猪囊虫培养疫苗免疫研究

<正> 1 前言关于蠕虫的免疫,许多国家早已开始研究.有关线虫、绦虫、吸虫的疫苗研究报?均有不少,有些效果是令人满意的.近几年应用蚴虫休外墙养的代?分泌抗原(E/S)研制的牛绦虫疫苗,澳大利亚学者认为具有较高的免疫原性,兰州医学院史大中等对囊     

猪囊虫病免疫预防研究进展

猪囊虫病免疫预防研究进展翟春生（南京军区军事医学研究所，南京２１０００２）猪囊虫病的免疫预防研究是一个难度很大的课题。寄生虫的初次感染可使宿主获得对同种寄生虫再次感染的抵抗力。这种被称为“带虫免疫”的现象提示人们进行寄生虫病免疫预防的可能性。但是，仿...     

猪囊虫病基因工程疫苗的研制

从猪带绦虫六钩蚴ｃＤＮＡ文库中筛选目的基因并进行克隆表达,重组抗原用血清学方法和猪体免疫进行鉴定。钭具有免疫保护作用的重组抗原纯化,与免疫刺激复合物疫苗佐剂混合,制备成猪囊虫病基因工程疫苗,免疫仔猪并攻虫。该疫苗安全,无毒副作用,免疫猪减虫率９２．２％,完全保护率５５．５％,且免疫组发现的囊虫多数已死亡。     

猪囊虫病基因工程疫苗的研制及应用

从猪带绦虫六钩蚴cDNA文库中筛选目的基因并进行克隆表达，重组抗原用血清学方法和猪体免疫试验进行鉴定，筛选保护性抗原基因。将具有免疫保护作用的重组抗原纯化，并与免疫刺激复合物佐剂结合，制成猪囊虫病基因工程疫苗。对工程菌的培养发酵、重组抗原的下游纯化及疫苗的配制、疫苗的中间试制进行了研究，确定了一套比较完善的生产工艺。应用昆明小鼠建立了猪囊虫病的实验动物模型，应用该模型进行上述疫苗的免疫预防试验，免疫1次和2次的免疫保护率分别为96．9％和98．4％。本动物的免疫预防试验显示，疫苗安全性好，免疫保护率达92．2％，且免疫组发现的囊虫多数已死亡。在流行区进行了田间和区域试验。免疫猪未有不良反应，囊虫感染率分别由20％降为1．1％和5．4％降为0．21％。用该疫苗对人工感染的囊虫病猪进行免疫治疗，发现在感染早期的治疗效果较好。免疫动物的体液免疫和细胞免疫的检测结果显示，该疫苗刺激机体产生抗体的时间早、持续时间长、效价高；可显著提高淋巴细胞转化率及E－RFC和Ea-RFC细胞、ANAE^ 细胞和粗粒型ANAE^ 细胞、抑制／杀伤性T细胞亚群的数量。以上结果表明，用大肠杆菌表达的重组抗原制备的猪囊虫病基因工程疫苗安全、高效，且成本低廉，可规模化生产，有成为预防猪囊虫病的一种新型生物制剂。     

猪囊虫病基因工程疫苗的生产工艺研究

从重组抗原的表达、复性与纯化、疫苗的配制及疫苗的质量控制等４个方面对猪囊虫病基因工程疫苗的生产工艺进行了探索。确定重组抗原表达的最佳培养液为ＬＢ磷酸盐培养液，诱导剂为１０ｇ／Ｌ乳糖，并根据接种量，溶解氧、罐压、发酵时间等对发酵结果的影响，确定了发酵培养的最佳条件。在重组抗原的复性与纯化方面，工程菌的裂解条件为选用溶菌酶感作用再超声波破菌，超声强度为２４０Ｗ５次，包涵体的纯化先采用低浓度的尿素洗涤２     

丙硫咪唑治疗猪囊虫病研究进展

丙硫咪唑作为一种新型、高效、广谱、低毒的苯咪唑氨基甲酸酯类抗蠕虫药，在猪体内可迅速代谢成亚砜和砜，抑制寄生虫对葡萄糖的吸收，导致虫体糖原耗竭，抑制延胡索酸还原酶系统，阻碍ATP的产生，导致虫体死亡。笔者就丙硫咪唑在猪体内的代谢动力学、作用机理、毒性及疗效作以综述。     

猪囊虫病酶联免疫快速检验法

猪囊虫病是一种危害严重的人畜共患病,在我国许多地区,该病不仅对人类健康构成威胁,而且使肉联厂遭受严重的经济损失.近年来,国内外许多学者对囊虫病的诊断方法作了大量的研究.但是,一些传统的免疫学诊断方法反应时间较长,不适于收购生猪时应用;几种凝集试验反应迅速,但若将从采血到获得血清的时间计算在内,也需要较长时间,而且判定时常有一些似是而非的情况,易误判.为了建立一种适用于生猪收购时检验囊虫病猪的方法,应用酶联免疫快速检验法,取得较满意的效果.现将检验方法介绍如下.     

猪囊虫病基因工程疫苗用于免疫治疗的研究

应用猪囊虫病基因工程疫苗分别对实验性猪囊虫病和自然感染的猪囊虫病进行了分组治疗,以探讨该疫苗的免疫治疗作用。１０头人工复制的囊虫病猪,随机分成３组。第１组４头猪,于感染于１个月注射该疫苗,连续３次,间隔１５天;第２组４头猪,于感染后２个月注射疫苗,同上连续３次;第３组２头猪,不注苗。第１组注射疫苗后１个月循环抗原滴度开始降低,２．０、２．５及３．５个月各有１头猪ＣＡ转阴,５个月ＯＤ值分别为０．１４、０．０９、０．１７、０．３８。第２组和第３组各猪血清ＯＤ值一直维持在１．０以上。感染后５个月剖检,第１组４头猪均未检出囊虫;第２组４头猪在咬肌、膈肌、腰肌、股内侧肌、肩胛外侧肌等部位均检测到囊虫,检测部位４０ｃｍ＾２面积发现囊虫３～７个,有部分虫体已钙化,胆汁卵化率为１５．４％;第３组各猪也在各检测部位检测到囊虫,４     

猪囊虫病免疫诊断技术的研究进展

猪囊虫病是一种重要的人畜共患寄生虫病，尤其是对人的危害更大，该病呈世界性分布，以发展中国家为多，人主要是食入带有猪囊尾蚴的不熟的猪肉成为猪带绦虫患者，通过自身体内，自身体外或经口食入虫卵污染的食物和水三种感染方式成为猪囊虫病患者。而猪的感染则是食入患猪带绦虫病人粪便污染的饲料、牧草和饮水，在流行地区．该病在猪和人之间形成循环链。据不完全统计，在我国有15个省、市和自治区有囊虫病流行，成虫感染的患者中，平均14．9％（2．3～25％）有囊虫寄生，而且在某些地区感染较高，对人群构成严重的危害[1，3]。目前很多…     

猪囊尾蚴特异性单克隆抗体的制备及其识别抗原成分的鉴定

通过SDS-PAGE方法对猪囊尾蚴囊液抗原成分进行了分离鉴定,并分别分离纯化了其中的16 000和10 000特异性蛋白质成分;将16 000和10 000纯化蛋白质成分分别做成佛氏佐剂苗,分组免疫BALB/c小鼠,超免后,无菌取脾脏制备脾细胞,分别与NS0骨髓瘤细胞进行融合,经阳性筛选和特异性鉴定获得2株分泌猪囊尾蚴特异性单抗的杂交瘤细胞,命名为TSCF-1611H12B8和TSCF-1012G5B5。免疫学鉴定结果表明,单抗TSCF-1611H12B8和TSCF-1012G5B5与猪细颈囊尾蚴、旋毛虫、住肉孢子虫和蛔虫抗原间不存在交叉反应;单抗TSCF-1611H12B8识别囊液中16 000和10 000蛋白质抗原条带,而单抗TSCF-1012G5B5识别囊液中的10 000蛋白质条带。     

猪囊尾蚴重组诊断抗原的研究进展

猪囊虫病是一种重要的人畜共患寄生虫病,严重危害了人类的健康,对囊虫病的有效诊断成为控制该病的关键。目前,囊虫病的诊断主要依靠免疫学检测,所用抗原多由虫体制备,存在虫源短缺而不易大量获得的问题。利用基因重组技术可以解决以上问题。本文拟对猪囊尾蚴重组诊断抗原的研究进展做一综述。     

猪瘟犊牛睾丸细胞苗与兔体组织苗免疫效果的比较观察

本试验采用细胞苗和组织苗在三个猪场做免疫对比试验,结果显示,细胞苗免疫后10龄、15日龄、20日龄、25日龄抗体水平分别有13%、30%、40%、53%,不在保护线,而组织苗则在20、25日龄才分别有10%、13%不在保护线.这表明组织苗免疫后仔猪母源抗体比细胞苗维持时间长.经几年抗体水平调查显示,细胞苗在14～16、19～21、24～26日龄抗体水平分别有16.9%、19.8%、26.2%不在保护线,而组织苗才分别有6.7%、7.9%、13.3%不在保护线.调查几个猪场显示1998～2000年用细胞苗后,仔猪存活率分别83%、85%、87%,而改用组织苗后,存活率分别为91%、93%、93%.由此表明,组织苗的免疫效果似比细胞苗好.     

口蹄疫病毒基因工程疫苗研究进展

口蹄疫 (FootandMouthDisease ,FMD)是偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病 ,被国际兽医局列为头号A类传染病。该病传播途径多、传播速度快 ,曾多次在世界发生大流行。虽然该病的死亡率不高 (幼畜除外 ) ,但造成动物生产性能下降 ,扑杀动物花费大量的人力、物力和财力 ,影响国际贸易 ,经济损失惨重。如 1997年我国台湾、2 0 0 0年日本和韩国、2 0 0 1年英国暴发的FMD可以说给该地区或该国畜牧经济以致命的打击[1] 。为此 ,世界各国非常重视FMD的研究。口蹄疫病毒 (FootandMouthDiseaseVirus ,FMDV)属于小RNA病毒科 ,口蹄…     

Immunization procedure-related immunoglobulin levels in the development of antibodies against Cysticercus cellulosae

Various immunization procedures were investigated in an effort to improve the number of hybridomas producing antibodies against Cysticercus cellulosae. Ten groups of 5 BALB/c mice were subjected to different immunization procedures and were bled repeatedly over a period of 68 days. The samples of sera thus obtained were tested by enzyme linked immunosorbent assay: total immunoglobulins, IgG and IgM levels were determined. In general, total anticyst antibody titres increased during the course of immunization but in 3 groups the final titre was lower than the maximal antibody titre. Overall, immune tolerance did not appear to be a problem and longer immunization programs seemed to end with slightly higher antibody levels. So far, 4 mice from the group that exhibited the highest immunoglobulin levels have been used for hybridoma production. Out of 124 hybridomas thus obtained, only 1 secreted antibodies against Cysticercus cellulosae.     

囊虫病免疫诊断检测方法的研究进展

由于科学技术的发展,囊虫病免疫诊断检测方法有了很大的进展,主要有1.免疫学检测方法,包括酶联免疫吸附法(ELISA)、斑点酶联免疫吸附法(Dot-ELISA)、生物素-亲和素酶联免疫吸附法(BAS-ELISA)、单克隆抗体酶联免疫吸附试验(McAb-ELISA)、酶联免疫印渍技术(ELIB);2.基因检测技术,包括DIG标记DNA探针、细胞因子基因检测方法、基因重组技术;3.免疫试剂盒的应用,包括循环抗原酶联免疫试剂盒、猪囊虫短程抗体IgG4快速ELISA检测试剂盒等。     

猪传染性胃肠炎(TGE)基因工程疫苗的研究进展

猪传染性胃肠炎（Transmissible gastroenteritis of pigs，TGE）是由冠状病毒引起的一种高度接触传染的病毒性疾病。病猪会出现呕吐、水样下痢、脱水等症状。TGE对首次感染的猪群造成的危害尤为明显，在短期内能引起各种年龄的猪发病。病势依日龄而异。日龄越小，病情愈重，死亡率也愈高。2周龄内的仔猪死亡率达90％～100％。康复后仔猪发育不良，生长迟缓。在疫区的猪群中，患病的周龄较大或成年猪虽然几乎没有死亡，但是抗病能力与免疫功能受损，掉膘、降低饲料利用率，浪费药物和人力等所造成的经济损失是非常严重的。该病是世界性的疾病之一，亚洲、欧洲以及美洲等国家的许多猪场TGE阳性率都有很高。1977年法国仅由于应付TGE的暴发就耗用了1000万美元的防治费用。     

中国禽用疫苗的研发与生产现状

1中国禽用疫苗的研究与生产现状2006年畜牧业总产值约1.4万亿元,占农业总产值的34%。肉、蛋、奶产量分别达到7980万t、     

Clinical and immunological effects of Newcastle disease virus vaccine on bovine papillomatosis

Newcastle disease virus (NDV) has antineoplastic and immunostimulatory properties, and it is currently being clinically tested in anticancer therapy. In order to analyze the immunostimulatory effects of NDV on bovine papillomatosis, we inoculated 14 cows subcutaneously with an attenuated vaccine containing the LaSota strain of NDV (LS-NDV). Four cows with papillomatosis served as controls. Serum samples were collected from each animal 1 h before and, 7 and 21 days after inoculation. In inoculated cows, on days 7 and 21 the mean antibody titers were log2 2.43 +/- 0.92 and log2 5.57 +/- 0.72 by haemagglutination inhibition (HI), and the mean levels of tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha) were 5.80 +/- 4.19 and 5.39 +/- 2.66 ng/ml by WEHI-164 cytotoxicity assay. Significant differences between inoculated and control animals were evident for antibody titers on day 21 and clinical scores on day 60. A correlation was evident between the TNF-alpha activities and clinical scores on day 21. The clinical observations at day 60 showed that the papillomas in five cows were completely resolved (36%), one animal had no alterations on clinical appearance of the tumor (7%), and papillomas in eight cows were regressed (57%). In conclusion, these results demonstrated that inoculation of LS-NDV vaccine stimulates an antibody response and limited increase in TNF-alpha activity and may enhance clinical recovery in bovine papillomatosis.