渭北烟区黄瓜花叶病毒酶联免疫检测方法

将采自渭北烟田的黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）分离纯化后,制备抗血清并建立了双抗体夹心式酶联免疫检测方法（ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ）,同时对其各项指标作了合理选择,结果发现,最适包被和酶标抗体的质量浓度均为０．６２５ｍｇ·Ｌ＾－１,用此方法测定表明,在渭北烟区越冬油菜是ＣＭＶ的主要越冬寄生;ＣＭＶ侵染烟草所引起的花叶病约占６４．３％。     

番茄病毒对烟草花叶病毒抗性的研究

番茄病毒对烟草花叶病毒抗性的研究中国农业科学院蔬菜花卉所冯兰香番茄病毒病是一种世界性的病害，分布极其广泛，危害十分严重。因此，长期以来，该病一直受到人们的高度重视。人们对番茄病毒病的最早认识是从烟草花叶病毒（ＴＭＶ）开始的，１９０９年美国在番茄植株上...     

烟草花叶病毒诱发抗性的研究

用烟草花叶病毒（ＴＭＶ）接种过敏性寄主枯斑三生烟或心叶烟的半叶或下部两叶，可诱导出未接种的另半叶或上部叶对ＴＭＶ再次感染的抗性，诱发接种后７ｄ用ＴＭＶ进行攻击接种，所产生的枯斑直径明显小于对照。诱发抗性最早在诱接种后３－４ｄ检测检测到，第７ｄ左右达到高峰。温度对诱发抗性的产生有很大影响。诱发接种叶上上部的未接种叶因叶位不同。其抗性强弱也不同。经ＴＭＶ诱发后的心叶烟可表现出对ＴＭＶ和ＣＭＶ两者的抗性     

转烟草花叶病毒复制酶基因烟草的病毒抗性研究

对用根瘤农杆菌双质粒法导入烟草花叶病毒复制酶基因的转基因烟草后代的研究表明：转基因烟草抗烟草花叶病毒和马铃薯Ｘ病毒,但感染马铃薯Ｙ病毒,抗病毒的转基因烟草存在某种机制限制着病毒在植株内的转移,转烟草花叶病毒复制酶基因烟草植株内不产生该复制酶,其抗病毒的确切机制有等进一步研究。     

烟草不同生育阶段对黄瓜花叶病毒侵染的表现

为了探索烟草不同生育阶段对CMV的侵染反应、为防治烟草黄瓜花叶病提供理论依据。1984～1986年对不同生育阶段的烟草品种“Speight G28”、“Nc89”、“中烟15”以CMV接种。观察其侵染和发病情况及对各个器官和产量的影响、试验结果指出:3个品种从大十字期至现蕾期对CMV的侵染无抵抗能力,但各生育阶段的耐病性存在明显差异。SpeightG28,中烟15自大十字期至50天属于感病阶段、50天后属于耐病阶段。“Nc89”前40天属于感病阶段。在感病阶段中、前两个品种又有两个高峰期、分别为从大十字期至第10天和第40天左右、“Nc89”为第10天和第40天。第一次高峰尤为严重、病情指数可达80以上、产量降低35%左右、潜育期短13～15天、推迟现蕾期30～50天、个别植株不能现蕾。耐病阶段病情指数低于40以下,产量降低10%左右。植株的感、耐现象与体内的蛋白质、总糖的含量有密切的关系。     

烟草品种（品系）对野火病抗性评价

采用苗期针刺接种野火病菌的方法,对收集到的烟草品种（品系）进行抗性试验,结果表明,在38个测试的品种（品系）中,大体分为中抗、中感和感病3个抗性类群,其中,感病品种（品系）4个,该类群病情指数大于70;中感品种（品系）20个,该类群病情指数介于50～70;中抗品种（品系）14个,该类群病情指数介于20～50.在所有测试品种中,十里坪烟抗性最低,可作为对野火病监测预警材料;桦甸柳叶尖抗性最高,可作为今后的抗性亲本材料.     

水杨酸诱导的烟草对烟草花叶病毒的抗性

采用水杨酸（SA）诱导烟草对烟草花叶病毒（TMV）的抗性．间接ELISA法检测诱导后烟草叶片的病毒含量．并用枯斑寄主的半叶法检测诱导抗性程度。结果表明．水杨酸处理后烟草叶片内TMV含量明显降低．随着病毒挑战接种后时间延长．病毒含量增多．第28d普通烟叶片的病毒含量达到最大值。SA诱导处理后．处理叶片（T-SA）与其上部未处理叶片（N-SA）比较，枯斑数基本一致。均比对照处理明显减少。     

黄瓜上烟草花叶病毒的RT-PCR检测

根据烟草花叶病毒TMV的外壳蛋白基因序列设计、合成引物,以感病组织和健康组织总RNA为模板进行cDNA合成和PCR扩增,对2002年采集的75份黄瓜病毒病样本进行了检测,结果从感病组织中扩增出与预期的425bp大小一致的目标片段而健康组织无此扩增产物;29份材料检测到TMV,检出率达38.67%。     

侵染烟草的黄瓜花叶病毒株系分化研究

根据已报道的黄瓜花叶病毒(CMV)外壳蛋白(CP)基因序列合成1对引物,对侵染烟草的黄瓜花叶病毒贵州分离物的病毒外壳蛋白基因进行基因扩增和序列分析。结果表明:40个CMV贵州分离物和CMV株系亚组ⅠB系列CP基因核苷酸相似性为95.1%~100.0%,与CMV株系亚组ⅠA系列CP基因核苷酸相似性为92.3%~98.2%,亚组ⅡCP基因核苷酸相似性为78.2%~80.5%。表明贵州CMV分离物与CMV株系亚组ⅠB系列同源性关系更密切,因而它们都属于CMV株系亚组ⅠB系列。     

侵染蚕豆的黄瓜花叶病毒的分离和鉴定

根据鉴别寄主反应、寄主范围测定、介体传播特性、粒体形态以及血清学诸项试验,将蚕豆病毒分离物B_5鉴定为黄瓜花叶病毒(Cucumber Mosaic virus,CMV)。B_5液接种能侵染7科20余种植物。在蚕豆的接种叶上形成红褐色坏死斑,有或无系统侵染;局部侵染苋色藜和昆诺藜;系统侵染心叶烟和番茄分别引起花叶和蕨叶症。B_5可经桃蚜、棉蚜和甘篮蚜的非持久方式传播。B_3在电镜下粒体形态为球状,直径28～30nm。B_5病株的粗制液在免疫双扩散试验中能和黄瓜花叶病毒的抗血清起反应,且在免疫电镜试验中,黄瓜花叶病毒抗血清处理的铜网能捕获大量B_5粒体。     

大豆品种对苜蓿花叶病毒的抗性鉴定

近年来,由苜蓿花叶病毒（alfalfa mosaic virus,AMV）引起的大豆病害在东北地区时有发生,并有流行扩大之势。研究通过病情等级和反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）对197个北方大豆品种进行抗病性筛选。结果表明,AMV可侵染所有测试大豆品种,无对AMV完全免疫的抗性品种。综合病情等级和RT-PCR结果,其中30份大豆品种耐病性较好,在两次接种试验中均未表现出明显AMV症状,是AMV流行区域大豆栽培和育种的良好抗性资源。     

水杨酸诱导的烟草对烟草花叶病毒的抗性

采用水杨酸(SA)诱导烟草对烟草花叶病毒(TMV)的抗性,间接ELISA法检测诱导后烟草叶片的病毒含量,并用枯斑寄主的半叶法检测诱导抗性程度。结果表明,水杨酸处理后烟草叶片内TMV含量明显降低,随着病毒挑战接种后时间延长,病毒含量增多,第28d普通烟叶片的病毒含量达到最大值。SA诱导处理后,处理叶片(T-SA)与其上部未处理叶片(N-SA)比较,枯斑数基本一致,均比对照处理明显减少。     

烟草品种（系）对青枯病菌的抗性鉴定与分析

大田采用茎部注射接种法和淋接种法，分别对从湖南各地收集的６２个烟草品种（系）接种青枯病茵株５－１，并对其成株期抗性进行了鉴定。结果６２个供试材料中，没有免疫品种，高抗的只有Ｔｉ４８８Ａ等５个品种，中抗品种有苦叶等３０个，其余为感病和高感品种。烟草成株期抗性鉴定用茎部注射接种法比较适宜。     

云南省烟草花叶病毒和黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因克隆及序列分析

以从云南省主要烟区烟草上分离到的烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus, TMV）和黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic virus, CMV）的RNA为模板,采用RT-PCR技术,对TMV云南分离物（TMV-YN）的外壳蛋白（Coat protein,CP）基因及3’端非编码区和CMV云南分离物（CMV-YNa）的CP基因进行了cDNA克隆和序列测定。结果表明,TMV-YN的cDNA全长684个碱基（EMBL登录号为AJ239099）,通过GenBank进行同源性比较发现：其5'端的480个碱基为CP基因,编码159个氨基酸;3'端的204个氨基酸为非编码区;此CP基因与TMV-U1株系和TMV韩国普通株系核苷酸同源性均为100%。CMV-YNa的CP基因全长657个碱基（EMBL登录号为AJ239098）,编码218个氨基酸;此CP基因与CMV亚组 I 的CMV-RB株系、CMV-117F株系和CMV-Y株系的核苷酸同源性分别为96%、93%和92%。     

壳寡糖席夫碱对烟草花叶病毒的诱导抗性

以壳寡糖与不同取代基的水杨醛为原料合成5种壳寡糖席夫碱,其结构经紫外、红外光谱确认,以50、100、200 μg/mL 3个浓度梯度处理心叶烟.结果显示,15种药剂对烟草花叶病毒具有显著的抑制效应,其中100 μg/mL3,5-二氨水杨醛壳寡糖席夫碱和200μg/mL 5-氯水杨醛壳寡糖席夫碱的效果最好,抑制率分别为(73.29±5.33)％、(71.50 +7.21)％.     

烟草花叶病毒诱发抗性的研究

用烟草花叶病毒（ＴＭＶ）接种过敏性寄主枯斑三生烟或心叶烟的半叶或下部两叶，可诱导出未接种的另半叶或上部叶对ＴＭＶ再次感染的抗性，诱发接种后７ｄ用ＴＭＶ进行攻击接种，所产生的枯斑直径明显小于对照。诱发抗性最早在诱发接种后３～４ｄ被检测到，第７ｄ左右达到高峰，温度对诱发抗性的产生有很大影响。诱发接种叶上部的未接种叶因叶位不同，其抗性强弱也不同。经ＴＭＶ诱发后的心叶烟可表现出对ＴＭＶ和ＣＭＶ两者的抗性，在攻击接种ＣＭＶ后，潜育期比对照延长１～２ｄ．     

河北省侵染红小豆（Phaseolus angulavis wight）的黄瓜花叶病毒的鉴定

1985年在河北省红小豆主产区红小豆罹病植株上采集了38份标样,从中分离出8502分离物。二年重复鉴定表明,该分离物可以侵染茄科、豆科、藜科等7科31种植物。体外稳定性測定:钝化温度60°—65℃,稀释限点10~(-3)—10~(-4),体外保毒期(室温)1—2天。病毒可通过摩擦接种传毒。并由桃蚜做非持久性传播。该分离物和黄瓜花叶病毒抗血清呈阳性反应。电镜下病毒形态为球状粒体,大小30nm。根据上述性状判断,8502分离物属于黄瓜花叶病毒(CMV)。用琼脂双扩散法检测该病毒在田间自然感染率约为12.7％—36％。可以认为黄瓜花叶病毒是红小豆病毒病的主要病毒种类之一。     

烟草花叶病毒系统诱发抗性的研究

用烟草花叶病毒诱发接种4种枯斑寄主:心叶烟、三生NN烟、珊西NC烟和蔓陀罗,可使接种植物对烟草花叶病毒、烟草蚀纹病毒及马铃薯X病毒的侵染表现很强的诱发抗性.这种抗性主要表现为处理的枯斑直径及枯斑数目比对照减少50%～75%.诱发抗性具有非特异性和广谱性.抗性在诱发接种后2～4天开始出现,7～8天达到最高抗性水平,且至少保持25天以上.