蛋白质凝胶电泳方法的几点改进

蛋白质凝胶电泳方法在杂交玉米纯度室内鉴定中与其他方法相比具有省时快速、简单易行、准确及电泳谱带分辨率高等优点。但是在操作中 ,尤其样品数量比较多时 ,该方法仍然有一些不足之处。通过我们这几年的大量实践 ,对该方法做了以下改进。1　凝胶贮存寿命的延长1.1　凝胶聚合原理 :我们知道 ,聚丙烯酰胺凝胶的聚合机理是 H2 O2 - Fe SO4 - Vc氧化还原体系引发的自由基聚合反应 ,即通过 H2 O2 与 Fe SO4 Vc进行氧化还原反应时产生足够数量和具有较高活性的游离基 ,引发丙烯酰胺和双丙烯酰胺进行链式聚合反应。当氧化剂 H2 O2 或还原…     

利用蛋白质凝胶电泳方法检测玉米种子纯度时需要注意的几个问题

1．1 电泳槽的选择。实际操作中发现,该方法应统一使用郑州粮食学院提供的电泳槽,“方案”中提到的北京六一厂生产的长20夹心式电泳槽进行电泳时,谱带的迁移距离拉不开,对有些品种无法判定,同时还经常出现粘板现象,用六一厂提供的配方处理后,玻璃板也只能用1～2次。     

玉米蛋白质凝胶电泳中易出现的问题分析

玉米盐溶蛋白电泳法是快速鉴定玉米种子纯度的一种方法。其原理是从玉米种子中提取盐溶蛋白在聚丙烯酰胺凝胶的浓缩效应、分子筛效应和电泳分离的电荷效应作用下．得到良好的分离．通过染色显示蛋白质谱带类型。不同玉米品种,由于遗传组成的不同,种子内所含的蛋白质种类有差异．这种差异可利用电泳图谱加以鉴别．     

蛋白质凝胶电泳操作中应注意的几个问题

蛋白质凝胶电泳操作中应注意的几个问题内蒙古自治区种子管理站（呼和浩特０１００１０）傅晓华内蒙古自治区赤峰市种子管理站（０２４０００）张学军蛋白质凝胶电泳是一项快速而又准确的生物技术,但受仪器设备、人员素质和药品配制等因素的影响,同一实验室中做同一个样...     

玉米盐溶蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳谱带分析

玉米盐溶蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的工作原理,是从玉米种子中提取的盐溶蛋白在聚丙烯酰胺凝胶的浓缩效应、分子筛效应和电泳分离的电荷效应作用下得到良好分离,通过染色显示蛋白质谱带类型;根据分子遗传学的理论,     

玉米盐溶蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳中常见故障的分析及解决办法

玉米盐溶蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的工作原理,是从玉米种子中提取的盐溶蛋白在聚丙烯酰胺凝胶的浓缩效应、分子筛效应和电泳分离的电荷效应作用下得到良好分离,通过染色显示蛋白质谱带类型.根据分子遗传学的理论,遗传信息的转移是遵守DNA→RNA→蛋白质这样的中心法则的,遗传信息在不同的大分子之间的转移都是单向的,不可逆的,只能从DNA到RNA(转录),从RNA到蛋白质(翻译).不同的玉米品种具有不同的遗传物质,那么种子内也就具有不同的蛋白质,不同的蛋白质其所带电荷不同,电泳谱带也就不同,通过对电泳谱带的分析达到对种子的真实性和品种纯度的鉴定.     

玉米蛋白质凝胶电泳应注意的问题

聚丙烯酰胺凝胶电泳是目前快速、准确测定玉米品种真实性和种子纯度的一种新方法.其原理是利用不同玉米品种籽粒所含同工酶或蛋白质大小不同,经提取在一定的pH条件下所带电荷的多少不同,形态不同,在电场作用下移动速率快慢不一致,经过一段时间的电泳,使性质相同的蛋白质移动到一起,性质不同的蛋白质得以分离,经染色形成不同的品种谱带.由于受多种因素影响,检验结果常出现误差.现就电泳检测中易出现的问题及相应对策总结如下:     

棉纤维发育突变体胚珠全蛋白及种子水溶性蛋白SDS凝胶电泳分析

 利用饱和酚法提取了棉纤维发育突变体胚珠的全蛋白以及种子水溶性蛋白,比较分析了不同发育时期棉花胚珠蛋白含量的变化。通过对野生型和纤维突变体全蛋白的SDS凝胶电泳图谱的比较分析,在二倍体棉种的突变体及其野生型间找到了三条可能与表皮细胞分化相关的差异蛋白条带,在种子水溶性蛋白中则发现了五条差异条带,为进一步研究与棉纤维分化相关的分子机制提供了参考。     

蛋白质凝胶电泳技术在玉米种子纯度鉴定中的应用

文章围绕玉米蛋白质凝胶电泳技术,从方法鉴定、操作技术、结果相关比较及存在问题等四个方面进行了重点阐述。分析了该方法鉴定玉米种子纯度的可行性和可靠性,结合实践较详细地介绍了主要操作技术及常见问题的处理,还对相对标准谱带的建立及正确识别方法作了比较详尽的说明,;通过试验资料的分析,发现玉米电泳测定纯度与田间纯度之间存在着极显著的正相关关系,并对电泳测纯技术应用中存在的问题,提出了解决途径。     

黑木耳制种过程中经常出现的问题及对策

1母种培养基经常出现的问题 1．1母种培养基摆斜面后凝固性差甚至不凝固 母种培养基中起凝固作用的是琼脂，出现这种现象的原因和解决方法如下：     

聚丙烯酰胺凝胶电泳法对导入后代重组个体的检测

组蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,应用于验证和检测试材的DNA导入情况,通过观察导入后代与供体DNA的共同和差异谱带,来筛选含供体特异DNA谱带的导入后代。这项技术的研究是外源遗传物质导入育种技术不可缺少的一部分。     

浅析黄秋葵制种过程中存在的问题及解决途径

黄秋葵栽培广泛,具有一定的药用和保健功能,经济效益高,然而黄秋葵制种产量和工作效率较低,制约了其进一步的发展。对黄秋葵在制种过程中存在的问题进行探讨,并提出解决的途径。     

聚丙烯酰胺凝胶制备及电泳中常见问题及克服方法

种子纯度是衡量杂交种子质量的主要指标,纯度低的种子给农业生产带来严重的损失。传统纯度鉴定多采用大田形态鉴定法,但它周期长、工作量大,有时无法及时满足经营工作的需要。近年来,生化标记和DNA分子标记技术得到日益广泛的应用,都是借助于聚丙烯酰胺凝胶电泳将具有品种特异性的谱带分离出来,进而判定纯度和真实性,具有速度快、时间短等优点,但电泳技术的熟练程度直接影响到电泳谱带的清晰度与分辨率。     

玉米苗期经常出现问题的原因及对策

承德地区是春玉米种植区,目前因当地的种植习惯和种植方式不当经常会使苗期出现各种问题。如种肥种类选用不当;使用劣质化肥;有机肥发酵不完全或没发酵;种肥不分离等原因造成烧芽或烧苗现象,若遇上春季雨水少,烧苗会更加严重。还有一些经营农资的个体户和农民科技知识缺乏,乱售、乱指导、乱用化肥,导致玉米苗期出现问题也较多。另外在除草剂施用过程中施用时期不准确或选用除草剂种类不当经常会出现除草剂药害问题。上述原因常常给玉米生产带来不同程度的损失。     

北疆棉花原种生产中存在的问题及解决途径

目前,北疆棉区种植两大类型品种：第一类型是新疆自育的不抗黄枯萎病的特早熟棉花品种。第二类型是在病区和病势严重的地块种植中棉所育出的品种和辽棉所育出的品种。两大类型的多品种在同一棉区种植,严重影响了一地一种区域化种植的格局,给原种生产与良种推广带来困难。为使北疆棉区适应市场需要,棉花生产从数量型转向质量型,必须加强种子管理,严格引种程序,抓好原种生产,实施一地一种,区域化种植,是当前以原种生产为龙头,提高棉花品种的重大举措。     

浅析韩城市大豆生产中存在的问题及解决途径

大豆是人们的生活必需品和养殖业主要饲料来源之一,区域大豆在生产上存在种植规模小、管理技术粗放、科技含量低、种植效益差及豆产品加工滞后等问题,应因地制宜优化品种布局,推广因种集成配套栽培技术,适度扶植豆制品加工企业生产规模,开发和延伸大豆产业链,为区域大豆产业发展提供参考。介绍了韩城市大豆生产现状及存在的问题,并提出了相应的解决途径。     

两系法杂交水稻种子生产中存在的问题及解决的途径

本文简述了利用光温敏核不育系的两系法杂交水稻生产应用状况及其优缺点，论述两系法杂交水稻种子生产中存在的问题，着重对其解决的途径进行了探讨。     

蛋白质电泳法检验玉米种子纯度常见闻题分析

玉米蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳法是指利用电泳技术对备检样品的种子或幼苗的蛋白质进行分离、染色,形成蛋白质电泳谱带的差异,并与标准品种相比较,从而鉴定品种的真实性和纯度的一种方法。不同作物品种的基因不同,基因的直接表达产物——蛋白质在种类、数量、结构等方面也不同。该法即是利用蛋白质的多态性来反映不同品种DNA组成上的差异,从而进行品种鉴定。该法快速、可靠,不受环境影响。     

对玉米DNA指纹分析中有关问题的探讨

总结了在进行玉米DNA指纹分析中,通过系统试验筛选SSR核心引物的原理与方法,指出正确的识读与统计PCR扩增带纹是生物技术操作的基本功。讨论和分析了对品种纯度检测、同一性分析和亲子鉴定中存在的概念性错误。简要地叙述了玉米品种DNA指纹分析所涉及的三个不同技术范畴的基本原理。