宽筋藤组织培养的初步研究

为了研究宽筋藤快繁技术,以宽筋藤健壮无病虫害的嫩茎和嫩叶作为试验材料,研究其表面消毒方法和在添加不同浓度激素的培养基上培养,对宽筋藤进行组织培养研究。结果表明：茎段表面采用75%酒精消毒30 s,用0.1%升汞浸泡5 min,无菌水漂洗2次后,再用0.1%升汞浸泡5 min,无菌水漂洗4次的效果最佳,存活率为66.7%;而叶片直接用升汞处理12 min的消毒效果较好,存活率为53.3%;适宜侧芽诱导和增殖的培养基为MS+6-BA 0.05 mg/L+GA3 0.04 mg/L+NAA 0.02 mg/L,30天的增殖系数为3;诱导愈伤组织以培养基MS+2,4-D 1.5 mg/L+BA 0.5 mg/L的效果较好,对嫩茎的诱导率可达83.3%,对嫩叶的诱导率可达76.7%,但所诱导的愈伤组织分化能力低,均不能分化不定芽;适宜生根的培养基为MS+NAA 0.1 mg/L,生根率可达到100%,且移栽成活率96%。     

栝楼组织培养研究

为解决籽用栝楼高品质种苗的不足,选用无毒、结籽率高并生长健壮的栝楼植株为材料,进行组织快繁。通过对栝楼不同外植体的选取、消毒方法、愈伤组织诱导、丛生芽诱导、继代和试管苗生根等相关条件研究,探讨栝楼组织快繁的技术方法。结果表明：以雌性栝楼4—5 月萌生的栝楼芽适宜做外植体,外植体用75%乙醇30 s,无菌水冲洗3 次,0.31% ClO2处理5 min,无菌水冲洗4~5 次效果好。适宜芽诱导的培养基为MS+1 mg/L 6-BA+ 0.3 mg/L NAA;继代培养基为MS+ 0.3 mg/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA和MS+0.4 mg/L 6-BA+ 0.2 mg/L NAA;栝楼根诱导培养基为MS+0.1 mg/L IBA和MS+0.1 mg/L NAA。     

金钱树的快速繁殖技术研究

以金钱树的叶片和叶状茎作为外植体,用0.1%的升汞作为消毒剂,通过试验拟找出最佳的消毒时间及合适的诱导、增殖和生根的培养基。结果表明：0.1%的升汞对两种外植体的最佳消毒时间是8~10min, 最适于诱导叶片外植体产生不定芽、不定芽的增殖和生根的培养基分别为：MS+6-BA2.0mg/L、MS+6-BA3.0 mg/L +KT0.8 mg/L和MS+6-BA5.0 mg/L+ KT0.3 mg/L、1/2MS+6-BA2.0 mg/L +NAA0.3 mg/L。     

金银花高效再生体系的建立

本研究以当年抽生的金银花嫩枝为外植体,在无菌条件下,用0.1%升汞消毒10 min,无菌水清洗后接种到不同激素配比的培养基中,建立金银花高效再生体系。研究结果表明:MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA0.01~0.05 mg/L适合不定芽的诱导,诱导率为100%;MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.01~0.05 mg/L适合继代壮苗培养;1/2 MS+IBA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L适合金银花的生根诱导培养,成功建立了金银花高效再生体系。     

膜荚黄芪愈伤组织诱导及植株再生体系的建立

为了建立膜荚黄芪组培快繁技术体系,本研究以膜荚黄芪无菌试管苗的下胚轴为外植体,探讨不同激素种类及其浓度配比对愈伤组织诱导率、丛生芽诱导率、再生苗生根率的影响,筛选适宜的培养基配方。结果表明:膜荚黄芪愈伤组织最佳诱导培养基是MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L,愈伤组织诱导率达86.4%,丛生芽分化的最佳培养基是MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L,丛生芽分化率最高达91.6%,再生苗最佳生根培养基1/2MS+IBA 0.5 mg/L+IAA 1.0 mg/L,生根率最高达62.6%。本研究建立了膜荚黄芪组培快繁技术体系,为其种质资源保存及开发利用提供了有力的技术支撑。     

金钻蔓绿绒愈伤组织诱导及再生体系的建立

通过诱导愈伤组织途径,建立其组培快繁体系。以金钻蔓绿绒根茎为试验材料,分析不同浓度6-BA、IBA、NAA组合对金钻蔓绿绒愈伤组织、不定芽诱导、不定芽增殖、生根的影响。结果表明:金钻蔓绿绒的出愈率最高可达85.55%;当6-BA浓度为1 mg/L时增殖系数达到最高,达17.3,经金钻蔓绿绒植株再生体系扩繁的组培苗生根率达100%,移栽成活率为100%。愈伤组织诱导培养基:MS+1 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA;不定芽诱导及增殖培养基:MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;生根最佳培养基为:1/2 MS+0.5 mg/L NAA。将植株种植于草炭和珍珠岩3:1基质中,成活率达100%。     

降香黄檀愈伤组织培养与植株再生研究

为了实现降香黄檀工厂化快速繁殖和扩大栽培,并为降香黄檀抗寒基因导入打下一定的基础,以降香黄檀无菌实生苗茎段、叶片、根尖为外植体,MS为基本培养基,对各器官愈伤组织诱导与分化的最适培养基成分进行了研究。结果表明,可从降香黄檀无菌实生苗茎段、叶片、根尖成功地进行愈伤组织培养和植株再生。茎段、叶片、根尖诱导愈伤组织的最适培养基分别为1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.10 mg/L、1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.10 mg/L和1/4MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L;茎段、叶片、根尖的愈伤组织诱导丛生芽最适培养基分别为1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 4.0 mg/L、1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 3.5 mg/L和1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 3.5 mg/L;茎段、叶片、根尖来源的单芽,其最佳生根培养基分别为MS+NAA 1.5 mg/L、MS+NAA 1.0 mg/L和MS+NAA 2.0 mg/L。比较茎段、叶片与根尖的愈伤组织诱导率、丛生芽诱导率和单芽生根率,得出以无菌实生苗根尖作为外植体是降香黄檀愈伤组织培养和植株再生的最佳选择。     

驱蚊香草快繁体系的建立及工厂化育苗主要影响因素研究

以驱蚊香草的幼嫩叶片作外植体,在含不同激素的不同培养基上进行丛生芽的诱导、芽的继代增殖、芽生根与移栽研究,以快速获得再生植株。结果表明,丛生芽诱导培养基以MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L较好,诱导率为96%;增殖培养基以MS（B5）+6-BA0.5mg/L +NAA0.1mg/L较好,增殖系数达8倍以上,且增殖芽生长好;壮苗培养基为MS（B5）+6-BA0.1mg/L+NAA0.2mg/L为好;生根培养基以1/2MS+NAA0.1 mg/L和MS+IBA0.2 mg/L为最佳,生根率达100%,幼苗生长势旺。影响工厂化育苗的主要因素有激素浓度、继代次数和移栽管理     

驱蚊草组织培养和快速繁殖技术的研究

采用植物组织培养技术,利用驱蚊草顶芽及带腋芽茎段为外植体,开展驱蚊草的诱导分化、芽苗增殖、壮苗培养、生根和移栽等系列研究。结果表明,采用二次消毒方法,有利于无菌系的建立;在无菌系建立后,以带叶柄叶片为材料,在MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L培养基上进行培养,可分化、获得高达60%的正常丛生芽;以1/2MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.1mg/L为丛生芽增殖继代培养基,不仅能够满足快繁、增殖,同时也能够降低驱蚊草试管苗玻璃比发生频率;生根培养基用1/2MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.5mg/L外加AC0.5mg/L,炼苗后将瓶苗移栽到泥炭土、沙、蛭石(质量比为2:3:1)的基质中,控温、保温、保湿栽,成活率可达80%左右。     

马齿苋离体培养再生体系的建立

以马齿苋幼嫩叶片和茎段为试验材料,对外植体灭菌、愈伤组织诱导、不定芽分化和试管苗生根的最佳条件进行研究,以期建立马齿苋再生技术体系,并为马齿苋的规模化繁殖和遗传改良等研究奠定基础。结果表明,最佳外植体灭菌方法为：用0.1%的升汞溶液浸泡8 min;最佳愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L;最佳不定芽分化培养基为MS+6-BA 5.0 mg/L+NAA 0.4 mg/L;最佳生根培养基为1/2MS+IBA 2.0 mg/L。     

新型消毒剂过碳酸钠灭菌对烟草种子萌发和无菌苗生长的影响

为探索和评价新型消毒剂在植物表面灭菌中的应用方法,本研究比较过碳酸钠、次氯酸钠、升汞3种灭菌剂对烟草种子的表面灭菌效果,及对种子萌发和植株生长的影响。烟草种子分别用4.0%过碳酸钠水溶液（活性氧含量≥0.54%）处理20~40 min后直接接种于MS培养基中;33.3%次氯酸钠溶液（活性氯含量≥1.65 %）处理10 min或0.1%升汞水溶液灭菌4 min,无菌水清洗5次后接种于MS培养基中。3种方法灭菌效果相当,无污染,并且90 %的种子能萌发。过碳酸钠和次氯酸钠处理后种子萌发快、植株生长良好,且过碳酸钠灭菌组的植株生长略优;而升汞则延缓种子萌发并抑制植株生长。此外,因过碳酸钠灭菌后无需清洗,显示了其作为种子表面灭菌剂的极大优势。本研究建立了烟草种子表面灭菌的新方法,同时为其他植物的种子及外植体表面灭菌提供了参考,具有较大的实用价值。     

细梗蔷薇种子发芽及组织培养技术研究

为获得细梗蔷薇(Rosa graciliflora)完整的植株并建立其组培快繁体系,试验研究了不同低温层积时间对细梗蔷薇种子发芽率的影响;同时,选择其嫩茎段为试验材料,研究了不同消毒试剂、消毒时间、植物生长调节剂配比对外植体腋芽诱导、丛生芽增殖及生根培养的影响,并筛选出适宜各阶段培养的最佳培养基配方。结果表明,低温沙藏9个月的种子发芽率最高,为35%;适宜茎段灭菌处理的组合为10%次氯酸钠溶液15 min+0.05%升汞10 min;丛生芽增殖的最佳培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 2.0 mg/L;组培苗生根的最佳培养基为WPM+IBA 0.3 mg/L,生根率达到90%。笔者研究了细梗蔷薇发芽所需的最佳低温层积时间,建立了细梗蔷薇组培快繁技术体系,为细梗蔷薇的大量繁殖、推广和应用提供参考。     

华北落叶松成熟合子胚不定芽诱导及伸长研究

本研究以华北落叶松成熟合子胚为外植体,进行华北落叶松离体器官发生的初步探究。试验采用不同消毒方法对华北落叶松成熟合子胚进行消毒,设计了以6-BA、NAA及蔗糖为试验因素的L934正交试验进行华北落叶松不定芽的诱导研究,并且在不定芽伸长试验中添加了少量活性炭。试验结果表明,（1）将种子在用流水冲洗12 h,75%酒精消毒3 min,再转入0.1%升汞消毒10 min所获得的综合效果较好;（2）光照条件下（约2000 lx）,DCR培养基+4 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+40 g/L蔗糖为诱导不定芽的最佳组合,其中6-BA影响作用显著,NAA、蔗糖则无显著影响;（3）1.0 g/L活性炭对不定芽伸长有显著的促进作用,平均伸长达0.43 cm。以上研究为华北落叶松组培器官发生及进一步的遗传转化研究奠定了良好的理论与实践基础。     

风蜡花‘Snow Flake’外植体消毒方法的研究

本文研究了风蜡花‘Snow Flake’组织培养快速繁殖中,外植体消毒的影响因素,分别从灭菌剂及灭菌时间,外植体取材时间、取材部位,以及抗菌素几个方面进行研究。结果表明：在10月到翌年3月取材,以顶芽为外植体,在75%的酒精中浸泡30s后用0.1% HgCl2处理8min,消毒效果较好。而在培养基中添加抗菌素,对‘Snow Flake’ 内生菌污染控制效果不理想。     

漆树组织培养中污染与褐变的防治

漆树作为重要的经济树种,可通过植物组织培养扩繁,但在其组织培养过程中会出现严重的污染和褐变。本研究使用制霉菌素、两性霉素B、苯扎氯胺,乙醇和升汞克服污染;使用半胱氨酸,MS和White培养基克服褐变。用SPSS 12.0统计软件进行单因素方差分析和Duncan新复极差法多重比较分析,通过统计污染率、褐变率和成活率,得出最佳消毒方法以75%乙醇浸泡1 min,1%苯扎氯胺浸泡 1 min,0.1%升汞浸泡20 min效果最好,污染率为1.15%,并得出最佳防治褐变培养基以添加100 mg/L半胱氨酸的White培养基效果最好,褐变率为1.15%,并将成活率提高到97.63%。试验所建立的漆树高效、稳定的无菌体系,为后期其完整的植物组织培养体系的建立奠定了基础。     

高山羊齿孢子的组织培养

[目的]探讨不同灭菌方式对组织培养中高山羊齿孢子成活率的影响以及不同培养基对孢子萌发率的影响.[方法]利用NaClO、NaClO+酒精、升汞、升汞+酒精、升汞+NaClO、酒精这6种不同灭菌方式研究其对高山羊齿孢子成活率的影响;考虑4因素基本培养基、蔗糖、NAA、6-BA进行L16 (44)正交设计,研究其对高山羊齿孢子萌发率的影响.[结果]6种灭菌处理中,NaClO+酒精的灭菌效果最好;酒精的灭菌效果最差;在正交实验中,以1/2 MS+3％蔗糖+1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA为高山羊齿孢子萌发的最佳培养基,萌发率达63.69％,以不加任何激素的MS培养基中萌发率最低.[结论]2种不同的灭菌剂混合使用比单独使用灭菌剂的效果好;基本培养基对高山羊齿孢子萌发率的影响最大,影响顺序为:基本培养基＞6-BA＞蔗糖＞NAA.     

重瓣长寿花叶片组织培养及植株再生的研究

摘要:以重瓣长寿花幼嫩叶片为试材,筛选各个培养阶段的培养基配方,研究重瓣长寿花的快速繁殖技术。结果表明: 0.1％升汞灭菌4min,外植体污染率为12.5％,死亡率2.5%,效果最佳;愈伤组织诱导培养基以MS+6-BA1.0 mg／L+NAA0.1～0.3 mg／L最佳,不定芽分化和增殖的最适培养基为MS+6-BA0.5 mg／L+NAA0.1 mg／L,生根培养基用1/2MS+NAA0.5mg／L最好,试管苗移栽成活率达99％。     

树莓品种‘Kivigold’快繁技术体系建立

以树莓（Rubus idaeus）品种‘Kivigold’带腋芽茎段为外植体,研究消毒剂HgCl2（0.1%）不同的消毒时间对外植体培养的影响,对不定芽增殖培养基和生根培养基中适宜的激素种类及浓度、生根苗移栽驯化中适宜的基质进行了筛选。结果显示,树莓品种‘Kivigold’外植体的最佳消毒时间为10 min,初代培养时只需添加6-BA即可满足外植体萌发和生长的需要;在不定芽增殖过程中,细胞分裂素主要影响不定芽的增殖,而生长素主要影响不定芽的生长,以质量浓度低于1.5 mg/L的6-BA以及质量浓度低于0.5 mg/L的NAA较为适宜,3种碳源中蔗糖更有利于不定芽的增殖和生长;经过进一步的筛选,确定适宜于‘Kivigold’不定芽增殖和生长的培养基为MS+1.00 mg/L 6-BA +0.10 mg/L NAA（含20 g/L蔗糖和5.9 g/L琼脂,pH 5.8）,适宜于‘Kivigold’不定芽生根的培养基为1/2 MS+0.10 mg/L NAA（含20 g/L蔗糖和5.9 g/L琼脂,pH 5.8）;在移栽驯化中最适宜的栽培基质为泥炭土:珍珠岩=1:1,移栽成活率可达到93.33%。     

无籽罗汉果组培无菌系的构建

【研究目的】研究无籽罗汉果组培快繁技术要点,为无籽罗汉果再生体系建立和工厂化生产提供技术支持。【方法】以幼嫩茎段为试验材料,探讨不同灭菌时间,不同激素组合以及浓度对启动培养、增殖培养、生根培养等的影响。【结果】无籽罗汉果带芽茎段最佳消毒方法为1% HgCl2溶液消毒8 min。最适宜的无籽罗汉果茎段启动培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L KT,无籽罗汉果继代增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA,增殖系数可达6.8;较适合生根的培养基为1/2MS+1.0 mg/L IBA+0.5 mg/LNAA,新稍平均生根数达7.4条,生根率可达95%。【结论】可为无籽罗汉果大规模组织培养和快速繁殖提供理论基础,并为组织培养高效体系的建立及外源基因导入提供参考。     

山苦茶组织培养与快速繁殖研究

为了给山苦茶（Mallotus oblongifolius）大规模繁殖和推广种植打下技术基础,以山苦茶当年生带芽茎段为试验材料,研究了山苦茶离体茎段培养和快速繁殖的影响因素。结果表明山苦茶带芽茎段最佳消毒方法为70%的酒精浸泡30 s,0.1% HgCl2溶液消毒8 min。最适宜的山苦茶茎段启动培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L KT。1/2MS为基本培养基,细胞分裂6-BA和KT组合有利于嫩茎增殖。山苦茶较好的继代增殖培养基为1/2MS+2.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L KT,生根培养基为1/2MS+2.0 mg/L IBA+2.0 mg/L NAA。利用本试验所得出的结果,可实现山苦茶种苗的离体无性快速繁殖,增殖率可达3。