科技前沿

断奶仔猪小肠钠葡萄糖转运蛋白1和葡萄糖转运蛋白2mRNA表达变化及饲粮添加谷氨酰胺对其的影响本试验旨在研究仔猪断奶后小肠黏膜钠葡萄糖转运蛋白l(SGLTl)和葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)     

断奶仔猪小肠钠葡萄糖转运蛋白1和葡萄糖转运蛋白2mRNA表达变化及饲粮添加谷氨酰胺对其的影响

本试验旨在研究仔猪断奶后小肠黏膜钠葡萄糖转运蛋白1(SGLTl)和葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)mRNA表达的发育性变化规律及谷氨酰胺是否对SGLTl和GLUT2 mRNA的表达产生影响.选择21日龄断奶的杜×长×大仔猪69头,断奶当天屠宰3头猪,其余66头随机分成2组,每组3个重复,每个重复11头仔猪.对照组饲喂基础...     

β-CM5对离体大鼠小肠葡萄糖吸收的影响

为了探讨β-酪啡肽-5(β-CM5)对大鼠小肠葡萄糖吸收的影响,利用翻转的离体小肠模型,通过测定60 min内β-CM5不同浓度组肠囊内葡萄糖含量及葡萄糖的转运率;测定离体肠道黏膜α-葡萄糖苷酶、Na+-K+-ATP酶活力,分析大鼠小肠钠依赖性葡萄糖共转运载体(SGLT-1)及葡萄糖转运载体2(GLUT-2)mRNA表达水平,揭示β-CM5对葡萄糖吸收影响及机制。结果:不同浓度β-CM5肠囊内葡萄糖的转运量及转运率均显著低于对照组;β-CM5组小肠黏膜中α-葡萄糖苷酶和Na+-K+-ATP酶活力显著低于对照组;β-CM5组小肠黏膜中SGLT-1、GLUT-2 mRNA表达量与对照组相比均显著性下调。结果表明:β-CM5可以通过抑制葡萄糖吸收的相关酶活性,下调葡萄糖转运载体mRNA的表达,从而抑制肠道葡萄糖的吸收,提示β-CM5可能具有降糖作用。     

肠道上皮主要葡萄糖转运载体及其作用机制

葡萄糖在肠道的吸收主要通过Na~+依赖性葡萄糖转运载体1(SGLT1)和易化葡萄糖转运载体2(GLUT2)实现。许多影响肠道葡萄糖吸收功能的因素都是通过调控SGLT1和GLUT2转录水平、mRNA稳定性及蛋白水平来实现的。通过对葡萄糖转运载体结构和功能的研究,不仅为人类肥胖症和糖尿病等相关疾病提供潜在药物靶点,还能为调节动物营养物质吸收提供思路。本文综述了肠道上皮主要葡萄糖转运载体SGLT1和GLUT2的功能和影响其在肠道上皮表达的因素,旨在从分子层面揭示葡萄糖在肠道的吸收以及体内葡萄糖平衡的调控。     

葡萄糖转运蛋白的研究进展

存在于肠道、肾近端小管的葡萄糖转运载体对葡萄糖的吸收和重吸收具有很重要的作用。其中肠道葡萄糖主要是通过位于肠细胞膜上Na —依赖性葡萄糖转运载体(SGLT1)进行主动转运的。从十二指肠到回肠的肠轴上分布有不同的SGLT亚型,这些转运载体对葡萄糖和半乳糖的转运能力与它们的     

肠道葡萄糖吸收的调节:畜牧学上的一个新问题

肠道葡萄糖吸收由位于肠细胞膜上的SGTII载体转运并受碱性膜上的钠-钾泵所维持的浓度梯度推动。动物消耗总能量的20％来至胃肠道,其中大部分是钠-钾泵工作的结果。葡萄糖转运受一系列胃肠     

猪血清中葡萄糖转运蛋白2发育性变化研究

采用ELISA(酶联免疫吸附试验)方法检测了不同体重梯度的川藏黑猪配套系和杜长大猪血清中葡萄糖转运蛋白2的含量变化,并分析其与肌内脂肪含量的关系。结果表明:川藏黑猪在90 kg、110 kg和130 kg体重时血清中的葡萄糖转运蛋白2含量分别为56.33、54.51和54.28μg/L,肌内脂肪含量分别为3.72%、4.41%和4.96%;杜长大猪血清中的葡萄糖转运蛋白2含量则分别为47.28、49.11和47.82μg/L,肌内脂肪含量分别为2.00%、2.50%和2.61%,葡萄糖转运蛋白2相同猪种不同体重间和110 kg、130 kg体重不同猪种间差异均不显著,90 kg体重不同猪种间差异显著(0.01P0.05)。相关性分析显示,葡萄糖转运蛋白2与肌内脂肪含量呈极显著正相关(P0.01),提示葡萄糖转运蛋白2可能是通过血液来实现对猪肌内脂肪的整体调控。     

瘤胃上皮细胞增殖和物质转运分子机制的研究进展

瘤胃作为反刍动物特有的消化器官,对饲粮营养消化利用具有重要作用。近50年来,人们对瘤胃上皮细胞发育和物质转运做了大量研究,重点聚焦于瘤胃上皮细胞增殖分子机制及相关转运蛋白调控通路的探索,如胰岛素样生长因子(IGF)和表皮生长因子(EGF)参与调控葡萄糖的转运,钠氢交换蛋白(NHE)、单羧酸转运载体(MCTs)和G蛋白偶联受体(GPR)参与瘤胃上皮细胞短链脂肪酸(SCFA)的转运等。尽管如此,我们对于瘤胃发育的内在机制了解非常有限,本文针对反刍动物瘤胃上皮细胞增殖和物质转运分子机制的研究进展进行了综述,对于进一步理解瘤胃上皮细胞发育过程及建立最佳的反刍动物营养供给策略具有重要意义。     

单羧酸转运蛋白1在动物体内的转运调控机制

单羧酸转运蛋白1(MCT1)是动物体内最重要的单羧酸转运蛋白亚型，广泛分布于动物体的各个组织细胞中，通过参与乳酸、短链脂肪酸等单羧酸物质的跨膜转运，发挥着多种生物学功能，包括参与营养物质转运、调节pH、作为癌症治疗的靶点、调控葡萄糖代谢平衡等。本文就近年研究，总结了MCT1在单胃和反刍动物体内的定位分布、表达差异，并重点阐述了MCT1通过转运单羧酸发挥的生物学功能和转运调控机制，为MCT1在动物体内的调控机制研究提供参考。     

非反刍动物小肠内葡萄糖的吸收与调控

营养性碳水化合物被非反刍动物摄入后,在消化道内逐渐降解成葡萄糖等单糖以及少量的双糖.小部分葡萄糖在门静脉回流组织(PDV)中进行供能代谢,大部分被小肠绒毛吸收而进入门静脉.葡萄糖吸收是由小肠黏膜上的Na+依赖型葡萄糖协同转运1(SGLT1)、Na+/K+ATP酶、葡萄糖转运子2(GLUT2)以及与吸收有关的调控因子共同完成.     

钠葡萄糖共转运载体(SGLT1)研究进展

综述了钠葡萄糖共转运载体(SGLT1)研究的新进展，葡萄糖的跨膜转运主要是通过SGLT1结合1mol葡萄糖，2mol的Na^ ，形成Na^ -载体-葡萄糖复合物，顺Na^ 的浓度梯度进入细胞。不同物种的SGLTl具有较高的同源性，大小为662～665个氨基酸。其二级结构业已阐明，它由14个连为一体的α螺旋(MS1～MS14)组成，动物种类、年龄、饥饿状况、Na^ 摄入水平和血清醛固酮水平均影响SGLT1的基因表达，表皮生长因子(EGF)、精氨酸加压素(AVT)、胰岛素样生长因子(IGF)以及蛋白激酶A和蛋白激酶C对SGLT1的表达具有调节作用。     

动物脂肪酸转运蛋白1的研究进展

脂肪含量对人类和动物健康以及动物肉品质均有重要影响.脂肪酸转运蛋白1(fatty acid transport protein 1,FATP1)是整合的跨膜蛋白,属于脂肪酸转运蛋白家族(FATPs)成员,参与脂肪酸跨膜转运及脂肪酸代谢,是影响脂肪含量的关键基因之一,近年来引起了越来越多的关注.本文就FATP1的结构特点...     

生长猪小肠钠依赖型磷摄入特性的研究

选取6头体重接近的3月龄生长期大白猪,屠宰后刮下肠黏膜,提取3段小肠上皮细胞刷状缘膜囊泡(Brush-border membrane vesicles,BBMV)。在室温条件下,研究各段小肠BBMV磷的摄入量,pH和钠离子依赖性,并测定BBMV磷吸收动力学参数。结果表明,生长猪BBMV对磷的主动吸收和被动扩散在酸性pH下均受到抑制。钠离子水平影响BBMV磷的主动吸收。pH7.4条件下,测得钠依赖型磷转运系统Hill系数(napp)为2.07,即转运1个磷酸根,至少有2个钠离子与其协同转运。不同肠段BBMV磷的主动吸收并没有显著差异。pH7.4条件下,生长猪钠依赖型磷转运系统对磷的亲和力常数(Km)为(0.43±0.09)mmol/L。最大转运速度(Vmax)为(2.25±0.19)nmol/(mg蛋白.15 s)。     

日粮中添加姜黄素对免疫应激断奶仔猪肠道抗氧化能力及糖代谢的影响

旨在研究姜黄素对免疫应激断奶仔猪肠道抗氧化能力、二糖酶活性及葡萄糖转运载体的影响。选择28日龄"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪24头,随机分为3个处理组,即对照组(基础日粮组),脂多糖(LPS)组(基础日粮+LPS)和姜黄素(Cur L)组(基础日粮+200 mg/kg姜黄素+LPS),每组8头。试验周期为28 d。于试验第18和28天,LPS组和Cur L组仔猪每千克体重腹腔注射100μg LPS,对照组仔猪注射相同体积的生理盐水。结果表明:添加200 mg/kg姜黄素可以显著降低空肠和回肠黏膜中丙二醛(MDA)含量(P0.05),增加回肠黏膜中麦芽糖酶活性(P0.05)以及上调空肠黏膜中钠/葡萄糖协同转运蛋白1(SGLT1)mRNA表达量和回肠黏膜中葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)mRNA表达量(P0.05)。因此,添加姜黄素可以通过降低过氧化产物的堆积缓解免疫应激对仔猪肠道的损伤,同时增加麦芽糖酶活性以及葡萄糖转运载体mRNA的表达而加强肠道对糖的消化吸收。     

二价金属离子转运蛋白的功能和表达调控

二价金属离子转运蛋白1(divalent metal transporter 1，DMT1)是动物跨膜铁转运蛋白，它主要是介导小肠上皮细胞的铁吸收以及参与铁从内吞小体跨膜转运到胞浆的过程。DMT1 mRNA有2种存在形式：“ IRE”和“-IRE”型，它的表达与铁呈依赖性关系。DMT1 mRNA调控主要是通过DMT1-IRE结合到IRP1的铁参与后的转录调控，但也存在其他未知的调控机制。文中对DMT1的主要功能和铁依赖性调控进行了综述。     

氨基酸转运载体B0AT1(SLC6A19)新型抑制剂的鉴定,作为诱导蛋白质限制和治疗2型糖尿病的潜在目标

中性氨基酸转运载体B0AT1最近被确定为是治疗2型糖尿病及相关代谢失调的靶点。B0AT1介导所有钠依赖性中性氨基酸的摄取。B0AT1需要collectrin(TMEM27)的共表达来在表层表达并发挥催化活性。本研究旨在建立鉴定和评估新型B0AT1的抑制剂的方法。CHO细胞系可稳定表达collectrin和B0AT1。利用高通量筛选以及荧光探针手段检测B0AT1摄取氨基酸期间细胞膜的去极化情况。在进行功能分析的同时,基于与B0AT1高度同源的果蝇多巴胺转运载体的高分辨率结构,使用AutoDock4对计算机模拟化合物进行筛选。我们测定了一系列新型B0AT1转运蛋白抑制剂。Benztropine是转运蛋白的竞争性抑制剂,其IC 50为44±9μmol。该化合物对相关转运体具有选择性,并阻断了小鼠小肠翻转模型中中性氨基酸摄取。本研究建立的方法可以广泛用于鉴定新的转运抑制剂。利用该方法能够可研究上皮转运、诱导蛋白质限制或通过药物化学进一步开发化合物。     

罗伊氏乳杆菌LR1对断奶仔猪血清生化指标和肠道营养物质转运载体mRNA表达的影响

本试验旨在研究罗伊氏乳杆菌LR1对断奶仔猪血清生化指标和肠道营养物质转运载体mRNA表达的影响。选取144头初始体重为(6.49±0.01) kg的21日龄杜×长×大断奶仔猪,随机分为3组,每组8个重复,每个重复6头。对照组饲喂基础饲粮,抗生素组饲喂基础饲粮+100 mg/kg喹乙醇+75 mg/kg金霉素,罗伊氏乳杆菌组饲喂基础饲粮+5×1010CFU/kg罗伊氏乳杆菌LR1。试验期为14 d。结果显示:1)与对照组相比,饲粮添加抗生素显著提高了血清葡萄糖(GLU)的含量(P0.05),且显著降低了血清尿素氮(UN)的含量(P0.05)。2)与对照组相比,饲粮添加罗伊氏乳杆菌LR1显著提高了十二指肠胃动素(MLN)和空肠胆囊收缩素(CCK)的mRNA表达量(P0.05);饲粮添加抗生素显著提高了十二指肠MLN的mRNA表达量(P0.05)。3)与对照组相比,饲粮添加罗伊氏乳杆菌LR1显著提高了十二指肠Na+依赖性谷氨酰胺载体2(ASCT2)、阳离子氨基酸运载体1(CAT1)、小肽转运体1(PepT1)和空肠中性和碱性氨基酸转运载体(rBAT)以及空肠与回肠y+L氨基酸转运体1 (y+LAT1)的mRNA表达量(P 0.05);饲粮添加抗生素显著提高了空肠y+LAT1、CAT1、PepT1和空肠与回肠哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的mRNA表达量(P0.05)。4)与对照组相比,饲粮添加罗伊氏乳杆菌LR1显著提高了十二指肠小肠脂肪酸结合蛋白(I-FABP)、乙酰辅酶A羧化酶α(ACCα)、脂肪酸合成酶(FASN)和十二指肠与空肠脂肪酸结合蛋白3(FABP3)以及十二指肠、空肠与回肠过氧化物体增殖物激活受体γ(PPARγ)的mRNA表达量(P0.05);饲粮添加抗生素显著提高了空肠ACCα的mRNA表达量(P0.05)。5)与对照组相比,饲粮添加罗伊氏乳杆菌LR1显著提高了空肠和回肠钠-葡萄糖协同转运蛋白1(SGLT1)的mRNA表达量(P0.05);饲粮添加抗生素显著提高了十二指肠SGLT1、钠-葡萄糖协同转运蛋白3(SGLT3)的mRNA表达量(P0.05)。综上所述,饲粮中添加5×1010CFU/kg罗伊氏乳杆菌LR1对断奶仔猪的肠道营养物质转运具有良好的促进作用,表现为促进断奶仔猪肠道物理消化和化学消化,促进小肽、氨基酸及脂肪酸吸收转运,增强脂肪酸的合成。罗伊氏乳杆菌LR1在替代猪饲用抗生素方面具有巨大潜力,可用于开发新型猪饲料抗生素替代物。     

神经内分泌因子对体外培养新生犊牛肝细胞MTP mRNA表达的影响

为了阐明神经内分泌因子在奶牛肝脂蛋白组装与转运过程中的调控作用,通过向体外培养的新生犊牛肝细胞添加胰岛素、胰高血糖素和瘦蛋白,采用内对照RT-PCR方法检测神经内分泌因子对体外培养新生犊牛肝细胞微粒体甘油三酯转运蛋白(MTP)mRNA丰度的影响。结果显示,随着细胞培养液中胰岛素和胰高血糖素浓度升高,MTP mRNA的丰度呈现剂量依赖性下降(P<0.01);随着瘦蛋白浓度的增加,MTP mRNA的丰度先升高后降低(P<0.01或P<0.05)。这表明胰岛素和胰高血糖素对肝细胞MTP mRNA表达具有抑制作用,呈现剂量依赖性;瘦蛋白对肝细胞MTP mRNA表达具有低剂量促进而高剂量抑制的双重作用,且均呈现剂量依赖性。     

实时荧光定量RT-PCR检测糖皮质激素对肉仔鸡空肠葡萄糖转运载体mRNA表达的影响

为探讨糖皮质激素对肉仔鸡空肠葡萄糖转运影响的机理,采用实时荧光定量方法研究了长期注射糖皮质激素类药物地塞米松对肉仔鸡空肠上皮细胞钠葡萄糖共转运载体(SGLT1)和葡萄糖易化转运载体(GLUT2)mRNA表达的影响.试验选取21日龄体重相近的AA肉仔鸡24只,随机分为4组,其中3个试验组每只腹部皮下注射地塞米松生理盐水注射液1mL(剂量分别为每1kg体重0.1mg,1mg和5mg),对照组注射等体积的生理盐水,连续7天.结果显示各地塞米松处理组间SGLT1 mRNA的表达量无显著差异(P＞0.05),但各处理组SGLT1 mRNA的表达量均显著低于对照组(P＜0.05);注射地塞米松显著影响了GLUT2 mRNA的表达量(P＜0.05).其中0.1和1 mg/kg体重地塞米松处理组的GLUT2 mRNA表达量均显著高于对照组(P＜0.05),5 mg/kg地塞米松处理组GLUT2 mRNA表达量略高于对照组(P＞0.05).结果表明糖皮质激素可能通过改变SGLT1和GLUT2转录水平的表达来实现对肉仔鸡空肠葡萄糖转运的调节.     

FcRn介导Fc与金黄色葡萄球菌毒力因子融合蛋白跨细胞转运至局部免疫触发位点

为了探究奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌毒力因子的重组蛋白能否经上皮屏障被转运至特定的乳腺局部免疫触发位点,本研究对金黄色葡萄球菌毒力因子重组蛋白FnBPB-ClfA和Fc融合蛋白Fc-FnBPB-ClfA的跨细胞转运机制、新生儿Fc受体(FcRn)是否参与此进程进行了验证。原代奶牛乳腺上皮细胞(pbMECs)接种于Transwell嵌套内的多孔膜上,培养至极性状态且细胞屏障完整,用于胞吞转运试验。将pbMECs对重组蛋白的胞吞转运试验设置为温度处理组(37℃和4℃)、蛋白A处理组、胞转途径抑制剂处理组。结果表明,2种重组蛋白均可被转运跨过pbMECs屏障,该转运作用呈温度依赖性,可能与囊泡介导的转运路径及FcRn受体有关,排除了细胞旁路扩散的可能。蛋白A对FnBPB-ClfA的跨细胞转运及亚细胞定位无明显影响,但明显减少了Fc-FnBPB-ClfA的跨细胞转运及其在细胞膜蛋白、骨架蛋白中的数量,说明Fc-FnBPB-ClfA的Fc与FcRn的结合在胞吞转运作用中发挥重要作用。LY294002、非律平以剂量-效应关系分别降低了FnBPB-ClfA、Fc-FnBPB-ClfA的跨细胞转运。结果表明,Fc融合蛋白Fc-FnBPB-ClfA能经胞吞转运作用跨过pbMECs屏障至局部免疫触发位点,且FcRn参与并促进了Fc融合蛋白的胞吞转运作用。