大花蕙兰原球茎诱导培养影响因素及褐化防治的研究

[目的]研究大花蕙兰茎尖外植体原球茎诱导及增殖培养、褐化污染的影响因素。[方法]以大花蕙兰茎尖作为外植体,研究无菌系建立、诱导培养的灭菌方法与褐化防治、原球茎诱导培养初始培养基的筛选、原球茎增殖培养的影响因素。[结果]结果表明:解决茎尖内生菌污染及褐化严重的问题,两段式灭菌(75%酒精30 s+0.1%升汞10 min+剥去幼叶+0.05%升汞5 min)优于单一式的灭菌;原球茎诱导培养基为1/2MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA;原球茎增殖培养基为1/2MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+2.0 g/L活性炭+10%马铃薯。[结论]该研究可为大花蕙兰的茎尖快速繁殖及工厂化生产提供技术依据。     

蛇足石杉组培快繁体系的研究

通过对蛇足石杉(Huperzia serrata)的组织培养进行系统研究,建立蛇足石杉的快速繁殖体系。结果表明,100 mg/L AAS+0.5 mg/L孔雀石绿组合对蛇足石杉外植体内生菌的抑制效果较好,外植体存活率为20%。蛇足石杉初代培养的最佳培养基为MS+蔗糖20 g/L+琼脂4.59 g/L+IBA 0.05μg/L+KT 1.4μmol/L+谷氨酰胺0.1 g/L+山农一号0.05%+TDZ 0.3 mg/L,诱导率达80%;继代培养中愈伤组织诱导在MS+1.0 mg/L TDZ+1.0 mg/L 2,4-D的条件下,愈伤组织诱导率可达70%;诱导生根的最佳培养基为1/3MS+1.5 mg/L IBA+2.0 mg/L谷氨酰胺,生根率可达90%。     

永福杜鹃离体再生与组培快繁技术

[目的]研究永福杜鹃组织培养离体再生体系。[方法]以永福杜鹃的带腋芽幼嫩茎段、带顶芽茎尖和不带顶芽茎尖为外植体,采用不同激素配比进行组培快繁研究,建立永福杜鹃离体快繁技术体系。[结果]适宜永福杜鹃离体培养的外植体为带顶芽茎尖,外植体消毒以0.1%氯化汞消毒5 min为宜,芽诱导最适培养基为1/2MS+2-ip 3.0 mg/L+NAA 0.10 mg/L+活性炭0.5 g/L,生根最适培养基为1/2MS+NAA 0.8 mg/L。[结论]建立了永福杜鹃组织培养离体再生体系,为永福杜鹃离体快繁技术研究提供理论依据。     

黄瑞香的组织培养和快速繁殖

[目的]探索黄瑞香组织培养和快速繁殖的培养条件。[方法]以黄瑞香幼嫩茎尖为外植体,采用植物组织培养和生物统计的方法研究黄瑞香的组织培养和快速繁殖技术。[结果]确定黄瑞香茎尖诱导愈伤组织的最佳培养培养基为WPM+IBA 0.1 mg/L+KT 0.1mg/L,茎尖诱导芽的适宜培养基为WPM+IBA 0.2 mg/L+6-BA 3 mg/L,幼芽形成根的适宜培养基为1/2 MS+IBA 3.0 mg/L。[结论]该研究结果为黄瑞香的快速繁殖及工厂化生产奠定了基础,该研究为黄瑞香组织培养和快速繁殖提供依据。     

何首乌离体快繁技术体系的建立

[目的]建立何首乌离体快繁技术体系,为其种苗生产提供技术支持.[方法]以从广西陆川县采集的何首乌幼嫩单芽茎段为外植体,分析不同灭菌时间、不同植物生长调节剂种类和浓度及不同培养方式对其组织培养快繁技术的影响.[结果]适宜何首乌外植体消毒灭菌的方法为0.1%HgCl2浸泡处理8 min;适宜不定芽诱导的初代培养基为MS+1.0 mg/L 6-氨基腺嘌呤(6-BA)+0.05 mg/L a-萘乙酸(NAA),腋芽萌发率达96.7%;适宜的继代增殖培养基为MS+2.0 mg/L苯基噻二唑脲(TDZ)+0.05 mg/L NAA,增殖系数为5.68,植株健壮;无菌苗的单芽茎段以浸没间歇式培养(TIBs)增殖系统效果最佳;适宜的生根培养基为1/2MS+0.01 mg/L NAA,生根率达91.33%.[结论]建立了以带腋芽茎段为外植体的何首乌离体快繁技术体系,可为其种苗生产提供新途径.     

重瓣大岩桐离体培养的两种途径

以大岩桐的茎段、叶片、茎尖为外植体,以MS为基本培养基,附加不同浓度的激素组合进行离体培养研究。结果表明:适宜外植体灭菌的方法为先用75%的乙醇表面消毒10 s后再用0.1%Hg Cl2灭菌4⁵ min,或者先用75%的乙醇表面消毒5 s后再用0.1%Hg Cl2灭菌6 min。3种外植体均可获得组培苗,叶片通过愈伤组织诱导途径可获得组培小苗;茎段和茎尖通过不定芽途径可获得组培小苗。最适宜的愈伤分化培养基为MS+6-BA 0.50 mg/L+IBA 1.00 mg/L,适宜的不定芽增殖培养基为MS+6-BA 0.50 mg/L或者MS+6-BA 0.50 mg/L+IBA 1.00 mg/L,适宜的生根培养基为MS+IBA1.005 min,或者先用75%的乙醇表面消毒5 s后再用0.1%Hg Cl2灭菌6 min。3种外植体均可获得组培苗,叶片通过愈伤组织诱导途径可获得组培小苗;茎段和茎尖通过不定芽途径可获得组培小苗。最适宜的愈伤分化培养基为MS+6-BA 0.50 mg/L+IBA 1.00 mg/L,适宜的不定芽增殖培养基为MS+6-BA 0.50 mg/L或者MS+6-BA 0.50 mg/L+IBA 1.00 mg/L,适宜的生根培养基为MS+IBA1.00².00 mg/L,降低蔗糖含量有利于生根。MS+IBA 2.00 mg/L+AC 0.10 g/L有利于生根培养。     

重瓣大岩桐离体培养的两种途径

以大岩桐的茎段、叶片、茎尖为外植体,以MS为基本培养基,附加不同浓度的激素组合进行离体培养研究。结果表明:适宜外植体灭菌的方法为先用75%的乙醇表面消毒10 s后再用0.1%Hg Cl2灭菌4~5 min,或者先用75%的乙醇表面消毒5 s后再用0.1%Hg Cl2灭菌6 min。3种外植体均可获得组培苗,叶片通过愈伤组织诱导途径可获得组培小苗;茎段和茎尖通过不定芽途径可获得组培小苗。最适宜的愈伤分化培养基为MS+6-BA 0.50 mg/L+IBA 1.00 mg/L,适宜的不定芽增殖培养基为MS+6-BA 0.50 mg/L或者MS+6-BA 0.50 mg/L+IBA 1.00 mg/L,适宜的生根培养基为MS+IBA1.00~2.00 mg/L,降低蔗糖含量有利于生根。MS+IBA 2.00 mg/L+AC 0.10 g/L有利于生根培养。     

甘薯茎尖脱毒及组培快繁技术

[目的]研究甘薯茎尖分生组织的分化培养基配方及快繁培养的影响因素。[方法]以甘薯茎尖作为外植体,总结出茎尖分化培养前的灭菌方法,筛选出适宜的分化培养基配方、快繁培养基配方以及影响快繁的各因素。[结果]75%的乙醇30 s+0.1%升汞10 min能取得较好的灭菌效果,降低污染率;适宜的茎尖分化培养基配方为:MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.25 mg/L GA3+10 mg/L病毒唑;快繁培养基配方为:Ms+0.1~0.2 mg/L NAA+2 mg/L泛酸钙;适宜的糖用量为30 g/L;培养条件为温度28℃、光照强度2 000lx、光照时间16 h/d时脱毒苗茎段生根较快,侧芽萌发后节间适中,有利于提高繁殖系数。[结论]为脱毒苗工厂化生产提供技术支持。     

药用植物桔梗组织培养技术研究

采用桔梗茎尖作外植体进行组织培养技术研究,通过试验对比筛选出其最佳灭菌方法为酒精15 S+0.1%升汞10 min+无菌水6次,最佳初代培养基配方为MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA2.0 mg/L,最佳增殖培养基配方为MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 2.0 mg/L,最佳生根培养基配方为1/2 MS+NAA 0.2 mg/L。     

桉树无性系雷11组织培养技术研究

[目的]建立桉树无性系雷11组织培养与再生体系。[方法]以桉树半木质化萌发茎段为材料,对外植体诱导及无菌组织培养体系进行研究。[结果]最佳外植体诱导培养基为MS+6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.4 mg/L,萌芽率为93%;最佳增殖培养基为MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.25 mg/L,增殖个数为3.48;最佳生根培养基1/2MS+IBA 0.2 mg/L+ABT 10.4 mg/L,生根率可达100%,根长7.45 cm。[结论]初步达到工厂化生产要求,并获得了桉树诱导、增殖和生根的适宜培养基和培养条件。     

降低软枣猕猴桃初代培养污染率的研究

[目的]筛选降低软枣猕猴桃外植体初代培养污染率和提升外植体诱导率的处理方法。[方法]采用半木质化的软枣猕猴桃新梢作为外植体,根据外植体灭菌时间和氨苄青霉素培养基浓度差异组合,分析降低软枣猕猴桃外植体初代培养污染率和提升外植体诱导率的因素,筛选出最适宜的处理方法。[结果]增加外植体75%乙醇灭菌时间至10 s可降低软枣猕猴桃初代培养污染率,培养基中氨苄青霉素浓度为100~150 mg/L时,软枣猕猴桃初代培养污染率随培养基中氨苄青霉素浓度的增加而降低。增加外植体灭菌时间和培养基中氨苄青霉素浓度均能增加软枣猕猴桃外植体诱导率。[结论]污染率低且诱导率高的处理方法为1/2MS+100 mg/L氨苄青霉素、1/2MS+150 mg/L氨苄青霉素、外植体75%乙醇灭菌10 s+0.1%升汞灭菌8 min和外植体75%乙醇灭菌10 s+0.1%升汞灭菌10 min。     

不同外植体对红掌初代培养及愈伤组织诱导的影响

[目的]研究红掌优良品种相配套的组培快繁技术体系。[方法]以盆栽红掌新品种‘YNG5’为研究对象,采用附加6-BA 2.0mg/L和2,4-D 0.2 mg/L的1/2MS培养基,探讨了外植体的灭菌方法、材料种类、生理状态及取材部位对红掌初代培养效果的影响。[结果]在红掌叶片、叶柄、腋芽、花序及佛焰苞片5种外植体中,叶片与叶柄的培养效果较好,出愈率可达70%以上;在选取叶片与叶柄作为外植体时,用0.1%HgCl2处理5 min,可获得良好的灭菌效果;采用叶片为外植体时,以展叶5～8 d、不带主脉的幼嫩叶片为宜,采用叶柄为外植体时,以未展开叶、形态学上端的部位为宜。[结论]研究获得了红掌新品种‘YNG5’组织培养的最适外植体种类及灭菌方法,初步建立了红掌初代培养的技术体系。     

山苍子外植体初始诱导的研究

[目的]研究山苍子外植体的诱导方法。[方法]以不同类型、不同采集时间的山苍子茎段为外植体材料进行组织培养研究。[结果]以0.1%氯化汞对外植体处理10 min效果较好,此时外植体污染率为40.0%,死亡率为15.0%;以顶芽以下2～5个芽的茎段进行初始诱导效果较好;1月份为最佳取材时间,此时诱导率高达81.1%,污染率仅为11.7%;初始诱导中,以改良MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA培养基为最适培养基配方。[结论]1月采集的半木质化茎段用0.1%氯化汞消毒10 min后,以改良MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA培养基可较好诱导山苍子幼苗。     

水榆花楸微型繁殖技术的研究

[目的]研究水榆花楸的微型繁殖技术。[方法]以带侧芽的水榆花楸茎段为外植体,研究不同外植体消毒时间、基本培养基及植物生长调节剂种类和浓度对水榆花楸侧芽诱导、丛生芽增殖及生根的影响。[结果]外植体的最佳消毒时间为7 min;侧芽的最佳诱导培养基为MS+KT 2.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L;丛生芽的最佳增殖培养基为MS+KT 2.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L;最佳生根培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg/L。[结论]该研究为水榆花楸苗木的大规模工业化生产提供了技术支持。     

3种抑菌剂对蛇足石杉内生真菌黑曲霉的抑制效果研究

[目的]探索3种抑菌剂对蛇足石杉内生真菌黑曲霉的抑制效果。[方法]采用平板涂布法分离获得供试菌,用菌丝生长速率法测定3种抑菌剂对黑曲霉的抑制效果。[结果]两性霉素B、苯甲酸钠、肉桂醛对黑曲霉的最低抑菌浓度分别为512.000 00 mg/L、4.00g/L、0.500 00 mg/L;EC50分别为1.910 00、150.000 00、0.120 00 mg/L,EC90分别为88.220 00、730.000 00、0.330 00 mg/L;3种抑菌剂中较优的抑菌剂为两性霉素B。[结论]该研究获得了3种抑菌剂的最低抑菌浓度,为蛇足石杉组织培养的深入研究提供了试验基础。     

意大利生菜组织培养体系的建立

[目的]建立意大利生菜组织培养体系。[方法]以意大利生菜(Lactuca sativa L.var.ramosa Hort.)种子为试验材料,用不同有效氯含量(0、0.5%、1.0%、2.0%、4.0%)的漂白水灭菌,于MS培养基上培养无菌苗。取4~5 d苗龄的无菌幼苗子叶,在添加不同浓度激素的MS培养基上诱导愈伤组织,并进一步诱导生芽、生根,筛选最佳诱导激素配比及激素浓度。[结果]意大利生菜种子经有效氯含量1.0%的漂白水处理,于MS培养基上培养可获得意大利生菜无菌苗。无菌幼苗子叶在MS+0.5 mg/L 6-BA+0.20 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂的培养基上,可以得到理想的意大利生菜愈伤组织;在MS+0.25 mg/L 6-BA+0.20 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂的培养基上,最有利于意大利生菜愈伤组织不定芽的发生且对后期生根有良好的诱导作用。[结论]配合使用一定浓度的6-BA和NAA可有效建立意大利生菜组织培养再生体系,为进一步建立意大利生菜遗传转化体系奠定基础。     

月见草种子的无菌萌发条件

[目的]为月见草的组织培养提供无菌外植体。[方法]以月见草种子为材料,经过不同的表面除菌方法处理后,接种于不同的培养基上,培养10 d后统计种苗的污染率、发芽率。[结果]经70℃热处理48 h后,用70%乙醇（40 s）＋0.1%HgCl2（10 min）＋吐温80进行表面除菌效果最好,污染率最低;在VW＋1.0 mg/L6-BA＋0.5 mg/LNAA＋0.05%AC培养基中培养,月见草种子的萌发率最高,达到93%,萌发后幼苗的生长状况最优。[结论]该试验建立了优质、高效的月见草种子无菌萌发体系,为月见草资源的持续利用奠定了基础。     

垂枝樱花外植体灭菌及不定芽的诱导研究

[目的]探讨垂枝樱花外植体灭菌及不定芽诱导的相关技术.[方法]以垂枝樱花当年生带腋芽茎段为外植体,对其组织培养繁殖技术中外植体选择、灭菌方法与程序、不定芽的诱导等环节进行了初步研究.[结果]适宜外植体采集时间为晴天中午,采集部位为当年生枝条的中上部,适宜的表面灭菌程序为：洗衣粉中浸泡15 min,流水冲洗lh,70％乙醇浸泡30 s,0.1％ HgCl2浸泡10 min,最后无菌水冲洗5遍,成活率达68.3％.适宜垂枝樱花不定芽诱导的培养基为1/2MS ＋6-BA 0.5 mg/L＋ NAA 0.10 mg/L,分化率达68.3％.[结论]为垂枝樱花的组织培养提供相关技术支持.     

梭梭种子组织培养表面灭菌方法研究

[目的]对梭梭组织培养的灭菌方法及外植体进行筛选,以期为其组织培养提供指导方法。[方法]以梭梭种子为试验材料,研究不同灭菌剂处理的灭菌效果和不同粒径种子对无菌苗成活率的影响。[结果]梭梭种子最佳灭菌方法为75%酒精5 min+0.1%升汞8min;以直径￠2.0 mm的种子外植体,组培能获得较高的无菌苗成活率,可达65%以上。[结论]该研究结果建立了适合梭梭种子组织培养的表面灭菌方法。     

马铃薯脱病毒与快繁技术研究

[目的]获得马铃薯脱毒试管苗及使长期保存导致生长势退化的试管苗复壮。[方法]设置不同的灭菌方法和不同的培养基进行马铃薯茎尖脱病毒及脱毒苗的快繁技术研究。[结果]芽外植体灭菌效果以质量分数5%的NaClO灭菌时间2 min与0.1%的HgCl2灭菌时间3 min组合效果最佳;茎尖诱导的最佳培养基为MS+GA30.1 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L,平均诱导率为58.25%;从MS液体和MS固体2种不同的培养基来看,MS液体培养基可以起到壮苗的作用;从扦插和平铺2种不同接种方式来看,平铺的接种方式可以加快脱毒苗繁殖速度。[结论]为马铃薯的组织培养快繁提供了参考依据。