普施特优势降解细菌的筛选与鉴定

从普施特生产厂的污泥和长期施用普施特的土壤中筛选获得了4株能以普施特为唯一碳源生长,且对普施特具有较好降解功能的细菌（降解率均在80％以上）.对其进行形态特征、生理生化及16S rDNA序列分析。结果表明,zx2和zx7为芽孢杆菌属（Bacillus sp．）,zx5是产碱杆菌科（Alcaligenaceae bacterium）菌,zx6是无色杆菌属（Achromobacter sp．）.     

普施特降解菌Bacillus sp. zx2和zx7生长及降解特性

芽孢杆菌zx2和zx7是普施特高效降解菌,研究其生长和降解特性旨在为普施特污染土壤的生物修复提供科学依据.采用瓶培养法,对芽孢杆菌zx2和zx7的生长特性及单菌和复合菌对普施特的降解特性进行了研究.结果表明,zx2和zx7均可在普施特初始浓度≤200 mg· L-1的无机盐培养液中生长良好,zx2在温度25～35℃和pH4.0～7.0时生长良好,而zx7适宜在温度30～35℃和pH5.0～8.0时生长,可见在适应性上二者互补.在最佳条件(温度32℃、pH6.0和普施特初始浓度为200 mg· L-1)下,zx2和zx7在无机盐培养液中对普施特降解动态均符合阻滞动力学,半衰期分别为3.8 d和2.8 d,培养6d时普施特降解率分别为85.81％和90.27％.在培养过程中,zx2的pH是降低的,而zx7的pH基本不变,可初步表明二者降解机理不同;zx2和zx7复合菌(1:1)对普施特降解率比单菌低,为82.70％,这可能是因为zx2或zx7降解普施特的过程中利用了对方产生的降解产物.     

普施特降解菌的筛选及作用效果研究

[目的]筛选出能降解普施特的菌株并确定其降解效果。[方法]采用限制性培养的方法,从长期施用普施特的大豆田土壤中分离得到一株能降解普施特的细菌;采用水培法测定了不同稀释倍数降解菌发酵液与不同浓度普施特组合对萌芽的水稻种子的根长、根鲜重、芽长、芽鲜重的影响。[结果]降解菌降解的普施特最佳浓度为20μg/kg,降解菌被稀释1 000倍时对普施特的降解效果最好。[结论]筛选出的菌株具有降解普施特的潜在应用价值。     

黑龙江省北部地区土著咪唑乙烟酸降解细菌的分离与鉴定

从长期施用咪唑乙烟酸的土壤中筛选获得了3株对咪唑乙烟酸具有较好降解能力的细菌(降解率均在75%以上)。通过形态特征、生理生化鉴定。结果表明:J1为微球菌属(Micrococcussp.),J2、J3为芽孢杆菌属(Bacillussp.)。     

阿特拉津降解菌FM326（Arthrobacter sp.）的分离筛选、鉴定和生物学特性

采集除草剂阿特拉津污染的土壤,通过直接涂布法和富集驯化培养分离法,分别获得6株和5株能够降解阿特拉津的细菌。通过降解效率和降解动态试验,筛选到1株高效降解阿特拉津的菌株FM326,该菌株能以阿特拉津为唯一的碳源和氮源生长,培养96h后对1000mg·L-1阿特拉津降解效率达到97%。通过生理生化鉴定和16SrDNA序列分析,菌株FM326鉴定为节杆菌属(Arthrobacter sp.)细菌。该菌株表现出最适生长温度30～35℃,最适生长pH值5～9,好氧生长的生长特性。     

溶杆菌属细菌鉴定及生防机制概况

溶杆菌属的大部分细菌具有重要的生防前景,因而受到了高度关注。为了明确目前溶杆菌属细菌的研究现状,分析了已报道的26种溶杆菌属细菌的分布环境及典型的生化特征,基于16SrDNA序列相似性和脂肪酸组成构建了26种溶杆菌属细菌的系统进化树,并辅以DNA-DNA杂交结果进行佐证,阐述了溶杆菌属细菌对病原菌、线虫病害的生物防治物质及其作用机理,并对其生物安全和应用前景进行了展望。     

药用植物金银花内生细菌的分离和特性研究

以药用植物金银花为材料,对其根部、茎部、叶片不同部位的内生细菌进行分离纯化,对细胞特征采用革兰氏染色、芽孢染色法进行研究,结合菌落特征和生理生化特性将其内生细菌初步分为第1类型和第2类型两大类.采用稀释涂布法对金银花不同部位分别进行可培养内生细菌计数.结果表明,内生菌的总体数量分布为根部＞叶片＞茎部,说明内生细菌在金银花组织中的分布因部位不同而不同.基于细胞染色特征、显微观察结果和培养特性,内生菌中第1类型符合芽孢杆菌属(Bacillus)的特点,第2类型具有类芽孢杆菌属(Paenibacillus)的特征.     

一株邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯降解菌的筛选鉴定与降解特性

为了进一步研究土壤中主要邻苯二甲酸酯(PAEs)污染物的微生物修复,选择邻苯二甲酸二丁酯(DBP)和邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)作为目标污染物,采用富集驯化法从设施菜地土壤中筛选出一株可同时降解邻苯二甲酸二丁酯(DBP)和邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)的细菌AS001。通过形态、生理生化特征、16S rDNA序列分析,初步鉴定为节杆菌属(Arthrobacter sp.),重点考察了该菌株在不同转速、pH、初始浓度、接菌量和温度条件下对邻苯二甲酸酯的降解特性。结果表明,菌株AS001的最佳降解条件为:转速175 r·min^-1,pH 7.0,初始浓度100 mg·L^-1,接菌量4%,温度35 ℃,且不同条件下菌株对DBP的降解效果高于对DEHP的降解效果。为该区域土壤中PAEs污染修复的环境条件提供一定的理论依据。     

十溴二苯醚降解菌的分离鉴定及其降解特性的初步研究

通过选择性富集法从杭州炼油厂附近长期受石油污染的土壤中分离到1株以十溴二苯醚为唯一碳源、能源生长的细菌BD-24,经形态、生理生化、16S rDNA核苷酸序列分析,以及(G+C)mol%测定,菌株BD-24被鉴定为芽孢杆菌属(Bacillussp.);并用高效液相色谱法测定十溴二苯醚浓度.结果表明:菌株BD-24在含20 mg·L-1十溴二苯醚的无机盐培养基上培养15 d,十溴二苯醚残余率下降至75.1%,到第25天,残余率则为65.6%;不同种类碳源的添加均能不同程度地促进十溴二苯醚的降解,其中麦芽糖作用最为显著,培养5 d后,残余率仅剩83.5%;而不同氮源的添加对降解无显著作用.     

硫丹降解菌的筛选及降解性能研究

从生产硫丹的农药厂的活性污泥中,分离到一株能以硫丹为唯一碳源生长的细菌C7,经鉴定为苍白杆菌属（Ochrobacterum sp．）。构建系统发育树了解C7与其它菌株之间的亲缘关系。用高效液相色谱法对C7的降解性能分析表明,C7在8天内对50mg／L硫丹的降解率达90．2％以上;菌株的培养条件为pH7,温度30℃,接种量25％时测定降解性能最好。     

稻瘟病生防菌对四种作物土传病害病原菌的抑制作用

利用稻瘟病生防菌(短小芽孢杆菌)对4种主要作物土传病害病原菌进行抑菌作用试验。结果表明,此生防菌对4种作物土传病害病原菌具有不同程度的抑制作用,100倍生防菌发酵稀释液对4种土传病原真菌--辣椒枯萎白绢病菌、节瓜枯萎病菌、香蕉枯萎病病菌、粉蕉根腐病菌生长抑菌率在41.18%以下,显著低于对稻瘟病菌生长的抑制率(69.85%);生防菌发酵原液对香蕉枯萎病菌的孢子萌发具有较好的抑制作用,抑制率达到86.67%,显著大于其他处理的抑制作用;但不同倍数的生防菌液对节瓜枯萎病菌的抑制差异不显著,抑制率介于76.34%~84.97%之间。     

菠菜内生细菌SEB的鉴定及拮抗作用

[目的]从菠菜上筛选内生细菌,防治菠菜主要病害。[方法]用稀释分离法从菠菜植株内分离内生细菌,培养基平板对峙法测定内生细菌的拮抗作用,并依据形态特征和生理生化特性,使用B iolog细菌鉴定系统鉴定。[结果]从菠菜植株根分离到具有生防活性的细菌SEB,对菠菜枯萎病菌等5种病原菌有较强的拮抗作用,鉴定为芽孢杆菌属。[结论]SEB菌株对多种病原真菌有拮抗作用,对菠菜枯萎病菌抑制率最高,具有开发成微生物制剂,防治园艺作物和农作物病害枯萎病的价值。     

Multiphasic characterization of a plant growth promoting bacterial strain,Burkholderia sp.7016 and its effect on tomato growth in the field

Aiming at searching for plant growth promoting rhizobacteria(PGPR), a bacterium strain coded as 7016 was isolated from soybean rhizosphere and was characterized in the present study. It was identified as Burkholderia sp. based on 16 S r DNA sequence analysis, as well as phenotypic and biochemical characterizations. This bacterium presented nitrogenase activity, 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid(ACC) deaminase activity and phosphate solubilizing ability; inhibited the growth of Sclerotinia sclerotiorum, Gibberella zeae and Verticillium dahliae; and produced small quantities of indole acetic acid(IAA). In green house experiments, significant increases in shoot height and weight, root length and weight, and stem diameter were observed on tomato plants in 30 d after inoculation with strain 7016. Result of 16 S r DNA PCR-DGGE showed that 7016 survived in the rhizosphere of tomato seedlings. In the field experiments, Burkholderia sp. 7016 enhanced the tomato yield and significantly promoted activities of soil urease, phosphatase, sucrase, and catalase. All these results demonstrated Burkholderia sp. 7016 as a valuable PGPR and a candidate of biofertilizer.     

一株芽孢杆菌的室内抑菌效果

1986年从乌海市土壤中分离到1株细菌,对10种植物病原真菌均有抑制效果。经鉴定属于芽孢杆菌属(Bacillus sp)。室内接种试验表明,对芝麻叶枯病(Alternaria sesami)和黄瓜枯萎病(Fusarium oxysporium f. sp. cucumerinum)均有很好的抗侵染效果。     

咪草烟在不同土壤和水体中的残留动态研究

采用HPLC法研究了咪草烟在不同土壤和不同自然水体中光化学降解动态。研究表明,在高压汞灯照射下,不同土壤中咪草烟的光解半衰期是砂姜黑土<黄潮土<黄褐土<砖红壤<红壤,半衰期分别为45.015、5.01、61.349、9.01和106.63 min;不同水体中咪草烟光解半衰期是湖水<井水<水库水<三蒸水<稻田水,半衰期分别为35.73、43.054、6.521、21.60和150.67 min。说明pH值、有机质及环境中的其他物质等环境条件对咪草烟降解速度有影响。     

节杆菌AD26的分离鉴定及其与假单胞菌ADP对阿特拉津的联合降解

用富集培养法,从农药厂的工业废水中分离到高效降解除草剂阿特拉津的AD26菌株,通过16S rRNA基因序列分析,该菌株被鉴定为节杆菌(A rthrobacter sp.).降解基因的PCR分析表明,AD26含有阿特拉津降解基因trzN和atzBC,它能以阿特拉津为唯一氮源、蔗糖或柠檬酸钠为碳源生长,将阿特拉津降解成氰尿酸,降解速度快但降解不完全.假单胞菌(Pseudomonas sp.)ADP是Waekea实验室分离的阿特拉津降解菌株,含有阿特拉津降解基因atzABCDEF,能以阿特拉津为唯一氮源、柠檬酸钠为碳源(不能以蔗糖为碳源)生长.将阿特拉津降解成NH3,和CO2,降解完全但降解速度慢.在阿特拉津浓度为200 mg·L-1的无机盐培养基中进行的AD26和ADP混合培养表明,它们对阿特拉津的降解发生了互补和增强作用,两个菌株能在以阿特拉津为唯一氮源、蔗糖为碳源的培养基中生长,而且生长和降解速率都好于单个菌株,培养72 h后阿特拉津去除率达到99.9%,其中76.7%的阿特拉津被降解成NH3和CO2.这表明由节杆菌AD26和假单胞菌ADP组成的混合菌株在阿特拉津废水处理和污染土壤的生物修复中有很好的应用潜力.     

华南草菇褐腐病及其病原细菌的初步鉴定

1985年从感染褐腐病的草菇(Volvariella volvacea)子实体中分离出一种病原细菌。经试验测定,此菌能侵入菌丝细胞内抑制草菇菌丝体生长,使之变黄甚至腐烂;子实体感染后黄褐色至黑褐色,然后萎缩腐烂。 根据此菌的形态、培养特征及生理生化反应、血清学试验结果,初步认为应归属于黄单胞菌属(Xanthomonas.sp.)。     

盐田土中中度嗜盐菌Pontibacillus sp. Y32的分离与鉴定

从江苏盐城三圩盐田土样中分离到一株中度嗜盐菌Y32并对其进行了系统鉴定。结果表明,综合该菌形态学、生理学和16S rRNA基因序列等特征,该菌为Pontibacillus属的一个新种,命名为Pon-tibacillus sp.Y32。菌种已送中国典型培养物保藏中心(CCTCC)保藏,保藏号为CCAM 100050。     

三价砷氧化细菌Acidovorax sp.GW2中As(Ⅲ)氧化酶基因和调控序列的克隆鉴定

通过反向PCR和细菌Fosmid文库筛选,克隆得到1株二三价砷[As(Ⅲ)]氧化细菌Acidovorax sp.GW2的As(Ⅲ)氧化酶Aox基因簇,包括aoxRSXABCD 7个基因,分别预测编码双组分信号传导系统转录调控子AoxR(同源性68%),周质感应组氨酸激酶AoxS(同源性55%),周质结合蛋白AoxX(同源性55%),砷氧化酶AoxAB(同源性分别为74%和71%),硝基还原酶AoxC(同源性46%),细胞色素C AoxD(同源性63%).反转录PCR结果显示,编码双组分系统的aoxRS基因共转录,而与之转录方向相反的结构基因aoxABCD处于同一操纵子中,aoxX基因和aoxRS基因不在同一操纵子中.通过对aoxS、aoxX、aoxD的基因敲除功能研究发现aoxS和aoxX基因为GW2三价砷氧化的必需基因,aoxD的功能丧失减慢了三价砷的氧化速率,但非关键基因.