鸡大肠杆菌iss基因的克隆测序及原核表达

本实验对鸡大肠杆菌O2血清型菌株进行iss基因克隆测序，并在此基础上设计出两对套式引物，分别对含信号肽Miss基因序列和不含信号肽Miss基因序列进行扩增，并与原核表达载体pGEX-6p-1连接进行原核表达。iss基因克隆测序的结果与两组国外发表Miss基因序列进行比对，其同源性达100％。SDS—PAGE鉴定显示融合蛋白获得了较理想的表达，融合蛋白分子量分别约为36kD和33kD。     

鸡源致病性大肠杆菌体外药敏试验

鸡源致病性大肠杆菌体外药敏试验秦四海郭庆荣郑洪云王自然（山东临沂农校，２７６０００）吴庆云（山东郯城县兽医站，２７６１００）自１９９３年至今笔者对临沂地区各县市共计６０多个养鸡场和养鸡专业户的大肠杆菌病鸡进行了１００多次药物敏感性体外试验，对大肠杆菌...     

鸡源致病性大肠杆菌对鸡胚气管上皮细胞的粘着作用

采用透射电镜和扫描电镜观察了鸡源大肠杆菌在改良马丁肉汤、营养肉汤、麦康凯琼脂和普通营养琼脂培养基上生长时菌毛的表达以及致病性大肠杆菌对培养的鸡胚气管上皮细胞的粘着。大肠杆菌Ｏ７８、Ｏ３６、Ｏ４９在改良马丁肉汤和麦康凯琼脂上经３７℃７２小时培养后菌毛生长良好，能够牢固地粘着在鸡胚气管上皮细胞绒毛上。     

鸡致病性大肠杆菌菌毛fimC基因的表达及重组fimC蛋白卵黄抗体的免疫保护效力

在表达鸡致病性大肠杆菌菌毛fimC基因的基础上,对fimC蛋白卵黄抗体的免疫保护效力进行测定。对鸡致病性大肠杆菌O2血清型菌株fimC基因序列进行扩增,扩增产物克隆至pMD18-T载体并测序。测序结果显示,fimC基因全长657 bp,编码218个氨基酸,与人源大肠杆菌fimC基因进行同源性比较,核苷酸序列同源性达97.9%,氨基酸序同源性为96%。从重组质粒pMD18-T-fimC上将fimC基因亚克隆到表达载体质粒pET-30c上,转化大肠杆菌BL21（DE3）,表达出预期的25 ku融合蛋白,采用Western Blot对表达产物进行反应原性分析,结果显示fimC融合蛋白具有较好的抗原反应特异性。用表达的fimC蛋白免疫产蛋母鸡,制备fimC高免卵黄抗体。用制备的fimC高免卵黄抗体免疫1日龄健康雏鸡,1 d后注射鸡致病性大肠杆菌进行攻毒,结果显示,fimC卵黄抗体免疫组死亡率为40%,对照组分别为60%、70%,证明所制备的fimC蛋白卵黄抗体能在一定程度上抵抗鸡致病性大肠杆菌的攻击。     

鸡致病性大肠杆菌研究进展

鸡致病性大肠杆菌研究进展裴建武甘孟侯（北京农业大学动物医学院，北京１０００９４）随着养鸡业的发展，鸡大肠杆菌病的危害日趋严重，特别是在鸡的几种重要病毒病得到有效控制后，由其造成的损失明显上升，该病已成为危害养鸡业的主要细菌病之一。大肠杆菌的血清型非常...     

fimC基因与鸡源大肠杆菌致病性的相关

将20株鸡大肠杆菌分别腹腔接种1日龄健康雏鸡,检测其致病性。同时以该20株菌的基因组DNA为模板,应用PCR技术分别进行fimC基因的扩增,结果95％高致病力菌为fimC^ ,而其它非致病性或致病力极低的菌株均为fimC^-。结合相关资料表明,fimC基因几乎只存在于高致病力鸡大肠杆菌中,可以作为高致病力鸡大肠杆菌鉴定的标志基因。将O2菌株PCR扩增产物克隆到pMD18-T载体上,并对其进行酶切鉴定和测序分析,测序结果与参考序列经同源性比较,核苷酸序列同源性为97．9％,氨基酸序列同源性为96．0％,证明所扩增基因是fimC基因。     

湖北省鸡源致病性大肠杆菌某些生物学特性研究

从湖北省１０余个先后暴发以气囊炎，心胞炎，肝周炎为主要症状的鸡场中分离到病菌，经培养，生化鉴定确认为大肠杆菌，对其中２２株血清型鉴定，有８株为Ｏ７８，占待检株的３７．４％，２株为Ｏ５８／１３８，占待检株的９．１％，Ｏ２，Ｏ７，Ｏ１１，Ｏ２２，Ｏ５７，Ｏ６０，Ｏ１４７各一株，５株未定型。     

鸡大肠杆菌油乳剂灭活菌苗免疫效果的检测

本试验采用本系研制的三批鸡大肠杆菌油乳剂灭活疫苗，分别免疫非免疫鸡１０只。在免疫前及免疫后的第７天、１４天、２８天、４２天、５６天分别采血，检测其免疫前、后的血清抗体效价。结果表明此疫苗在免疫后第７天即产生抗体，２８天达到高峰，到５６天仍维持较高水平。分别用Ｏ１、Ｏ２、Ｏ３５、Ｏ７８菌体抗原检测血清单因子抗体，结果表明，４种抗原均能产生较高浓度的凝集抗体。在免疫后第６０天，分别用４种不同Ｏ抗原的野生型细菌攻击：每只鸡口服２０亿活菌，观察一周，每组鸡均未见死亡，扑杀后也未分离到大肠杆菌，表明免疫鸡能抵抗活菌的攻击     

鸡的致病性大肠杆菌分离鉴定

鸡的致病性大肠杆菌分离鉴定吴耀妹，任建鸾（南京农业大学２１００９５）侯世忠（胜利油田肉鸡场）南京某鸡场和山东某鸡场的罗曼鸡群先后发生了一种以气囊炎、腹膜炎、败血症、输卵管炎及脐炎为特征的疾病，经调查及病原分离鉴定，确诊为大肠埃希氏菌病，并对分离的１１...     

iss基因与鸡大肠杆菌毒力相关性的分析

对20株鸡源大肠杆菌的致病性进行测定。并对不同致病性鸡大肠杆菌的iss基因进行了扩增。结果表明：鸡E．coli O1、O2、北京1、北京3、贵州1、新大、田大、E10、E11、E27对1日龄雏鸡具有较强的毒力;O78、E5、E21的致病性较弱;而E．coli E1、E4、E7、E8、E9、E14、E18接种雏鸡均无死亡。iss基因在致病性鸡E．coli O1、O2、O78、北京1、北京3、贵州1、新大、田大、E5、E21、E10、E11、E27中的扩增频率为92．31％;在毒力较强的致病性鸡Ecoli O1、O2、北京1、北京3、贵州1、新大、田大、E10、E11、E27中的扩增频率为100％;在无致病性(或低毒力)的鸡Ecoli E1、E4、E7、E8、E9、E14、E18中的扩增频率为14．29％。结果表明：iss基因在致病力强的菌株中的扩增频率明显高于其它菌株,iss基因的存在与鸡大肠杆菌的毒力问有一定的相关性。     

Iss蛋白在鸡源大肠杆菌不同毒力菌株中的检测

本试验以鸡源大肠杆菌O2血清型iss基因原核表达产物GST-Iss融合蛋白免疫SPF鸡,获得抗血清。采用间接ELISA法检测Iss蛋白在几种毒力强弱程度不同的鸡源大肠杆菌菌株中的表达情况,并通过检测菌株在血清中的存活状况,研究Iss蛋白与抗补体功能(血清抗性)及致病力的关系。结果表明,鸡源大肠杆菌Iss蛋白与菌株的血清抗性及菌株的致病力有相关性。     

鸡致病性大肠杆菌的分离鉴定

鸡大肠杆菌病是严重影响养鸡业生产的一种传染性疾病，雏鸡以败血症；各种年龄鸡以气囊炎、心包炎、肝周炎、腹膜炎、眼炎、肉芽肿以及产蛋鸡的卵黄性腹膜炎等主要的症状和病理变化。我们从本省的仪征、盐城、东台、海安等地的病鸡共分离到７６株大肠杆菌，选有代表性１０株，进行生化特性及血清型鉴定。结果表明，江苏东北地区分离株的血清型主要表现为Ｏ７８、Ｏ８、Ｏ３５、Ｏ１，生化结构表明不同血清型细菌之间或同一血清型不同     

鸡经不同途径接种大肠杆菌灭活苗的免疫应答

采用滴鼻,口服和注射三种不同的免疫途径对鸡进行Ｅ．ｃｏｌｉ灭活疫苗的免疫后,通过试凝集试验检测了试验鸡的血清抗体滴度变化。结果证明,滴鼻,口服接种Ｅ．ｃｏｌｉ灭活疫苗与注射Ｅ．ｃｏｌｉ灭活疫苗一样都可引起鸡血清抗体的应答,只是所产生的抗体水平较低。     

山东省鸡致病性大肠杆菌的血清型鉴定

山东省鸡致病性大肠杆菌的血清型鉴定范伟兴胡敬东肖传发李桂杰（山东农业大学动物科技学院，泰安２７１０１８）鸡大肠杆菌病是由大肠埃希氏菌的某些血清型所引起的一种综合征，１８９４年Ｌｉｇｎｉｅｒｅｓ首先报道了该病［１］，以后有关鸡大肠杆菌病的研究不断增多［...     

鸡致病性大肠杆菌药敏试验

用２０种抗菌药物对分离自四川不同地区的１５株毒力强的致病性大肠杆菌进行体外药物敏感性试验。结果表明，供试菌对丁胺卡那霉素、先锋霉素Ｖ、新霉素１００％敏感，其高敏以上菌株所占比例分别为１００％、９３．３％、９３．３％，可作为防治鸡大肠杆菌病的首选药物。