尼罗罗非鱼不同生长阶段的趋光性研究

采用水平光梯度法,以白光为光源,尼罗罗非鱼为研究对象,研究了5组不同生长阶段尼罗罗非鱼：Ⅰ30.0~45.2mm;Ⅱ51.0~63.3mm;Ⅲ70.0~83.0mm;Ⅳ88.0~102.0mm;Ⅴ108.0~120.0mm,在光梯度分别为250lux、500lux、1000lux、2000lux、4000lux、8000lux下的趋光行为。结果表明：在光强范围250～1000lux条件下,5组尼罗罗非鱼的趋光指数均随着光强的增强而增大,并在光照强度为1000lux时达到最大;在250lux和500lux两个梯度之间趋光指数差异性不显著（P>0.05）,但250lux与1000 lux两个梯度之间趋光指数差异性极显著（P<0.01）;当光强大于1000lux时,尼罗罗非鱼的趋光指数随着光强的增强而减小,在2000lux和4000lux两个梯度之间,趋光指数无明显差异（P>0.05）,而2000lux与8000lux两个梯度之间趋光指数存在极显著差异（P<0.01)。本实验条件下,Ⅰ组尼罗罗非鱼趋光反应最明显,随着尼罗罗非鱼的生长发育,趋光性逐渐下降,趋光指数Ⅰ＞Ⅱ＞Ⅲ＞Ⅳ＞Ⅴ。在水温23～25℃时,适宜照度区为1000～2000lux,实际生产中可以利用其将尼罗罗非鱼引诱到集中的区域进食,对于提高罗非鱼的摄食率,以及光诱捕具有积极意义。     

盐度对尼罗罗非鱼低温耐受性影响的研究

为提高尼罗罗非鱼的抗寒能力,本试验采用室内水族箱养殖方法研究了尼罗罗非鱼在0‰、5‰、12‰、25‰ 4个盐度梯度下的低温耐受性。结果表明：就温度而言,死亡率随着温度的降低呈先上升后下降的趋势,温度达到9.1℃时,死亡率达到最大值,为38.7%;就盐度而言,盐度为5‰时的死亡率最低,当盐度上升至25‰时罗非鱼的死亡率最高,50%的个体的成活时间(ST50)由长至短排序为5‰＞12‰＞0‰＞25‰;在不同的盐度梯度下,尼罗罗非鱼的低温耐受性都有所增加,当温度在8℃~11℃,盐度为12‰时,死亡率小于50%,当温度低于8℃时,死亡率急剧升高,在7℃时全部死亡;经统计分析,盐度为12‰时的半数致死低温显著低于其他3组。以上结果说明,一定的盐度可提高罗非鱼的低温耐受性。     

不同生长阶段尼罗罗非鱼IGF1基因表达分析

为阐明IGF1基因在罗非鱼生长过程中的表达规律,为罗非鱼的分子选育等工作奠定了理论基础,本实验利用实时荧光定量PCR技术跟踪尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)在不同生长阶段（0、20、40、60、80、125、145、165、185、205天）肝脏和肌肉胰岛素样生长因子1(IGF1)基因表达的发育性变化。结果表明：实验鱼的体重增长过程可以分为快速生长期和平稳期。在快速生长期时,肝脏IGF1基因表达水平较高,平稳期时较低,肝脏中IGF1基因表达情况与体重增长趋势基本吻合。肌肉中IGF1基因mRNA含量要低得多,而且表达模式与肝脏IGF1基因不相同。研究结果提示：IGF1 mRNA的表达具有明显的时空变化和组织特异性。肝脏中IGF1基因的表达量变化与罗非鱼体重增长趋势一致。肌肉中IGF1表达模式与肝脏中不同,提示肌肉中IGF1的分泌和作用有其自身的特异性。     

4种尼罗罗非鱼♀×奥利亚罗非鱼♂杂交子代肌肉营养成分对比分析

为了解不同遗传背景亲本对杂交子代奥尼鱼肉质的影响,开展4组不同品种尼罗罗非鱼、奥利亚罗非鱼杂交子代肌肉营养成分对比分析,用常规方法分析4组奥尼罗非鱼肌肉中营养组分、氨基酸含量和脂肪酸含量。结果显示,4组奥尼鱼肌肉水分含量在79.19%~79.82%之间,粗蛋白在17.44%~18.03%之间,粗脂肪含量在2.13%~2.25%之间,灰分在0.90%~0.99%之间,4种组分在组间均无显著性差异(P > 0.05);必需氨基酸、非必需氨基酸总量在组间接近,但精氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸和丙氨酸单项氨基酸含量受亲本来源不同影响存在差异显著(P < 0.05);脂肪酸含量方面组间饱和脂肪酸总量无显著差异,单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸受母本的影响在不同杂交组间差异显著(P < 0.05)。研究结果阐明了亲本选择对奥尼鱼肌肉营养差异的影响,为获得肉质性状更为优良的奥尼罗非鱼苗种提供技术指导。     

4种尼罗罗非鱼♀×奥利亚罗非鱼♂杂交子代肌肉营养成分对比分析

为了解不同遗传背景亲本对杂交子代奥尼鱼肉质的影响,开展4组不同品种尼罗罗非鱼、奥利亚罗非鱼杂交子代肌肉营养成分对比分析,用常规方法分析4组奥尼罗非鱼肌肉中营养组分、氨基酸含量和脂肪酸含量。结果显示,4组奥尼鱼肌肉水分含量在79.19%～79.82%之间,粗蛋白在17.44%～18.03%之间,粗脂肪含量在2.13%～2.25%之间,灰分在0.90%～0.99%之间,4种组分在组间均无显著性差异(P>0.05);必需氨基酸、非必需氨基酸总量在组间接近,但精氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸和丙氨酸单项氨基酸含量受亲本来源不同影响存在差异显著(P <0.05);脂肪酸含量方面组间饱和脂肪酸总量无显著差异,单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸受母本的影响在不同杂交组间差异显著(P <0.05)。研究结果阐明了亲本选择对奥尼鱼肌肉营养差异的影响,为获得肉质性状更为优良的奥尼罗非鱼苗种提供技术指导。     

尼罗罗非鱼干扰素调节因子1的表达与细胞定位

为了分析尼罗罗非鱼干扰素调节因子1(IRF1)的表达规律及其功能,克隆了尼罗罗非鱼IRF1基因c DNA全长,与其他脊椎动物IRF1基因进行比对,构建IRF家族系统进化树。然后使用Poly I∶C对尼罗罗非鱼进行体内注射诱导抗病毒免疫反应,利用荧光定量PCR技术检测处理组和对照组中尼罗罗非鱼各组织IRF1基因的表达差异。最后构建尼罗罗非鱼IRF1基因真核表达载体,对其进行细胞定位。结果表明,尼罗罗非鱼IRF1有888 bp的开放读码框,编码295个氨基酸的蛋白序列。该蛋白N端高度保守,并含有6个保守的色氨酸,具有DNA结合结构域。对蛋白相似率的计算发现尼罗罗非鱼与斑马鱼IRF1相似度为52.1%。而与大鼠IRF1的相似率最低,为36.2%。IRF家族成员蛋白序列构建的系统进化树显示,IRF家族共分为4个亚群。将p CMV3-FLAG-IRF1真核表达载体转染到Hela细胞中后,对IRF1进行细胞定位发现,尼罗罗非鱼IRF1主要分布在胞质中,胞核中有少量分布。对尼罗罗非鱼使用Poly I∶C进行体内注射诱导抗病毒应答反应,利用实时荧光定量PCR检测到各个组织中IRF1在不同时间下的表达水平有显著差异。本研究完成了尼罗罗非鱼IRF1的表达和细胞定位,对各种脊椎动物IRF家族成员进行了系统进化分析,结果有助于深入了解干扰素系统在机体免疫系统中的调控机制。     

饲料中添加木聚糖酶对尼罗罗非鱼生长性能的影响

以尼罗罗非鱼(Tilapia nilotica)为试验对象,初始平均体重为(106.16±16.77)g,小麦基础饲料为对照,小麦基础饲料中分别添加不同水平的木聚糖酶(0.05%,0.10%,0.15%),75 d后测定其增重率、内脏指数、肝胰脏指数、肠道指数、表观消化率及肌肉营养成分。结果表明,对照组尼罗罗非鱼的增重率为258.24%,0.05%和0.10%组的增重率较对照组分别提高8.29%和17.45%(P<0.01)。对照组肠道指数和肝胰脏指数分别为1.90和2.82,0.05%组的肠道指数显著低于对照组(P<0.05),0.10%组极显著低于对照组(P<0.01)。0.05%,0.10%和0.15%组的肝胰脏指数分别比对照组降低14.54%,27.30%和12.06%(P<0.01)。对照组饲料干物质和总糖表观消化率分别为67.35%和61.48%。0.05%,0.10%和0.15%组的干物质消化率分别比对照组提高7.69%(P<0.05),11.00%(P<0.01)和2.87%(P<0.05)。3个试验组的总糖表观消化率均极显著高于对照组(P<0.01)。0.05%和0.10%组肌肉粗蛋白含量分别显著(P<0.05)、极显著高于对照组(P<0.01)。0.05%和0.10%组肌肉粗脂肪含量分别比对照组提高14.43%和33.89%(P<0.01)。0.05%,0.10%和0.15%组试验鱼肌肉中粗灰分含量分别比对照组提高4.11%,7.54%和2.77%(P<0.01)。0.05%,0.10%和0.15%组肌肉总钙含量分别比对照组提高19.70%,25.76%和15.15%(P<0.01),总磷含量分别比对照组提高4.78%,3.83%和3.83%(P<0.01)。0.05%和0.10%组试验鱼肌肉水分含量极显著低于对照组(P<0.01)。因此,本研究结论:在含50%小麦的基础饲料中适量添加木聚糖酶,可以提高尼罗罗非鱼的生长性能,其适宜添加水平为0.10%。     

尼罗罗非鱼MHC IIB基因多态性及其与链球菌病抗性的关系

为了解MHC IIB基因多态性与尼罗罗非鱼链球菌病抗性的相关关系,本研究用2b-snp-sf和2b-snp-sr引物分别从尼罗罗非鱼40尾感病个体和40尾抗病个体的基因组DNA中扩增MHC IIB基因片段,扩增产物长度为775~797 bp。在775~797 bp核苷酸序列中,抗病群体的多态核苷酸位点有265个（33.2%）,感病群体中有255个（31.9%）。在该扩增片段编码的101个氨基酸位点中,抗病群体与感病群体分别有32个和33个多态位点。对80个个体的441个阳性克隆测序,发现有7种不同的MHC IIB等位基因主型,编码7个不同的氨基酸序列。大部分等位基因是两个群体共有的。等位基因Orni-DAB＊0201和Orni-DAB＊0401在抗病群体中出现的频率（15.5%、5.6%）显著高于在感病群体中出现的频率（7.4%、1.8%）,而等位基因Orni-DAB＊0501和Orni-DAB＊0601只出现在抗病群体。抗病群体中70%的个体出现2~4个等位基因,30%的个体出现1个等位基因;感病群体中42.5%的个体出现2~4个等位基因,57.5%的个体只出现1个等位基因。这提示个体中等位基因数量的多少与其对链球菌病的抵抗力有着明显的关系。个体中具有的MHC IIB等位基因数越多、抗病力越强。本研究结果为抗病尼罗罗非鱼选育奠定了基础。     

尼罗罗非鱼MyD88基因荧光定量PCR检测方法的建立

为了准确分析尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）髓样分化因子（myeloid differentiation factor 88,MyD88）在天然免疫反应中的作用,根据MyD88 EST序列（GenBank登录号：GR679416.1）和β-actin基因序列（GenBank登录号：AB037865.1）,分别在保守区域设计并合成引物。实验利用5倍系列稀释的尼罗罗非鱼肝脏cDNA样品构建标准曲线并进行融解曲线分析,建立尼罗罗非鱼MyD88的SYBR GreenⅠ荧光实时定量PCR检测方法。应用2?ΔΔCt分析方法初步检测了尼罗罗非鱼肝脏、脾脏、血液和肌肉等不同组织中的MyD88相对表达量。扩增结果表明MyD88和β-actin基因标准曲线CT值检测范围分别为24~35和19~30,扩增效率分别为100%和96.7%,相关系数分别为0.998和0.995;熔解曲线分析显示产物均形成单一特异峰,Tm值分别为78.5℃和77.5℃。定量分析结果显示,MyD88基因在参与机体免疫的相关组织肝脏、脾脏和血液中高丰度表达。     

外源木聚糖酶对尼罗罗非鱼消化器官消化酶活力及分布的影响

本试验以尼罗罗非鱼为试验对象,小麦日粮为对照,小麦日粮中分别添加不同水平的木聚糖酶(0.05%,0.10%,0.15%)作为试验饲料。每个处理设5个重复,每个重复放养40尾雄性尼罗罗非鱼。试验采用饱食方式,每天投喂4次(8:30,11:30,14:30,17:30)。在池塘浮式网箱(1.0 m×1.0 m×1.3 m)中进行饲养试验,75 d后测定罗非鱼胃、肠、肝胰脏的蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、木聚糖酶、纤维素酶、果胶酶6种消化酶的活力。结果表明:0.10%木聚糖酶试验组的胃蛋白酶、纤维素酶活力较对照组有极显著提高(P<0.01);木聚糖酶试验组的6种肠消化酶活力均有不同程度的提高,其中,0.10%木聚糖酶试验组的6种肠消化酶与对照组均存在极显著差异(P<0.01);外源性木聚糖酶抑制罗非鱼肝胰脏蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活力,但提升肝胰脏内源性木聚糖酶、纤维素酶和果胶酶的活力;外源性木聚糖酶的添加不影响淀粉酶、内源性木聚糖酶、纤维素酶和果胶酶在胃、肠、肝胰脏中的分布规律,但对蛋白酶、脂肪酶的分布规律有明显影响。     

饥饿对繁殖期尼罗罗非鱼肌肉生化成分和性腺发育的影响

在养殖群体中选取规格为202.3±5.1g（♀）和251.7±5.9g（♂）的尼罗罗非鱼作为实验样本,研究饥饿对其肌肉生化成分和性腺发育的影响。实验期间雌雄鱼体质量均于饥饿14d后显著下降（P<0.05）,停食结束后分别下降19.72%和15.93%;饥饿早期性腺质量持续上升,21-28d期间出现拐点,至28d卵巢和精巢质量分别增加95.93%和120.31%。饥饿过程中肌肉粗脂肪和粗蛋白含量以及能量密度均呈下降趋势,雌雄鱼粗脂肪含量分别于7d和14d显著下降（P<0.05）,粗蛋白含量的显著变化均出现于14d。结果表明饥饿对尼罗罗非鱼肌肉生化成分及性腺发育具有显著影响,饥饿早期其动用储备能量供性腺发育,随着饥饿的延续,性腺发育趋缓直至停滞。此外,由于雄鱼前期能量贮存水平高于雌鱼,加之卵巢发育需要消耗更多能量,因此各阶段雌鱼主要指标的下降均早于雄鱼,且降幅也大于后者。     

循环水养殖系统中饲养密度对罗非鱼幼鱼生长及经济效益的影响

为探讨养殖密度对循环水养殖系统中罗非鱼幼鱼的影响,选取了同批次的罗非鱼幼鱼进行50天的饲养,测定了4组不同养殖密度梯度下幼鱼的生长指标的变化,并计算了不同工况下的经济效益。结果表明,养殖密度对罗非鱼幼鱼的生长有一定的影响,随着养殖密度的增大,幼鱼的成活率及最终平均体重和体长都呈现出下降的趋势,特定生长率、日平均增重、生长效率、肥满度等生长指标也显示出相似的规律,密度最低的A组各生长指标显著高于密度最高的D组,密度过高会抑制罗非鱼幼鱼的个体生长速度。养殖经济效益分析表明C组产量最高,是较适宜的养殖密度。     

饲料可消化蛋白和脂肪水平对吉富罗非鱼幼鱼生长性能、能量物质代谢和抗氧化功能的影响

本试验旨在研究饲料中不同可消化蛋白(DCP)和脂肪(DL)水平对吉富罗非鱼(GIFT,Oreochromis niloticus)幼鱼生长性能、能量物质代谢和抗氧化功能的影响,以确定罗非鱼幼鱼饲料适宜氮能比.初始均重为2g幼鱼,投喂不同DCP(22％、24％、26％、28％)和DL水平(3％、5％、7％)配制而成的12...     

饲料添加白藜芦醇对吉富罗非鱼生长免疫、肝脏结构的影响

(目的)为探究不同含量白藜芦醇对吉富罗非鱼(Oreochromis niloticus)生长、非特异免疫能力及肝脏结构的影响。(方法)试验设计4组不同含量Res饲料：0%、0.025%、0.05%、0.1%,分别表示D1、D2、D3、D4组;在第15天、45天测定血清中八种非特异免疫酶活性,扫描电镜观察肠绒毛、肝脏显微结构。(结果)结果显示：经45天,处理组与对照组之间增重率(WGR)、特定生长率(SGR)、饲料系数(FC)显著降低(P<0.05)。生长期15天,MT、Hsp-70、Hsp-60、TRF四种酶活性均随着Res含量提高而降低;C3、C4二种酶活性处理组与对照组无显著差异;生长期45天,C3、C4、IgM、TNF-α、Hsp-60、TRF六种酶活性均随着Res含量提高而降低。扫描电镜显示：15天D4组肠绒毛“干瘪”、“卷曲程度加深”,45天时,D4组绒毛排列紊乱、绒毛高度降低,受损严重,肝脏纤维化现象明显。(结论)综上所述：饲料中添加0.1% Res能够降低吉富罗非鱼部分非特异性免疫酶活性,并且损伤肠道、肝脏。     

低温应激下吉富罗非鱼生化指标与氨氮排泄水平的变化

为研究低温应激对吉富罗非鱼(GIFT,Oreochromis niloticus)生化指标与氨氮排泄水平的影响,选取平均体重(232±10)g的吉富罗非鱼作为试验对象,降温速度1℃/h,设定(24.5±0.2)℃对照组和低温(14.3±0.8)℃冷应激试验组,每组设定3个平行组,于试验第0、4.5和24 h时统计试验鱼成活率,测定试验鱼生化指标及水体p H、氨氮含量。结果表明,水温降至应激温度的第0 h,试验组罗非鱼血糖、肌糖原、乳酸水平均有上升,其中肌糖原上升显著。水中氨氮水平也有所增加,但不显著。该应激影响在24 h后通过罗非鱼自身调整消除,各生化指标最终趋于稳定。因此认为在本试验条件下,在该降温速度和暂养温度下短时间内暂养200 g左右的罗非鱼是安全的,对鱼体健康并无显著影响。     

奥利亚罗非鱼在光场中的行为反应研究

为探索了解奥利亚罗非鱼在光场中的趋避行为规律。采用水平光梯度法,研究了4组不同生长阶段的奥利亚罗非鱼：Ⅰ组：20.0~50.0 mm;Ⅱ组：50.0~80.0 mm;Ⅲ组：80.0~110.0 mm;Ⅳ组：110.0~140.0 mm,在250、500、1000、1500、2000 lx白光光强梯度下的行为反应。同时对Ⅰ组奥利亚罗非鱼在不同波长单色光下（红、黄、绿、蓝）下的行为分布开展研究。结果表明：在白光下,4组奥利亚罗非鱼均表现出正趋光性,在250~2000 lx间趋光率随光照强度的增强呈现出先上升后下降的趋势,在1000 lx时趋光率达到峰值,其中近光区趋光率分别为67.5%、55.0%、55.0%、42.0%,总趋光率分别为96.0%、94.0%、96.5%、95.0%;奥利亚罗非鱼的白光适宜照度范围为：500~1500 lx;随着奥利亚罗非鱼的生长发育,近光区趋光率峰值Ⅰ>Ⅱ>Ⅲ>Ⅳ。此外,Ⅰ组奥利亚罗非鱼在不同单色光同一照度下的趋光率差异显著(P<0.05),在蓝光、绿光下的趋光率高于红光、黄光,对不同单色光的趋集行为具有选择性。研究表明：奥利亚罗非鱼在不同光色、不同光强、不同生长阶段都具有选择性,研究结果在开发高效诱捕灯、提高工厂化养殖效益等方面具有积极意义。     

不同养殖密度下吉富罗非鱼生长性状的通径分析

为研究不同养殖密度下吉富罗非鱼(GIFT)成鱼体长、全长、体高和体宽对体重的影响差别,采用单因素方差分析法研究不同养殖密度下罗非鱼生长性状之间的差别。采用通径分析的方法对各养殖密度下变量的重要性进行排序,对不显著变量进行了剔除。结果发现：除在养殖密度为18000尾/hm2和22500尾/hm2时体长和全长之间差异不显著(P＞0.05)外,其他指标在不同养殖密度间差异均极显著(P＜0.01);3个养殖密度下对体重影响最大的变量分别是体长（18000尾/hm2）、体宽（22500尾/hm2）、全长（27000尾/hm2）,回归方程中,在养殖密度为22500尾/hm2时全长和体高被剔除,在养殖密度分别为18000尾/hm2和27000尾/hm2时体长被剔除。不同养殖密度下同日龄吉富罗非鱼的其他生长指标对体重的影响存在差别,在选育时应充分考虑。     

平塘县江优919不同栽培密度试验初报

为探讨江优919最适宜的栽培密度,开展了15221株/667m2、13307株/667m2、11 223株/667m2、8547株/667m24个不同栽培密度试验.结果表明：在试验设计的密度范围内,江优919栽培密度越大,单产越低,株高越高,穗长越长,总粒数越小,实粒数越少,结实率越低,分蘖率越低,千粒重变小.     

高密度对不同基因型夏玉米农艺特性、产量性状及耐密性的影响

为研究种植密度对不同夏玉米品种农艺性状、产量与耐密性的影响,在高密度(75000、90000株/hm²)条件下,对14个不同基因型夏玉米的农艺性状、产量构成因子以及耐密性系数等进行研究。结果表明,增密对14个不同基因型夏玉米品种生育期没有影响,株高、穗位高、茎粗、节间长度、茎粗系数、地上部干物质等农艺性状的差异达显著或极显著水平,穗位高系数、经济系数差异不显著,其中,株高平均增高1.23 cm,穗位高平均增高1.92 cm,第3节节间长度减小0.42 cm‘,NK718’‘、农大372’的地上部干物质质量增加,其余品种地上部干物质质量减小,减少幅度4.72%～23.99%,经济系数增加4.71%。75000株/hm²条件下的产量、穗部性状与90000株/hm²密度条件相比,差异达极显著水平,在90000株/hm²密度条件下产量增加2.39%、穗粒数减少5.68%、百粒重降低1.17%。14个夏玉米品种相比,‘泽玉8911’、‘新单61’及‘豫单9953’耐密性系数值较大,适宜密植。