链霉菌TD-1对番茄灰霉病菌的抑制及防御酶活性的影响

采用体外抑菌活性和盆栽试验测定方法,研究了白黄链霉菌TD-1发酵液对番茄灰霉病菌的抑制效果及植株体内防御酶活性的影响,旨在为番茄灰霉病的生物防治提供参考。结果表明:TD-1菌株发酵液对灰霉病菌的菌丝生长和孢子萌发抑制率分别为98.1%和98.3%;TD-1发酵液在番茄植株上对灰霉病的防治效果为76.98%。喷洒TD-1发酵液24 h后接种灰霉菌孢子悬浮液,番茄叶片中苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)的活力均有所提高,分别在处理后第4,3,2,3天达到最高。     

利迪链霉菌A02诱导番茄抗灰霉病作用机制研究——对植株防御酶系的影响

利用利迪链霉菌生防菌株A02发酵液和番茄灰霉病菌对番茄植株进行诱导和接种处理,利用分光光度法测定处理前和处理后1~5 d番茄叶片组织的主要防御酶系——苯丙氨酸解氨酶、过氧化物酶、过氧化氢酶和多酚氧化酶的活性变化。试验结果显示,不接种灰霉病菌而单独诱导处理、接种灰霉病菌后诱导处理和诱导处理后接种灰霉病菌这3种处理都能提高番茄植株各防御酶系的活性,后者酶活性峰值最高,对番茄植株灰霉病的抑制作用也最明显,控制效果达94.92%。     

土壤放线菌K2的筛选、鉴定及其抑菌活性初探

筛选具有抑制植物病原菌活性的放线菌是农用抗生素开发的基础。通过平板对峙法筛选出8株拮抗放线菌菌株,采用生长速率法测定获得一株对植物病原菌有较好抑菌作用的菌株K2,并采用抑制菌丝生长速率法对其抑菌谱进行研究,以及进行菌种鉴定。生长速率法试验表明,放线菌菌株K2发酵液对10种供试植物病原菌菌丝生长均有不同程度的抑制作用,其中以对尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)抑制效果最好,抑菌率可达57.38%。根据形态学特征、生理生化特征和基于16S rDNA序列比对,鉴定菌株K2属于链霉菌属(Streptomyces)的一个菌株。放线菌K2的代谢产物具有较广的抑菌谱,对植物病原菌的防治有很大的研究开发潜力。     

洛阳市番茄灰霉病菌对嘧霉胺的抗药性检测

为了明确洛阳市番茄灰霉病菌对苯胺基嘧啶类杀菌剂嘧霉胺的抗药性状况,2012—2013年从洛阳市不同保护地中采集番茄灰霉病病果或病叶,经单孢分离共获得番茄灰霉病菌54株。采用菌丝生长速率法测定了其对嘧霉胺的敏感性。结果显示,高抗菌株9株（16.67%）,中抗菌株19株（35.19%）,低抗菌株10株（18.52%）,敏感菌株16株（29.63%）。比较抗性水平不同菌株间的菌丝生长情况,发现菌丝生长速度和抗性水平无相关性。研究表明,洛阳市番茄灰霉病菌已对嘧霉胺产生不同水平的抗药性,且以中抗菌株为主,生产上应合理更换或轮换使用与嘧霉胺无交互抗性的药剂防治番茄灰霉病。     

番茄灰霉病菌对几种杀菌剂的敏感性测定

摘 要： 【研究目的】通过研究本地区的番茄灰霉病菌对几种常用药剂的敏感性,筛选出防治效果较好的药剂。【方法】采用菌丝生长速率法和孢子萌发法,测定了两株番茄灰霉病菌对6种杀菌剂的敏感性。【结果】在六种药剂中,乙霉威对两株番茄灰霉病菌的抑制效果最好,多菌灵对番茄灰霉病菌抑制效果最差,两菌株均对多菌灵产生高水平抗性;菌株SY和WS对扑海因分别表现为中抗和高抗;菌株WS对甲基托布津已产生了高水平抗性;腐霉利对灰霉菌孢子的萌发抑制效果明显,而嘧霉胺对抑制菌丝生长的效果明显。【结论】乙霉威在防治番茄灰霉病时可作为首选药剂,生产中应减少甲基托布津和多菌灵的使用次数和剂量并避免单剂使用。     

内生枯草芽孢杆菌Thhy1的促生与定殖力研究

采用种子萌发及盆栽试验测定菌株Thhy1对番茄的促生长作用。结果表明：菌株培养液浓度在40%以下对番茄种子萌发具有强的促生作用,大于40%时对番茄种子萌发具有抑制作用;菌株培养液比菌株胞外分泌物对种子的萌发促生作用好;菌株Thhy1培养液对幼苗平均鲜重和干重增长率均达到120%以上;对幼苗的平均株高增长62.01%;对幼苗的平均根长增长率为44.14%;对幼苗的平均茎粗增长率为50.00%。以抗利福平（300 μg/mL）的拮抗病原菌双抗性为标准,测定菌株Thhy1的内生及定殖性。采用浸种和叶片涂抹两种方法,结果证明菌株Thhy1能在番茄体内定殖,其中叶片涂抹法在植株体内的定殖量较浸种处理多。     

番茄灰霉病拮抗细菌的筛选

采集番茄土壤、根、叶片和花样本共96份,经平板法和叶盘法两步分离,获得对番茄灰霉病菌（Botrytis cinerea Pers.）有抑制作用的拮抗细菌12株。根据抑菌圈法测定,拮抗细菌对灰霉菌的拮抗能力有显著差异,其中B21菌株抑菌圈直径达35mm,拮抗性最强最稳定。温室试验表明：B21悬浮液和10倍稀释液对番茄灰霉病有较好的防治效果,室内叶片的防效分别为98.68%和98.03%,无显著差异,明显优于45%多菌灵（500倍稀释液）。     

番茄内生细菌种群动态分析及拮抗菌株的筛选

摘要：采用研磨组织稀释分离法对3个种植地区的番茄内生细菌的种群分布、数量变化规律进行了初步探讨。共分离、纯化得到内生细菌374株,经形态及理化特征鉴定,分属10个不同的属,13个种。其中假单孢菌属Pseudomonas sp.,黄单孢菌属Xanthomonas sp.;肠杆菌属Entenobacter sp.和芽孢杆菌属Bacillus sp.为优势种群。内生细菌在番茄植株种群数量从0.21x104 到13.82x104 cfu.g -1鲜重之间,但不同品种、组织、生育期及种植地,内生细菌的种群和数量各不相同,各组织中内生细菌的种群及数量根中最多,其次是茎和叶,成株期内生细菌无论种类和数量都明显高于苗期。采用平板对峙法从分离的内生细菌中筛选出对番茄灰霉病菌具有体外拮抗活性的菌株32个,占菌株总数的8.56%; 25个菌株对叶霉病菌有抑制作用,占菌株总数的6.68%;对灰霉病菌和叶霉病菌都具有拮抗作用的菌株20个,占菌株总数的5.35%。对灰霉病菌有强拮抗作用的菌株12个,对叶霉病菌有强拮抗作用的菌株仅1个,其中芽孢杆菌是主要的类群。     

海洋放线菌BM-2菌株对黄瓜的促生作用和诱导抗性研究

海洋放线菌BM-2菌株发酵液浸泡黄瓜种子后采用盆栽试验法,测定对黄瓜幼苗根长、须根数的影响,检测黄瓜根部的苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)和超氧化物歧化酶(SOD)等4种防御酶的酶活性变化。结果表明:BM-2菌株发酵液浸泡黄瓜种子可促进黄瓜须根的增加和根伸长;浸种处理后黄瓜幼苗根部PAL、POD、PPO和SOD4种酶活性明显高于对照,且4种酶活性高峰时期不同,表明BM-2菌株发酵液浸泡种子能够明显诱导黄瓜对枯萎病的抗性。     

放线菌菌株97发酵液中活性代谢产物的抑菌作用及稳定性测定

本实验室从采自山东临沂和日照的烟田土样中分离得到一株对烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica var. nicotianae)具有拮抗作用的放线菌菌株97,为了明确该生防菌的抑菌作用和抑菌因子的理化性质,采用菌丝生长速率法,对菌株97发酵液中活性代谢产物的抑菌作用及稳定性进行了研究。结果表明,发酵液中活性代谢产物对多种植物病原真菌均表现较好的抑制作用。此外,发酵液中活性代谢产物在低温贮藏下仍有很好的抑菌效果,在偏酸性或中性条件下稳定,有较强的热稳定性和抗紫外线照射能力,对蛋白酶K稳定性较好。     

番茄根内生芽孢杆菌的多样性和系统发育研究

旨在了解番茄根内生芽孢杆菌(Bacillus spp.)的分布和物种多样性。采用纯培养的方法从11 种不同的番茄栽培品种中分离纯化根内生芽孢杆菌,并通过16S rRNA基因序列的扩增、测序和分析进行分子鉴定及系统发育分析。从11 个样品中分离出芽孢杆菌65 株,分别鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus)和短芽孢杆菌属(Brevibacterium)的18 个种。不同的番茄栽培品种分离的根内生芽孢杆菌的种类存在差异。系统发育分析表明分离的内生芽孢杆菌聚为几个小簇和不同种群,但是来源于不同番茄品种的同一种属的芽孢杆菌菌株的16S rRNA基因序列聚为同一分支,并且没有明显的差异。研究表明不同番茄栽培品种的根内生芽孢杆菌存在广泛的物种和分布多样性。     

棉花根部拮抗枯萎病菌或黄萎病菌的可培养内生细菌多样性分析

为解析棉花内生细菌的种群结构,更好地开发利用生防内生细菌,以棉花枯萎病菌、黄萎病菌为指示病原真菌,对常抗棉和泗棉3号根部分离获得的内生细菌进行拮抗活性筛选,获得87株至少对其中1个指示病原真菌具有拮抗作用的内生细菌。ARDRA分析(Amplified ribosomal DNA restriction analysis)和16S r DNA序列测定表明棉花根部可培养内生拮抗细菌可分为13个ARDRA类群,分属于芽孢杆菌属(Bacillus)、短芽孢杆菌属(Brevibacillus)、伯克霍尔德氏菌属(Burkholderia)、农杆菌属(Agrobacterium)、中华根瘤菌属(Sinorhizobium)、不动杆菌属(Acinetobacter)和假单孢菌属(Pseudomonas)7个属。其中常抗棉根部内生拮抗细菌分属于芽孢杆菌属、短芽孢杆菌属、伯克霍尔德氏菌属和农杆菌属,而泗棉3号根部内生拮抗细菌则分属于芽孢杆菌属、伯克霍尔德氏菌属、中华根瘤菌属、不动杆菌属和假单孢菌属,二者的优势种群都是芽孢杆菌属细菌。BOX-PCR分析显示这些内生拮抗细菌具有丰富的遗传多样性。通过测定这些内生拮抗细菌对棉花黄萎病菌和棉花枯萎病菌的拮抗力大小,以及是否具有产纤维素酶、几丁质酶、蛋白酶和嗜铁素的活性,表明这些内生拮抗细菌具有不同的生防作用机制。     

内生枯草芽孢杆菌Thhyl的促生与定殖力研究

采用种子萌发及盆栽试验测定菌株Thhyl对番茄的促生长作用。结果表明：菌株培养液浓度在40％以下对番茄种子萌发具有强的促生作用,大于40％时对番茄种子萌发具有抑制作用;菌株培养液比菌株胞外分泌物对种子的萌发促生作用好;菌株Thhyl培养液对幼苗平均鲜重和干重增长率均达到120％以上;对幼苗的平均株高增长62．01％;对幼苗的平均根长增长率为44．14％;对幼苗的平均茎粗增长率为50．00％。以抗利福平（300μg／mL）的拮抗病原茵双抗性为标准,测定菌株Thhyl的内生及定殖性。采用浸种和叶片涂抹2种方法,结果证明菌株Thhyl能在番茄体内定殖,其中叶片涂抹法在植株体内的定殖量较浸种处理多。     

不同土壤添加剂对番茄苗期土壤根际微生物数量的影响

将8种物质苜蓿汁、韭菜汁、木醋液、白菜汁、萝卜汁、葱汁、草木灰和蘑菇汁分别与有机肥以1：7的比例混合,制成土壤添加剂,然后再将配好的不同土壤添加剂分别按1：30的比例加入到土壤中,混合均匀,种植上番茄,设有机肥处理作为对照,待番茄苗出土后,每隔7d测定一次番茄土壤根际微生物数量（主要测定土壤细菌,土壤真菌和土壤放线菌的数量）。测定结果表明,在整个测定期间,与有机肥对照相比,苜蓿汁与有机肥、韭菜汁与有机肥和木醋液与有机肥配制的土壤添加剂对土壤中微生物数量都有增加趋势。木醋液与有机肥配制的土壤添加剂在加入土壤15d,土壤细菌、土壤放线菌和土壤真菌数量就增加到最大,分别为1131.94%、191.67%和348.19%。     

生防菌A4的鉴定及其对樱桃番茄采后主要病害的抑制作用

依据形态学、分子生物学以及菌株的生理生化特征对菌株A4进行鉴定,并研究其对樱桃番茄采后病害的防治效果。结果表明：菌株A4为生防菌贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）,其对樱桃番茄采后的重要致病菌灰霉菌（Botrytis cinerea）和扩展青霉菌（Penicillium expansum）均有抑制作用;平板对峙试验表明,贝莱斯芽孢杆菌A4对上述2种病原菌生长的抑制率分别高达66.56%和59.19%,预先接种浓度为1.0×109 CFU/mL A4菌悬液的樱桃番茄患病率分别降至14.67%和4.00%;扫描电镜显示,生防菌A4通过抑制病原菌的萌发和生长,降低病原菌的致病能力,减少病害的发生。本研究为生防菌贝莱斯芽孢杆菌的鉴定提供了参考,并为提高樱桃番茄采后病害的防治技术提供了新思路。     

玉米大斑病生防菌的筛选、鉴定及应用研究

为了从生物途径探索有效控制大斑病在玉米生产带来的危害,本试验以玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)为目标菌株,采用对峙法和盆栽接种试验获取生防菌,并测定其盆栽防治效果.结果表明:从128株玉米内生细菌获得1株对玉米大斑病菌拮抗效果最佳的菌株,最长半径与最短半径比值为2.9.从玉米内部分离到的内生生防...     

植物内生真菌次生代谢产物研究进展

综述了近5年来对植物内生真菌次生代谢产物的研究进展,对内生真菌次生代谢产物在抑菌、杀虫、抗肿瘤活性、对植物生长调节作用及其他活性等方面进行了概述,并就其研究中存在的问题和今后可能的研究方向做了一些探讨。     

甜叶菊斑枯病生物防治拮抗菌株的筛选

从甜叶菊根部土壤中分离到放线菌A01和A64两个菌株,生长繁殖速度快,抗污染能力强,抑菌效果好,为高效拮抗菌株。两个拮抗菌株的拮抗活性能稳定遗传。初步鉴定两菌株为链霉菌属(Streptomyces Waksman and Henrici),A01为黄色类群的一个种,A64为蓝色类群的一个种,种名未定。喷施抗生菌剂,可有效降低斑枯病病情指数,平均防效为56.3%。A01和A64混合构成的抗生菌剂防治效果明显好于两个菌剂单用,差异达到显著水平。抗生菌剂可显著提高甜叶菊叶片产量,平均增产18.7%,尤其在连作小区,增产效果更为明显。