细胞凋亡的调控基因研究进展

1　细胞凋亡的概念在多细胞生物中 ,细胞的死亡有两种不同的形式。一种是坏死性或意外性死亡 ( necrocis or acci-dental cell death) ,它是由于某些外界的因素 ,比如局部贫血、高热以及物理、化学损伤和生物的侵袭等 ,造成细胞急速死亡 ,即病理性细胞死亡 ,形态学上表现为细胞坏死。另一类为生理性细胞死亡 ,这是1972年 Kerr等在正常生理状态下观察到的 ,称为编程性细胞死亡 ( Programmed cell death PCD) ,形态学上表现为细胞凋亡 ( apoptosis) [1]。细胞凋亡是机体的正常细胞在受到生理性或病理性刺激后启动的自发的死亡过程 ,是一种主…     

鸡Bcl—2基因的克隆及其对卵泡闰细胞凋亡的影响

将鸡的Bcl-2基因克隆到真核表达载体JLV，构建了重组质粒JLVB。0．2μg／孔JLVB重组质粒经脂质体介导转染卵泡颗粒细胞，应用流式细胞术等方法分析了转染Bcl-2基因后原代细胞和传代细胞的生长与凋亡情况。与对照组相比，转染后的传代细胞分裂速度较快（P＜0．01），凋亡比率较低，G2／M＋S期细胞比例极显著高于对照组（P＜0．01）。这些结果表明，Bcl-2基因具有促进细胞分裂、抑制细胞凋亡、延长细胞寿命的作用，这种作用是直接的。在转染时间为12h、DNA量为0．3μg/孔的条件下，较好的脂质体介导用量的1．2μL／孔。     

细胞凋亡的研究近况

细胞凋亡是受到包括基因在内的多种因素调节的细胞主动死亡的过程，随着对细胞凋亡研究的深入，人们逐渐认识到细胞凋亡与细胞增殖在致病作用中具有重要的意义。文章简述了细胞凋亡的概念。细胞凋亡的形态改变。细胞凋亡的基因调控，细胞凋亡的生理意义及细胞凋亡与疫病的关系，通过对细胞凋亡的研究。为预防，治疗，诊断某些疾病提供新的理论依据及相应对策。     

细胞凋亡及基因调控在兽医病毒学领域研究动态

病毒感染杀伤细胞导致靶器官组织损伤以及病毒ＤＮＡ整事于细胞中使感染进入潜伏状态，其致病过程是病毒感染细胞后，诱导和抑制细胞凋亡的自身基因或缩主相关基因表达调控的结果。随着对细胞凋亡研究的深入，人们逐渐认识到细胞凋亡与细胞增殖在致病作用中具有重要意义。本文简述了细胞凋亡的概念，某些病毒诱导或抑制细胞凋亡基因调控的研究动态，以及该领域研究的意义及展望。通过探讨病毒与宿主相互关系，为预防、治疗、诊断病毒     

细胞凋亡调控基因

细胞凋亡已成为近年来发育生物学和医学研究的一个热点.从低等动物到高等哺乳类动物,从胚胎到成体,整个生命过程中都伴随着凋亡.细胞凋亡是由基因编码所决定的生理性、主动性的细胞死亡方式,是由一系列调控因子所调控,具有形态学和生化特征以及特定时空顺序的过程.越来越多的研究成果正在不断地提高人们对凋亡的认识.     

生精细胞的凋亡及其调控

本文简述细胞凋亡的概念和形态特征，并介绍在生理状态下各期生精细胞的凋亡、生精细胞凋亡的生化特性和基因、激素等调节因素。     

细胞凋亡的调控与检测

细胞凋亡是细胞的生理性死亡形式,受包括caspase、Bcl-2家族蛋白等在内的许多因素的调控并与其共同构成一个复杂的网络机构,诱导细胞凋亡并对其进行严密的调控。根据细胞凋亡的形态学改变和生化改变,通过显微镜和流式细胞仪等仪器设备,采用凝胶电泳及原位标记法等方法对凋亡细胞进行检测。     

细胞凋亡与疾病防治

细胞凋亡是受到包括基因在内的多种因素调节的细胞主动死亡的过程，涉及到一组半胱氨酸蛋白酶家族（caspases)对细胞凋的发生起着关键性作用，通过激活或者抑制caspases的活性，即可促进或抑制细胞发生凋亡，这就为疾病的防治提供了可能性，本文学就细胞凋亡的形态改变、发生机制作了简单综述。     

铅镉与细胞凋亡研究最新进展

1引言铅、镉是不可降解的环境污染物,在环境中可长期蓄积,并通过食物链、土壤、水和空气进入人畜体内,对人和动物机体造成长期的慢性损伤及严重的生态问题.铅、镉与必需金属元素结构相似,可以激活和抑制由必需金属离子调控的细胞进程.     

镉对小鼠生精细胞凋亡及bax和bcl-2基因表达的影响

将150只小鼠随机分成4个处理组和1个对照组，每组30只。给4个处理组小鼠分别一次性注射氯化镉1、2、4、6mg／kg（按体重给药），对照组小鼠注射等体积的生理盐水。于注射后第3、6和9d用原位末端标记法（TUNEL）测定睾丸内生精细胞的凋亡率，并用免疫组织化学方法检测bax和bcl-2基因的表达水平。结果显示，各染毒组小鼠的生精细胞凋亡率明显升高，与对照组相比差异显著（P〈0．05），并具有剂量-反应关系和时间-反应关系。bax基因的表达水平明显上升，而bel-2基因的表达水平明显下降。表明，镉可以诱导小鼠生精细胞凋亡，其机制可能与bax基因上调和bcl-2基因下调有关。     

Recent developments in the use of arthroscopy in cattle

Diagnostic arthroscopy can be applied to the bovine stifle to directly visualize the menisci, cranial and caudal cruciate ligaments, the articular surfaces, and the synovium. Basic arthroscopic technique for the bovine stifle hock is described using line drawings and endophotography. Examples of joint lesions as seen through the arthroscope and at postmortem dissection are presented.     

表达RGD和MEL重组沙门氏菌的构建及其对B16细胞凋亡作用的研究

为研究融合表达肿瘤靶向肽(RGD)和蜂毒肽(MEL)双基因重组减毒沙门氏菌对小鼠黑色素瘤B16细胞的体外抑瘤作用,本实验将RGD-MEL基因片段克隆至pEGFP-N1载体,将重组载体导入减毒沙门氏菌LH430,构建了重组沙门氏菌LH430/pEGFP-RGD-MEL,经PCR技术、质粒双酶切鉴定后采用阳性重组菌株侵染体外培养的小鼠黑色素瘤B16细胞,提取细胞总RNA经反转录后采用PCR检测目的基因RGD-MEL转录情况,western blot检测目的蛋白RGD-MEL以及凋亡蛋白Caspase-3、Bcl2、Bax的表达;流式细胞术检测B16细胞凋亡情况。结果显示:导入RGD-MEL基因的减毒沙门氏菌LH430侵染B16细胞后,目的基因RGD-MEL高效表达;经重组菌株侵染的B16细胞凋亡蛋白Caspase-3、Bcl2、Bax表达水平均显著增高(p<0.05);重组沙门氏菌诱导B16细胞的凋亡作用较PBS组显著增强(p<0.05)。本研究为细胞穿膜肽和细菌联合治疗肿瘤提供实验支持,并为后续动物试验奠定了研究基础。     

金属硫蛋白对热应激奶牛血淋巴细胞凋亡基因和HSP70基因表达的影响

为探讨金属硫蛋白(MT)对热应激奶牛血淋巴细胞凋亡基因和HSP70基因表达的影响及其机理,选取25头中国荷斯坦奶牛经产泌乳母牛,随机均分为A、B、C、D、E 5组,分别按每头0(对照),16.0,24.0,32.0和40.0 mg颈静脉注射Zn-MT,于试验第1(注射Zn-MT之前),7和14天逐头采取血样,测定不同剂量的外源性MT对热应激奶牛血淋巴细胞HSP70、Bcl-2、Bax和p53基因表达水平的影响。结果表明,补给外源性MT后,4个试验组奶牛的产奶性能都有不同程度提高,其中B组奶牛的产奶量比A、C、D和E组分别高出20.94%(P＜0.05),15.83%(P＞0.05),10.94%(P＞0.05)和8.85%(P＞0.05);各试验组HSP70基因的表达水平都有所上升,其中D组比对照组高出130.00%,达到显著(P＜0.05)水平;各试验组Bcl-2基因的表达水平均高于对照组,其中C组达到显著(P＜0.05)水平;B、D组Bax基因的表达水平和C、E组p53基因的表达水平较对照组分别降低了22.00%,13.00%和22.00%,34.00%,但均未达到显著(P＞0.05)水平。说明外源性MT能改善热应激奶牛的产奶性能并有效调控奶牛血淋巴细胞HSP70、Bcl-2、Bax和p53基因的表达水平,且表现出较为明显的剂量效应。     

人端粒酶基因(hTERT)对牛耳成纤维细胞凋亡的影响

为了提高体细胞核移植的效率,试验探讨了转染外源性hTERT基因对核移植供体细胞———牛耳成纤维细胞的影响。试验应用脂质体介导hTERT基因转染,用相差显微镜观察转染前后的细胞状态,用RT-PCR、W estern blot法检测hTERT基因是否整合并表达,用流式细胞仪检测转染前后细胞周期的变化和凋亡的情况,并进行核型分析。结果表明:转染48 h后能看到明显的荧光,经600μg/mLG418筛选后,获得阳性克隆,转染后的细胞形态上基本无变化,hTERT基因整合并表达;经流式细胞仪检测,转染前后生长周期无明显变化,凋亡率极显著降低(P<0.01),核型正常;转染hTERT基因后的牛耳成纤维细胞的凋亡率显著低于未转染的细胞,并且形态正常,表明转染hTERT后,使体外培养的牛耳成纤维细胞生命力得到延长,为核移植提供了数量更多的高质量的核供体细胞。     

Relative biological effectiveness of fast neutrons for apoptosis in mouse hair follicles

This study compared the effects of high linear energy transfer (LET) fast neutrons on the induction of apoptosis in the hair follicles of ICR mice with those of low LET ⁶⁰Co γ-rays. The changes that occurred from 0 to 24 h after exposing the mice to either 2 Gy of γ-rays (2 Gy/min) or 0.8 Gy of neutrons (94 mGy/min, 35 MeV) were examined. The maximum frequency was found at 12 h (γ-rays) or 8 h (neutrons) after irradiation. The mice that received 0-8 Gy of γ-rays or 0-1.6 Gy of neutrons were examined 8 h after irradiation. The dose-response curves were analyzed using the best-fit curve model. The dose-response curves were linear-quadratic, and a significant relationship was found between the frequency of apoptotic cells and the dose. The morphological findings in the irradiated groups were typical apoptotic fragments in the matrix region of the hair follicle, but the spontaneous existence of apoptotic fragments was rarely observed in the control group. In the presence of an apoptosis frequency between 2 and 14 per follicle, the relative biological effectiveness values of neutrons in small and large follicles were 2.09 ± 0.30 and 2.15 ± 0.18, respectively.     

表皮生长因子对水牛胚胎体外发育及凋亡的影响

为了探讨表皮生长因子(EGF)对水牛早期胚胎体外发育及凋亡的影响,通过收集屠宰场卵巢卵母细胞进行体外成熟和体外受精,将假定的受精卵置于含不同浓度EGF(0,25,50和100 ng/mL)的培养液中培养,检查分裂率和囊胚发育率,用细胞凋亡试剂盒(Annexin-V-FluosStaining kit)试剂染色,统计囊胚细胞凋亡率和坏死率。结果表明:50 ng/mL EGF组的孵化囊胚率显著高于对照组(P<0.05),该组细胞凋亡率和坏死率显著低于对照组(P<0.05)。100 ng/mL EGF的卵裂率、囊胚率、D7囊胚率和孵化囊胚率显著低于对照组和其他试验组(P<0.05)。细胞凋亡率和坏死率显著高于其他各组(P<0.05)。提示:一定浓度的EGF可提高囊胚孵化率,并可抑制胚胎细胞的凋亡。     

两株H5N1亚型禽流感病毒NS1基因诱导细胞凋亡的研究

为了研究H5N1亚型禽流感病毒NS1基因诱导的细胞凋亡作用，我们将两株H5N1亚型禽流感病毒A／Duck／Guangdong／40／2000（H5NI）（简称DKGD／40／00）和A／Duck／Guangxi／35／2001（H5NI）（简称DKGX／35／01）的NSI基因克隆到真核表达载体plRES2-EGFP，转染Hela细胞后，应用荧光显微镜检测转染表达效率，应用TUNEL和流式细胞仪观察NSI基因产生的细胞凋亡作用。结果两株病毒NSI蛋白表达均能诱导Hela细胞凋亡，凋亡率无明显差异。表明单一的NS1并不能完全阐明凋亡的产生与病毒毒力强弱和病毒扩散之间的关系。     

我国生物制品的研究进展

综合论述近年来我国对传统疫苗的改良以及新病疫苗、基因工程疫苗、新型佐剂、免疫增强剂等兽用基因工程生物制品研究与开发的进展情况及发展趋势。