安徽3株柔嫩艾美耳球虫cox1基因部分序列的比对分析

为研究柔嫩艾美耳球虫不同地理株的线粒体细胞色素c氧化酶第1亚基(cox1)基因与球虫种群之间的遗传关系,以安徽3个地区的3株柔嫩艾美耳球虫为研究对象,通过卵囊的分离与纯化获得纯种虫株,然后应用PCR技术对柔嫩艾美球虫3个地理株的cox1序列进行扩增,并与GenBank上登录的鸡柔嫩艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫、布氏艾美耳球虫和堆形艾美耳球虫虫株的相应序列进行比对分析。结果显示,每个虫株都成功扩增出800 bp左右的cox1部分有效序列(pcox1),与柔嫩艾美耳球虫pcox1序列种内无差异,pcox1相应序列种间的差异程度为9.9%～14.9%。表明柔嫩艾美耳球虫的cox1序列可作为艾美耳球虫种间遗传变异研究的标记,为进一步研究艾美耳球虫的群体遗传学特性和耐药性奠定了基础。     

全椒县山羊球虫感染情况及种类的调查

报道了全椒县 15 4只山羊球虫感染的粪便检查情况。检查发现 ,15 4只山羊球虫感染率为 47.40 % ,初步鉴定它们分别属于 7种艾美尔球虫 ,即小型艾美耳球虫 (E .parva)、阿氏艾美耳球虫 (E .arloingi)、浮氏艾美耳球虫 (E .fanrei)、雅氏艾美耳球虫 (E .ninakohlyakimoral)、阿撒他艾美耳球虫 (E .ahsata)、山羊艾美耳球虫 (E .caprina)、错乱艾美耳球虫 (E .intricata) ;并对各种球虫卵囊的大小和形态进行了描述     

乌鲁木齐地区鸡球虫种类调查

本文调查是采用饱和盐溶液浮集球虫卵囊的方法,检查了420只鸡粪样品。对未发育的卵囊和混合于2.5％重酪酸钾溶液中在25℃恒温箱中培养形成孢子的卵囊进行了形态学的观察和量度。发现乌鲁木齐地区有7种艾美耳球虫,它们是柔嫩艾美耳球虫(E.tenella),巨型艾美耳球虫(E.maxima),和缓艾美耳球虫(E.mitis),哈氏艾美耳球虫(E.haani),毒害艾美耳球虫(E.necatrix),基前艾美耳球虫(E.praecox)及堆型艾美耳球虫(E.acervulina)。除了堆型艾美耳球虫由于鸡的感染带虫率低,发现的卵囊较少,只作了一般观察外,其他六种都进行了较详细地观察,并分别描述了各种卵囊的形态。     

陕西某羊场莎能奶山羊球虫分离鉴定及感染情况

对陕西省某羊场莎能奶山羊的球虫感染情况进行调查研究,应用球虫卵囊富集技术,结合形态学方法对采自该场2～12月龄的49份（≤2月龄22份;3～5月龄13份;6～12月龄14份）奶山羊新鲜粪便样品进行球虫卵囊分离,显微镜检测和OPG（Oocysts per gram）统计。结果显示,莎能奶山羊球虫总感染率为98.0%（48/49）,OPG统计发现,3～5月龄羔羊球虫平均OPG最高,为2 442个/g。最高OPG存在于2月龄羔羊样品中,为15 083个/g,且该羊只出现严重腹泻症状。对富集分离到的球虫卵囊进行孢子化和种类鉴定,共鉴定出7种山羊艾美耳球虫。进一步对随机提取的277个孢子化球虫卵囊进行优势虫种统计分析,其中雅氏艾美耳球虫（Eimeiria ninakohlyakimovae）、阿氏艾美耳球虫（E.arloingi）和柯氏艾美耳球虫（E.christenseni）占比最高,依次为17.3%（48/277）、15.9%（44/277）和15.2%（42/277）,是该羊场莎能奶山羊球虫的优势虫种。综上所述,初步明确该羊场莎能奶山羊不仅普遍存在球虫感染,而且存在多种球虫混合感染和致病力较强的优势虫种。     

安徽部分地区鸡球虫种类及感染情况调查

为了解安徽省部分地区鸡球虫种类及感染情况,采用群体采样法分别从肥西县、长丰县和凤台县采集鸡新鲜粪样,用饱和盐水漂浮法检查。阳性粪样采用饱和盐水漂浮和离心沉淀法进行卵囊分离。显微镜下观察卵囊进行虫种鉴定,并统计各调查点的鸡球虫感染率和感染强度等。结果表明,鸡球虫感染率为93.3%(84/90);共检获7种球虫,即:柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)、巨型艾美耳球虫(E.maxima)、堆型艾美耳球虫(E.acervulina)、毒害艾美耳球虫(E.necatrix)、布氏艾美耳球虫(E.brunetti)、和缓艾美耳球虫(E.mitis)、早熟艾美耳球虫(E.prae-cox)。     

无角多赛特绵羊球虫感染情况和种类调查初报

应用饱和盐水漂浮法和麦克马斯特法对河南某种羊场新引进的82只1岁左右无角多赛特绵羊球虫感染情况和种类进行了调查,结果表明:10圈绵羊均感染球虫,感染率28.57%￣100%,平均为84.2%(69/82);多为2￣5种球虫混和感染;平均OPG值为839.03(200￣4200)。共检出11种艾美耳球虫,分别是:韦不理吉艾美耳球虫(Eimeria weybridgensis)、巴库艾美耳球虫(E.bakuensis)、小型艾美耳球虫(E.parva)、类绵羊艾美耳球虫(E.ovinodalis)、颗粒艾美耳球虫(E.granulosa)、槌形艾美耳球虫(E.crandllis)、阿撒他艾美耳球虫(E.ahsata)、浮氏艾美耳球虫(E.faurei)、贡氏艾美耳球虫(E.gon-zalezi)、爱缪拉艾美耳球虫(E.aemula)、苍白艾美耳球虫(E.pallida),其中前4种为优势虫种。用Miaspro图象分析处理系统软件对各种卵囊进行了测量,并进行了显微照相和形态描述。     

新疆北疆部分地区鸡球虫病病原调查及分类鉴定

[目的]调查新疆北疆部分地区鸡球虫病病原分布情况,明确近年来新疆北疆地区鸡球虫病的致病种类情况.[方法]采用定点采样法,从沙湾、石河子、玛纳斯和昌吉等地采集病死禽的肠道直接进行粪便处理和病原学检查,收集新鲜粪样进行鸡球虫卵卵囊分离,进行孢子化卵囊培养和形态学观察,对鸡球虫进行虫种鉴定.[结果]鸡球虫的感染率为100;,共检出6种艾美耳球虫,分别为柔嫩艾美耳球虫(Etenella)、巨型艾美耳球虫(E.maxima)、堆型艾美耳球虫(E.acervulina)、和缓艾美耳球虫(E.mitis)、哈氏艾美耳球虫(E.hagani)、布氏艾美耳球虫(E.Brunetti).其中柔嫩艾美尔球虫、巨型艾美耳球虫和堆型艾美耳球虫为新疆北疆地区鸡球虫病病原的优势虫种.[结论]研究对新疆部分北疆地区的鸡球虫原分布及其构成进行了初步确定,了解其病原水平,从而为该病防治中抗球虫药物的选择及代化用药方案提供必要数据,今后北疆地区预防和控制该病提供依据.     

武汉地区鸡球虫种类的初步鉴定

从武汉郊区多个鸡场采回粪便 ,对艾维茵肉鸡进行感染 ,通过卵囊的实验室鉴定和鸡的病理剖检 ,初步鉴定出武汉地区鸡球虫有 :柔嫩艾美耳球虫 (Eimeriatenella)、毒害艾美耳球虫 (E necatrix)、堆形艾美耳球虫 (E acervulina)、巨型艾美耳球虫 (E maxima)、布氏艾美耳球虫 (E brunetti)、和缓艾美耳球虫 (E mitis)等 6种 ,主要致病虫株为柔嫩艾美耳球虫和堆形艾美耳球虫     

晋东南地区兔球虫种类的初步调查

作者对山西省晋东南地区的兔球虫种类作了初步调查,发现有下列七种和一未定种,并对各种未发育和已发育的球虫卵囊作了显微描图。 1.兔艾美耳球虫 E. stiedae 2.大型艾美耳球虫 E. magna 3.中型艾美耳球虫 E. media 4.无残艾美耳球虫 E. irresidua 5.梨形艾美耳球虫 E. piriformis 6.穿孔艾美耳球虫 E. perforans 7.小型艾美耳球虫 E. exigua 8.艾美耳球虫未定种 E. sp.     

家鹅球虫种类鉴定及国内一新记录种

用卵囊形态特征观察与回归动物试验相结合的方法，对从江苏省昆山市19个鹅群中分离获得的7种球虫进行了种类鉴定，证实6种球虫为家鹅的真实寄生虫，其中艾美耳属(Eimeria)5种：鹅艾美耳球虫(E．anseris)、棕黄艾美耳球虫(E．fulva)、赫氏艾美耳球虫(E．hermani)、有害艾美耳球虫(E．nocens)和条纹艾美耳球虫(E．striata)；泰泽属(Tyzzeria)1种：稍小泰泽球虫(T.parwula)。检出的1种等孢属球虫(Isospora sp)为家鹅的假寄生虫。条纹艾美耳球虫为国内新记录，赫氏艾美耳球虫和棕黄艾美耳球虫为江苏省新记录。19个鹅群均有球虫感染，稍小泰泽球虫、赫氏艾美耳球虫和有害艾美耳球虫为优势种，其感染率分别为89．5％、78．9％和68．4％。     

纯种柔嫩艾美耳球虫的分离培养

用琼脂滴稀释法,对4株柔嫩艾美耳球虫进行单卵囊分离,每株各感染5日龄罗曼公雏5只,结果感染成功率分别为60%,40%,20%,20%,总的成功率为35%,能基本满足后续试验的需要。     

转基因柔嫩艾美耳球虫对生态环境的影响

【目的】从表达M2e-EYFP融合蛋白转基因柔嫩艾美耳球虫的稳定性,及其在环境中的传播能力、竞争能力和存活能力方面,分析转基因球虫对生态环境的潜在风险。【方法】稳定性试验包括:转基因球虫感染非靶动物,观察临床症状和卵囊产出情况;转基因球虫继代繁殖,检测荧光率;转基因球虫与毒害艾美耳球虫混合感染,PCR检测卵囊中的外源基因。传播能力试验主要是分析感染鸡和不感染同居鸡的卵囊产量和荧光率。竞争性试验则是用不同混合比例的2种球虫感染鸡,检测卵囊产量和荧光率;存活能力试验是用不同处理方式的卵囊感染鸡,检测卵囊是否产出以分析卵囊存活能力。【结果】转基因球虫不感染小鼠和家鸽,与野生型柔嫩艾美耳球虫宿主特异性相同;连续繁殖传17代后外源基因稳定表达。与毒害艾美耳球虫混合寄生时在异种球虫体内未检测出外源基因。传播能力试验中,46d攻毒时转基因球虫感染与不感染同居组的卵囊产量差异不显著,但与不感染对照组相比均显著减少,且1∶1感染和不感染同居组卵囊荧光率检测结果维持在51.6%67.9%。竟争性试验中,攻毒时各比例感染组卵囊产量均极显著少于不感染攻毒对照组,荧光率检测结果各比例组变化幅动不大,且1∶1组哨兵鸡卵囊荧光率检测结果为41.2%61%。存活能力试验,转基因球虫与野生型球虫在夏季室温条件下均不能存活90d,且与其他不同方式处理的卵囊外界存活时间接近。【结论】说明转基因球虫具有良好的稳定性,在环境中的传播能力、竞争能力和存活能力未呈现显著优于野生球虫的趋势。     

柔嫩艾美耳球虫卵囊形成的超微结构

对柔嫩艾美耳球虫卵囊形成的超微结构进行了观察。大配子体系由末代裂殖子侵入盲肠上皮细胞后,长大变圆而形成。大配子体发育、大配子形成、受精、卵囊形成均在带虫空泡内进行,大配子体发育过程的早期,微线、棒状体、椎体、极环等组成的顶复合器消失,随之,首先在大配子体内部形成大量的成囊体 2,成囊体 2有电子稀疏的杆状结构组成,成囊体 2为圆形,外被一层单位膜,结构比较明显,但表面不光滑;成囊体 1较成囊体 2形成晚,其组成成分电子结构十分致密,它也呈圆形,而且表面十分光滑,外被一层不明显的膜;在成囊体形成的同时,支链淀粉和脂肪体也逐渐形成;大配子体和大配子外被单位膜,中央有一个细胞核,核仁不十分明显。卵囊壁形成起始于大配子受精以后,成囊体移向被膜,并且集中于被膜下,首先,成囊体 1解聚,在被膜下形成一层卵囊壁,随后,成囊体 2解聚形成又一层卵囊壁,最后,在内部的合子膜形成第五层囊壁,卵囊形成以后,细胞核位于细胞中央,细胞内有大量的支链淀粉和脂肪体     

鸡柔嫩艾美耳球虫单卵囊分离技术的建立

以玻璃纸做材料,用单卵囊分离技术,对柔嫩艾美耳球虫进行了分离,实验室单卵囊感染26只鸡,在感染后5～12d,用饱和盐水漂浮集卵法进行检测,其中10只鸡检出卵囊,结果表明,该单卵囊分离技术简单易行,单卵囊感染成功率达38%,单卵囊技术的关键步骤为:(1)滴管拉的尽量细,(2)滴液尽量小,(3)要耐心观察,(4)实验鸡在0～7日龄。     

鹌鹑角田氏艾美球虫的研究

1987年,作者用粪检法对河北农业大学鹌鹑饲养室的鹌鹑进行了球虫检查,发现有球虫感染,之后,采用单卵囊分离技术获得纯的Eimeria tsunodai球虫,并通过纯种卵囊扩大感染,对E. tsunodai球虫进行了详细观察及描述。     

福清山羊和戴云山羊发情周期内生殖激素分泌规律研究

为了研究福清山羊和戴云山羊发情周期内生殖激素的分泌变化规律,采用Elisa方法检测了2个品种经产母羊整个发情周期内外周血中4种生殖激素(雌二醇、孕酮、促卵泡激素、促黄体激素)的浓度。结果表明,2个品种发情周期内血浆FSH、LH均呈现周期性波动式分泌,福清山羊在发情周期中出现了4次波峰而戴云山羊为5次。2个品种血浆E_2的分泌水平呈现明显的高、低2个分泌时期,2个分泌时期血浆E_2浓度差异达到极显著水平(P0.01),戴云山羊高分泌期的E_2浓度显著高于福清山羊(P0.05)。2个品种血浆P浓度在发情期、发情前后2~3d较低,到发情周期的第6d开始分泌量迅速增加,在发情周期第8~9d达到整个发情周期的最大峰值,极显著高于发情期血浆P浓度(P0.01),随后在较高浓度范围内呈波动分泌至发情周期第16d,之后迅速下降至发情期的低分泌水平。     

AFLP and RAPD Analysis of the Boer and Indigenous Breeds of the Goat in Jiangsu

Blood and tissue samples were collected from 105 goats including 60 Boer goats (30 for eachsex), 30 Xuhuai goats (15 for each sex) and 15 Haimen goats (7 stud and 8 does). DNA was extracted andDNA pools were constructed on the basis of goat breeds. In 36 selective primer combinations, 29 combinationsamplified totally 3 253 markers including 92 polymorphic markers by amplified fragment length polymor-phism (AFLP). On average, 3.17 polymorphic markers were amplified per combination, with a polymorphicfrequency of 2.8%. The primer combinations amplifying more polymorphic markers (showed in brackets)were involved in E00+ACG/M00+CAA (13), E00+ACG/M00+CAG (10), E00+AAC/M00+CAC (8)and E00+AAC/M00+ACT (7). A total of 183 markers including 60 polymorphic markers were amplified byRAPD from the pooled DNA of three breeds using 22 primers with strong polymorphism and high reproduc-ibility selected from 93 RAPD primers. On average, 2.73 polymorphic markers were amplified per primer,with a polymorphic frequency of 32.8%. The results of AFLP and RAPD coincidently suggested that the ge-netic distance is the closest between Xuhuai and Haimen goat, next between Xuhuai and Boer goat, and the far-thest between Haimen and Boer goat. According to the UPGMA method, Haimen and Xuhuai goats can begathered together as a cluster, then Boer goat. Both methods can be used to implicate the genetic difference ofthese three breeds, in particular AFLP has more polymorphic markers.     

11株巨型艾美耳球虫的免疫原性分析

用平均增重和病变记分或卵囊减少率等为试验指标,对11株巨型艾美耳球虫的免疫原性进行了分析。结果显示,各虫株每鸡免疫感染100个卵囊后,不仅对攻击1×105个同源株卵囊均产生大于70%的病变记分降低率,而且使每鸡攻击1×104个同源株卵囊时的卵囊产量均减少97.42%以上,在各虫株间无显著差异。各虫株对异源株的交叉免疫力程度不一致,美国株对国内10个虫株的卵囊减少率为20.09%~82.44%,仅3株大于75%,而国内10个虫株对美国株的卵囊减少率为27.43%~95.26%,有5株大于75%;扬州株、南通株、凤阳株、龙岩株、广州株和上海株间的相互卵囊减少率为-1.72%~96.67%,其中南通株对扬州株、凤阳株、龙岩株、广州株和上海株的卵囊减少率均大于75%,上海株对扬州株、南通株、凤阳株与广州株的卵囊减少率为-1.72%~57.69%。     

6株肠艾美耳球虫繁殖力的比较研究

[目的]为肠艾美耳球虫的早熟选育及兔球虫疫苗的研制提供理论依据。[方法]采用6个不同地区肠艾美耳球虫的孢子化卵囊经口接种45日龄无球虫兔,接种剂量为1×104个卵囊/只,并对6株肠艾美耳球虫的繁殖力进行比较。[结果]衡水株排卵量最多,张家口株次之,胶南株排卵量最少。睢宁株的排卵量接近胶南株,如皋株、通江株相近,在感染后第8.5～9天均有排卵,各虫株的排卵高峰期相似,第13天排卵量达到峰值,第21天接近0。[结论]不同地理株肠艾美耳球虫的排卵量不同,但排卵高峰相一致。     

鸡毒害艾美尔球虫早熟株的免疫原性研究

为制备早熟弱毒疫苗提供虫株和理论依据,对选育的毒害艾美尔球虫早熟株(P8)和亲本株(P0)的免疫原性进行了研究。试验分别用P0和P8,以每只鸡300个孢子化卵囊免疫7日龄雏鸡,免疫后14 d,分别以每只鸡1×104和10×104个P0孢子化的卵囊进行攻毒,以OPG、平均每只鸡的卵囊产量,卵囊减少率、相对增重率、病变记分减少率为指标。结果表明:(1)攻毒后每只1×104个P0孢子化的卵囊时,P8、P0免疫攻毒组的卵囊减少率分别为75.59%、84.66%;(2)攻毒后每只10×104个P0孢子化的卵囊时,P8、P0免疫攻毒组病变记分降低率分别为81.46%、76.66%。表明P8株的免疫原性与P0无明显变化,均有保护力,符合早熟株免疫原性保持不变的特点。