台湾桤木花粉生活力的测定方法初探

【研究目的】探讨台湾桤木花粉萌发的适宜培养基组成、培养温度及台湾桤木花粉生活力的快速测定方法。【方法】以台湾桤木新鲜花粉为试材,采用花粉离体培养萌芽法及TTC染色法、I2-KI染色法、过氧化物酶沉淀法等方法进行研究。【结果】台湾桤木花粉离体培养的适宜培养液为：10%蔗糖+100mg/L硼酸;最适培养温度为25℃。过氧化物酶沉淀法是快速测定台湾桤木花粉生活力的适宜方法。【结论】蔗糖和硼是台湾桤木花粉萌发的必要条件     

紫花鸢尾花粉萌发及贮藏性研究

以紫花鸢尾的花粉为试材,运用正交试验设计方法,研究了不同培养基对其萌发的作用,同时探讨不同贮藏条件和贮藏时间对花粉生活力的影响。结果表明：（1）紫花鸢尾花粉在200 g/L蔗糖+ 300 mg/L H3BO3 + 200~300 mg/L CaCl2的液体培养基上萌发率最高,为81.55%。（2）干燥条件有利于紫花鸢尾花粉的贮藏,且硅胶为适宜的干燥剂。（3）随着贮藏时间的延长,紫花鸢尾花粉生活力下降,但随着贮藏温度的降低,花粉生活力下降速度变缓,在-196℃下保存270天后的花粉萌发率为84.21%,与新鲜花粉生活力差异不显著。     

适宜水稻花粉萌发的液体培养基的优化

花粉萌发率是检测花粉活力的一个重要指标,但实践中还缺少便捷、可靠的水稻花粉萌发率测定方法。本研究在前人研究基础上,采用液体培养基对相关培养条件进行了优化。结果表明,采用155g/L蔗糖+20mg/L H3BO3+40mg/L CaCl2+5 mg/L VB1相配合的培养基较适合两系杂交中稻两优818花粉的萌发,萌发率最高可达63.78%。此外,该培养方法具有培养条件要求不高、发芽结果稳定性好、培养基分布均匀等优点。     

肉果秤锤树花粉活力测定方法

本研究以离体培养萌发法为参照,从TTC法、I2-KI法、过氧化物酶沉淀法和醋酸洋红法4种方法中筛选出适宜快速测定肉果秤锤树(Sinojackia sarcocarpa L.Q.Luo)花粉活力的方法。结果表明:肉果秤锤树花粉离体培养萌发的最适条件为23℃培养下15%蔗糖、0.01 mg/m L硼酸,萌发率达84.85%;过氧化物酶沉淀法、TTC法、I2-KI法和醋酸洋红法测定的萌发率分别为78.45%、0、100%和37.01%。过氧化物酶沉淀法测定结果与离体培养萌发法的测定结果最接近(p0.01),是简单快速测定肉果秤锤树花粉活力的最适方法。本研究筛选出的花粉离体培养萌发条件和花粉活力快速测定方法,可为进一步开展肉果秤锤树育种工作提供理论依据与技术支持。     

茶树花粉离体萌发条件优化及活力快速检测

以福鼎大白茶(Camellia sinensis cv.Fuding-dabaicha)花粉为研究对象,考虑不同浓度的蔗糖、硼酸、硝酸钙,采用正交试验设计优化茶树花粉离体萌发培养基;通过离体萌发法、TTC染色法的对比,探讨茶树(C.sinensis)花粉活力的快速测定方法。结果表明,硼酸是影响茶树花粉离体萌发效果的主要因素,而不同浓度蔗糖的影响差异不显著,茶树花粉离体萌发最佳培养基为150g/L蔗糖+150mg/L硼酸+100mg/L硝酸钙。离体萌发法和TTC染色法测定茶树花粉活力进行比较,2种方法得到茶树花粉活力最佳分别为90.04%、83.17%,且差异不显著。因此,花粉离体萌发法和TTC染色法都可用于测定茶树花粉活力,10g/L TTC用于快速检测茶树花粉活力效果最佳。     

茉莉花粉离体培养萌发及花粉管生长特性研究

为了揭示茉莉花粉育性并为其活力检测提供一种高效方法,研究了取粉时间、基本培养基种类及不同添加物浓度、pH值、温度、光照、时间等因素对花粉离体培养萌发和花粉管生长的影响,并应用扫描电子显微镜观察了花粉在柱头上的萌发情况,以对检测方法进行验证。结果显示,早上8：00-9：00所取花粉活力最高,适宜萌发的培养基为BK（成分为100 mg/L的H3BO3、100 mg/L的KNO3、200 mg/L的MgSO4·7H2O和300 mg/L的Ca（NO3）2·4H2O）＋蔗糖80 g/L＋PEG4000120 g/L,适宜的pH值6．0,最佳培养温度为25～30℃、光照为35～50μmol/（ m2· s）、时间为3～4 h。相关性分析发现,花粉萌发和花粉管生长均与光照强度和培养时间呈极显著正相关（P＜0．01）,与培养基pH值呈正相关、与蔗糖和PEG4000浓度均呈负相关、与培养温度分别呈负相关和正相关,但相关性均未达显著水平（P＞0．05）。研究表明,茉莉花粉总体上活力较低,离体培养萌发不失为一种简单、快速、可靠的检测方法,但应注意对培养条件的选择和优化以达到最佳效果。     

培养基pH值及蔗糖、硼酸、PEG-4000对百香果花粉体外萌发的影响

为明确培养时间、培养基pH值、蔗糖、硼酸、PEG-4000对百香果花粉离体萌发的影响,筛选出花粉体外萌发的适宜条件、优化液体培养基组分,本研究以'台农一号'百香果花粉为材料,采用液体培养基离体培养的方法,开展单因素及正交试验,并用'台农一号'及'黄果'百香果的花粉验证了最适宜培养基的萌发率.结果 显示:培养时间、培养基pH值、蔗糖、硼酸、PEG-4000对花粉萌发率及花粉管生长均有显著的影响.培养时间为4h,培养基pH值为5.5时萌发率最高,蔗糖、硼酸、PEG-4000为百香果花粉离体萌发的必需物质,适当的浓度可促进花粉萌发及花粉管的生长,但浓度过高起抑制作用,因素间存在明显的互作效应.百香果花粉离体萌发的最佳培养基为:150 g/L蔗糖+150 g/L PEG-4000+25 mg/LH3BO3+300 mg/L Ca(NO3)2·4H2O+200 mg/L MgSO4·7H2O+ 100 mg/L KNO3,'台农一号'百香果及'黄果'百香果花粉在该培养基中的离体萌发率分别为95.99％及92.35％.本研究筛选到的适宜百香果花粉体外萌发的培养条件及萌发率高的液体培养基,为生产及杂交育种中的人工授粉及百香果孢粉学研究提供参考.     

银杏花粉生活力测定及贮藏方法的优化

以银杏花粉为试验材料,研究了花粉在离体培养条件下,培养基中蔗糖、硼、钙对其萌发率的影响,优化了培养基配方;并比较了3种不同的染色法对银杏花粉生活力的测定效果。结果表明：培养5d是进行花粉萌发率测定的最佳时期,蔗糖对银杏花粉萌发至关重要,在培养基中添加3%蔗糖可有效提高花粉萌发率,达到50%左右;硼和钙对银杏花粉萌发有一定的促进作用,最佳培养基配方为蔗糖3%＋硼60mg/L＋钙100mg/L。TTC染色法测定的银杏花粉生活力与离体萌发法测定的结果可以相互代替和印证,是一种较为准确的测定银杏花粉生活力的染色法。4℃冰箱干燥保存利于保持银杏花粉生活力。     

黄刺玫花粉离体萌发的特性

为明确黄刺玫的花粉萌发特征,采用花粉离体培养法,研究蔗糖、H_3BO_4、CaCl_2、NAA、GA浓度及培养温度、采集时间、贮藏方式对黄刺玫花粉萌发的影响。结果表明:培养温度、培养基中蔗糖、H_3BO_4、CaCl_2、NAA、GA浓度均显著影响黄刺玫花粉萌发,一天中不同的采集时间和不同的花粉贮藏方式黄刺玫的花粉萌发率不同。在25℃、15%蔗糖的培养基上萌发效果最好,花粉萌发率达67.51%。基本培养基上分别添加H3BO4150 mg/L、CaCl_2 20 mg/L、NAA 20 mg/L、GA 20 mg/L时花粉萌发率较高。在室温带花、室温离体、0℃~2℃带花、0℃~2℃离体4种条件下贮藏花粉,5 h、10 h后培养,各处理间差异不显著,但在室温下,带花贮藏比离体贮藏效果好;0℃~2℃下,离体贮藏比带花贮藏的萌发率高。花粉于10:00~14:00时段采集较好,12:00时采集萌发率最高。本试验探讨不同条件对黄刺玫花粉萌发的影响,为其杂交育种及理论研究提供依据。     

水稻花粉的离体萌发

选出适合于水稻花粉萌发的液体培养基： 20%蔗糖+10%PEG4000+40 mg.L-1H3BO3+3m mol/L Ca(NO3)2+10 mg.L-1VB1, 得到80%的萌发频率。 离体萌发时, 花粉管生长很快, 在30 min内可达700 μm。 最适萌发的温度范围较宽, 27～33℃都可以得到较高的萌发频率。