禽副粘病毒2型Yucaipa标准株F基因的克隆和序列分析

根据从GenBank上查到的PMV-2型Yucaipa株F基因序列——D13977序列，设计特异性引物，从禽副粘病毒2型Yueaipa标准株成功地克隆了F基因全编码序列。所测的核苷酸序列大小为1654bp，编码一个含536个氨基酸残基的多肽(未加工前)，分子量约为55．75kDa。裂解位点在F基因的第98和第99个氨基酸残基之间，F2蛋白羧基端裂解位点区的氨基酸残基序列为Lys-Pro-Ala-Ser-Arg。F基因序列同源性比较结果表明本研究所测的序列是PMV-2型F基因序列，并进一步证实了副粘病毒2型与分离自猴的Murayama病毒在系统进化上有非常紧密的关系。     

ZJH92—1型,ZJH92—2型烘茧灶

ＺＪＨ９２－１型和ＺＪＨ９２－２型烘茧灶是浙７３－１型烘茧灶的改进灶型。文中对新旧灶型的性能和蚕茧干燥质量进行了较全面的测试。测试数据表明，用新灶型替代老灶型，经济效益明显提高。     

新城疫F－Ⅶ型－－鹅源禽副粘病毒灭活疫苗的研制与免疫效力试验

用GPV-SF02株作为抗原液,经福尔马林灭活后,与油佐剂混合,制成SF02灭活疫苗。同时将ND灭活疫苗、ND弱毒疫苗和SF02灭活疫苗按不同剂量分别免疫川白鹅和AA鸡,结果用1羽份SF02灭活疫苗免疫的鹅与鸡,能100%抵抗SF02株和F48E9株的攻击;用1羽份ND灭活疫苗免疫的鸡能100%抵抗F48E9株的攻击,而免疫的鹅对F48E9株的抵抗力为60~80%;用1羽份ND弱毒疫苗免疫的鹅,其保护率在0~50%,免疫的鸡则有100%的保护率。     

9SA—400型移动式饲草氨化机

随着人民生活水平的提高,牛羊肉的消费量迅速增长,我国广大山区、半山区的养羊业正在迅速发展,其规模大多为中小型。由于远离市区很多地方无三相电供给。因此广大养殖户急需一种体积小、重量轻、操作简便、耗电少、一机多用的饲料加工机械。针对这种情况,山东省荣成市华兴机械有限公司近期成功地研制生产了一种新型多功能饲料加工机械——     

对青岛地区4个猪场的猪细环病毒II型的分子流行病学调查

为了解青岛地区各猪场中猪细环病毒II型（TTV2）的存在和感染情况,本实验对2012年3月至5月期间采自青岛地区4个猪场的59份猪血清样品利用病毒核酸提取试剂盒进行了猪细环病毒DNA提取,在此基础上利用TTv2的特异性引物进行PCR检测。结果显示只有莱西1个猪场的血清样品中检测到阳性,阳性率为13．8％,并且存在TTV1与TTV2混合感染的情况,混合感染率为6．9％。本实验结果证实某些猪场中存在猪细环病毒感染,由于TTV在猪的多系统衰竭综合征的病症发展中可能扮演一定角色,所以了解TTV在猪场中的存在状况具有重要意义。     

新型添加剂F89Ⅱ型和Ⅲ型饲喂育肥猪的试验

F89为苯二氮卓化合物,是一种生理调节剂,能够刺激畜禽下丘脑食欲中枢,增强神经递质活性和胃肠激素分泌,促进食欲,提高饲料摄食量,改善营养成分的消化吸收过程,增强代谢水平,从而提高生长速度和饲料转化率,改善肉质.     

南非II型口蹄疫间接ELISA检测方法的建立

为满足口岸对南非II型口蹄疫检测、监测的需求,在对南非II型口蹄疫抗原表位分析及相关基因合成的基础上,进行融合蛋白pGEX—VP1-VP3的体外表达,采用柱上酶切方法制备VP1-VP3蛋白。将纯化VP1-VP3抗原包被96微孔板,分别优化抗原包被浓度、血清稀释度、酶标二抗稀释度,确定阴性临界值。经反复优化,建立的南非II型间接ELISA检测方法的最佳抗原包被浓度为6．4ug／ml,血清最佳稀释度为1：200,酶标二抗最佳稀释度为1：4000,阴性临界值（0D450）为0．562。检测样品判定标准为：OD450〉0．622为阳性,OD450〈0．502为阴性,0．502≤OD450≤0．622为可疑。特异性试验结果表明,所建立方法与其它血清型口蹄疫间无交叉反应。南非II型口蹄疫间接ELISA检测方法的建立为我国口岸口蹄疫检疫提供了新的查验方法。     

犬腺病毒I型和II型TaqMan双重荧光定量PCR方法的建立

为鉴别检测犬腺病毒（CAV）I型和II型,根据GenBank中CAV-I和CAV-II型参考基因序列,设计合成1对通用引物和2条鉴别探针,建立了可鉴别检测CAV-I型和CAV-II型的双重荧光定量PCR检测方法。同时,对该方法进行了优化,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行了试验,并与普通PCR检测方法进行样品检测符合率分析。特异性试验结果显示;本研究建立方法对犬瘟热病毒、犬副流感病毒、犬冠状病毒均未产生扩增曲线。敏感性试验结果显示,建立方法对CAV-I的检测敏感度为100 copies/μL,对CAV-II的检测敏感度为10 copies/μL。重复性试验结果显示,组内和组间变异系数均小于5%。临床样品检测对比结果显示,建立方法与普通PCR方法的符合率为95.12%。结果表明,本研究建立的TaqMan双重荧光定量PCR方法具有特异性好、灵敏度高、重复性好等优点,可用于临床鉴别检测CAV-I和CAV-II型。本研究为CAV-I和CAV-II型感染的检测、鉴别以及流行病学调查提供了便捷快速的方法。     

禽副粘病毒2型F4分离株F基因的克隆和变异分析

克隆了分离自七彩纹鸟的禽副粘病毒2型F4分离株F基因的全长,对它的生物特性进行了较为详细的研究,并试图通过与标准株Yucaipa株进行全面的比较,探讨该变异株的变异情况.研究结果表明:在电镜形态结构上,这两个毒株没有明显的差异;而血凝抑制交叉反应以及F基因序列同源性比较、疏水性和预测的二级结构比较分析显示它存在一些较为重要的变异,这对于禽副粘病毒2型病毒的流行病学分析有着重要的意义.     

鸽Ⅰ型副粘病毒的RT—PCR套式PCR检测方法的建立

对3个中国广东的鸽Ⅰ型副粘病毒分离株（P4，P5和P7）基因组RNA以反转录－聚合酶链反应法（RT－PCR）扩增了F基因75％的基因区域（343－1673nt），其中毒株P4和P7准确扩增出预期大小明亮的DNA片段，而P5扩增出片段很淡，用该RT－PCR产物作模板以相同引物再作PCR，结果可以扩增出大小与预期一致的明亮条带，此方法可以快速检测鸽Ⅰ型副粘病毒（PPMV－1）。     

鸡新城疫病毒F基因和鸡IL—2重组DNA疫苗的构建

利用已克隆到的新城疫D26株F基因和鸡IL－2基因，经过载体改建，将他们共同克隆于真核表达质粒pCDNA3上，经酶切分析、PCR鉴定证实成功构建了共表达鸡新城疫病毒F基因和鸡IL－2的重组质粒，为探讨禽类重组基因疫苗的构建及鸡IL－2在基因疫苗中的作用奠定了基础。     

鸽Ⅰ型副粘病毒F基因的序列分析

本研究采用RT-PCR方法成功地获得了3个鸽I型副粘病毒广东分离株(P4、P5和P7的F基因片段。经测序表明，基因片段长度均为1290bp；经序列分析发现，毒株P4与NDV标准株La Sota和C30的同源性最高，达到99．4％；而毒P5、P7与La Sota和C30的同源性相对较低，为83％。从建立的系统发育树可看出，毒株P4与NDV标准株La Sota和C30有很近的亲缘关系，而毒株P5、P7与NDV标准株La Sota和C30的亲缘关系相对较远。