人工接种诱发烟草黑胫病抗性鉴定的应用研究

为提高烟草黑胫病抗性鉴定结果的稳定性,笔者于2001—2006年采用人工接种诱发抗性方法不连续地对15个烤烟新品系（6614、8504、9601、9717、8902-42、CF209、CF964、CF986、RGH12、YH01、YH02、YH05、YNH09、云烟97和云烟98）进行了烟草黑胫病抗性鉴定研究,本鉴定方法提出了烟草黑胫病培养和保存技术及接种体的制备方法,提出了烟草黑胫病大田期的接种时间及接种量。从鉴定结果看,15个品系不同年份的平均病指均在25以下,SSR分析发现,与抗病对照K326和革新三号的抗性无显著差异,均达抗病水平,且各品系不同年份间抗性稳定,说明该研究所用烟草黑胫病抗性鉴定方法稳定可靠。     

枣缩果病抗性的高强度离体鉴定方法建立与应用

为克服田间抗性评价的各种限制因素,充分发掘抗性种质,对枣缩果病抗性的高强度离体鉴定方法进行了研究。结果表明,在果实白熟期前（8月初）采集健康果实,用针轻刺枣果表面,喷施浓度为107个／mL的病原菌（ Alter-naria alternata （ Fr．） Keissler、Phoma destructiva Plowr．和Fusicoccum spp．）孢子悬浮液,经恒温（25℃）保湿（相对湿度为100％）培养5～7 d后调查病情指数较为适宜。采用此方法,对田间表现抗病（33个）和感病（3个）的品种进行了室内离体抗性鉴定,未发现对枣缩果病免疫的种质,但进一步筛选出了长鸡心、孔府酥脆、成武冬枣、苹果枣、串铃、酥圆铃、六月鲜等7份高抗种质,其病斑扩展速度慢、发病程度轻,与感病品种差异显著。总体上看,离体鉴定结果与田间自然发病调查的结果基本一致,但离体鉴定的选择强度更大,可鉴定出更高水平的抗性种质。     

一种TMV抗性离体快速鉴定方法及其在烟草育种上的应用

烟草普通花叶病,由烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)引起,是烟草生产中的常见病害之一,培育和种植抗病品种是解决该病害的主要途径,育种材料的抗性鉴定是抗病育种的关键环节。为提高TMV抗性鉴定效率,本研究根据TMV与N基因作用的原理设计了一种烟草苗期离体接种快速鉴定TMV抗性的方法。该方法为研磨病害严重程度为5级的新鲜病叶(10 g)并过滤,往过滤液中加纯净水(100 m L)稀释为病毒液;摘取6～7叶期烟苗的叶片(从上往下数第3叶)进行离体摩擦接种;3 d后观察坏死斑发生情况。应用此鉴定方法对20份烟草材料的TMV抗性进行鉴定,结果表明13份材料出现免疫斑;同时,对20份烟草材料的N基因进行了检测,结果表明13份材料含有N基因。出现免疫斑的材料与含N基因的材料相一致,证明了苗期离体接种方法鉴定TMV抗性的可行性。将此方法应用于21 524份育种中间材料(7 047株BC₁F₃、10 013株BC₁F₄、4 464株BC₁F₅)的...     

黄瓜枯萎病接种方法及抗性遗传的研究

黄瓜枯萎病是严重危害黄瓜生产的一种世界性土传病害,建立黄瓜枯萎病接种方法,从而实现快速、准确地对黄瓜种质资源进行抗病性筛选,明确不同黄瓜种质材料对枯萎病的抗性水平,可为黄瓜抗病育种提供重要依据.试验选用5份抗感枯萎病黄瓜材料及其杂交后代,以危害我国黄瓜生产的优势枯萎病生理小种4为供试菌源,开展了苗期人工接种枯萎病抗性鉴定方法以及枯萎病抗性遗传规律研究.结果表明,浸根接种法,以1×106孢子/mL的接种液接种子叶期幼苗,在白天24～28℃,夜晚16～20℃的温室中培养,接种后10～14 d即可正确区分品种之间的抗感性差异.该方法发病迅速,整齐度、重复性好,是较理想的黄瓜枯萎病接种方法.运用浸根接种法对以WIS2757和津研2号为双亲构建的F1、F2、F4 52个株系的各世代接种结果表明,WIS2757抗枯萎病,津研2号感枯萎病,F1群体抗枯萎病.根据F2群体和F4株系的抗病表现推断WIS2757对黄瓜枯萎病的抗性符合显性单基因的遗传模式.同时通过对Cu13和京育202及其F1的接种鉴定表明,Cu13抗枯萎病,京育202感枯萎病,F1群体表现中抗,初步认为抗病材料Cu13由多基因调控.     

一种新的鉴定水稻初级三体的方法

水稻初级三体在水稻遗传育种中起着重要的作用.其归属鉴定通常用Shastry(1960)的粗线期核型分析方法,但这种方法在实际操作中有一定的难度,不易得到分散好的粗线期染色体分裂相.本研究首次尝试利用三体株和正常株同源染色体间DNA含量的差异,用分子标记的手段将量的差异转为自显影带的差异原理去鉴定三体,发现此鉴定结果与粗线     

国槐离体培养及高效再生体系的优化

以国槐枝条为材料,研究了国槐离体培养及再生体系,探讨了不同激素组合对国槐无菌芽的产生、愈伤组织的形成、分化、增殖以及生根的影响,筛选出适合国槐枝条无菌芽诱导、无菌芽各部分形成愈伤组织、分化和增殖的培养基为MS+ BA1.0mg/L +NAA 0.1mg/L;有利于生根的培养基为1/2MS+ NAA0.3mg/L。     

甘蔗耐盐愈伤组织的离体筛选及鉴定

以甘蔗心叶为外植体,MS+2,4-D2mg/L为基本培养基,在25±2℃、光照强度24~30μmol/m².s、每天光照10h条件下进行耐盐愈伤组织的离体筛选和鉴定。结果表明,甘蔗愈伤组织的半致死和致死盐浓度分别为0.5%、1.5%NaCl,其愈伤组织诱导率分别为57.5%、0,极显著低于对照;在最高筛选盐浓度(1.0%NaCl)胁迫下,耐盐愈伤组织的相对生长量(2.363%)极显著低于对照(3.162%);耐盐植株的脯氨酸含量(527.19ug/g)极显著高于对照(185.06ug/g),相对电导率(32.3)极显著低于对照(49.0)。     

威灵仙黑斑病的病原鉴定及防治药剂的离体活性筛选

为明确威灵仙黑斑病的致病菌并筛选出有效的防治药剂,采用形态特征及菌株的ITS序列分析方法进行病原菌鉴定,通过平皿菌丝生长抑制法测定杀菌活性,结果表明威灵仙黑斑病病原菌为Alternaria alternata (Fr.)Keissler;25%溴菌腈可湿性粉剂、72%霜疫力克可湿性粉剂、30%爱苗乳油、80%绿亨2号可湿性粉剂和10%世高水分散粒剂对菌丝抑制率均达90％以上。此研究结果可为该病害的有效控制提供前期研究基础。     

人工接种与疫区诱发条件下大豆对灰斑病的抗性及后代选择研究

大豆灰斑病菌具有较强的生理分化的特点, 不同地区及气候条件都会影响大豆灰斑病的发病程度. 本试验将两份相同的大豆杂交材料分别种植在哈尔滨人工接种条件下及阿城疫区自然诱发条件下, 比较不同鉴定条件下杂交后代及亲本的抗性表现、抗性遗传与选择效果. 结果表明, 气候因素对大豆灰斑病抗性表现的影响很大. 在任何条件下,     

甘蓝未受精子房离体培养及再生植株倍性的鉴定

甘蓝通过未受精子房离体培养诱导获得的再生植株,对再生植株的倍性进行有效的鉴定是将其进一步应用于优良品种选育的基础。本研究利用3种基因型的甘蓝材料(PMQM、QMF、RMQM)培育再生植株,优化甘蓝未受精子房离体培养体系,并通过形态学鉴定法、根尖染色体计数法、流式细胞仪鉴定法对组培植株进行倍性鉴定。结果表明:在0.4 mg/L ZT的分化培养基中,3种基因型材料的愈伤组织分化率明显高于1.0 mg/L 6-BA培养基中的组培苗,其中基因型RMQM的分化效果最好;最终确定诱导愈伤组织分化不定芽的最适培养基配方为MS+0.4 mg/L ZT+2.0 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L NAA,且通过3种鉴定方法,得出再生植株倍性:单倍体3.4%,双倍体49.8%,四倍体15.9%,嵌合体35.3%。     

The reaction of Chrysanthemum cultivars to Puccinia horiana and the inheritance of resistance

Summary Four types of reaction of Chrysanthemum morifolium to infection by Puccinia horiana are described. (1) Resistant plants show no macroscopic lesions. Cultivars classified as resistant carry a single dominant gene mostly in a simplex, sometimes in a duplex condition. (2). Incomplete resistance provides good protection but under extreme test conditions some pustules develop slowly. (3) Necrosis inhibits spore formation to a large extent. The progenies of crosses between necrotic and susceptible cultivars are mostly susceptible. (4) Susceptible plants sporulate abundantly.The merits of the three types of resistance are discussed.     

Effect of Lr34 Resistance on Leaf Rust Development, Grain Yield and Baking Quality in Wheat

The protection provided by the leaf rust resistance gene Lr34 against Puccinia recondita f. sp. tritici was studied in the field over two seasons. In leaf-rust inoculated and fungicide-sprayed control plots, yield of RL6058, the ‘Thatcher’ backcross line with Lr34, was compared to that of the susceptible cultivar ‘Thatcher’. Leaf rust severity remained low on RL6058 in both seasons, but was high on ‘Thatcher’. The latent period of wheat leaf rust isolate 3SA132 in flag leaves of RL6058 was 256 h longer than in ‘Thatcher’. The uredinium density on ‘Thatcher’ was 14.4/cm², compared to 3.7/cm² flag leaf surface on RL6058. Leaf rust infection of ‘Thatcher’ reduced the total grain yield per plot by 25.4% and 1,000 kernel mass by 15.6%. Leaf rust caused little or no damage on RL6058 and rusted plots outyielded the control plots by 0.3 %. Seed weight of RL6058 was reduced by 0.7%. Compared to previous greenhouse studies, the adult-plant resistance conferred by Lr34 is more clearly expressed in the field. Evaluation of milling and baking quality characteristics revealed that compared to ‘Thatcher’, RL6058 had a higher flour protein content, but that its milling, dough development and baking properties were inferior.     

101份中国甘蔗主要育种亲本褐锈病抗性鉴定及Bru1基因的分子检测

由黑顶柄锈菌引起的甘蔗褐锈病是一种重要的世界性甘蔗病害,Bru1是甘蔗抗褐锈病主效基因,该基因对不同地区的褐锈病分离物具有广谱抗性。为明确中国甘蔗主要育种亲本对黑顶柄锈菌的抗性水平,了解Bru1基因在这些亲本中的分布情况,本研究于2014年对中国国家甘蔗种质资源圃保存的101份甘蔗主要育种亲本进行苗期抗褐锈病鉴定和抗褐锈病基因Bru1的分子检测。结果显示,供试亲本中,共48份抗病材料含有抗褐锈病基因Bru1,频率为47.5%,表明中国甘蔗主要育种亲本中褐锈病抗性主要由Bru1控制;其余29份抗病材料和24份感病材料均不含抗褐锈病基因Bru1,暗示除了Bru1外,可能还有其他抗褐锈病基因存在。研究结果为深入开展甘蔗抗褐锈病育种,选育和推广优良抗病品种,有效防控甘蔗褐锈病提供了科学依据和优良抗性亲本。     

31份甘蔗野生核心种质资源褐锈病抗性鉴定及Bru1基因的分子检测

为明确甘蔗野生资源对黑顶柄锈菌的抗性水平,了解Bru1基因在甘蔗野生资源中的分布状况,于2013年对中国国家甘蔗种质资源圃保存的31份野生核心种质资源进行苗期抗褐锈病鉴定和抗褐锈病基因Bru1的分子检测。结果表明,31份供试材料中,高抗(1级)至中抗(3级)的有28份,占90.3%。其中19份材料表现高抗(1级),占61.3%,3份材料表现抗病(2级),占9.7%,6份材料表现中抗(3级),占19.4%。31份供试材料中只有贵州78-2-12、云南97-4、E.rockii95-19、E.rockii 95-20、云南83-224、广西79-8、云南95-35和广西89-13含抗褐锈病基因Bru1,占参试材料的25.8%;其余20份抗病材料和3份感病材料均不含抗褐锈病基因Bru1,表明除Bru1外,可能还有其他抗褐锈病基因存在。结果暗示中国国家甘蔗种质资源圃保存的野生核心种质资源中蕴藏着优良的抗褐锈病基因,是选育抗褐锈病甘蔗品种很有利用前景的抗源种质。     

绿色棉胚珠离体培养体系优化及光照对纤维生长发育的影响

在优化绿色棉离体培养体系的基础上,以绿色棉品种绿絮棉1号、白色棉品种泗棉三号(对照)为材料,比较了光培养和暗培养对鲜胚珠质量、纤维长度、纤维素含量等生理生化指标影响,来探讨光照对绿色棉纤维生长发育的影响。结果表明:花后2 d的绿色棉胚珠较适宜离体培养,其适宜的消毒方式为75%的乙醇10min+0.1%升汞10min;离体培养的适宜激素及其浓度为GA31.0μmol·L-1+IAA 5.0μmol·L-1+ZR 2.5μmol·L-1,3种激素对胚珠鲜质量和纤维伸长影响大小的顺序为ZRIAAGA3。光培养能够抑制纤维的伸长、β-1,3-葡聚糖酶活性和培养前期的纤维蔗糖合成酶活性;但能够促进胚珠的生长、纤维素的合成、纤维PAL活性和培养后期的纤维蔗糖合成酶活性,提高黄酮含量。可见,光照能够对绿色棉纤维生长发育产生一定的影响。     

两系杂交稻腋芽在母体与离体条件下的再生特性

以两系杂交稻培矮64S/E32、培两优500为材料,采用留高桩和节插两种试验方法,对两组合各节位腋芽的再生特性进行了研究。结果表明,（1）头季稻齐穗期中部腋芽较长,齐穗到齐穗后20 d各节腋芽伸长速度均慢,齐穗后20 d到成熟期伸长速度均加快,但上位芽更快。（2）中高节位腋芽对母体营养物质的依赖性较低节位腋芽大,且其营     

我国棉花品种抗黄萎病鉴定存在的问题及对策

对１９９０～１９９６年通过省级审定的８４个棉花品种的黄萎病病指分析表明,大多数品种的病指与其实际抗病性不符。分析其原因认为,抗性鉴定的病圃及鉴定方法不规范,品种审定时对抗黄萎病性能无明确要求等所造成,为此提出解决问题的对策。     

二价核酶基因构建及对PLRV负链靶序列的体外切割研究

根据锤头状核酶的作用模式,设计、合成并克隆了特异性切割马铃薯卷叶病毒(Potato leaf roll virus,PLRV)中国分离株(PLRV-Ch)复制酶基因负链RNA的二价核酶序列。将该核酶基因克隆到pGEM-4Z中,构建成体外转录载体pGEM-4ZDR;同时将包含核酶切割识别位点的PLRV-Ch复制酶基因cDNA近5’端的874 bp片段反向插入到pGEM-4Z中,构建了体外转录载体pGEM-4ZR5。以线性化的重组质粒pGEM-4ZDR和pGEM-4ZR5为模板,在T7 RNA聚合酶的作用下,分别转录获得核酶RNA和PLRV-Ch复制酶基因5’端负链RNA底物片段。将以上2种RNA转录物混合并经37℃保温后,检测结果表明,所得核酶RNA对PLRV-Ch复制酶基因负链RNA在体外具有较强的特异切割活性。     

黄淮海抗大豆花叶病毒（SMV）育种现状与展望

从SMV株系划分、组成与分布、抗源筛选、抗病基因定位及病毒新类型等方面综述了国内外近年来对SMV的研究进展,重点总结了黄淮海SMV株系组成和分布最新研究结果。对比历年国家或地方区域试验的SMV抗性鉴定结果,分析了黄淮海地区的抗病育种研究现状,提出了该地区今后抗病育种研究方向。