几种调控因子对生物反应器培养东北刺人参不定根的影响

以东北刺人参不定根为材料,探讨不定根反应器培养过程中通气量、接种密度、反应器大小对其增殖生长的影响。结果表明,在含有4L培养基的5L气升式反应器中,当通气量为300mL/min时不定根长势最佳,鲜质量和干质量最大,分别为92.2、9.5g/L;当接种密度为5g/L(鲜质量)时不定根的增殖效果明显好于其它处理,增殖系数最大为19.6;同时,研究证实了5L反应器的培养条件基本适用于10L和20L反应器的扩大培养。     

利用生物反应器大量生产人参不定根

在5 L气球型生物反应器中,采用完全浸没式培养方式,人参不定根鲜重和干重明显优于间歇浸没式培养;在培养开始时一次性注入含50 g/L蔗糖的培养基,可促进人参不定根鲜重和干重的增加;接种时,将不定根切成1 cm长、接种量为20 g时接种较适宜;增殖培养周期以30天为宜.     

氮源和有机物质对东北刺人参不定根增殖生长的影响

为了筛选东北刺人参不定根组培增殖适宜的培养基成分,以东北刺人参不定根为外植体,研究了MS培养基中NH4+/NO3-和有机物质对东北刺人参不定根增殖生长和分化的影响,同时观察了培养过程中不定根的生长动态。结果表明:MS培养基中NH4+/NO3-为30/30mmol时适宜不定根的生长,鲜物质量和干物质量优于其他MS培养基中NH4+/NO3-,分别为809mg和117mg。当有机物质含量为MS原配方量的1.5倍时,不定根生长较好。通过观察不定根的生长动态发现,培养14d后不定根数随着培养天数的增加而增加,在培养24²6d时东北刺人参不定根生长达到旺盛期,此后不定根数随着培养天数增加而不再增加。     

银白杨组织培养生根条件影响因子研究

为提高西藏地区银白杨组培苗的生根率,筛选出银白杨不定芽诱导生根的最佳培养基,以前期银白杨组培中获得的不定芽为试验材料,设置不同光照周期、蔗糖浓度、琼脂粉含量、不同激素配比及不同pH值等培养条件,筛选出最优生根培养基。结果表明,1/2MS为银白杨的最佳基本培养基,最佳激素为IBA浓度0.4mg/L,最适pH值5.7±0.1;光照12h/d、琼脂6g/L、蔗糖15g/L时银白杨不定芽生根率最高且生长态势良好;综合各影响因子,最终确定银白杨不定芽生根的最佳培养基配方为:1/2MS+IBA0.4mg/L+琼脂6g/L+蔗糖15g/L,pH 5.7±0.1。     

植物激素对杉木组培苗增殖和生根的影响

对NAA、IBA和6-BA对杉木组培苗增殖及生根的影响进行研究,结果表明,培养基中6-BA与NAA、IBA的比例适宜时能明显促进杉木组培苗生长和芽分化,适宜浓度的IBA比NAA更利于根的形成和生长,但激素浓度过高会抑制苗木生长。苗木质量主成分分析表明,增殖培养时,应选择利于芽分化和生长的培养基;生根培养时,应选择利于提高生根率、根数量、根长等的培养基。综合比较后以MS+NAA 0.05mg/L+6-BA 0.3 mg/L+琼脂7 g/L+蔗糖30 g/L为较适宜的增殖培养基,1/2MS+IBA 0.7 mg/L+琼脂7g/L+蔗糖25 g/L为较好的生根培养基。     

美国红栌植株再生体系的建立

为解决美国红栌传统方法繁殖系数低的问题,以其带芽茎段为外植体进行了美国红栌组培植株再生研究。结果表明,美国红栌带芽茎段经0.1%HgCl2体表灭菌5min,在MS+30.0g/L蔗糖+6.0g/L琼脂初代培养基中可获得高质量无菌材料。经过对不同基本培养基及不同植物生长调节剂浓度配比的培养基进行筛选,确定WPM+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA+30.0g/L蔗糖+6.0g/L琼脂为最佳不定芽分化培养基,不定芽分化率可达92%;最佳不定根分化培养基为1/2MS+0.5mg/L NAA+0.1mg/L IBA+15.0g/L蔗糖+6.0g/L琼脂,不定根分化率可达100%。该体系可直接用于美国红栌的苗木生产。     

尾叶桉优良无性系组培快繁研究

文章以尾叶桉(Eucalypt urophylla)优良新无性系的无菌组培苗为材料,MS培养基为基本培养基,研究6-BA、NAA不同质量浓度配比对尾叶桉无菌幼苗丛芽增殖率,以及生根粉种类、质量浓度、不同IBA和NAA配比对不同尾叶桉无性系生根率的影响.试验结果表明,当6-BA质量浓度为0.01 mg/L,丛芽增殖率在NAA质量浓度为0.01、0.1 mg/L时递增;而NAA质量浓度为1、5 mg/L时,则有利于生根;筛选出适宜尾叶桉优良无性系ZQUA10的增殖培养基为MS+0.01 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+6 g/L卡拉胶,增殖系数达到4.7;筛选出适宜尾叶桉优良无性系ZQUA13的生根培养基为1/2MS+0.5 mg/L ABT1+30 g/L蔗糖+6 g/L卡拉胶,生根率达到57.5%;筛选出适宜尾叶桉优良无性系ZQUB58的生根培养基为1/2MS+1 mg/L IBA+0.5 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+6 g/L卡拉胶,生根率达到100%.     

南京椴茎段植株再生繁育技术

通过对南京椴无菌实生苗茎段的组织培养,探索南京椴带芽茎段分化、增殖及生根的最佳培养条件.结果表明,最适宜诱导南京椴不定芽分化的培养基为MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30.0g/L+琼脂5.2 g/L,诱导分化率为100%;最佳芽增殖及继代培养基为MS+BA 0.5～1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+蔗糖30.0 g/L+琼脂5.2 g/L,繁殖系数达4.0～5.0;在生根培养基(1/2MS+BA 0.1 mg/L+IBA 0.5 mg/L+蔗糖20.0 g/L+琼脂5.2 g/L)中添加5.0 g/L AC能明显促进不定根形成,40 d后生根率达56.6%;生根苗移栽至泥炭土中,成活率达80.0%.     

桤叶唐棣组培技术

对桤叶唐棣进行组织培养研究,结果表明,诱导培养基配方为MS+ BA 0.6 mg/L+ NAA 0.12 mg/L+ IBA0.4 mg/L+蔗糖35 g/L+琼脂8g/L,诱导率达到了74％;增殖培养基配方为MS+ BA 1.5 mg/L+ IBA 1.0 mg/L+蔗糖35 g/L+琼脂8 g/L,增殖倍数达到5.56倍;生根培养基配方为1/2MS+ NAA 0.05 mg/L+ IBA 1.0 mg/L+蔗糖35 g/L+琼脂8 g/L,生根率达91％.     

芦苇植株再生体系优化

在前人工作基础上利用禾本科芦苇成熟种子为外植体建立了植株再生体系。芦苇成熟种子经2%洗涤灵溶液洗涤,70%乙醇处理30s,20%＂84＂消毒液处理25min后接种到MS＋4%蔗糖（pH 5.5）的种子萌发培养基中培养,种子萌发率为62%。萌发种子继代至MS＋1mg/L 6-BA＋0.1mg/L 2,4-D＋0.5mg/LNAA＋4%蔗糖（pH 5.5）培养基进行不定芽诱导,不定芽发生率为95%。无根丛生芽继代到不定根诱导培养基1/2MS＋0.5mg/L IBA＋0.5mg/L NAA＋4%蔗糖（pH 5.5）,不定根发生率为90%。     

‘绿岭’核桃种胚无叶腋芽萌发快繁途径的初步研究

以早实薄皮核桃‘绿岭’成熟种胚诱导出的无叶腋芽为外植体,MS为基本培养基,通过调节激素种类和浓度配比,初步研究了‘绿岭’核桃种胚无叶腋芽快繁体系。比较试验结果表明:最佳种胚萌发诱导培养基为MS+IBA 1.0mg/L+6-BA 1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L;种胚无叶腋芽伸长培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+IAA 1.0mg/L+GA31.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L。生根采用两步生根法:离叶柄基部2 mm切的茎段先在DKW+IBA 8.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.0g/L暗培养20d,然后转入DKW+蔗糖30g/L+琼脂6g/L培养基中进行光照培养,生根率为50%。诱导生根的组培苗移栽到大田后成活率为33.3%。     

二穗短柄草植株再生体系的建立

以成熟种子为外植体建立二穗短柄草植株再生体系,结果表明:二穗短柄草成熟种子经1%次氯酸钠消毒液处理20min,接种于MS+4%蔗糖(pH 5.5)培养基中培养5d,萌发率为90%,褐化率为10%,污染率为0;萌发种子转入到愈伤组织诱导培养基MS+1mg/L 6-BA+1mg/L 2,4-D+0.5mg/L NAA+4%蔗糖(pH 5.5)上继代培养,光照条件下愈伤组织诱导率为86%,黑暗条件下愈伤组织诱导率为64%;二穗短柄草愈伤组织在MS+2mg/L 6-BA+0.1mg/L 2,4-D+0.5mg/L NAA+4%蔗糖(pH 5.5)进行不定芽诱导,不定芽发生率为90%;无根丛生芽继代转入到不定根诱导培养基1/2MS+0.5mg/L IBA+0.25mg/L NAA+4%蔗糖(pH 5.5)中,5d以后可以见到不定根的形成,15d后不定根发生率为91%;在研究中还发现,二穗短柄草种子萌发后可直接继代转入不定芽分化培养基形成健壮不定芽,不定芽诱导率为94%。     

拟南芥悬浮细胞系培养条件优化

为了优化拟南芥悬浮细胞系的培养条件,以拟南芥愈伤组织为供试材料,研究了不同的接种量、蔗糖含量和转速对拟南芥悬浮细胞生长的影响情况。结果表明:接种量、蔗糖浓度和转速对拟南芥悬浮细胞的生长具有较大的影响,当接种量为4 g.150 mL-1时,悬浮细胞生长速度最快,鲜质量的增加量为0.463 g.mL-1;蔗糖质量浓度为30 g.L-1时细胞生长最好,干质量的增加量最高为0.198 g.mL-1;转速为120 r.min-1时,细胞增殖最快,能获得分散性与生长状况良好的细胞系。在优化后的培养条件下,拟南芥悬浮细胞呈现"S"型生长规律,继代周期为7 d。     

芦荟组织培养快速育苗试验

芦荟组织培养诱导不定根用培养基MS＋IBA0.3mg/L＋3％蔗糖或MS＋NAA0．3mg/L 3%蔗糖均可，但最佳培养基为MS＋BA3mg/L 3%蔗，一般10d左右开始发生不定根，30d左右长成具3－4片叶和多条不定根的苗。在诱导时，外植体要纵剖或横剖，这样增殖系数可达1：3．5－4。     

金焰彩栾试管微型嫁接技术研究

以金焰彩栾试管苗为接穗,黄山栾树试管苗为砧木,对影响微嫁接苗成活的因子进行了研究。试验以黄山栾树优良单株具腋芽茎段为外植体,灭菌后接种在1/2 MS+0.5 mg/L BA+0.1 mg/L NAA培养基上培养30 d的无菌芽苗为砧木,以金焰彩栾播种苗带侧芽的茎段为外植体、灭菌后接种在改良1/2 MS+0.02 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA+0.05 mg/L IAA+0.02 mg/L IBA+30 g/L蔗糖的培养基中培养30 d的无菌芽苗为接穗,使用劈接法,嫁接后在含有不同基本培养基和不同种类、质量浓度的生长调节剂的培养基上培养。结果表明:以培养30d带2叶的金焰彩栾试管芽苗为接穗,培养30 d带2叶的黄山栾树试管芽苗为砧木,嫁接后以改良培养基1/2 MS+0.02 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA+0.05 mg/L IAA+0.02 mg/L IBA+30 g/L蔗糖进行培养,微型嫁接苗成活率最高,萌发生长效果最好。     

菩提树组培扩繁技术研究

以MS为基本培养基,分别加入不同浓度的生长调节物质6-BA、NAA和IBA的组合,对菩提树当年生长健壮的带侧芽茎段进行组织培养,最后筛选出菩提树初代培养的最适培养基为MS+6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.10 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L;继代增殖的最适培养基为MS+6-BA 1.2 mg/L+NAA 0.05 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L;生根阶段的最适培养基为1/2MS+NAA 0.05 mg/L+IBA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L。同时还筛选出草炭土、细河沙、壤土以3∶5∶2的比例混合是菩提树组培苗移栽成活率最高的移栽基质,为73.2%。     

珍贵阔叶树种刺楸离体繁殖技术

为建立刺楸组织培养体系,选取刺楸成熟胚、休眠芽及幼嫩茎段进行离体培养,探讨不同消毒时长、培养基种类及激素浓度对刺楸离体快繁的影响。结果表明:由于刺楸种子为胚乳性种子,因此选用刺楸的成熟胚进行离体培养,无论采用何种消毒方式均未获得成功;而休眠芽及幼嫩茎段分别使用0.1%的Hg Cl2消毒12、10 min时灭菌效果最佳;在对休眠芽和幼嫩茎段进行离体培养时筛选出1/2MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.1 mg/L为最适培养基及激素组合,腋芽萌发率可以达到66.7%和88.5%;生根培养时1/2MS+NAA0.1 mg/L+20 g/L蔗糖为最适培养基;移栽后1周,生长正常,长势良好。     

不同激素配比及糖浓度对紫色辣椒离体再生影响的研究

采用组织培养方法,研究了不同激素组合、糖浓度对紫色辣椒离体培养不同阶段的影响。结果表明,不定芽分化最佳培养基为:MB5 4 mg/L 6-BA 1 mg/LIBA 20g/L蔗糖,最大分化率为70.24%,且6-BA对分化影响较大;不定芽伸长最佳培养基为:MB5 2 mg/L 6-BA 0.5 mg/L IBA 4 mg/L GA 30g/L蔗糖,最大伸长率和伸长芽数分别是58.33%和0.77个;再生芽在6种生根培养基中的根数都达到4个以上。     

三抗杨叶片高效再生系统的建立

以三抗杨为试材,建立了三抗杨叶片外植体高效再生系统,为三抗杨遗传转化体系的建立奠定了良好的基础.以三抗杨无菌苗叶片作外植体,接种干附加不同浓度的生长素(NAA,IAA)和细胞分裂素(6-BA)的MS培养基上,筛选出叶片分化不定芽的最佳培养基为MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.1 mg/L,蔗糖30 g/L,琼脂6.0 g/L,pH值5.8,不定芽分化率为83.3%.将不定芽接种干附加不同浓度的生长素(NAA,IBA)的MS培养基上,筛选出三抗杨最佳生根培养基为MS IBA 0.1 mg/L NAA 0.1 mg/L,蔗糖15 g/L,琼脂6.0 g/L,pH值5.8.生根率为91.7%.     

陈山红心杉组培苗诱导不定根研究

以陈山红心杉[Cunninghamia lanceolate(Chenshan-red-fir)]无菌试管苗为材料,研究了不同无性系、基本培养基、生长素、有机添加物等因素对芽苗生根的影响。结果表明,不同无性系组培苗生根诱导率有差异,有机添加物对诱导生根影响不大,陈山红心杉组培苗诱导不定根的适宜培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L+IBA 1.0mg/L+20g/L蔗糖+7g/L卡拉胶,其不定根诱导率达88.3%,平均生根数4.12条。