有机添加物对卡特兰组织培养的影响

以卡特兰（Cattleya labiata）品种MC1原球茎（protocorm-like-body,PLB）为外植体,接种到添加不同浓度（10%、15%、20%）的六种有机添加物（椰乳、椰汁、香蕉泥、马铃薯、水解酪蛋白、苹果汁）的改良VW + 5.0 mg?L-1 6-BA + 0.5 mg?L-1 NAA + 20 g?L-1蔗糖 + 16 g?L-1琼脂的培养基上。结果表明：六种有机添加物对PLB增殖的促进作用由大到小依次为椰乳、马铃薯、椰汁、香蕉泥、苹果汁、水解酪蛋白。15%的椰乳对PLB增殖效果最佳,PLB的增殖率最高,而且PLB的分化率最低。材料的年龄对PLB的增殖也有影响作用,年龄越小,增殖率越高,分化率越低。     

基本培养基及附加物对蝴蝶兰原球茎增殖效果的影响

以白色花系蝴蝶兰(Phalaenopsis)的原球茎为外植体进行培养,比较不同基本培养基(1/3 MS,1/2 MS,MS,改良VW),有机添加物(椰乳,香蕉,马铃薯,苹果)和植物激素(BA,NAA)等因子对影响蝴蝶兰原球茎(Protocorm-like body,简称PLB)增殖效果进行了研究.结果表明:以改良VW为基本培养基对促进PLB增殖的效果优于MS基本培养基,在MS为基本培养时,削减大量元素的用量即降低无机盐的浓度有利于PLB的增殖.使用有机添加物对PLB增殖有影响,其中以椰乳增殖效果最好,其次为马铃薯、香蕉,苹果对PLB的增殖没有促进作用.BA及NAA的使用浓度决定PLB继续增殖或分化的方向以及进行的速度.     

白花兜兰的无菌播种和离体快速繁殖

为建立白花兜兰(Paphiopedilum emersonii)组织培养和离体快速繁殖体系,以授粉结果为180 d未开裂的白花兜兰种子为基础材料,研究不同的添加剂对无菌萌发、原球茎分化及其根诱导的影响,筛选出适宜白花兜兰生长增殖的培养基和原球茎诱导与增殖的培养基,以及炼苗时间和栽培基质。结果表明:诱导白花兜兰种子萌发的最佳培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L+100 mL/L椰乳;原球茎的诱导和增殖最佳的培养基为1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+100 mL/L椰乳,有机添加物椰乳对种子的萌发和原球茎的诱导与分化均有较好的促进作用。1/2 MS+NAA 0.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L+1.0 g/L活性炭对白花兜兰根的诱导效果最为理想;炼苗最佳时间为7 d,栽培适宜基质的配比为树皮∶珍珠岩∶腐殖土(1∶1∶1),移栽成活率达76%。     

三倍体毛白杨快繁技术研究

以4份三倍体毛白杨无性系为供试材料,比较了培养基中激素种类及浓度、大量元素浓度以及有机添加物香蕉、椰汁和马铃薯对三倍体毛白杨快速繁殖中繁殖系数及玻璃苗频率的影响,结果表明：培养基中2/3大量元素含量能降低玻璃苗频率;添加0.5mg/L 6-BA和0.01mg/L NAA 获得较高的繁殖系数;添加15%的椰汁能提高繁殖系数并降低玻璃苗频率;不同无性系之间的繁殖系数和玻璃化频率无明显差异。     

不同倍性蝴蝶兰杂交种子的离体培养

研究了影响不同倍性蝴蝶兰杂交种子离体培养的因素.结果表明,播种方式、培养基、光照时间、温度和杂交组合明显影响蝴蝶兰原球茎产量.播种方式、培养基和温度对蝴蝶兰原球茎百粒重影响显著.有机添加物对蝴蝶兰试管苗生长发育影响显著.适合不同倍性蝴蝶兰杂交种子的培养方案是采用稀释法将蝴蝶兰种子播种到1/2 MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.2 mg/L+CM 100 ml/L培养基上,在27℃下培养;播种后15天内每天光照5 h,15天后光照16 h,光强为20.27～13.51μmol/(m2-s);60天后将小苗转移到1/2MS+NAA0.2mg/L+土豆汁30g/L+AC0.5 g/L上壮苗,180天后炼苗移栽.     

基于再生不定芽的蝴蝶兰继代扩繁体系建立

为降低蝴蝶兰通过再生原球茎途径频繁继代培养可能出现的变异及玻璃化风险、减轻继代培养中的褐化,以蝴蝶兰花梗茎段再生的营养芽为试验材料,进行基于再生不定芽的继代扩繁及抗褐化研究。结果显示,以5节花梗的中间腋芽茎段为材料,在VW+ 6-BA 5 mg/L+ NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L培养基上进行启动培养,能获得最高的营养芽诱导率。继代培养中,TDZ促进再生不定芽的效果比6-BA强。茎芽经过“切叶”处理,在培养基VW+ TDZ 1 mg/L+300 mg/L柠檬酸+10 g/L蔗糖+15%椰汁,或培养基VW+ 6-BA 5 mg/L+ NAA 0.1 mg/L+ 300 mg/L柠檬酸+10 g/L蔗糖+15%椰汁上进行继代培养,能获得最佳的继代扩繁效果。笔者研究认为初步建立了基于再生不定芽的蝴蝶兰继代扩繁体系。     

蝴蝶兰无菌播种组培快繁技术研究

通过配制含不同激素水平及添加物的培养基对纳博纳交樱桃番茄和纳博纳交矩宝橘子2种新杂交品种蝴蝶兰种子和原球茎进行阶段性培养，探究不同6-BA水平对于诱导新杂交品种蝴蝶兰种子形成原球茎的影响，6-BA、NAA水平以及香蕉汁、椰子水与土豆对于原球茎芽分化的影响。结果显示，蝴蝶兰无菌播种的最适NAA浓度为3.0 mg/L；芽诱导最适NAA浓度为3.0 mg/L，最适6-BA浓度为0.25 mg/L，最适添加物为椰子水。     

鼓槌石斛组织培养及快繁技术研究

以鼓槌石斛成熟果实中的种子为外植体,研究了鼓槌石斛无菌苗增殖,壮苗生根的最佳培养基配方,并对无菌苗增殖培养条件进行了优化。研究结果表明：可通过种子直接形成无菌苗、再经无菌苗增殖、壮苗生根的途径,生成完整植株,实现鼓槌石斛种苗的规模化生产;并筛选出适宜的培养基：无菌苗增殖培养基为MS+0.5mg/LNAA+2.0mg/LBA+50g/L香蕉泥,增殖系数高达4.7,且长势良好、芽苗健壮;壮苗生根培养基为1/2MS+0.3mg/LNAA,生根苗根系长而粗壮,叶色浓绿。无菌苗增殖的优化条件：白糖浓度为30g/L,有机添加物为香蕉泥,丛植芽数量为5株/丛时增殖系数最高,幼苗长势最好。     

药用植物白及组培苗瓶内复壮研究

对白及(Bletilla striata)试管苗进行复壮研究,以期解决其羸弱纤细、不利于生根培养及生根后成活率低等问题,同时优化复壮培养条件。在课题组已有的白及增殖及生根培养基配方中,分别添加不同质量浓度植物生长延缓剂多效唑(PP₃₃₃)和矮壮素(CCC)并改变培养基碳源浓度,以不同继代试管苗为材料,通过单因素和L₉(3⁴)正交实验研究不同材料和不同植物生长延缓剂种类及其质量浓度对试管苗复壮、繁殖生长、生根培养及驯化移栽的影响。实验表明,4代苗在MS+活性炭1.0 g/L+香蕉泥50 g/L+ 6-BA 0.5 mg/L+ NAA 0.01 mg/L+ PP₃₃₃ 0.5 mg/L+CCC 0.1 mg/L+蔗糖40 g/L中获得最佳的复壮效果,培养70天后,试管苗基茎直径平均达(0.26±0.06) cm,繁殖系数2.13,假鳞茎发生率100%;复壮后的试管苗在1/2MS+活性炭1.0 g/L+香蕉泥80 g/L+ 6-BA 0.1 mg/L+ NAA 1.0 mg/L+蔗糖15 g/L中培养60天后,可获得具假鳞茎、根粗苗壮的再生植株,生根率100%;再生苗移栽成活率亦达100%。本研究完善了白及体外快繁及复壮条件,建立了高效的植株再生体系。     

大花蕙兰与春剑杂交原球茎增殖及分化研究

【研究目的】对大花蕙兰品种‘绿宝石’与春剑杂交原球茎增殖与分化进行研究。【方法】设置不同培养基、6-BA 和 NAA以及不同添加物对杂交兰原球茎增殖分化的进行探讨。【结果】KC培养基为最佳培养基;6-BA对原球茎的增殖影响不大, NAA对增殖影响较明显当浓度为0.2mg/L原球茎增殖效果最好;KC+6-BA2.0 mg/L+ NAA 0.5 mg/L对原球茎的分化效果最好;【结论】在培养基中加15mL/L香蕉汁最有利于杂交兰原球茎的增殖。     

象脚丝兰试管苗生根培养的研究

摘要：本试验采用正交法研究了4种不同因素即：MS、NAA、IBA和AC对象脚丝兰试管苗生根的影响。结果表明：MS、IBA是影响象脚丝兰生根的主要因素;象脚丝兰生根培养最适的培养基配方为：1/4MS + NAA 0.8mg/L + IBA 2.0mg/L +AC 3.0g/L。     

‘三白’石榴再生体系的构建

为建立适用于遗传转化和育种研究的‘三白’石榴再生体系,以带芽茎段为外植体进行组织培养研究。结果表明,最佳初代培养基为MS+BA 2.0 mg/L+ IBA 0.2 mg/L+ PVP 2 g/L,成芽率达83.1%,成芽个数为4.9;最佳增殖培养基为B5+ BA 0.8 mg/L+ IBA 0.5 mg/L+ AgNO3 0.2 mg/L+ GA3 0.2 mg/L+椰汁100 ml/L+PVP 2 g/L,增殖系数达5.6;最佳生根培养基为B5+ IBA 1.0 mg/L+椰汁100 ml/L,生根率达95.6%,移栽成活率达87.3%,由此建立了‘三白’石榴的再生体系。     

外源激素对蝴蝶兰双梗率及花梗发育的影响

为了研究6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)以及赤霉素(GA3)不同浓度配比对不同品种蝴蝶兰双梗率以及花梗发育的影响,以‘金桔’(Phalaenopsis‘SurfSong’)、‘富乐夕阳’(Phalaenopsis ‘Fullers sunset’)及‘双霞'Phalaenopsis ‘ShuangXia’)3种不同花色的蝴蝶兰品种为试材,筛选出蝴蝶兰双梗率最高的激素种类和浓度。主要结论如下:(1)不同浓度的6-BA均明显提高了3个品种蝴蝶兰的双梗率,其中‘金桔’和‘双霞’的最适浓度为100mg/L,而‘富乐夕阳’的最适浓度为200mg/L,较对照组双梗率分别提高1.68%、114.3%、154.7%;(2)GA3对蝴蝶兰双梗率无明显影响或有一定的抑制作用,但可有效的加快植株花梗的生长发育,3个品种蝴蝶兰的花梗平均长度均在GA3浓度为100mg/L的条件下达到最高。但在GA3条件下会出现畸变的现象,且畸形率随着GA3浓度的增加而提高。本研究为提高不同品种的蝴蝶兰双梗率提供一定的理论依据。     

4个优良石榴品种叶片高频再生体系的建立

为提高石榴叶片再生率,增加再生芽数量及缩短再生周期,以‘泰山红’‘、泰山三白甜’‘、皮亚曼’‘、牡丹’4个石榴品种盆栽苗和无菌苗叶片为试材,研究培养基类型、生长调节剂配比、叶片来源和培养步骤对不定芽再生的影响。结果表明：MS是叶片再生最适培养基类型;无菌苗叶片比盆栽苗叶片更易再生不定芽;BA3.0mg/L+KT1.0mg/L+IBA0.3mg/L是叶片愈伤组织诱导、分化和不定芽形成过程中生长调节剂最佳配比;先在液体培养基上培养3~5天,再转至固体培养基比仅在固体培养基上效果更好,叶片再生率最高达98.47%,出芽数达7.51个。叶片不定芽的最佳单芽培养基和增殖培养基分别为B5+BA0.6mg/L+IBA0.5mg/L+椰汁100mL/L+PVP2.0g/L+GA31.0mg/L和B5+BA0.8mg/L+IBA0.5mg/L+椰汁100mL/L+PVP2.0g/L,增殖系数为5.56。适宜的生根培养基为B5+IBA1.0mg/L+椰汁100mL/L,生根率为89.63%。由此建立了石榴叶片高频再生体系。     

油菜不同类型外植体组织培养及再生研究

为建立高效的组织培养体系，以甘蓝型油菜杂交品种恢复系627R、621R和616R材料田间种植植株的侧芽、花托和无菌种子实生苗下胚轴为外植体，探索不同苗龄、预培养时间、预培养基、愈伤分化培养基、诱导出芽培养基以及成苗壮苗培养基中激素配比对芽再生、成苗植株生长势的影响。结果表明：无菌苗快速繁殖体系中，发芽6 天的无菌苗下胚轴或者子叶在预培养（MS+ 2.0 mg/L 2,4-D+ 1.0 mg/L 6-BA+ 30 g/L 蔗糖+ 8 g/L 琼脂，pH 5.85）3 天后转移到分化培养基MS+ 3 mg/L 6-BA+ 1.0 mg/L NAA+5 mg/L AgNO3+ 30 g/L 蔗糖+8 g/L 琼脂(pH 5.85)，或者MS+ 3 mg/L 6-BA+ 1.0 mg/L IAA+ 5 mg/LAgNO3+ 30 g/L 蔗糖+8 g/L 琼脂(pH 5.85)生长，可以获得较高的芽再生频率，对于田间生长到抽薹开花期植株取样的外植体，腋芽的出芽频率高于花托培养的出芽频率，但是这2 类外植体在分化培养基（MS+ 10 mg/L 6-BA+ 1 mg/L NAA+ 30 g/L 蔗糖+8 g/L 琼脂，pH 5.85）生长30 天后都有成苗的潜力，上 述外植体经过组织培养出芽后转移到添加矮壮素的培养基（MS+15 mg/L CCC+15~20 g/L 蔗糖+8 g/L 琼脂，pH 5.85）上继续生长30 天，能够得到根系发达、生长势强的植株。甘蓝型油菜优良恢复系建立的组织培养体系能够快速获得生长势优的油菜植株，加速油菜良种的繁殖与评价。     

中国柽柳组培快繁技术研究

为更好地对中国柽柳种质进行保存,以中国柽柳茎段为外植体进行组培快繁研究。结果表明：采取75%酒精浸泡30 s、2%次氯酸钠浸泡3~5 min和升汞浸泡5 min为最适宜的灭菌方案。MS+蔗糖20 g/L+琼脂6.5 g/L为中国柽柳最适初代培养基,MS+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L为其最适增殖培养基,1/2MS培养基为最适生根培养基。     

铁线莲‘Polish Spirit’组培快繁体系的建立

本研究以铁线莲波兰精神(Clematis viticella‘Polish Spirit’)为实验材料,以带芽茎段为外植体,利用正交试验,完成‘Polish Spirit’初代培养消毒方式筛选并对其叶片、叶柄和无芽茎段进行愈伤组织诱导研究。通过研究不同外植体、不同消毒方式、不同激素种类和浓度配比对腋芽诱导、增殖培养及不定根诱导的影响,建立了铁线莲波兰精神的组培快繁体系。实验结果表明最佳的外植体为带芽茎段,最好的消毒方法是2%洗衣粉溶液浸泡10 min流水冲洗1 h,75%的酒精消毒20 s,0.1%HgCl2消毒6 min。诱导腋芽的最佳培养基为1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+0.05 mg/L NAA+1.5%蔗糖,pH值为5.8,增殖培养基添加椰汁150 m L/L可有效提高丛生芽诱导率,添加20 mL/L香蕉泥可有效壮苗,生根最适诱导培养基为1/2MS+0.02 mg/L NAA,生根率为85%,组培苗移栽成活率达90%以上。本研究结果为铁线莲优良品种‘Polish Spirit’快速扩繁提供了理论基础。     

3个铁线莲品种组培快繁体系的建立

本试验以铁线莲‘卡西斯’(Clematis Cassis)、‘大河’(Clematis Taiga)、‘倾盆大雨’(Clematis Cloudburst)为外植体,研究在3、4月外植体的消毒最佳时长时间,结果表明,3、4月中,‘卡西斯’的最佳消毒时长分别是3 min和4 min,‘大河’的最佳消毒时间均为4 min,‘倾盆大雨’的最佳消毒时长分别为3 min和4 min;以‘卡西斯’、‘大河’、‘倾盆大雨’带芽茎段为外植体,以3种激素不同浓度配比实验,筛选出3个铁线莲品种增殖继代培养的最佳配方分别为:‘卡西斯’:1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA+0.1 mg/L VC+20 g香蕉;‘大河’为:1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+0.1 mg/L NAA+0.1 mg/LVC+20 g香蕉;‘倾盆大雨’为:1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L KT+0.01 mg/L NAA+0.1 mg/L VC+20 g香蕉。2 mg/L的NAA可以显著提高生根率,但即使不进行生根诱导,培养时间超过30 d后各品种也会相继出现生根现象。