应用浸种法导入外源DNA转化烤烟遗传性状变异D_2代研究(Ⅰ)

提取抗赤星病烤烟 CV 87的总 DNA,采用浸种法导入感赤星病烤烟 NC89。 D_1 代筛选出的优良变异株收种并种植后得到 D_2代 ,对其活体接种赤星病菌 ,检测其抗病性 ,并于接菌前后测定叶片过氧化物酶活性。对其田间生长性状调查 ,对其成熟期烟叶总糖、蛋白质及烟碱分析。结果表明 ,浸种法直接导入外源 DNA ,在变异株 D_2代仍可有效转移株高、株型、叶型、叶面积及抗病性等性状 ,并获得较高的转化率 ,D_2代为 8.10 %。高抗赤星病 ,过氧化物酶活性高 ,总糖、蛋白质及烟碱含量基本保持了受体原有的优良品质 ,其变异株 D_2代有 C_10,A_9,B_6,D_3,A_13。     

应用浸种法导入外源DNA转化烤烟遗传性状变异株D_2代研究(Ⅱ)

采用浸种法导入外源 DNA后变异株 D2 代 ,对其进行盆栽生长性状调查 ,活体接种赤星病菌 ,检测其抗病性及同工酶电泳酶谱分析。结果表明 ,浸种法直接导入外源 DNA,在变异株 D2 代仍可有效转移供体表型性状如株高、株型、叶型、叶面积、生育期、抗病性及同工酶酶谱等性状 ,并获得较高的转化率 D2 代为 12 .5 0 % ,其中具有多种优良性状抗病株系有 C1 0 ,B6 ;具有供体株高、株型、抗病性及同工酶酶谱的优良株系有 A9,D3     

外源DNA导入烟草后D_2代植株抗病性鉴定和酶活性的测定

提取抗赤星病烤烟CV87的总DNA ,采用花粉管通道法导入感赤星病烤烟NC89。D1代筛选出的优良株收种并种植后得到D2 代 ,对其活体接种赤星病菌 ,检测其抗病性 ,并于接菌前后测定叶片过氧化物酶活性。结果表明 :接菌的 10个株系有 3个株系的抗病性与供体亲本CV87相似 ,并显著高于受体亲本NC89;抗病性强的个体接菌后其过氧化物酶活性较接菌前有明显升高 ,与CV87没有明显差异。但CV87的过氧化物酶活性在接菌前后没有明显变化 ,说明其接菌前就表现高的活性     

外源DNA导入烟草后D2代植株抗病性鉴定和酶活性的测定

提取抗赤星病烤烟CV87的总DNA，应用花粉管道通道法导入感赤星病烤烟NC89。D1代筛选出的良株收种并种植后得到D2代，对其活性接种赤星病菌，检测其抗病性，并于接菌前后测定叶片过氧化物酶活性。结果表明：接菌的10个株系有3个株系的抗病性与供体亲本CV87相似，并显著高于受体亲本NC89；抗病性强的个体接菌后其过氧化物酶活性较接菌前有明显升高，与CV87没有明显差异。但CV87的过氧化物酶活性在接菌前后没有明显变化，说明其接菌前就表现高的活性。     

外源DNA导入烤烟后变异株D1代茎尖染色体核型分析

以抗赤星病烤烟CV87为供体，感病烤烟NC89为受体，采用浸种法将总DNA导入受体。收获的变异株Jz96027种子发芽，得到的D1代个体，对其茎尖受体(亲本)的茎尖进染色体核型分析。结果表明：烤烟NC89(受体)和变异株JZ97027染色体体数目2n＝48，2个染色体组均为基本对称核型。其中14对染色体为M型，9对为SM型，1对为ST型。变异株D1代Jz9702与受体NC89核型相比较有第1、2、4、6、15、16、17、22共8对染色体有明显变异。变异株D1代Jz97027尚有染色体落后畸变现象发生。     

外源DNA导入烤烟后D_2代植株抗病性和过氧化物酶活性的测定

提取抗赤星病烤烟ＣＶ８７ 的总ＤＮＡ,采用浸种法导入感赤星病烤烟ＮＣ８９。Ｄ１ 代筛选出的优良株收种并种植后得到Ｄ２ 代,对其活体接种赤星病菌,检测其抗病性,并于接菌前后测定叶片过氧化物酶活性。结果表明,接菌的８ 个株系有３ 个株系的抗病性与供体亲本ＣＶ８７ 相似、并显著高于受体亲本ＮＣ８９;抗病性强的个体接菌后的过氧化物酶活性较接菌前有明显的升高,与ＣＶ８７ 没有明显差异。但ＣＶ８７ 的过氧化物酶活性在接菌前后没有明显变化,即接菌前就表现高的活性     

应用浸种法导入外源DNA转化烤烟D1代遗传性状变异的研究

针对严重威胁烤烟大田生产的赤星病病害，培育抗病品种，以烤烟品种NC89为受体，具有选择标记性状的CV87为供体，采用浸种法将供总DNA导入受体，获得具有目的性状的D0代变异株收种并种植后得到D1代，对其D1代进行实验检测结果表明浸种法直接导入外源DNA在D1代，仍可有效转移株高，株型，叶色，叶面积，生育期及抗病性等性状，并获得较高化率D1代为15％，导入后D1代成熟烟叶总糖与蛋白质含量变异株与对照基本一致，说明变异株基本保持了受体原有的优良品种，蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，表明导入D1代变异株出现了受体没有的耐供体所特有的两条谱带，Rf0．19和Rf0.63，具有供体特有的两条谱带的D1代变异株有A14B6．C5．C10．D3等5个优良株系。经过D1代一系列检测和筛选，选出5株早熟，优势，抗病变异株有A14．B6．C5．C10．D3。为今后进行D2代筛选，通过分子验证，为烟草育种创造新种质，开创新途径。     

应用浸种法导入外源DNA转化烤烟变异株D2代的氨基酸含量分析

本文对应用浸种法将烤烟CV87总DNA导入受体烤烟NC89产生的抗赤星病变异株D2代的水解氨基酸含量进行了分析。结果表明，变异株D2代4个抗病株系的17种氨基酸总量均比受体低。通过与受体和供体各种氨基酸成分的相对含量比较表明，这4个变异株系中的天冬氨酸、丙氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、精氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、胱氨酸含量的改变与供体烤烟CV87的DNA导入有关。     

外源DNA导入烟草后过氧化物酶活性及其同工酶变化的研究初报

抗赤星病烟草CV85的总DNA用浸种法导入优质烤烟感病品种Nc89，当代筛选出具抗赤星病性质的变异植株，对其进行过氧化物酶活性和同工酶的测定分析，结果表明，该变异株较受休Nc89过氧化物酶同工酶谱带增加，原有谱带颜色加深，同时过氧化物酶活性明显增强．     

应用浸苗法导入外源DNA转化烤烟遗传性状变异的初步研究(I)

针对严重危胁烤烟大田生产的赤星病病害,培育抗病品种。本研究以烤烟品种Ｎｃ８９为受体,Ｃｖ８７为供体,采用浸苗法将供体总ＤＮＡ导入受体,通过表型、抗病性和过氧化物酶同工酶检测,筛选抗病变异材料。研究结果表明,外源总ＤＮＡ直接导入可有效转移株高、株型、叶色、叶面积大小、生育期及抗病性等性状,并获得了较高转化率（７．１０％）。