四氮唑染色法快速测定棉籽生产力的研究

本文研究了四氮唑染色法测定棉籽生活力方法中影响染色和预湿速度的因素并进行了改进。     

独一味种子生活力最优测定方法研究

为测定独一味种子生活力及最佳染色条件，建立独一味种子活力测定的快速方法，以野生独一味种子为材料，采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法，通过单因素试验、正交试验研究不同浸种温度、浸种时间、染色温度、染色时间和TTC浓度对独一味种子生活力测定的影响。结果表明，5个因素对独一味种子生活力的影响依次为：染色时间>染色温度>TTC浓度>浸种时间>浸种温度；正交试验染色最佳条件为25℃水浸泡9 h、0.1%TTC、40℃恒温箱染色9 h。     

四唑染色法测定抗肿瘤中药半枝莲种子生活力的研究

采用染色全过程观察和正交试验方法研究了TTC浓度、染色温度和时间对半枝莲种子生活力的影响,探讨半枝莲种子生活力测定的最佳条件.结果表明:四唑染色法能够很好地检测半枝莲种子生活力,估测种子潜在的发芽能力.TTC浓度和染色时间在生活力测定中呈一定的线性关系.试验表明,30℃下浸种30 min待种子完全吸胀后,置于30～45℃黑暗条件下、TTC浓度0.5%,染色40～60 min为半枝莲种子生活力测定的最佳条件.     

四唑染色法测定唐古特大黄种子生活力的研究

采用随机区组试验,研究四唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride,缩写为TTC)染色法测定唐古特大黄种子生活力的方法.结果表明,TTC溶液浓度和染色时间对唐古特大黄种子胚的染色效果均具有显著影响,在30℃黑暗条件下,以0.20％ TTC溶液染色3h为生活力测定的最佳条件;同时,建立了四唑染色法测定唐古特大黄种子生活力的鉴定标准.     

四唑染色法快速测定任豆种子生活力的研究

根据四唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride,缩写TTC)染色法测定种子生活力的原理,研究不同四唑溶液浓度,不同染色温度和不同染色时间对任豆种子生活力测定的影响,摸索出测定任豆种子生活力的最佳条件.结果表明,溶液浓度,染色温度,染色时间三者之间存在一定的关系,通过改变三之者中的一者或两者可以达到改变其它两者或一者的目的,因此,可根据实际需要来确定测定条件.比较四唑染色法测定任豆种子生活力的不同条件,本文提出:温度为25℃,浓度为0.5%,染色时间为7h是测定任豆种子生活力的最佳条件.     

四唑法测定几种草花种子生活力标准的研究

用四唑溶液测定一串红、万寿菊、百日草、翠菊、三色堇、鸡冠花6种花卉种子的生活力,找出6种花卉种子的生活力测定方法,包括制胚方法、染色时间、浓度,以及生活力高低测定的标准,绘制了6种花卉种子的四唑染色图谱。     

TTC法测定山豆根种子生活力条件的优化

以山豆根种子为实验材料,采用TTC法测定生活力,分别通过正交试验、单因素试验和Central Composite Design响应面试验对测定条件进行优化,从TTC浓度、染色温度和染色时间为指标。结果显示,各因素对种子生活力测定的影响差异不显著;单因素试验的最佳测试条件为TTC浓度0.7%、染色温度40 ℃、染色时间4 h;Central Composite Design响应面试验优化后,最佳测试条件与单因素试验结果一致。表明用响应面分析法对TTC法测定山豆根种子生活力的条件进行优化是可靠的。     

肉桂种子生物学特性及生活力研究

为了探究肉桂种子生物学特性及生活力测定的最适条件,对肉桂种子形态特征、千粒重、萌发特性、生活力等进行研究,探索不同萌发环境对肉桂种子发芽率的影响,并采用2,3,5-氯化三苯基氯化四氮唑(TTC)染色法测定肉桂种子生活力,通过正交设计研究不同染色温度、染色时间、TTC溶液浓度对肉桂种子生活力测定的影响。结果表明,肉桂种子平均长度为10.89 mm,平均直径为7.41 mm,千粒重为262.41 g,含水量为35.99%,在湿沙条件下发芽率最高,为76.76%;极差分析表明,TTC浓度和染色温度是影响肉桂种子生活力的较重要的因素。研究表明,湿沙催芽能显著提高肉桂种子发芽率,TTC法最佳染色条件为TTC浓度为1%、染色温度为35℃、染色时间为8 h。     

肉苁蓉种子生活力快速测定方法研究

采用单因素、多因素交互及正交试验设计等方法,对肉苁蓉种子生活力测定过程中的预处理方法四唑染色液浓度及pH值进行优化,初步建立了肉苁蓉种子生活力的快速测定技术,使测定程序简化、时间缩短,并确定38℃下去皮直接染色18 h的最适宜染色液pH值为6.4,TTC浓度为0.3%～1.0%.     

TTC法快速测定白鲜种子生活力

采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定白鲜种子生活力,利用正交试验设计,研究不同的浸种温度、浸种时间、TTC溶液浓度、染色温度和染色时间对白鲜种子染色效果的影响。结果表明,TTC法能够快速测定白鲜种子的生活力,其染色最佳条件为30℃浸种6 h,35℃条件下0.3%TTC溶液避光染色24 h。     

新城疫病毒诱导黄粉虫抗病毒肽的效果分析

目的：观察鸡新城疫病毒（NDV）诱导黄粉虫是否产生抗鸡新城疫病毒肽。方法：先用鸡胚培养鸡新城疫病毒以扩增病毒,然后提取病毒液备用,接着用鸡新城疫病毒液接种刺伤黄粉虫幼虫,2～3天后提取黄粉虫体内的抗病毒物质,测定其血凝效价和鸡新城疫病毒诱导鸡胚发病抑制试验结果。结果 ：黄粉虫抗病毒肽在血凝抑制试验中的效价为1∶64;在鸡新城疫病毒诱导鸡胚发病抑制试验中有一定效果,但不明显。     

谷朊粉复合改性及其在食品中的应用研究

主要研究了磷酸化—酶法复合方法改性小麦面筋蛋白,得到改性小麦面筋蛋白的最佳工艺条件为:小麦面筋蛋白添加量6%,三聚磷酸钠添加量2.5%,中性蛋白酶添加量0.08%,温度30℃,酸解pH值9;以复合改性小麦面筋蛋白膜的阻水性和消化率为考察指标,经初步研究得到制备可食性膜的较好工艺条件为:小麦面筋蛋白添加量7%,三聚磷酸钠添加量2.5%,中性蛋白酶添加量0.05%,温度30℃,酸解pH值10.5。     

广西野生毛葡萄种质资源性状评价

为了解决生产上低产不稳产和种质创新问题,2003年至2008年,对来自广西各地的124份野生毛葡萄种质进行结实和果实等性状调查和检验分析,主要性状为：萌芽期为4月12日,开花期为5月22日,成熟期为9月4日;萌芽率44.8%,变异幅度为15%~100%;结果枝率71.7%,变异幅度为12.5%~100%;每结果枝穗数2.2穗,变异幅度为1.2~4.1穗;坐果率27.1%,变异幅度为7.1%~56.1%;单穗重84.8 g,变异幅度为13.6~296.6 g;单果重1.5 g,变异幅度为0.8~2.8 g;可溶性固形物12.3%,变异幅度为9.3%~16.5%;有种子3.3粒,变异幅度为1.8~4.2粒;出汁率71.6%,变异幅度为63.4%~80.1%;水溶性总糖11.70 g/100mL,变异幅度为6.08~18.11 g/100mL;总酸2.05 g/100mL,变异幅度为1.10~3.14 g/100mL;单宁0.27 g/100mL,变异幅度为0.09~0.64 g/100mL;维生素C 0.67 mg/100mL,氨基酸总量315.6 mg/100mL。收集到综合性状优良的两性花原生种质。     

长白山东坡落叶松林下笃斯越桔群落的生境特征

为深入了解长白山笃斯越桔群落的生态习性,对长白山东坡笃斯越桔群落的生长环境进行了调查研究。结果表明：长白山东坡于海拔1317 m处首次开始出现笃斯越桔群落,其立木环境是杂木林,林地叶面积指数约1.7,样地的立木径级分布大多都在＜10 cm之内,最大径级出现在24~26 cm内。高度级分布大多出现在2~12 m,最大高度出现在16~18 m。落叶松-笃斯越桔群落样地立木主要为落叶松,偶有白桦,样地叶面积指数在0.85~2.04之间,10~12 cm径级树木最多,14~16 cm径级树次之。14~16 m高度级树分布最多,其次是6~8 m树。笃斯越桔数量与叶面积指数呈反比率关系,适宜具有一定光照的环境。长白山东坡落叶松林下笃斯越桔的生长基质是以苔藓和凋落物为主的土壤基质,基质垂直结构自上而下依次分为4层,即活苔藓层、死苔藓层、泥炭层和火山灰层。死苔藓层平均厚度6.0 cm,笃斯越桔根系的分布最多。落叶松林下笃斯越桔群落中,笃斯越桔的平均基径在(2.61±1.40)~(4.57±1.49) mm之间,笃斯越桔均高在(33.36±10.16)~(59.50±13.54) cm之间,笃斯越桔是群落优势种。     

长白猪甘露聚糖结合凝集素A基因的 克隆与原核表达

从长白猪肝脏细胞中提取总RNA,通过RT-PCR法扩增pMBL-A基因,与pMD18-T载体连接进行TA克隆,得到猪甘露聚糖结合凝集素A（porcine mannan-binding lectin A,pMBL-A）基因。再亚克隆到pPROEXHTb表达载体上,构建重组表达质粒。将阳性重组表达质粒转化到大肠杆菌中诱导表达重组pMBL-A蛋白,通过SDS-PAGE检测蛋白的表达情况。结果成功扩增得到包括完整开放读码框长为875bp的全长cDNA片段,并原核表达了重组蛋白,为进一步研究该蛋白的遗传特征以及为猪遗传育种方面的研究提供依据。     

区域作物旱灾产量和经济损失定量估算——以唐山地区为例

以1991a-2006a唐山地区夏粮作物旱灾面积为基础,从产量损失和经济损失两方面对旱灾损失进行了估算。结果显示：⑴1991a-2006a夏粮因旱累计减产17.99×108kg,平均每年减产1.12×108kg;产量损失最大年份为1999a（减产2.2×108kg）,产量损失最小年份为2006a（减产0.2×108kg）;（2）按1990a不变价格计算,累计经济损失15.3×108元,平均每年损失0.96×108元。按当年价格计算,累计经济损失19.6×108元,平均每年损失1.2×108元;（3）减产利润损失最大年份为1995a（利润损失为0.68×108元）,利润损失最小年份为2000a（利润损失为-178.4×104元）。不变价格和当年价格计算的经济损失以及产量损失与利润损失间的非一致性,对农业保险政策的制定具有一定的借鉴作用。     

海南水稻土有机质的时空变异

根据2004年采集的300个海南不同地区水稻土耕作层样品分析数据和第二次土壤普查的706个剖面点资料,对全省水稻土有机质时空变异特征进行了研究和分析。结果表明,海南水稻土有机质近20多年来下降十分明显,根据第二次土壤普查标准,属于“丰”水平的样点数从31.9%下降到22.4%,“中”水平的样点数变化不大,基本保持在31%左右,而“缺”水平样点数明显增加,从37.3%升高到46.6%,说明改变当前海南农民重化肥、轻有机肥偏向,大力提倡秸杆还田,增施有机肥,补充土壤有机质是维持海南水稻田地力的当务之急。     

抗凋亡融合蛋白PTD-Bcl-xL原核表达载体的构建及表达纯化

人工抗凋亡蛋白PTD-Bcl-x L能保护多种因素引起的细胞异常凋亡,为了获得高纯度Bcl-x L与PTD(Protein transduction domains)的融合蛋白,首先采用TRIzol法提取SD大鼠肝脏总RNA,将RNA反转录为c DNA,设计引物以c DNA为模板,PCR扩增Bcl-x L基因,构建p UM19-T-Bcl-x L质粒,并对质粒双酶切鉴定和测序鉴定;其次设计包含PTD序列的Bcl-x L引物,以测序正确的p UM19-T-Bcl-x L质粒为模板,PCR扩增PTD-Bcl-x L序列,将扩增序列克隆入p ET28a载体,构建PTD-Bcl-x L蛋白的原核表达质粒p ET28a-PTD-Bcl-x L,并对p ET28a-PTD-Bcl-x L载体双酶切鉴定和测序鉴定;将p ET28a-PTD-Bcl-x L重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达,并对IPTG诱导融合蛋白表达的浓度和诱导时间进行了优化;SDS-PAGE分析表达蛋白的可溶性情况,在变性条件下用Ni-NTA琼脂纯化融合蛋白;最后用SDS-PAGE、Western Blot及质谱对融合蛋白进行鉴定。结果表明:双酶切p UM19-T-Bcl-x L质粒出现约774 bp大小条带,p UM19-T-Bcl-x L质粒测序结果与NCBI数据库比对序列一致,表明成功构建p UM19-T-Bcl-x L质粒;双酶切p ET28a-PTD-Bcl-x L质粒出现约744 bp大小条带,p ET28a-PTD-Bcl-x L质粒测序结果与预期序列一致,表明成功构建了p ET28a-PTD-Bcl-x L原核表达载体;在IPTG诱导下p ET28a-Bcl-x L重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出36 k Da大小蛋白,最优IPTG诱导浓度为0.1 mmol/L,最佳IPTG诱导时间为6 h;SDS-PAGE电泳显示融合蛋白主要出现在菌液超声后的沉淀里,以包涵体形式表达,经Ni-NTA琼脂纯化获得了高纯度的融合蛋白;Western Blot和质谱鉴定证明IPTG诱导表达蛋白和纯化的融合蛋白为PTD-Bcl-x L蛋白。纯化得到了PTD-Bc L-x L融合蛋白,推进了PTD-Bcl-x L蛋白在猪、牛等家畜精液冷冻保存的应用进程。     

高温和阿维菌素对朱砂叶螨的胁迫效应及热休克蛋白研究

在实验室内研究了高温和阿维菌素对朱砂叶满的胁迫效应及胁迫后热休克蛋白的表达。结果表明,朱砂叶螨在34℃下,持续高温饲养1年后对阿维菌素的LC50为26℃下饲养的敏感品系的2.1396倍;抗阿维菌素品系连续用药24代,抗性倍数达4.1494倍。抗阿维菌素品系与敏感品系在高温48℃下胁迫1h后死亡率差异不显著,但均显著高于耐高温品系;采用SDS-PAGE电泳检测各品系43℃热处理前后的蛋白表达情况,结果发现,朱砂叶螨耐高温品系与敏感和阿维菌素抗性品系相比,热急前后,97.2kDa条带都特异表达;阿维菌素抗性品系与敏感品系相比,28.5、26.8kDa条带表达增强,抗性品系43℃热激1.5h后,98.6 kDa条带表达明显强于其它条带;43℃热激1.5h后,各品系分子量为54.9kDa的主条带表达减弱,75.9kDa条带表达增强,其中以耐高温品系的75.9kDa条带表达最强。研究结果推测这些蛋白表达的变化可能与其耐热性及抗药性有关。     

除草剂丁草胺人工抗原合成及其抗体制备研究

以除草剂丁草胺、巯基丙酸为原料,合成丁草胺半抗原,用氢核磁共振、电喷雾质谱、红外光谱方法进行鉴定;通过活泼酯法将半抗原与载体蛋白偶联制备丁草胺人工抗原,用紫外扫描法鉴定;免疫动物后,间接竞争ELISA检测鉴定抗体.结果表明,巯基丙酸与丁草胺连接生成半抗原,半抗原被连接到载体蛋白上,抗血清能被丁草胺阻断,丁草胺人工抗原合成成功,获得了抗丁草胺多克隆抗体.