低值水产品蛋白资源酶解产物的抗氧化性分析和评价

为分析评价水产品蛋白酶解产物活性特性及合适水解蛋白酶类的选择。采用不同的商品化蛋白酶和枯草蛋白酶BPN对市场上常见的经济鱼类白鲢和彩云雕蛋白进行酶解,测定各种酶在水解过程中的水解度,并对酶解产物的抗氧化活性进行了比较分析。结果表明：蛋白酶在水解反应的前20 min内水解度迅速增加,20~120 min之间逐渐达到平衡。复合蛋白酶和水解蛋白酶具有较强的水解能力,其中水解蛋白酶对彩云雕2 h的水解产物最高可达15.92%。白鲢鱼枯草蛋白酶水解液的抗氧化活性最好,其DPPH清除能力为87.11%。不同蛋白酶水解不同的水产品蛋白产生的酶解产物活性肽成分具有明显的差异。     

鱿鱼内脏成分分析及自溶条件的研究

以水解度和水解液中氨基酸态氮的含量为评价指标,以提高鱿鱼内脏水解度为目的,测定了鱿鱼内脏基本成分,进行单因素试验确定了鱿鱼内脏的自溶最佳料液比1:1,pH值4.5,恒温45℃,自溶12h。同时添加适量的半胱氨酸和巯基乙醇,紫外照射和超声处理对自溶都有促进作用。     

复合菌共生发酵法酶解甘薯蛋白制备生物活性肽的研究

以甘薯蛋白为原料,采用复合菌共生发酵法制备生物活性肽。通过Sephadex G-25型色谱柱对发酵产物进行分离,并利用高效液相色谱法做进一步的分析验证,测定了产物的DPPH自由基清除能力及还原能力。结果表明,甘薯蛋白在枯草芽孢杆菌与黑曲霉比例1.5∶1.0,以10%的接种量在5%甘薯蛋白发酵培养基中发酵48 h后,可水解为具有一定DPPH自由基清除能力以及还原能力的小分子肽类物质。     

杜仲愈伤组织及其叶和皮的抗氧化活性及降血糖能力比较

本研究用60%甲醇和60%乙醇提取杜仲愈伤组织与杜仲叶和杜仲皮的活性成分,测定其总黄酮和总酚含量,比较分析其抗氧化活性及降血糖能力。结果表明,杜仲叶中总黄酮含量和总酚含量最高,杜仲愈伤组织次之,杜仲皮最低。杜仲叶中60%甲醇和60%乙醇提取物中总黄酮含量分别达到283.738 mg QuE/g DM和285.065 mg Qu E/g DM,总酚含量分别达到59.100 mg GAE/g DM和66.720 mg GAE/g DM。抗氧化活性分析表明,60%甲醇提取物DPPH·和ABTS+·清除能力均为叶>愈伤组织>皮,对Fe2+络合能力为愈伤组织>叶>皮。60%乙醇提取物对DPPH·和ABTS+·清除能力均为叶>皮>愈伤组织,对Fe2+络合能力为叶>愈伤组织>皮。60%甲醇和60%乙醇提取物对α-葡萄糖苷酶活性抑制能力均为叶>皮>愈伤组织。相关性分析表明,杜仲总黄酮、总酚与DPPH·清除能力的相关系数分别为-0.975、-0.972,与ABTS+·清除能力的相关系数分别为-0.988、-0.986,表明总黄酮和总酚与DPPH·清除能力、ABTS+·清除能力具有显著相关性。总黄酮、总酚与Fe2+络合能力的相关系数分别为-0.541、-0.514,说明总黄酮、多酚与Fe2+络合能力之间有一定的相关性。总黄酮、总酚与α-葡萄糖苷酶活性抑制能力的相关系数分别为-0.871、-0.883,说明总黄酮、多酚与α-葡萄糖苷酶活性抑制能力具有显著相关性。本研究为传统药用部位杜仲皮的替代品开发和利用提供科学依据。     

不同品种高粱米糠提取物的体外抗氧化活性研究

研究不同溶剂对高粱米糠提取物含量及抗氧化活性的影响。以80%的乙醇、甲醇、丙酮为溶剂在60℃水浴条件下分别提取高粱米糠提取物,并对所得提取物进行体外抗氧化活性评价。结果表明,在一定浓度范围内,其抗氧化活性与体积分数呈正相关;3个品种对Fe3+的还原能力、OH自由基及DPPH自由基的清除能力为乙醇甲醇丙酮。     

碱性蛋白酶水解苦荞的抗氧化活性研究

苦荞生物活性肽生理保健功能的实现主要依赖于其自身的抗氧化活性,为此提出碱性蛋白酶水解苦荞的抗氧化活性研究。以西荞2号和2.4 AU/g的2709碱性蛋白酶为试验材料,在配制苦荞蛋白的基础上,以温度、pH值、2709碱性蛋白酶的使用量以及水解时间为因素指标,分别构建3个不同的因素水平,采用正交试验的方式进行测试。对于苦荞碱性蛋白酶水解抗氧化活性的检测,以DPPH自由基的清除能力和ABTS+自由基清除能力为评价指标。根据测试结果发现,在温度参数为45.0℃、pH值设置为9.0、2709碱性蛋白酶使用量为60.0 AU/g、水解时间为4.0 h的条件下,碱性蛋白酶水解苦荞的抗氧化活性最高;在测试的4个因素中,温度对苦荞水解产物的抗氧化活性影响最明显,其次是pH值;当达到最优水解时间条件后,水解时间对苦荞水解产物的抗氧化活性影响不显著。     

蜂蛹蛋白的酶解工艺研究

以蜜蜂蜂蛹为原料,研究蜂蛹蛋白质酶解工艺,并对所得结果进行分析。结果表明,胰蛋白酶水解蜂蛹蛋白质最适条件为:酶解温度为60℃,酶用量为1.5%,酶解时间1.5 h,pH值为8.0,料水比为1∶8,最适水解条件下,水解液中的氨基氮质量浓度为1.526 mg/mL;中性蛋白酶水解蜂蛹蛋白质最适条件为:酶解温度为45℃,酶用量为2.0%,酶解时间为1 h,pH值为7.5,料水比为1∶6,最适水解条件下,水解液中的氨基氮质量浓度为2.068 mg/mL;最优水解酶是中性蛋白酶;双酶水解蜂蛹蛋白质的最适条件为:总酶量为2.0%,酶量比为1∶2,酶解温度50℃,酶解时间为2 h,最适水解条件下,水解液中的氨基氮质量浓度为1.889 mg/mL。双酶同时水解的效果不及中性蛋白酶。     

蜂蛹蛋白的酶解工艺研究

以蜜蜂蜂蛹为原料, 研究蜂蛹蛋白质酶解工艺, 并对所得结果进行分析。 试验结果表明, 胰蛋白酶水解蜂蛹蛋白质最适条件为： 酶解温度为 60 ℃, 酶用量为 1.5%, 酶解时间 1.5 h, pH 值为 8.0, 料水比为 1∶8, 最适水解条件下, 水解液中的氨基氮含量为 1.526 mg/mL; 中性蛋白酶水解蜂蛹蛋白质最适条件为： 酶解温度为 45 ℃, 酶用量为 2.0%, 酶解时间为 1 h, pH 值为 7.5, 料水比为 1∶6, 最适水解条件下, 水解液中的氨基氮含量为 2.068 mg/mL;最优水解酶是中性蛋白酶; 双酶水解蜂蛹蛋白质的最适条件为： 总酶量为 2.0％, 酶量比为 1∶2, 酶解温度 50 ℃,酶解时间为 2 h, 最适水解条件下, 水解液中的氨基氮含量为 1.889 mg/mL。 双酶同时水解的效果不及中性蛋白酶。     

用酶法水解酒糟生产新型调味品的研究

以黄酒酿造副产物酒糟为主要原料,以酸性蛋白酶和α-淀粉酶为水解剂,对酒糟的水解条件进行正交试验研究。结果表明,酒糟的最佳水解条件为:酸性蛋白酶与α-淀粉酶的质量比为1∶1,加酶总量为0.07g/100g酒糟,水解温度为45℃,水解液pH值为3.5,水解时间为10h,酒糟和水的固液比为1∶3。在此条件下,经酶解和过滤,浓缩至酒糟相等质量的水解液,其总可溶性固形物和氨基态氮含量分别为9.0%和0.570%。     

文蛤肉酶法水解条件的优化及最适蛋白酶的选择

以文蛤肉为原料,探讨了胰蛋白酶的加酶量、水解时间、水解温度、pH值及液固比对文蛤肉水解液总氨基氮含量和水解得率的影响规律,确定文蛤肉酶解的最优条件为酶解温度50℃,加酶量4000U/g原料,pH值为（8．00±0．05）,水解时间5h,液固比3：1。再以文蛤肉水解液的水解度、水解得率及风味评分值为指标对该酶解优化条件下获得的产品与精制中性蛋白酶水解优化条件下获得的产品进行比较。结果表明,胰蛋白酶为酶法水解文蛤肉最适宜的蛋白酶,其酶解所得文蛤肉水解液的水解度、水解得率及风味评分值分别为42．44％、82．86％及205．92。     

酶解油菜蜂花粉抑制超氧阴离子自由基的研究

【研究目的】探讨油菜蜂花粉中水溶性有效组分的抗氧化能力及其在黄嘌呤氧化酶体系中抑制O2-.的机理。【方法】采用酶解技术和膜分离技术提取分离油菜蜂花粉中水溶性抗氧化有效组分,用黄嘌呤氧化酶体系测定酶解物的不同相对分子质量级分淬灭超氧阴离子自由基(O2-.)的能力。【结果】实验结果表明,经酶解和超滤后得到的相对分子质量大于1000的组分抑制O2-.的效果非常显著【结论】酶解和膜分离技术是提高花粉抗氧化功效成分含量的有效途径。     

超声辅助酶解茶渣蛋白制备抗氧化活性肽

利用食源蛋白制备具有抗氧化能力的天然活性肽是当前的研究热点。为了优化超声辅助酶解茶渣蛋白制备抗氧化活性肽工艺,本研究以茶渣为原料,以酶解液DPPH清除率为指标,在单因素逐级优化基础上,选定酶解pH值、温度、时间、加酶量进行4因素3水平正交试验设计和分析。结果表明,碱性蛋白酶较好,在p H值为7.5、温度50℃、时间20 min、加酶量为400 U/g、超声功率为105 W的优化条件下酶解,酶解液对DPPH清除率达为85.36%,比对照活性提高了为31.87%。可见,在本试验条件下低功率超声能有效提高碱性蛋白酶酶解茶渣蛋白效率,增加抗氧化活性肽得率,为开辟茶渣高值化利用的新途径提供实验依据。     

牛蒡根酶解物的制备及其对甜瓜生长与品质的影响

为了提高牛蒡根下脚料酶解物的收率并验证其肥效,笔者采用响应面法对复合酶的组成和酶解条件进行优化,并通过盆栽试验验证酶解物对甜瓜生长和品质的影响。结果表明,复合酶的最佳组成为纤维素酶47.3%、中性蛋白酶1.0%、碱性蛋白酶51.7%,最佳酶解条件为49.9℃、pH 6.42、底物浓度6.94%、酶底比2.536%。在此条件下水解3 h,牛蒡根酶解物的收率可达74.83%,可溶性蛋白得率可达11.06%,可溶性糖得率可达37.49%。牛蒡根酶解物富含有机质、可溶性糖和氨基酸等肥效成分,具有促进甜瓜生长,提高其产量和品质的作用。复合酶法水解牛蒡根下脚料具有技术可行性,酶解产物收率高且富含有机养分,可用作水溶性有机肥料。     

酶解金枪鱼头蛋白制备羟基自由基清除物的研究

用5种蛋白酶(木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、typsin、pepsin以及Alcalase 2.4L)分别酶解金枪鱼头蛋白,以羟基自由基清除率为指标,筛选出羟基自由基清除力最强的是Alcalase 2.4L的酶解液,通过响应面试验优化Alcalase2.4L最佳酶解条件为:酶解时间340 min,酶解温度54℃,加酶量0.38%,该条件下酶解液的羟基自由基清除率最佳,为63.67%。     

鳗鱼加工副产物制备抗氧化肽酶解条件的优化

采用响应面方法,对鳗鱼加工副产物制备抗氧化肽的酶解条件进行优化。结果表明,酶与底物蛋白比例伍,）、酶解温度（如）和酶解时间（墨）与酶解产物抗氧化活性（Y,以酶解液还原力评价）之间满足回归方程：Y=-2．77＋0．26X1＋0．0971X2＋0．32X3-0．00127X1X2-0．0153XiX3＋0．000658X2X3-0．0194X11^2-0．0931X22-0．049X,2;该三个因素对酶解产物的还原力均有显著影响（P〈0．05）,其影响力的大小依次为：X1〉X3〉X2;X1与X2和X1与五的交互作用对酶解产物的还原力也有显著影响（P〈0．05）;过度酶解可导致酶解液还原力的降低：鳗鱼加工副产物制备抗氧化肽的最优酶解条件为：酶与底物蛋白比例为3．84％．50．6℃温度下酶解3h。经6次验证试验．酶解产物的还原力与预测值无显著差异,酶解产物清除DPPH自由基的EC50值为O．32mg／mL。     

蚕蛹蛋白抗氧化肽的制备及其纯化

以DPPH自由基清除率为指标,采用正交试验,优化Alcalase酶解蚕蛹蛋白制备抗氧化肽的工艺条件;采用超滤、DEAE-52纤维素柱层析,以及Sephadex G-50柱层析分离纯化蚕蛹蛋白抗氧化肽。试验结果表明,酶解液制备蚕蛹蛋白抗氧化肽的最优工艺条件为:酶解温度30℃,pH值7.5,时间20min,底物质量分数3%,加酶量3.5%。Mr≤5ku时,组分有很强的体外抗氧化活性,从Mr≤5ku组分中获得了5个抗氧化肽组分,它们的体外抗氧化活性大小依次为:组分Ⅱ>组分Ⅲ>组分Ⅰ>组分Ⅴ>组分Ⅳ。     

小分子胶原多肽的抗氧化活性研究

为了研究小分子胶原多肽清除DPPH?自由基、羟自由基(-OH)的能力和抗氧化的能力。采用体外DPPH?自由基和羟自由基(-OH)清除系统测定小分子胶原多肽清除自由基的能力;建立D-半乳糖致衰老的模型小鼠,测定小鼠血液及肝脏组织内的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和丙二醛(MDA)含量。结果表明,1000 kDa以下胶原多肽(CP1)组分在10 mg/mL浓度时,对DPPH?自由基的清除率为80%;40 mg/mL时对-OH的清除率为91.56%。与模型组相比服用CP1的小鼠血清和肝脏丙二醛(MDA)含量显著降低(P＜0.01);超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力显著升高(P＜0.05)。表明小分子胶原多肽具有显著的抗氧化作用。     

EGCG EGCG4″Me和EGCG3″Me清除DPPH自由基的研究

采用DPPH自由基检测法测定了EGCG,EGCG4″Me和EGCG3″Me清除自由基的活性。在反应时间44 min和波长517 nm下测定了EGCG,EGCG4″Me和EGCG3″Me清除DPPH自由基的EC50值。结果表明,三者都具有明显的清除作用,其EC50值分别为1.208,2.499,1.632 mg/L。