龙眼荔枝属间原生质体电融合

由龙眼的幼胚培养诱导、筛选出松散型胚性愈伤组织 ,由之建立了胚性悬浮细胞系 ;用同样的方法建立了荔枝的松散型胚性愈伤组织系 .龙眼的胚性悬浮细胞和荔枝的胚性愈伤组织在含纤维素酶和果胶酶各 10 .0g· L-1的 CPW- 13M的酶解液中酶解 ,经纯化后可得到较为纯净的原生质体 .采用电融合方法进行两种原生质体融合处理 ,获得了适宜的融合参数 ,融合率达 2 0 %以上 .融合产物经初步培养 ,形成了多细胞团     

柑橘原生质体电融合研究进展

柑橘原生质体电融合研究进展华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室刘继红柑橘是多年生木本植物,童期长,遗传上高度杂合,一些主栽品种雄性败育（如温州蜜柑）或／和雌性败育（如脐橙）,更为重要的是柑橘具有多胚性,使得杂交育种进展极为缓慢。而原生质体融合技术能...     

电场诱导融合再生两个柑桔种间体细胞杂种

通过电场诱导融合方法分别获得了续荷尔脐橙与粗柠檬、纽荷尔脐橙与夔柑两个组合的体细胞杂种。纽荷尔脐橙＋粗柠檬级合获得了４５棵再生植株。对其中的３０棵株进行染色体检查,结果表明,全为四部体,２ｎ＝４ｘ＝３６。过氧化物同工酶及ＲＡＰＤ分析表明再生植株为体细胞杂种。续荷尔脐橙＋夔柑组合获得了２５株再生植株。染色体检查结果表明,全为四倍体,２ｎ＝４ｘ＝３６。ＲＡＰＤ分析表明再生植株为体细胞杂种。     

大麦原生质体融合和体细胞杂种形成

以申麦１号和花培系Ａ１０２为材料，分别用它们的叶细胞和胚性细胞悬浮系游离出的原生质体作为融合亲本，进行了原生质体融合实验，通过改进融合液组成，采用微孔滤膜技术，改进培养方法等措施，获得了它们的体细胞杂种细胞系，并经杂种筛选和鉴定，证明它们是由融合产生的体细胞杂种。     

马铃薯叶肉原生质体电融合参数优化及杂种植株再生

以马铃薯栽培种“中薯2号”的无性系3^#、8^#和野生种Solanum chacoense叶肉原生质体为融合试材,优化马铃薯高效融合的电融合参数。研究表明,在交变电场(AC)100V／cm、AC作用时间20s、直流脉冲电压(DC)1100V／cm、DC脉冲时间60μs、脉冲数1次时,双核融合率可达40％以上。融合产物经过4-5个月的培养获得再生植株。对首先再生的15个株系通过RAPD标记检测,证明均为体细胞杂种。所用引物C-01能够同时扩增出杂种植株中双单倍体亲本1100bp和670bp的特征带以及野生种．S.chacoense亲本510bp的特征带。     

一个新的柑桔属间体细胞杂种

通过ＰＥＧ诱导原生质体融合，进行了伏令夏橙＋枳橙的体细胞杂交，培养获得了５０株再生植株，经细胞学检查和同工酶分析鉴定，确认为６株为伏令夏橙和枳橙和枳橙的体细胞杂种，它们均为四倍体，具有双亲综合的ＧＯＴ和ＳＫＤＨ同工酶带型，融合后原生质体经３种培养方式比较结果表明，以ＬＭＴ软包埋培养效果最好。     

一个新的柑桔属间体细胞杂种

通过ＰＥＧ（聚乙二醇）诱导原生质体融合，进行了伏令夏橙（ＣｉｔｒｕｓｓｉｎｅｎｓｉｓＯｓｂ．ｃｖ．‘ｖａｌｅｎｃｉａ’）＋枳橙（ＰｏｎｃｉｒｕｓｔｒｉｆｏｌｉａｔａＲａｆ．×Ｃ．ｓｉｎｅｎｓｉｓＯｓｂ．）的体细胞杂交，培养获得了５０株再生植株．经细胞学检查和同工酶分析鉴定，确认有６株为伏令夏橙和枳橙的体细胞杂种，它们均为四倍体（２ｎ＝４ｘ＝３６），具有双亲综合的ＧＯＴ和ＳＫＤＨ同工酶带型．融合后原生质体经３种培养方式比较结果表明，以ＬＭＴ（低熔点琼脂糖）软包埋培养效果最好．     

柑橘种间体细胞杂种花器官特性及花粉育性

柑橘异源四倍体体细胞杂种“哈姆林甜橙Citrus sinensis cv．Hamlin Sweet Orange 粗柠檬Citrus jambhiri cv．Rough Lemon)”是我国最早一例开花的柑橘体细胞杂种。为探讨其在柑橘育种与生产中的价值,对其花器官特性、花粉形态及大小进行了观察,并对花粉育性进行了检测。结果表明,花器官有3种类型：完全花、雌蕊败育花和畸形花。其中95％的花为雌蕊败育花,但其花药饱满,花粉量大(每花药19229粒),萌发率高(15．31％)。以异源四倍体体细胞杂种为父本与晚白柚杂交,座果率为49．50％,远远高于晚白柚自然授粉和白花结实的座果率,这说明柑橘种间体细胞杂种的花粉可促进晚白柚的授粉受精,在杂交育种中可作为亲本利用。     

香蕉原生质体的电融合研究

以香蕉栽培种＂过山香＂（Musa AAB Silk cv.Guoshanxiang）和野生阿宽蕉（Musa itinerans Cheesm.AB Group）原生质体为融合试材,进行香蕉高效融合的电融合参数优化。研究表明,在交变电场（AC）200 V/cm、AC作用时间30 s、直流脉冲电压（DC）1500 V/cm、DC脉冲时间40μs、脉冲次数为2次时,融合效率最佳,融合率可达32.4%以上,原生质体活力达81.4%。     

柑桔与枳属间体细胞杂种叶型遗传研究

枳的三出叶一般被认为对柑桔属和其它近缘属的单叶是显性的 ,且为不完全显性[1 ] ,它涉及到两对基因的作用 ,一般认为这两对基因是显性重复的[2 ] 。枳壳的三出叶性状是纯合显性的 ,杂合基因型则表现三出叶或二出叶 ,而单叶类型是纯合隐性的[1 ] 。但单叶的柚和单叶的马蜂柑的 50株杂交后代约有1 /3是三叶类型 ,因此 ,三叶性状也被认为可能由 2个互补显性基因控制 ,上述 2个单叶亲本是各含有一个显性互补基因的杂合体。由此看来 ,控制三出叶的 2对基因间互作在柑桔的不同类型中可能不一致[2 ] 。柑桔与枳属间体细胞杂种的创造为研究枳属三叶…     

柑橘非对称体细胞杂种的胞质基因组分析

采用CAPS（cleaved amplified polymorphic sequence）分子标记对通过非对称原生质体融合获得的2个组合体细胞杂种植株进行了胞质遗传分析。结果表明,在伏令夏甜橙（Citrus sinensis）＋默科特橘橙（C.reticulata×C.sinensis）组合中,分析的2棵植株胞质DNA都来自伏令夏甜橙（供体）;在丹西红橘（C.retic-ulata）＋佩琦橘柚（C.reticulata×C.paradisi）组合中,分析的3棵植株胞质DNA都来自来源于佩琦橘柚（受体）。     

原生质体技术在园艺植物育种中的应用

原生质体技术包括原生质体植株再生、原生质体融合技术等,在园艺植物育种应用工作中取得了一定的成果,原生质体再生植株的变异为园艺植物育种工作提供了大量材料;原生质体融合技术则是育种工作的新途径。二者都对育种工作的发展起到了非常重要的作用。     

属间体细胞杂交创建甘蓝型油菜细胞质雄性不育系及其鉴定

 利用原生质体融合技,获得了甘蓝型油菜品种中双4号与新疆野生油菜野油18的对称性体细胞杂种。杂种当代建成的6株植株中有2株雄性不育株。用中双4号做轮回亲本与不育株回交,不育株率随回交代数增加而升高,至BC3代大部分株系的不育株率接近100%,到BC4代不育性稳定,群体中无育性分离现象。用波里马CMS的恢复系和保持系与其测交,6个甘蓝型油菜品系均可保持该不育系的不育性,表明该雄性不育胞质与Pol不育胞质不同。     

Establishment and Identification of Cytoplasmic Male Sterility in Brassica napus by Intergeneric Somatic Hybridization

Exploitation of novel cytoplasmic male sterility(CMS)is a main approach for widening the cytoplasmic genetic background of hybrid oilseed rape and avoiding epidemic risk in oilseed rape production.In this study,symmetric somatic hybrids between Brassicanapus var.Zhongshuang4 and Sinapis arvensis(Yeyou18)were produced by protoplast fusion.Two of the six established hybrids were male sterile showing trace or no pollen release upon flowering with non-or slightly extended stamens.Using Zhongshuang4 as a recurrent parent to pollinate the male sterile plants,the ratio of male sterile plants increased with the number of backcrosses.As early as in BC3 generation,most of the sterile families had nearly 100%sterile plants.Up to BC4 generation,the male sterility became stable and no fertility segregation was observed.All F1 progenies from tested crosses using restorer and maintainer lines of Polima CMS were 100%sterile,indicating that the established CMS by somatic hybridization is different from Polima CMS.The origin of the cytoplasm and potential use of this hovel CMS in oilseed rape breeding were discussed.Key wotds:Oilseed rape,Protoplast fusion,Cytoplasmic male sterility,Sinapis arvensis     

天然四倍体紫花地丁的体细胞染色体观察

[目的]了解药用植物紫花地丁的植物分类及区域分布,为其提供细胞学资料。[方法]分别随机采集50株野生紫花地丁的幼蕾及50株成熟野生紫花地丁的果实,经预处理后,对子房细胞及根尖细胞进行卡宝品红染色及染色体观察并计数。[结果]对50株野生紫花地丁的子房,用8-羟基喹啉溶液预处理,进行子房细胞染色体制片,经光学显微镜镜检后,共得到127个可染色体计数的子房细胞;50株野生紫花地丁的种子经发根培养,8-羟基喹啉溶液预处理,进行根尖体细胞染色体制片后,共得到92个可染色体计数的细胞。这219个可染色体计数的体细胞的染色体数目均为48。[结论]发现了一个紫花地丁的天然四倍体种群,其体细胞染色体数目为48。     

桂林市柑橘园植株和土壤铜含量分析

了解桂林市柑橘园土壤与植株的铜含量现状,为含铜肥料、农药的使用提供科学依据,对桂林市柑橘园不同品种、不同树龄的植株叶片、根系和园区耕地表层土壤进行了铜含量分析。结果表明：桂林市柑橘园植株叶片铜含量极不均匀,介于3.4～72.2 mg/kg,平均7.89 mg/kg,且含量与树龄呈正相关;根系铜含量较丰富,平均19.81 mg/kg,无缺铜现象,也不存在过量现象,含量也与树龄呈正相关;土壤有效铜含量范围在0.80～22.41 mg/kg,平均6.37 mg/kg,为高含量水平;同时发现耕作层土壤有效铜含量与土壤成土母质、土壤pH值、土壤有机质含量有关;土壤有效铜与植株铜含量呈显著正相关关系。     

贵州南部地区柑橘生产现状调查

贵州南部地区气候温暖湿润,适应各种南亚热带果树的生长发育。为了充分利用和合理开发贵州南部果树资源,把自然优势转化为经济优势,对贵州南部柑橘生产现状进行了调查,分析了生产中存在的问题,并提出了建议与对策。