一种适用于动物与植物总DNA提取的方法——改良CTAB法

关于动物和植物基因组DNA的提取方法国内外有很多报道,但同一方法通常只能较好的从动物或植物提取总DNA。在前人报道的基础上,该研究对常用的CTAB法进行了适当修改,获得了一种从动物和植物中均能有效提取DNA的方法。     

改良CTAB法提取野牡丹科7种植物DNA

以野牡丹科植物幼叶为材料,对影响野牡丹科植物DNA提取质量的主要因子进行研究,以期建立适宜野牡丹科植物DNA提取的优化反应体系.结果表明,当提取液中CTAB浓度为4％,沉淀时加入0.6体积的预冷异丙醇、1/2体积的5mol/L氯化钠及2倍体积的无水乙醇时,所提取到的DNA纯度较高,电泳条带清晰.且在此条件下,能提取出野牡丹科7种植物的DNA.     

改良CTAB法提取野牡丹科7种植物DNA

以野牡丹科植物幼叶为材料,对影响野牡丹科植物DNA提取质量的主要因子进行研究,以期建立适宜野牡丹科植物DNA提取的优化反应体系。结果表明,当提取液中CTAB浓度为4％,沉淀时加入0．6倍体积预冷异丙醇、1／2倍体积5mol／LNaCl、2倍体积无水乙醇时,所提取的DNA纯度较高,电泳条带清晰。且在此条件下,能提出野牡丹科7种植物的DNA。     

改良CTAB法提取菠萝DNA

采用改良CTAB法提取菠萝叶片叶基、叶尖和叶中部及幼根等部位的DNA,各个部位DNA的OD260／OD280比值为1．72～1．88;OD260／OD2301．45～2．11;提取产量为5．584—24．325μg／g（鲜重）;各个部位DNA提取产量大小排序为：叶基、心叶〉叶中部、叶尖〉幼根。本方法提取的菠萝DNA质量较高,可用作于SRAP分析。     

适于植物愈伤组织DNA提取的改良CTAB法

本文介绍了一种提取植物愈伤组织DNA的改良CTAB方法。这种方法根据植物愈伤组织的特点,通过在提取液中加入PVP、将提取液加入样品中研磨、以氯仿/异戊醇代替酚/氯仿/异戊醇等措施获得质量较高的基因组DNA,以此为模板进行PCR扩增可检测到清晰的目的片段,说明提取的DNA可以用于一般的分子生物学实验。     

采用CTAB法快速提取植物DNA

<正> 植物 DNA 的提取是植物 DNA 分子生物学常用的技术手段,其提取效率和质量直接关系到分子测定的结果。本人在北京农业大学进修期间,参照 CTAB 法多次提取植物DNA,其快速简便值得从事植物分子生物学研究者借鉴。现介绍如下:     

改良CTAB法提取鸢尾属植物DNA

鸢尾属植物中酚类、多糖含量较高,DNA提取较为困难。在前人工作基础上,改进了提取植物DNA的CTAB方法,通过延长水浴时间、氯仿/异戊醇(24∶1)2次抽提、适当延长氯仿/异戊醇与提取液接触时间等一系列改进,简化了提取步骤,大大缩短了提取时间。所提取的DNA纯度高,可满足以PCR扩增为基础的试验需要。     

改良CTAB法提取益智基因组DNA

益智叶片中多酚和多糖等杂质的含量较高,为获得高质量的益智基因组DNA,试验在传统CTAB法的基础上加以改良,提取益智基因组DNA,并对所得DNA的质量和浓度进行了检测。结果表明,改良后的方法较之传统方法简单高效,所获得的基因组DNA质量较好,OD260/OD280在1.7~2.0之间,RNA消化彻底,DNA无明显降解,进行ISSR分析条带清晰,多态性好。适合于进行以PCR为基础的DNA多态性的研究。     

改良CTAB法提取薰衣草基因组DNA研究

[目的]寻找高效、快速的薰衣草（Lavandula pedunculata）基因组DNA提取方法。[方法]通过改良CTAB法提取薰衣草3个品种的基因组DNA。[结果]经检测,所提样品OD260/OD280值在1.85左右,得率为454.50～1 093.35μg/ml,电泳条带清晰,无明显的拖尾现象;Eco RI酶切基因组DNA图谱表明,提取的DNA能被限制性内切酶完全酶切;以提取的DNA为模板,用1对随机引物进行RAPD-PCR,发现检测条带清晰,说明获得的DNA质量较高,可以满足相关的分子生物学研究需要。[结论]该研究可以为薰衣草分子生物学的后续试验的开展奠定理论基础。     

利用改良CTAB法提取淮山叶片高质量DNA

[目的]为淮山的分子生物学研究奠定基础。[方法]以淮山嫩叶为试材,用改良CTAB法提取其中的DNA,并通过琼脂糖凝胶电泳和ISSR—PCR扩增对所得DNA的质量和浓度进行检测,考察该方法对DNA的提取效果。[结果]所提取DNA的分子量与λDNA相近,各泳道均出现1条清晰的DNA条带,且条带的完整性较好,无蛋白质和RNA污染,无DNA降解现象;以所提DNA为模板进行ISSR-PCR扩增,可获得稳定的扩增条带。[结论]改良CTAB法简单高效,所得DNA质量较高,RNA消化彻底,DNA无明显降解,进行ISSR分析时,务带清晰,多态性较好。     

改良CTAB法提取大戟属药用植物叶片总DNA试验

由于大戟属(Euphorbia Linn)植物叶片中含大量的多糖、酚类等次生代谢物质,严重影响总DNA的提取,因此,以大戟属药用植物叶片为材料,对常用的CTAB(Hexadecyltrimethy ammonium bromide)法进行了改良,并通过琼脂凝胶电泳法对所提DNA样品进行了检测.结果表明,改良CTAB法提...     

改良CTAB法对西南牡丹总DNA提取工艺的优化

为筛选适宜西南牡丹品种基因组DNA的提取方法,通过4因素3水平的正交试验,对提取牡丹基因组DNA的CATB法进行优化。结果表明:提取西南牡丹品种DNA改良的CTAB法的最佳配方为2%的CTAB、2%的PVP、0.5%β-巯基乙醇,三氯甲烷和异戊醇(24∶1)抽提2次,在此条件下,提取的基因组DNA浓度在712.0～780.5ng/μL,A260/A280比值在1.812～1.823,DNA条带清晰,无拖尾现象。说明,利用该改良的CATB方法,可获得高纯度的牡丹DNA。     

改良CTAB方法快速提取小麦基因组DNA(英文)

[目的]旨在寻求一种微量、快速提取小麦DNA的方法。[方法]以小麦幼叶为材料,分别用改良CTAB法、改良SDS法和沸水浴法提取小麦叶片总DNA,通过琼脂糖凝胶电泳法、紫外吸收法和PCR检测DNA完整性和纯度。[结果]改良CTAB法提取的小麦基因组DNA质量和纯度高、无降解,每人每天可以轻松提取200个DNA样品,对转基因植株的PCR检测显示扩增目标条带清晰一致,无假阳性,试验结果理想。改良SDS法所提DNA纯度和浓度虽略不如改良CTAB法,但仍然符合实验要求。沸水浴法提取量少且杂质多,PCR无有效扩增,结果不理想。[结论]改良CTAB法提供了一种简便、快速微量小麦DNA提取方法,适用于PCR和其他分子生物学研究。     

利用改良CTAB法提取卷丹百合鳞叶基因组DNA

为了获得高质量卷丹百合鳞叶基因组DNA,在传统CTAB法的基础上进行了改良和优化,筛选出较理想的DNA提取方法.结果表明:用改良CTAB法提取的卷丹百合鳞叶基因组DNA电泳条带清晰,无降解现象,D260 nm/D280 nm为1.6 ～1.9,用于ISSR-PCR扩增时其稳定性和可重复性都很好,说明DNA纯度和产率完全满足PCR扩增分析的要求.     

用CTAB法提取苎麻总DNA试验

用CTAB法提取了苎麻总DNA ,考虑到苎麻中酚类、黄酮类等次生代谢物质多的特点 ,在提取液中加入了一定浓度的PVP和 β -巯基乙醇 ,从而获得了高分子量的DNA。经实验鉴定 ,其纯度符合分子遗传实验的要求     

改进的CTAB法提取盐生植物基因组DNA

用改进的CTAB法提取猪毛菜、碱蓬、骆驼蓬、骆驼蹄瓣和柽柳5种盐生植物基因组DNA,通过与常规的CTAB法提取结果相比发现,改进的CTAB法从提取速度、得率、质量上都优于常规的CTAB法,并总结出一套适用于盐生植物的快速高质量基因组DNA的提取方法。     

一种适用于动物与植物总DNA提取的方法——改良CTAB法(英文)

[Objective] The study aimed to introduce a rapid and effective method that is suitable for extracting genomic DNA from animal and plant. [Method] The genomic DNAs were extracted from tender leaves of 24 peanut cultivars and from the liver,lung and kidney of white mouse through the specifically modified CTAB method. The DNAs were run on agarose gel,next detected by DNA/Protein analyzer. Finally PCR amplification was conducted to detect the quality of DNAs extracted using the modified CTAB method. [Result] The clear and orderly bands were observed in gel detection,and the values of OD260/OD280 for DNAs extracted via modified CTAB method were between 1.77-1.83. The DNAs performed well in PCR amplification. [Conclusion] The DNAs extracted by modified CTAB method could satisfy the requirement of PCR amplification.     

改良CTAB法提取核桃总RNA试验

从植物组织中提取高质量的RNA是进行基因克隆和基因表达分析的基础。不同植物的组织由于组成成分的差别,其RNA的提取有不同的难点。本试验针对核桃嫩叶内含物复杂的典型特点,在对比各种提取方法的特点及总结他人研究的基础上改良了CTAB法。此方法提取的核桃嫩叶总RNA的电泳结果可见清晰完整的条带,表明改良CTAB法能有效去除多糖和多酚以及色素等次生代谢物的污染,提取RNA纯度较高、完整性好,易于进行RT-PCR和cDNA文库的构建。此方法简单易行而且所用试剂成本较低。     

2种CTAB法对干燥方法不同的平邑甜茶叶片DNA的提取

分别采用S.Wilkie的CTAB提取方法及在此基础上进行了改良的CTAB法,以硅胶干燥、标本干燥和新鲜的平邑甜茶叶片为材料,提取出平邑甜茶基因组DNA,并进行DNA质量的检测。结果表明,利用改良的CTAB法能够获得较高质量的DNA,新鲜叶片中提取的DNA量最多,经过硅胶干燥的叶片提取的DNA比标本干燥的叶片多。     

一种改良的棉花总DNA提取方法

为了获取高质量的棉花基因组DNA,进行了后续分子实验,通过对已有的几种DNA提取方法进行综合比较,寻找一套优化的适于棉花高质量DNA的提取方法。结果表明,优化的棉花基因组DNA提取方法所提取的DNA纯度高,无降解现象,适用于进行常规PCR扩增以及进行高精度要求的SSR扩增。