副猪嗜血杆菌侵袭内皮细胞

加拿大蒙特利尔大学研究人员进行的一项研究证实，副猪嗜血杆菌（H．parasuis）在健康仔猪是一种呼吸道共生菌，但是通过血脑屏障，也能引起侵袭性疾病与脑膜炎。研究人员发现，从有全身病变的猪体分离的强毒株符合多位点序列分型（MLST）中的系统分支并对吞噬和血清有抵抗力；从健康仔猪鼻中分离的非强毒株在MLST中属于鼻分支并对吞噬和血清敏感；强毒株的侵袭力大多数比非强毒株强，侵袭内皮细胞是H．parasuis的一种毒性机理，这可能与某些能够引起脑膜炎的菌株有关。     

捕食线虫性真菌的分离培养及分布规律

对自然界中的捕食线虫性真菌进行了分离和种属区分，并对分布规律进行了研究。从土壤、粪便等材料中获得了2类活性较强的捕食线虫性菌株：即套捕型(hooping)捕食线虫性真菌和粘捕型(sticking)捕食线虫性真菌。主要的代表种类有3种。这些捕食线虫性真菌在捕食性结构分生孢子形态及某些生物学特性上有一定差异。套捕型捕食线虫性真菌代表种为少孢节丛孢菌(Arthrobotrys oligospara)和梨形指环菌(Dactylaria pyriformis)，它们以菌环、菌网作为捕食性结构(器官)，以套捕方式杀灭线虫幼虫。梨形指环菌可产生多量厚垣孢子(chlamyalospore)。粘捕型捕食线虫性真菌代表种为纺锤隔指孢菌(Dactylella ellipsospora)。可形成菌结捕食线虫性结构，以粘捕的方式杀灭线虫幼虫。结果表明：捕食线虫性真菌在土壤和家畜粪便中的分离率是40．41％；此类菌适合于生存在阴暗、潮湿、富含腐植质的环境中。在温暖季节时，采用0．4g／L玉米粉琼脂培养基(CMA)易于对其进行分离培养。     

犊牛实验性呼吸道合胞体病毒性肺炎微生物学和免疫荧光的研究

用呼吸道合胞体病毒从鼻腔内或兼用鼻腔内和气管内接种方式接种犊牛。在接种后1—14天屠宰。用免疫荧光法检查接种后2—10天屠宰的犊牛鼻咽粘腠细胞,并查出病毒抗原。用免疫荧光法和病毒分离法查出由上述两种方式接种的犊牛其气管和肺脏受到呼吸道合胞体病毒感染。仅鼻腔内接种的犊牛中则未查出。在肺脏细支气管和肺泡内观察到呼吸道合胞体病毒抗原。在接种犊牛中查出的唯一病毒是呼吸道合胞体病毒。除1头犊牛之外,其余所有接种犊牛其下呼吸道中没有分离出细菌和支原体,接种后5天内,屠宰的犊牛中未查出呼吸道合胞病毒抗体,接种后10—13天期间,屠宰的5头未吃初奶犊牛中有4头有抗呼吸道合胞体病毒抗体。而从母体获得的原育抗体量不能保护犊牛免受感染。从现象看,在接种犊牛中看到的临床症状和病理损害是由呼吸道合胞体病毒感染所引起的。曾认为犊牛呼吸道合胞体病毒感染,与呼吸道疾病流行有关,后者的特点常有严重的临床症状和病理变化。但是,用呼吸道合胞体病毒实验接种犊牛而引起较轻的疾病,下呼吸道仅有轻微病理变化。本报告的宗旨是记述接种一株当地分离到的牛呼吸合胞体病毒所致临床发病,并有广泛肺炎病犊呼吸道的微生物学和免疫荧光所见。其临床症状病理变化观察,在另一篇专文中描述。     

哺乳动物胚胎着床前的基因表达与调控

综述近年来哺乳动物胚胎着床前这一发育阶段基因表达与调控的研究进展，早期胚 育受母源型，即卵母细胞内mRNA和蛋白质的调控，随着母型mRNA的消耗，合子型基因取而代之进行合子型调控；其中合子型基因激活是调控过渡的关键事件。     

合胞体检查在牛白血病病毒检查上的价值

合胞体检查法是检查牛白血病病毒(BLV)感染的一种新方法,对该方法用受感染牛和绵羊的淋巴细胞进行了评价。只有患地方流行性白血病的牛和人工感染白血病病毒的绵羊的淋巴细胞,才能在指示细胞中引起合胞体形成。牛白血病病毒感染牛的淋巴细胞接种数与合胞体形成的数量成正比。用抗牛白血病病毒的血清处理患成年型淋巴肉瘤牛的淋巴细胞可以抑制合胞体的形成。但抗牛合胞体病毒血清和患散发性淋巴肉瘤血清均不能抑制合胞体形成。这些结果表明这种检查对白血病病毒感染的检查是特异的和有效的。     

问号钩体(Leptospira interrogans)Ⅲ型分泌系统相关基因分析

根据鼠疫耶尔森菌Ⅲ型分泌系统和大肠杆菌鞭毛系统中已知蛋白，以NCBI／Blast软件搜索问号钩体全基因组中与之高度同源的蛋白；用TMHMM-2．0对所得蛋白跨膜区进行分析；用Interpro对所得蛋白结构城进行分析，初步整理出问号钩体Ⅲ型分泌系统组成，发现10个被注释为鞭毛系统的相关基因和Ⅲ型分泌系统有关，并和鼠疫耶尔森菌Ⅲ型分泌系统相关蛋白有较高同源性。6个为跨内膜蛋白，4个为胞内蛋白，并共同组成Ⅲ型分泌系统的内膜孔道，但没能发现组成外膜孔道的蛋白组分。问号钩体Ⅲ型分泌系统与鞭毛组装系统共用相同的部分组分，但钩体Ⅲ型分泌系统和经典Ⅲ型分泌系统有一定程度的差别：它缺乏外膜孔道结构，且分泌产物先进入胞周间隙。     

对牛白血病病毒合胞体检出的评价

作为牛白血病病毒检定的一种新方法,合胞体检出是以被感染牛和羊的淋巴细胞来评价的。只有当采用地方流行性白血病牛和BL实验感染羊的淋巴细胞时,始在指示细胞中诱发合体形成。合胞体形成数与BLV—感染牛接种淋巴细胞数显示一种用量的正比反应关系。成熟型淋巴肉瘤牛的胚淋巴细胞用抗BLV血清处理能抑制合胞体形成,然而用牛合胞体病毒的抗血清或用散发性淋巴肉瘤牛血清均不能引起抑制。这些结果表明这种检出方法对BLV感染的检定是特异性的和有用的。关于牛白血病病毒的作用与在数个指示细胞上可形成合胞体已有报导[2,6,7],在其试验体系中,正常牛胚胎细胞和变态细胞被用作指示细胞。已往的研究已经确认合胞体检出(SA)对定量BLV的感染性是一种简易、可靠的技术。了解具有抗BLV抗体的牛是否在它们的淋巴细胞中携带有BLV是很重要的。电子显微镜及合胞体检出揭示了在具有BLV抗体牛的外周血液淋巴细胞培养中病毒复制物已有产生。[4,10] 这篇论文是关于用BLV所感染的牛和羊的淋巴细胞测定SA的进一步评价。     

宠物源大肠杆菌耐药性与整合子关系的研究

为阐明宠物源(犬、猫)大肠杆菌的耐药性及其与细菌携带的整合子的关系,采用CLSI (2010)推荐的纸片扩散法测定分离菌对15种抗生素的体外敏感性,以确定菌株的耐药性特点;采用PCR方法检测分离菌中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型整合酶基因,用HinfⅠ核酸内切酶酶切和DNA序列分析技术确定整合子阳性菌株所携带的耐药基因盒类型;采用SPSS软件分析整合子基因盒系统与菌株多重耐药的相关性.结果显示82株临床分离宠物源大肠杆菌耐药现象严重,对氨苄西林、链霉素、四环素、复方新诺明的耐药率均超过了65％.82株菌中有60株含Ⅰ类整合子,阳性率73.17％,其中有57株(95％)整合酶阳性菌株扩增出可变区,共检测出5种耐药基因盒组合形式:dfrA15、aadA22、dfrA16+aadA2、dfrA17+aadA5、dfrA12+orfF+aadA2,未检出Ⅱ、Ⅲ型整合子.通过SPSS软件分析,Ⅰ型整合子阳性菌株的多重耐药率比阴性菌株的多重耐药率高,二者差异具有统计学意义(P＜0.05),说明整合子与细菌多重耐药的发生有相关性.本试验证明Ⅰ型整合子普遍存在于宠物源大肠杆菌临床菌株中,1型整合子与宠物源大肠杆菌耐药性密切相关,在多重耐药大肠杆菌耐药机制中起重要作用.     

猪源氟喹诺酮耐药大肠杆菌通过接合水平传递耐药性的研究

为研究猪源大肠杆菌中可移动质粒在氟喹诺酮类药物耐药性水平传播机制中的作用,作者对氟喹诺酮耐药且PMQR基因阳性的大肠杆菌进行接合试验,并对所得接合子采用微量肉汤稀释法测定其对8种常见药物的最小抑菌浓度(MIC),针对质粒介导的氟喹诺酮耐药基因(PMQR)设计特异性引物对接合子进行PCR扩增。研究结果显示,41株氟喹诺酮耐药且PMQR基因阳性的供体菌共接合成功16株细菌,接合成功率高达39%,接合子与受体菌J53相比,均呈现一定的耐药表型,与供体菌相比,87.5%的接合子存在耐药谱型的变化,并且存在丢失一种药物耐药性,产生另一种药物耐药性的现象,PCR结果显示,接合子与供体菌相比,基因型有所减少,接合子中qnrS基因接合成功率最高,12.5%的接合子发生oqxA、oqxB和qnrS的共转移。本研究表明不同的PMQR基因在可移动质粒介导耐药性水平传播的过程中接合成功率存在差异,不同的PMQR基因有可能位于不同的可移动质粒上,通过比较接合前后供体菌和受体菌耐药表型的变化,尤其是PMQR基因检出率的变化,可以初步确定,可移动性质粒在大肠杆菌耐药性水平传播的过程中起到了非常重要的作用。     

斯氏艾美耳球虫细胞化学的研究

本文用组织化学技术对斯氏艾美耳球虫内生阶段和子孢子的细胞化学进行了研究。结果发现,多糖存在于第二代裂殖体、大配子体、大配子、合子、未孢子化卵囊和子孢子内。脂肪存在于第二代A型裂殖体、大配子、合子、未孢子化卵囊及子孢子内。整个内生发育阶段的虫体和子孢子均含有蛋白质。两型裂殖体、大、小配子体、合子和子孢子内均有Feugan反应阳性的DNA存在,而RNA存在于整个内生阶段和子孢子中。内生阶段虫体和子孢子均有ACP和SDH,然而ALP只存在于内生阶段,子孢子缺乏。     

复合生物菌对肉仔鸡肉质的影响

复合生物菌是由多种有益微生物混合在一起研制开发出来的一种新型微生态制剂产品。复合生物菌与其他生物菌不同，一是其保存时间长，在常温下可保存1-3年；二是复合生物菌成分复杂，其主要成分有光合细菌、醋酸杆菌、放线菌、酵母菌、乳酸菌、菌根菌等；三是复合生物菌使用方便，可直接添加到饲料或饮水中。     

鸡源大肠杆菌中耐药基因bla_(CTX-M)的水平转移研究

本研究对四川省规模化鸡场分离出的29株产ESBLs的大肠杆菌进行了bla_(CTX-M)耐药基因检测和接合试验,并对供体菌和得到的接合子进行了耐药表型及基因型比较。结果显示:29株产ESBLs的大肠杆菌中均检出bla_(CTX-M)基因,包括7个亚型;29株大肠杆菌中有11株接合成功,接合效率在在10~(-5)～10~(-3)之间;所有接合子均表现出头孢噻肟耐药性,11株接合子中有3株接合子为多重耐药菌;与供体菌相比,100%接合子的耐药谱变窄;所有接合子的bla_(CTX-M)基因型与其供体菌相同。试验表明:规模化鸡场中产ESBLs大肠杆菌中的耐药基因bla_(CTX-M)可通过接合的方式水平传播。     

牛呼吸道合胞体病毒RT-PCR检测方法的建立

根据GenBankTM上发表的牛呼吸道合胞体病毒核衣壳蛋白N基因序列,设计合成了一对特异性引物,扩增大小为596bp的目的片段,通过特异性试验、敏感性试验和重复性试验建立了牛呼吸道合胞体病毒的RT-PCR检测方法。所建立的牛呼吸道合胞体病毒的RT-PCR方法与牛腺病毒、牛副流感病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛无浆体均无交叉反应,该方法的敏感性可达1TCID50。结果表明,该方法具有快速、敏感、特异性强和重复性好等特点,可作为牛呼吸道合胞体病毒检测的一种方法。     

牛呼吸道合胞体病毒RT—PCR检测方法的建立

根据GenBankTM上发表的牛呼吸道合胞体病毒核衣壳蛋白N基因序列,设计合成了一对特异性引物,扩增大小为596bp的目的片段,通过特异性试验、敏感性试验和重复性试验建立了牛呼吸道合胞体病毒的RT—PCR检测方法。所建立的牛呼吸道合胞体病毒的RT—PCR方法与牛腺病毒、牛副流感病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛无浆体均无交叉反应,该方法的敏感性可达1TCID50。结果表明,该方法具有快速、敏感、特异性强和重复性好等特点,可作为牛呼吸道合胞体病毒检测的一种方法。     

动物源大肠杆菌整合子携带氨基糖苷类耐药基因盒的研究

收集540株不同动物源大肠杆菌,采用微量肉汤稀释法检测其对22种药物的耐药性;利用多重PCR方法检测菌株携带3型整合子的情况;采用χ2检验分析1型整合子阳性菌及阴性菌的耐药性;采用PCR—DNA测序法对整合子阳性菌株携带的氨基糖苷类耐药基因盒进行分析。结果显示,540株菌对链霉素等20种药物耐药率超过37％,全部菌株均呈多重耐药;1型整合子检出率为86．48％,未检出2及3型整合子;整合子阳性菌株对头孢唑啉等13种药物耐药率显著高于整合子阴性菌;随机选择的67株1型整合子阳性菌株中,有92．54％菌株携带有编码氨基糖苷核苷转移酶和乙酰转移酶基因（aadA2、aadA5、aadA22、aacA4）,共有5种类型基因盒,其中以介导对甲氧苄啶、链霉素和大观霉素耐药的dfrA17＋aadA5组合最为常见;在2株茵中分别发现介导对阿米卡星、氯霉素及甲氧嘧啶耐药的aacA4＋catB3＋dfrA1组合,和介导链霉素、大观霉素耐药的aadA22基因盒,是在四川分离菌中首次发现这2种基因盒。结果表明,1型整合子广泛存在于大肠杆菌临床菌株中,大肠杆菌耐药性与整合子相关,菌株中广泛携带氨基糖苷类及甲氧苄胺嘧啶耐药基因盒。     

鸽Ⅰ型副粘病毒病HI抗体水平消长规律的研究

对鸽Ⅰ型副粘病毒病的ＨＩ抗体水平动态进行了调查，发现乳鸽母源抗体水平在１０日龄时最高，达４．４ｌｇ２；鸽Ⅰ型副粘病毒病油苗一免后可保持４个月的较高抗体水平；二免后可保持近１年的高抗体水平；三免之后激发的抗体水平只能保持半年的较高水平。由此提出鸽Ⅰ型副粘病毒病的合理免疫程序。     

牛呼吸道合胞体病毒和溶血性巴氏杆菌对羔羊的实验感染一病理学研究

从肺炎病羊中常分离出溶血性巴氏杆菌。与溶血性巴氏杆菌有关的肺炎有两种基本类型:急性型(称为巴氏杆菌病、急性肺脏巴氏杆菌病、急性坏死性肺炎或渗出性肺炎;1963年Git—mour NJL)和非典型(称为非典型肺炎或地方性肺炎;1963年Gitmour NJL,1963年stampJT,1977年ALLeyMR等)。有些学者认为,这两性肺炎在病因上是复杂的。以溶血性巴氏杆菌作气管内或鼻内接种进行疾病的实验复制,未获得一致成功,而且需要大剂量接种物(1963年Gitmor,1964年smthGR,1963年stamp等)。对于溶血性巴氏杆菌在绵羊肺内生长和引起疾病来说,可能需要一种诱因。(1967年Biborstein等)能使绵羊肺脏容易发生溶血性巴氏杆菌感染的传染性因子,包括3型付流感病毒(P1—3)(1971年BiBersteinE L,1977年Da—ViesDE)、腺病毒、呼吸道-肠道病毒衣原体(1967年BibersteinEL等)、支原体(1974年elareJK)和呼吸道合胞体结合反应抗休,则表明绵羊已感染牛呼吸道合胞体病毒。实验中,曾揭示呼吸道合胞体病毒能感染羔羊并引起轻撇的临床呼吸道疾病(1979年CutliPRc等)。病变特点是间质性肺炎、支气管炎、出血和细支气管炎。我们在前一篇报道中叙述了用呼吸道合胞体病毒和溶血性巴氏杆菌实验接种的羔羊的临床症状和微生物学所见(1982年Al一DarrajiAM等)。单一溶血性巴氏杆菌或呼吸合胞体病毒引起少数羔羊轻微的呼吸道疾病和短期发热;但接种这两种病原,则引起了许多羔羊严重的呼吸道在状。精神姜糜发热和卧地。本报告旨在记述这些羔羊的病变,并且补自发性肺脏巴氏杆菌病的病变作比较。     

大蒜素在水产养殖中的应用

大蒜在水产养殖中应用得较早，不少渔民现在还保留着将大蒜捣烂喂鱼或涂摸伤鱼的习惯，这方面累积的数据和进行的研究都很多。实验方面：中国科学院水生生物研究所对大蒜抑菌效果进行了系统的研究，实验用的病源菌包括：①草鱼肠炎病病源菌．肠型斑点单抱菌56-20-9；②赤皮病病源菌，荧光极毛杆菌56—12—10；③烂鳃病病源菌，鱼害粘球G4；④弧菌病病源菌，鳗弧菌E一3—11；⑤鳗鲡爱德华氏病病源菌，福建爱德华菌87-10—1；⑥暴发性传染病病源菌，气单胞43＃，鲁氏耶乐森乐菌Y．R，抑菌试验结果如下：注：“一”表示菌不生长，“＋”表示…     

鸭源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及耐药性分析

为鉴定临床疑似鸭多杀性巴氏杆菌感染肉鸭的病原菌，本试验通过细菌分离培养、菌体形态观察、细菌生化鉴定、16S rRNA基因测序分析、细菌种特异性鉴定、荚膜分型鉴定和动物回归试验进行鉴定，并通过药敏试验和耐药基因检测进行耐药性分析。结果显示，从患病鸭肝脏组织分离到的细菌在鲜血琼脂培养基中呈现表面光滑凸起、灰白色菌落，为革兰氏阴性短小杆菌，瑞氏染色呈两极浓染；生化鉴定结果显示，分离菌能发酵葡萄糖、蔗糖和甘露醇，硫化氢、氧化酶和吲哚等试验阳性；16S rRNA基因序列系统进化树分析显示，该分离菌与多杀性巴氏杆菌聚为一支，同源性 > 99%；细菌种特异性鉴定结果与多杀性巴氏杆菌相符；荚膜分型鉴定结果仅扩增到约为1 050 bp的目的基因片段，与荚膜血清A型相符；动物回归试验显示，该分离菌有较强的致病性；药敏试验结果显示，该分离菌对羧苄西林、氨苄西林、复方新诺明和四环素等12种药物耐药；经耐药基因PCR检测显示，该分离菌携带Sul1、Sul3、tet（X）和Intl1 4种耐药基因，与药敏表型相符。本试验成功分离到1株鸭源荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌，为鸭多杀性巴氏杆菌病的防治提供参考依据。     

家蚕质型多角体病毒多角体形态变异的分析

利用扫描电子显微镜观察了在家蚕幼虫体内传代三次后的家蚕质型多角体病毒的多用体形态，发现有部分畸形多角体，这种畸形多角体主要出现在四角形系列中。畸形多角体有二种类型：嵌合式和缺陷型，前者数量多于后者。