蹄疫诊断技术研究进展

口蹄疫是偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病,可使世界范围内的畜牧业遭受严重的经济损失,及时准确的诊断是防制口蹄疫的重要环节.诊断口蹄疫的方法可分为临床诊断、生物学实验、血清学诊断、分子生物学检测技术及环介导等五类技术,每类技术中又包括数个具体技术.论文对其优缺点进行比较,并对口蹄疫诊断技术研究进行了展望.     

动物隐性携带口蹄疫病毒的检测方法研究进展

动物隐性带毒的检测在口蹄疫预防控制中有着十分重要的意义。多年来,为了有效地检测出动物隐性携带的口蹄疫病毒,人们采用了各种各样的检测方法,常用的有采集食管-咽喉分泌液进行病毒分离和应用血清学技术检测血清抗体等。近年来,随着分子生物学技术和基因工程技术的发展,不管是检测抗原还是检测抗体,对于口蹄疫隐性带毒的检测和研究都有了一些新的进展,如应用PCR技术检测病毒核酸和应用血清学技术检测抗非结构蛋白抗体,这些新的检测方法的建立使口蹄疫隐性带毒的检测更加可靠。文章对一些口蹄疫隐性带毒的检测方法和最新的研究进展进行了综述。     

口蹄疫诊断技术研究进展

口蹄疫是偶蹄动物的一种重要的烈性传染病，可使世界范围内的畜牧业遭受严重的经济损失，作者综述了目前的口蹄疫诊断技术研究进展，其中包括了传统的病毒分离技术，实验室的血清学检测技术以及分子生物学诊断技术等，着重对目前在全世界应用广泛的ELISA技术进行了重点介绍，并对口蹄疫诊断技术进行了展望。     

口蹄疫新型诊断技术的研究进展

近年来,口蹄疫诊断检测技术得到了快速改进和发展,本文从工作原理、技术特点、开发使用情况等方面对新型病原学和血清学口蹄疫诊断技术进行综述,为今后该病诊断检测技术的应用选择提供参考.病原学核酸检测技术包括直接扩增反转录聚合酶链技术(Directly quantitative reverse transcrip-tase p...     

口蹄疫诊断技术研究进展

口蹄疫的有效控制关键在于早期检测 ,然而有很多疾病症状与口蹄疫相似 ,仅靠临床症状难以确诊 ,因此必须进行实验室诊断。实验室诊断包括病毒学诊断和血清学诊断。病毒学诊断方法有病毒分离、补体结合试验、酶联免疫吸附试验 ( EL ISA)、RT-PCR以及乳胶凝集试验 ( L AT)。 RT-PCR有待进一步完善 ,而用于野外检测的现场诊断方法已取得可喜进展。血清学诊断包括中和试验和 EL ISA,中和试验已经被 EL ISA方法取代 ,并且通过检测非结构蛋白的抗体可以区分感染动物和免疫动物。更加快速、敏感、可靠以及用于检测潜伏感染的诊断技术将是今后研究的热点。     

口蹄疫检测技术的研究进展与应用

从生物学试验、血清学诊断技术和分子生物学检测技术等方面概述了目前口蹄疫检测技术的研究进展及其应用。其中生物学试验包括动物试验和细胞培养;血清学诊断技术包括补体结合试验、中和试验、凝集试验、酶联免疫吸附试验和免疫胶体金快速检测技术等;分子生物学检测技术包括反转录聚合酶链式反应、核酸探针、核酸序列分析和等电聚焦等。     

口蹄疫诊断技术的研究进展

综述了口蹄疫的诊断方法,包括临床诊断、病毒分离、血清学、分子生物学及一些新型的诊断技术,尤其对ELISA、PCR和基因芯片等快速、灵敏的诊断技术做以阐述,对其优缺点进行比较。     

一步法RT-PCR快速检测口蹄疫O型病毒

目前检测口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)常用技术主要有动物接种、病毒分离和血清学试验等[1,2],但这些方法存在费时、敏感性低等缺点。近年来,随着分子生物学的发展和PCR技术的建立,许多学者又将PCR技术应用于FMDV的检测[3~8],该方法克服了目前常规方法的某些缺点,具有良     

O型口蹄疫与亚洲Ⅰ型口蹄疫临床诊断鉴别要点

口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒引起的偶蹄类动物共患的急性、热性、接触性传染病,是危害最为严重的家畜传染病之一.世界动物卫生组织(OIE)将此病列为A类传染病的第一位,我国也将口蹄疫列为一类动物疫病.在实际工作中,借助于血清学诊断技术来确诊口蹄疫疫病比较容易,但由于大多数口蹄疫疫病发生在交通不便的山区和边远的牧区,这些基层乡镇兽医站不具备血清学诊断技术的实验室条件,给基层初步判断口蹄疫疫病带来了一定的困难;有的动物防疫人员出现误诊,往往贻误了疫病防控的最佳时机;甚至于有的发病畜被当作健康畜,堂而皇之的随动物检疫合格证明进入流通环节,给口蹄疫防控工作带来了极大的隐患.     

口蹄疫诊断技术的研究进展

<正>口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的急性、热性、高度接触性传染病。该病给养殖业带来巨大经济损失,被世界卫生组织列为A类传染病。由于该病传播迅速、难以防治,所以,准确而快速的诊断技术成为防治该病的必要措施。目前,口蹄疫的检测技术主要有病毒培养与鉴定、血清学检测技术和分子生物学技术等。1病毒培养与鉴定首先,从患病家畜无菌采集病料,做病原体的分离培养与鉴定。将提取物在培养基上进行培养,然后,根据培养物的特性做     

The molecular diagnosis of porcine viral diseases: a review

The worldwide occurrence and re-occurrence of transboundary diseases like foot-and-mouth disease or classical swine fever indicates that there is a high need for the development of powerful, robust and high-capacity new diagnostic methods, which are able to detect the causative agents before they could spread to large populations and cause tremendous losses. This article reports the experiences of a research group on the development of molecular methods for the improved diagnosis of a range of porcine viral diseases, including diseases on List A of the Office International des Epizooties (OIE). Nucleic acid hybridisation and various polymerase chain reaction (PCR) assays have been applied for routine diagnosis of a large range of viral diseases. During the last one-and-a-half decade more than 40 nested PCR assays have been developed to detect a variety of DNA and RNA viruses. False positive and negative results are avoided by the use of special tools, practices and internal controls of amplification (mimics). Recently, real-time PCR methods (TaqMan, molecular beacons, Primer-Probe Energy Transfer system) have been developed for the diagnosis of a wide range of diseases, such as foot-and-mouth disease, swine vesicular disease and vesicular stomatitis. Multiplex PCR packages have been developed for the simultaneous detection of eight important viruses of swine. By introducing nucleic acid extraction and pipetting robotics, together with the multi-channel real-time PCR machines, the diagnostic procedures have become rapid, robust and automated. In order to standardise the real-time PCR assays, the rules of OIE are considered. By following the five steps of OIE standardisation and validation, the new diagnostic procedures are nationally and internationally standardised and harmonised. The rapid, powerful and internationally standardised molecular diagnosis contributes to the reduction of losses caused by the transboundary viral diseases in swine populations.     

口蹄疫诊断技术的研究进展

口蹄疫是一种重要的人畜共患传染病,可使世界范围内的畜牧业遭受严重的经济损失,阻碍畜牧业、畜产品加工业的发展,并危害人体健康。各国都采取了多种措施控制该病的发生。而防制口蹄疫的重要环节是要作出及时、准确的诊断。作者对口蹄疫诊断技术研究进展,包括ELISA诊断技术研究以及分子生物学诊断技术研究进展进行了综述,并对口蹄疫诊断技术进行了展望。     

犬冠状病毒诊断技术研究进展

犬冠状病毒（canine coronavirus,CCoV）是导致犬胃肠道疾病的常见病原,与其他肠道病原共同感染时犬死亡率显著升高,严重影响养犬业的健康发展。快速、灵敏和特异的诊断技术对该病的防控起到至关重要的作用。除临床诊断外,常见的CCoV实验室诊断技术主要有病毒分离培养、电镜观察及血清学诊断技术,然而这些技术往往耗时长且工作量较大,分子诊断技术主要包括普通RT-PCR、实时荧光定量RT-PCR、纳米PCR等检测方法,这些诊断技术在准确性、敏感性及特异性上有极大提高,诊断效率也显著提高。近年来,随着分子免疫诊断技术与新型材料研发技术的迅速发展,新的检测方法应运而生,纳米金、核酸探针、芯片技术及纳米生物传感器等技术更加敏感、便捷、高效且都具有制备试剂盒的可能性,从而在诊断上具有简洁性和普适性。文章将针对CCoV的诊断技术进行全面综述,以期为CCoV诊断试剂的研发提供参考。     

O型口蹄疫病毒不同基因型联合RT-PCR检测方法的建立

在比较国内外口蹄疫病毒(FMDV)流行毒株序列的基础上，设计了检测FMDV的PCR引物及O型FMDV不同基因型即中国型(Cathay)与乏亚株(PanAsia)的二联PCR引物。在确定单项RT-PCR反应条件的基础上，建立、优化了二联RT-PCR反应体系和条件，并进行了相关病毒检测试验。结果表明，建立的检测O型FMDV不同基因型中国型与泛亚株的二联RT-PCR，有效、特异且敏感，为FMD的诊断、流行病学调查及疫苗应用奠定了基础。     

A型塞尼卡病毒检测方法及疫苗研究进展

A型塞尼卡病毒（Senecavirus A,SVA）也称为塞尼卡谷病毒（Seneca Valley virus,SVV）,属于小RNA病毒科塞尼卡病毒属成员。SVA主要引起猪的水泡性疾病,与口蹄疫、水泡性口炎、猪水泡病等临床症状相似,可导致新生仔猪急性死亡,严重影响养猪业发展。自2015年广东省发生SVA感染以来,中国多省份陆续有该病发生的报道。当前,中国因猪群缺乏针对SVA的免疫屏障,加之该病传染性较强,存在大范围暴发的潜在风险。如何有效防控SVA感染是迫切需要解决的问题。目前已开发出多种SVA诊断方法用于进行实验室及现场条件下早期的鉴别诊断。SVA的分离鉴定、原位杂交和免疫组化可用于检测病原体的存在及其与组织内形态学变化关系;血清学诊断方法包括基于不同结构蛋白的间接ELISA方法、竞争ELISA方法、均相光激化学发光免疫技术和病毒中和试验,用免疫学方法检测抗体有助于了解SVA感染进程,是临床诊断的主要手段;病毒核酸检测方法主要有PCR技术、等温扩增技术、基因组测序等分子生物学技术,在病毒感染的早期快速检测及检测新发病毒中具有重要作用。目前仍无商品化疫苗预防SVA感染,但科研人员已研发出了灭活疫苗、弱毒疫苗、核酸疫苗和亚单位疫苗等多种具有潜力的候选疫苗。笔者系统总结了SVA检测方法及疫苗研发的最新进展,以期为SVA感染的防控提供参考依据。     

猪口蹄疫的诊断及其防控

猪口蹄疫疫情一经扩散,则很难控制和消灭,防控该病的关键是作出及时、准确的诊断,以尽早启动口蹄疫防控预案,控制疫情。主要对诊断口蹄疫的病原学、血清学、分子生物学等方法作一介绍,并以＂早、快、严、小＂为原则,提出了一系列综合防控措施,以期为有效防控该病提供参考。     

Microarray-based detection of viruses causing vesicular or vesicular-like lesions in livestock animals

Definitive diagnosis of vesicular or vesicular-like lesions in livestock animals presents challenges both for veterinary clinicians and diagnostic laboratories. It is often impossible to diagnose the causative disease agent on a clinical basis alone and difficult to collect ample vesicular epithelium samples. Due to restrictions of time and sample size, once laboratory tests have ruled out foot-and-mouth disease, vesicular stomatitis and swine vesicular disease a definitive diagnosis may remain elusive. With the ability to test a small quantity of sample for a large number of pathogens simultaneously, DNA microarrays represent a potential solution to this problem. This study describes the application of a long oligonucleotide microarray assay to the identification of viruses known to cause vesicular or vesicular-like lesions in livestock animals. Eighteen virus isolates from cell culture were successfully identified to genus level, including representatives of each foot-and-mouth disease virus serotype, two species of vesicular stomatitis virus (VSV), swine vesicular disease virus, vesicular exanthema of swine virus (VESV), bovine herpesvirus 1, orf virus, pseudocowpox virus, bluetongue virus serotype 1 and bovine viral diarrhoea virus 1. VSV and VESV were also identified in vesicular epithelium samples, with varying levels of sensitivity. The results indicate that with further development this microarray assay could be a valuable tool for the diagnosis of vesicular and vesicular-like diseases.     

口蹄疫病毒分子生物学检测方法研究进展

口蹄疫是一种高度传染的病毒性疫病,及早诊断意义重大。分子生物学检测方法在口蹄疫病诊断和病毒分型过程中具有许多优势,已经广泛应用。作者对实时荧光PCR法、多重PCR法、核酸杂交法、基因芯片法、环介导等温扩增法及核酸序列依赖扩增法等进行分析和比较,对各种方法的检测效率、灵敏度、优缺点及国内外的研究情况进行综述,为口蹄疫病毒分子生物学检测方法的应用与深入开发提供参考。