新疆天康将推出三款猪用疫苗

<正>猪圆环病毒2型重组杆状病毒亚单位灭活疫苗由新疆天康畜牧生物技术股份有限公司技术中心研制的猪圆环病毒2型重组杆状病毒亚单位灭活疫苗,是应用分子生物学技术将猪圆环病毒2型Cap基因重组于杆状病毒内,在昆虫细胞上培养表达PCV2-r Cap蛋白而制成的亚单位疫苗。该疫苗与市场使用的猪圆环病毒2型全病毒灭活疫苗相比,具有极其显著的特点:(1)以当前的优势基因型毒株PCV2b基因序列做参考,经杆状病毒系统表达出类似病毒样颗粒(VLPs)的蛋白,抗原的     

科技新品

<正>"易圆净"猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗成功上市近日,青岛易邦成功研制出的猪圆环病毒2型基因工程亚单位疫苗——"易圆净"成功上市,该疫苗的主要特点包括:1)率先建立猪圆环疫苗评价体系,引领行业标准;2)表达病毒样颗粒抗原(VLPS/CAP),抗原性好,能高效诱导机体产生良好体液免疫与细     

猪圆环病毒1型和2型Rep蛋白在大肠杆菌中的表达与纯化

分别以猪圆环病毒1型基因组和重组质粒pCI-PCV2-ORF1为模板,利用PCR扩增了猪圆环病毒1型和2型的ORF1基因,随后克隆到pET-28a( )和pET-32a( )两种原核表达载体上。测序正确的重组质粒分别转化E.coli BL21(DE3),进行目的蛋白的诱导表达。SDS-PAGE和Western blot分析表明,猪圆环病毒1型和2型的ORF1均能在pET-28a和pET-32a中分别以重组蛋白His-Rep(40 Ku)和Trx-His-Rep(54 Ku)的形式表达。进一步纯化后测定重组蛋白的浓度,推算出猪圆环病毒1型和2型的His-Rep蛋白产量分别为34 mg/L菌液和14 mg/L菌液,Trx-His-Rep蛋白产量则为12 mg/L菌液和10 mg/L菌液。这些纯化的蛋白在Western blot中能够与猪抗猪圆环病毒2型阳性血清发生特异性反应,显示其具有良好的免疫学活性。本研究建立的猪圆环病毒重组Rep蛋白的原核表达系统及其纯化方法,为下一步开展Rep蛋白功能等相关研究奠定了基础。     

猪圆环病毒2型衣壳蛋白体外表达研究现状

猪圆环病毒2型(PCV2)是引起猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)的主要病原体,会破坏免疫系统,引起多种病毒或细菌的混合感染与继发感染,给养猪业造成了巨大经济损失。目前疫苗免疫仍然是防控PCVAD的有效手段,核衣壳蛋白(Cap)是主要免疫保护性抗原,因此Cap蛋白基因工程疫苗是研究的理想靶抗原,获得大量、可溶性、富有活性的PCV2 Cap蛋白是疫苗研制的关键因素。论文综述了利用大肠埃希氏菌、酵母菌、活病毒载体等体外表达系统表达PCV2 Cap蛋白的进展,为PCV2新型基因工程疫苗的研制提供依据。     

首个以抗感染为评价标准的圆环病毒疫苗:诸元妥

<正>目前圆环病毒疫苗有全病毒灭活疫苗、亚单位疫苗、弱毒疫苗和基因工程疫苗(核酸疫苗、重组疫苗、活载体疫苗)。主流产品是全病毒灭活疫苗和亚单位疫苗。截至2013年5月,我国共有5种猪圆环病毒灭活疫苗研制成功,分别为猪圆环病毒2型灭活疫苗(SH株)、猪圆环病毒2型灭活疫苗(LG株)、猪圆环病毒2型灭活疫苗     

猪圆环病毒Cap蛋白亚单位疫苗研究进展

猪圆环病毒病是由猪圆环病毒(PCV)引起的猪的一种多系统功能障碍性疾病,预防该病的有效方法是采用疫苗进行预防接种,除了传统的灭活疫苗外,国内外学者正在积极研究开发PCV2的亚单位疫苗、DNA疫苗以及基因工程活载体疫苗,本文结合国内外对猪圆环病毒亚单位疫苗的研究结果,以抗原蛋白表达系统分类对其研究情况作一综述。     

FLEX系列茵格发猪圆环病毒疫苗免疫预防韩国单点生产猪场猪圆环病毒相关疾病的效果研究

猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)是猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)的病原。猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)也叫做断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)。开发有效的猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)疫苗是控     

杆状病毒表达系统融合表达猪圆环病毒2型Cap蛋白与口蹄疫病毒VP1蛋白及免疫原性评估

猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)Cap蛋白是病毒的主要结构蛋白,能诱导宿主产生特异性免疫应答。口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)VP1蛋白是病毒的主要免疫原性蛋白,能刺激机体产生中和抗体。利用杆状病毒表面展示系统,将这2种病毒蛋白与猪CD40配体(CD40 ligand,CD40L)进行融合表达并展示在杆状病毒表面,构建了rv Ac-Cap、rv Ac-VP1和rv Ac-Cap-VP1 3种重组杆状病毒。通过SDS-PAGE和Western blotting检测3种重组杆状病毒感染的Sf9细胞总蛋白,证明3种融合蛋白成功表达。纯化的重组杆状病毒颗粒以1×108pfu/只的剂量免疫接种BALB/c小鼠,通过间接ELISA检测血清中Cap和VP1的抗体浓度,证明表面展示有Cap和VP1的重组杆状病毒能激发小鼠产生较高水平的抗体,与PCV2和FMDV商品化疫苗免疫组的抗体浓度差异不显著(P0.05),表明该重组杆状病毒具有较好的免疫原性。     

猪圆环病毒2型ORF3蛋白的表达及抗原性鉴定

为研究猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF3蛋白的免疫活性,对其进行了表达及初步鉴定。根据NCBI上PCV-2ORF3的基因序列(FR823451)设计特异性引物,扩增后将其插入pET28a表达载体构建了重组表达质粒pET-PCV-2-ORF3,转化E.coli BL21(DE3)诱导表达后用SDS-PAGE和免疫印迹进行了鉴定。随后又用圆环病毒野毒感染猪和重组ORF2免疫小鼠的阳性血清对表达蛋白的免疫原性进行了检测。结果表明,构建成功的pET-PCV-2-ORF3表达菌被诱导后能大量表达PCV-2 ORF3蛋白。ORF3表达蛋白能与圆环病毒野毒感染猪的阳性血清发生特异性反应,与重组疫苗免疫鼠的阳性血清不能发生反应,表明ORF3蛋白具有很好的免疫原性和反应原性,有望作为圆环病毒野毒感染检测的靶抗原。     

猪圆环病毒二型Capsid表面五倍轴loops的研究进展

猪圆环病毒1型(PCV1)与猪圆环病毒2型(PCV2)的核苷酸序列高度同源,但两者的Cap蛋白结构存在较大差异且PCV1不致病。通过近年来研究两者Cap蛋白结构的文献以及比对PCV1与PCV2病毒颗粒表面五倍轴的三段loops氨基酸序列及蛋白3D结构模拟展示结果,观察Loop BC,Loop DE以及Loop HI的潜在功能和作用,本综述目的在于进一步揭示PCV2 virus-like particles(VLPs)组装及其细胞入侵分子机理,有助于PCV2疫苗及药物载体等的研究与开发,为PCV2疫苗、药物载体等研究与开发奠定理论基础。     

猪圆环病毒2型Cap蛋白杆状病毒载体表达及免疫保护性分析

为了获得低成本高产量的抗原表达,开发新型、有效防控猪圆环病毒的亚单位疫苗,根据猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白序列,通过软件设计优化了密码子并合成cap基因,利用多角体病毒作为载体,构建了表达PCV2 Cap蛋白的重组病毒,命名为flashBAC-PCV2-ORF2株.经过鉴定,证明该病毒株表达Cap蛋白的抗原量在...     

我国首个猪用基因工程疫苗将上市

正历时7年研发成功的国内首个纯病毒样颗粒猪圆环病毒基因工程亚单位苗将上市。专家介绍,市场上常见猪用疫苗的类型大致分为全病毒灭活苗、减毒活疫苗、基因工程苗(包括亚单位苗、载体疫苗、核酸疫苗)等。病毒样颗粒疫苗(VLPs疫苗)是亚单位苗的一种。病毒样颗粒是由病毒单一或多个结构蛋白自行装配而     

应用免疫磁珠纯化猪圆环病毒2型病毒样颗粒的研究

为探讨应用免疫磁珠纯化猪圆环病毒2型病毒样颗粒的可行性,利用猪圆环病毒2型病毒样颗粒抗原特异性免疫磁珠,对经IPTG诱导表达的重组菌pET30a-Cap2d/Rosetta目的蛋白进行纯化,之后电镜观察纯化效果.结果显示,免疫磁珠可以特异性地结合猪圆环病毒2型病毒样颗粒.结果表明,应用免疫磁珠纯化猪圆环病毒2型病毒样颗...     

猪圆环病毒2型病毒样颗粒研究进展

猪圆环病毒2型(PCV2)是引起猪圆环病毒相关疾病的主要病原体,给养殖业造成重大经济损失。一直以来,对于PCV2的防控主要通过疫苗接种。目前使用的疫苗可大致分为全病毒灭活疫苗、嵌合病毒疫苗、重组亚单位疫苗三大类。病毒样颗粒(VLPs)作为一种伪病毒,以其高免疫原性、高安全性成为新型疫苗的研究热点。本文综述了VLPs在国内外的最新研究动态、研究和开发的意义,提出了VLPs作为一种基因转载工具,其研究为疫苗研发开拓了新的方向。     

猪圆环病毒基因及其疫苗的研究进展

猪圆环病毒(PCV)感染是近几年新发现的一种猪的传染病,目前,国际上已分离获得2个不同血清型的猪圆环病毒(PCV),并命名为猪圆环病毒1型(PCV-1)和猪圆环病毒2型(PCV-2).PCV-1对猪无致病性,而PCV-2被认为是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原.该病在包括中国在内的各养猪国家广泛流行,发病猪死亡率10%～30%不等,较严重的猪场在暴发本病时死淘率高达40%,给养猪业造成严重的经济损失,同时也给各国科研人员带来了新的挑战和任务,现已受到国内外学者的高度重视,对此病的研究特别是对其疫苗的研究正日益受到关注.文章中就猪圆环病毒基因的结构特点、功能以及疫苗等方面进行了综述,以期为猪圆环病毒基因及其疫苗的研究提供一定依据.     

病毒样颗粒疫苗在猪病防控中的应用

一些猪病如猪瘟、猪圆环病毒病等,其病毒可能会通过肉类食品传播给人类,对人体健康造成威胁,且危害公共卫生安全。因此,猪病防控在养猪生产中占有至关重要的地位,不仅关系到养殖户的经济效益、我国肉类供应稳定,还关系着国家食品安全与公共健康。病毒样颗粒(VLPs)疫苗具有安全性高、免疫原性好等优势,是目前研究预防动物病毒性疾病的疫苗的最热关注点。文章结合实践经验,对病毒样颗粒及其表达系统进行简要介绍,并对病毒样颗粒疫苗在多种猪病防控中的应用情况进行综述,包括猪细小病毒病、猪圆环病毒病、猪传染性胃肠炎、猪乙型脑炎、猪瘟等,旨在为病毒样颗粒疫苗在猪病防控中的推广与使用提供更多依据。     

猪圆环病毒2型广谱性中和构象表位的结构解析及其抗体介导的中和作用机制

正猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)属于圆环病毒科圆环病毒属的一员,是一类非常小的无囊膜的单股环状DNA病毒。PCV2病毒直径约为17 nm,基因组含有1 766 nt～1 768 nt核苷酸,主要包含4个开放阅读框架(Open reading frame, ORF), ORF1～ORF4,其中ORF2编码病毒的唯一结构蛋白,即衣壳蛋白(Capsid protein,Cap蛋白),与病毒感染和免疫息息相关。PCV2是一种     

猪圆环病毒2型ORF2基因及其编码蛋白的研究概况

结合国内外对猪圆环病毒2型(porcine circovirus2,PCV2)的研究,重点对猪圆环病毒2型ORF2基因及其编码蛋白的抗原表位和功能应用研究进行简要综述,为猪圆环病毒2型新型疫苗研究和建立诊断检测方法研究方面提供参考。     

普遍使用PCV2疫苗后肥育猪体内PCV2病毒抗体和病毒的流行率行率

正1绪论猪圆环病毒2型(PCV2)是养猪生产中具有最大经济重要性的病原体,是猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)的病原体。自2006年普遍使用猪圆环病毒2型(PCV2)疫苗以来,肥育猪的PCVAD控制变得相当成功,因为美国几乎所有的猪在断奶前或断奶时接种该疫苗。在商用猪场,仔猪在断奶前后接种疫苗可减少该病的危害,降低猪血清中猪圆环病毒2型的水平,提高生产性能,但不能消除病毒的感染。的确,早先的调查显示,     

猪圆环病毒核酸疫苗pcDNA-PCV-ORF2-ISS的构建及分子佐剂联合免疫研究

用PCR方法扩增猪圆环病毒PCVwhn株编码CAP蛋白的基因ORF2,同时人工合成一段CpG序列,并设计上下游引物,进行扩增,定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建新型核酸疫苗(pcDNA-PCV-ORF2-ISS),并进行了酶切和测序鉴定.用构建的pcDNA-PCV-ORF2-ISS质粒以及pcDNA-PCV-ORF2与5种细胞因子分子佐剂质粒(IL-6/4、IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ真核表达质粒)联合对仔猪进行免疫试验.免疫后用间接ELISA法测定猪圆环病毒Ⅱ型特异性抗体IgG,用流式细胞仪测定猪血液CD3+、CD4+和CD8+T细胞亚类的数量.结果显示,成功构建含CpG免疫刺激序列的猪圆环病毒Ⅱ型核酸疫苗;pcDNA-PCV-ORF2-ISS在仔猪免疫实验能诱导细胞免疫并产生特异性抗体(P<0.05);用5种细胞因子分子佐荆质粒与pcDNA-PCV-ORF2疫苗同时免疫能显著提高DNA疫苗的免疫效果(P<0.05).分子佐剂免疫增强效果次序为:IL-6、CpG、IL-6/4、IL-2、IL-4和IFN-γ,表明IL-6和CpG最佳.