体进行扩增,共扩增出147条谱带,其中多态性谱带67条。分析结果显示:崇明白山羊遗传多样性较为丰富,在物种水平上平均多态位点百分率(PPB)=42.18%,Shannon's信息指数(Ho)=0.2085;在群体水平上,PPB=38.55%,Ho=0.1946。崇明白山羊各群体间遗传差异较小,遗传稳定性较高。UPGMA聚类分析显示:崇明白山羊3个群体间亲缘关系较近,优先聚为1支,再与黄淮山羊相聚。     

抑制素免疫对崇明白山羊公羔羊生殖发育的影响

利用重组抑制素对崇明白山羊雄性断奶羔羊(n=6)在第0天、第21天、第42天、第63天共进行4次免疫,探讨抑制素免疫对其睾丸发育、激素水平及生殖相关基因表达量的影响。结果表明:试验期间,免疫组抑制素抗体水平均显著高于对照组;在试验的第84天阉割时,免疫组和对照组试验羊在体重[(21.87±2.19)kg vs(23.58±5.13)kg]、阴囊周长[(20.95±0.74) cm vs (21.57±1.65) cm]、睾丸质量[(56.88±4.96) g vs(62.99±4.17)g]方面无显著差异;睾丸组织石蜡切片分析表明,免疫组和对照组试验羊在睾丸组织学上没有显著差异;血清卵泡刺激素(FSH)及睾酮(T)水平在二免后7 d免疫组显著高于对照组,其余采样时间无显著差异;血清促黄体生成素(LH)水平免疫组和对照组无显著差异;qRT-PCR检测结果表明,免疫组睾丸组织染色体联会相关基因Dmrtc2表达量极显著高于对照组(3.04 vs 1.00),性腺发育相关基因SOX30基因表达量显著高于对照组(1.48 vs 1.00),雄激素受体基因AR表达量显著低于对照组(0.59 vs 1.00),而FSH受体基因FSHR、LH受体基因LHR、精子发生相关基因GPx4以及减数分裂相关基因DDX4基因表达量两组之间没有显著差异。综上所述,抑制素免疫能短暂提高崇明白山羊FSH及T水平,提高睾丸Dmrtc2、SOX30基因的相对表达量,但对体重、LH激素水平、睾丸质量、睾丸组织学形态、睾丸FSHR、LHR等基因水平无显著影响。     

季节对波尔山羊超数排卵效果及受体妊娠率的影响

在不同季节,用阴道栓 FSH PG法对85头供体波尔山羊进行超数排卵处理。结果表明:繁殖季节与非繁殖季节超排存在显著差异;春秋两季头均可用胚数为16.3±7.9,18.9±4.3。冬夏两季头均可用胚数为8.9±2.0,5.2±1.8。     

受体牛品种和移植季节对胚胎移植妊娠率的影响

研究分析了不同受体品种、受体牛饲养方式和移植季节对胚胎移植妊娠率的影响。用于移植的冷冻性控胚胎由加拿大进口。移植的受体选用鲁西黄牛和西门塔尔牛。分析结果显示：受体牛品种对胚胎移植的妊娠率有一定的影响，鲁西黄牛的妊娠率相对较高（40．80％），而西门塔尔牛的妊娠率则相对较低（38.10％）。经卡方独立性检验受体品种与妊娠率之间无显著性关联（P〉0．05）。另外，受体牛饲养方式和移植季节对胚胎移植的妊娠率也有一定的影响，集中含饲条件下受体的整体妊娠率相对较高。秋季移植受体的妊娠率要比春季移植的相对稍高，但二者之间的差异均没有得到显著的水平。     

供体母羊及与配公羊个体对波尔山羊胚胎移植效率的影响

对135只波尔山羊供体母羊进行超排处理,回收卵总数2504枚,平均18.55±7.63枚,其中可用胚2182枚,平均16.16±7.46枚.将2127枚鲜胚移植给1182只受体,妊娠率为63.03%(745/1182),移植胚胎成羔率为52.1%(1108/2127).试验结果表明,供体各个体之间所获得的胚胎移植成羔率存在着显著差异(P＜0.05),胚胎成羔率大于80%的供体平均每只获胚胎移植羔羊14.8±4.27只,胚胎成羔率小于20%的供体平均每只获胚胎移植羔羊1.83±1.17只,其中个体获得羔羊最多的为21只(21/26).有9.63%的供体胚胎移植成羔率大于80%,有4.44%的供体胚胎移植成羔率小于20%.14只公羊配种的135只供体获得的胚胎可用率同样存在着显著差异(P＜0.05).     

不同品种受体对波尔山羊胚胎移植效率的影响

对黄淮羊、波杂羊、奶杂羊、萨能羊4个不同品种山羊用炔诺酮阴道栓-FSH法进行同期发情处理和波尔山羊胚胎移植。结果表明:同期发情有效率在不同品种受体之间差异不显著;排卵并形成功能黄体的比率,波杂羊显著高于奶杂羊(P<0.05),黄淮羊和萨能羊介于二者之间,无显著差异;胚胎移植受体妊娠率、胚胎成羔率,奶杂羊显著低于波杂羊、黄淮羊和萨能羊(P<0.05),后3个品种受体羊之间差异不显著。     

不同FSH剂量·季节和重复超排对山羊超数排卵的影响

[目的]研究不同FSH剂量、季节和重复超排等因素对供体羊超排效果的影响,为扬州地区进一步做好山羊胚胎移植和胚胎生物工程研究提供必要的数据。[方法]设计不同FSH剂量（240IU和300IU）、季节（10～12月份和4～6月份）、重复超排（第1次和第2次）,鉴定超排效果。[结果]FSH240IU和300IU组的平均排卵点和可用胚数分别为10．12个、8．82枚和15．55个、13．15枚,2纽间平均排卵点和可用胚数差异显著（P〈0．05）;在4～6月份和10～12月份的平均排卵点和可用胚数分别为9．05个、7．05枚和15．55个、13．15枚,2组间平均排卵点和可用胚数差异显著（19〈0．05）;供体使用1次和2次的超排效果差异不显著（P〉0．05）。[结论]FSH剂量、季节因素对超排效果影响显著,供体重复使用对超排效果影响不显著。     

不同因素对安徽白山羊超数排卵的影响

为获得更多安徽白山羊受精卵,以开展转基因育种工作,研究了不同孕酮阴道栓来源、季节以及供体妊娠状态对安徽白山羊超数排卵效果的影响。结果表明:使用国产孕酮阴道栓(CIDR)对供体母羊进行同步发情处理,头均排卵数和回收受精卵数分别为15.0±7.62和14.6±7.88枚,受精率为97.3%,而应用进口孕酮阴道栓对供体山羊进行同步发情处理,头均排卵数和回收受精卵数分别为11.0±5.38和10.8±5.16枚,受精率为98.2%,两组间差异不显著(P0.05);安徽白山羊在春、秋、冬3个季节超数排卵,头均回收卵子数分别为13.71±6.28、16.54±7.43和13.95±6.15枚,季节间差异不显著(P0.05);妊娠母羊和未妊母羊头均排卵数分别为14和15.2枚,两者差异不显著(P0.05),但妊娠组回收卵子的受精率显著低于空怀组(P0.05)。     

柴达木绒山羊胚胎移植技术应用试验

超数排卵和胚胎移植技术是扩繁优良羊只的高新技术.该研究对2只供体和20只受体柴达木绒山羊母羊经过同期发情和超数排卵处理,进行胚胎移植.结果表明,20只受体羊同期发情率达70.00％,供体羊产生12枚黄体,移植鲜胚9只羊,妊娠率达33.33％,产羔率达100.00％,羔羊成活率达100.00％.     

崇明白山羊和徐淮山羊体重与体尺的相关和通径分析

分析了崇明白山羊和徐淮山羊成年母羊的若干体尺指标与体重的相关性及其直接和间接作用,建立了体重．体尺最优回归模型。结果表明：角基周长可作为预测崇明白山羊成年母羊体重和选择的主要体尺因素,胸深与肩宽则可作为徐淮山羊的相应体尺因素。崇明白山羊成年母羊的体尺-体重最优回归模型为Y=-14．5244＋1．91．62X5＋0．3862X4;徐淮山羊的体尺-体重最优回归模型为Y=-47．4653＋1．7264X2＋2．0831X8。     

波尔山羊×宜昌白山羊F_1代杂种羊生产性能的测定

[目的]提高宜昌白山羊的生产性能。[方法]通过人工授精,利用波尔山羊精液对宜昌白山羊进行改良,研究F1代杂交山羊的生长性能、屠宰性能和板皮性能。[结果]在相同的饲养管理条件下,F1杂种山羊初生重,2、4、8、12月龄体重均明显高于宜昌白山羊,差异极显著(P<0.01)。F1代杂种山羊2、4、8、12月龄体长分别比宜昌白山羊提高32.46%、30.00%、32.05%和26.57%,胸围分别提高26.41%、23.68%、29.39%和19.73%。12月龄F1代杂种山羊的平均胴体重比宜昌白山羊高7.52 kg,屠宰率(47.26%)比宜昌白山羊高6.67个百分点。F1代杂种山羊鲜皮重、板皮面积均比宜昌白山羊显著提高。[结论]利用波尔山羊杂交改良宜昌白山羊的生产性能是可行的,值得推广。     

温度对安徽白山羊受胎率和产仔数的影响

温度对安徽白山羊受胎率和产仔数的影响试验结果表明 ,在平均气温最高的 7、8月份 ,安徽白山羊平均受胎率和产仔数均最低 ,如采用 1a2胎 ,则应避免在 7、8月进行配种     

不同处理方法对波尔山羊胚胎移植效果的影响

为了提高波尔山羊繁殖力,应用两种处理方法对波尔山羊进行了同期发情及超数排卵研究。结果表明:两种处理方法(PG-FSH法与CIDR-FSH法)对波尔山羊的同期发情率无显著差异(P>0.05),波尔山羊同期发情率达到92.5%;CIDR-FSH法处理的供体卵巢上的平均黄体数及平均采卵数均显著高于(P<0.05)PG-FSH法,而两者的平均获胚数与平均可用胚数差异不显著(P>0.05),说明CIDR-FSH法对波尔山羊的超排处理效果要优于PG-FSH法。试验还表明,移胚数量对受体妊娠率无显著影响(P>0.05),而对受体产羔率有极显著(P<0.01)的影响。移植双胚可以提高受体的产羔率。     

奶山羊冻胚长期保存长途运输和移植试验

用ＲＰＥ简易冷冻器快速冷冻６～７日龄萨能奶山羊胚胎。将在液氮中冻存１２～８１９ｄ的胚胎用液氮罐经汽车或火车运至外地，并把解冻后的７３枚胚胎移植给３８只当地山羊。受体妊娠率为６０．５％，移植胚产羔率为３９．７％。胚胎冻存１２～２１，１９８～２６５，３２０～４８０和６８７～８１９ｄ时，移植产羔率分别为３８．５％，４５．８％，４１．７％和２５．０％。各冻存期间差异不显著（Ｐ＞０．０５）．     

鸡蛋黄和鹌鹑蛋黄在崇明白山羊精液冷冻保存中效果比较

对崇明白山羊精液采取3种不同离心处理去除精清,比较添加鹌鹑蛋黄和鸡蛋黄对精液冷冻保存效果的影响.结果表明:崇明白山羊精液冷冻保存中以1 000 r/min离心5 min去除精清后,添加鸡蛋黄组解冻后精子活力为50.48%,鹌鹑蛋黄组解冻后精子活力为42.98%.添加鸡蛋黄组的效果显著优于鹌鹑蛋处理组.     

波尔山羊胚胎移植技术及应用效果研究

采用CIDR+FSH方法,对66只周岁波尔山羊进行超数排卵处理,63只超数排卵有效,有效率达到95.45%;平均每只羊冲取胚胎15.35枚,其中最高个体获得胚胎43枚。采用CIDR+PMSG方法对本地山羊进行同期发情处理,24h内发情率达到87.67%。对受体羊单胚移植后,两个情期的不返情率达62.76%,实际产羔率为51.46%。受体羊与供体羊的发情时间同步、晚12h、晚24h,胚胎移植受胎率差异不大,受体羊第二次手术与第一次手术移植对产羔率影响不大。     

提高山羊卵丘细胞核移植效果的研究

 【目的】提高山羊卵丘细胞核移植效果。【方法】采用秋水仙胺提高山羊卵母细胞去核率,5-氮-2'-脱氧核苷（5-aza-dC）和曲古菌素A（TSA）影响山羊卵丘细胞核移植胚胎。【结果】0.5 μg?ml-1秋水仙胺处理山羊卵母细胞效果最好,胞质突起率达91.7%（P＜0.05）;通过比较盲吸去核法与化学辅助去核法的去核率及构建卵丘细胞核移植胚胎的体外发育能力发现,化学辅助去核法的去核率达100%,所构建的重构胚体外发育能力较高,桑椹胚率和囊胚率分别达25.2%和13.1%,显著高于盲吸去核法（P＜0.05）。采用0.01 μmol?L-1的5-aza-dC处 理山羊卵丘细胞,核移植胚胎桑椹胚率和囊胚率分别达30.4%和17.0%,显著高于其它各组（P＜0.05）;采用 400 nmol?L-1TSA处理山羊卵丘细胞,核移植胚胎桑椹胚率、囊胚率分别达31.5%和15.2%。【结论】化学辅助去核法的去核率显著高于盲吸去核法,采用0.01 μmol?L-1的5-aza-dC或400 nmol?L-1 TSA处理山羊卵丘细胞,效果最佳。