大肠杆菌病病原学检测方法的研究进展

大肠杆菌主要寄居于人和动物的肠道内,在自然界分布广泛,属于条件致病菌.大肠杆菌能通过消化道使人类和畜禽发生感染和中毒.对大肠杆菌病的防治和流行病学调查都依赖于对病原的及时准确的检测和鉴定.本文对大肠杆菌病各种实验室病原检测方法,包括细菌的分离培养、荧光免疫测定技术、免疫胶体金标记技术、免疫磁珠分离法、多重PCR、荧光定量PCR等方法作以概要性综述.     

猪细小病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初步应用

用经超滤浓缩、PEG 沉淀,氯化铯密度梯度离心纯化的猪细小病毒(PPV)免疫 BALB/C 小白鼠,取免疫鼠脾细胞与骨髓瘤细胞 SP_2/O在PEG 存在下融合,经 HAT 筛选、ELlSA 测定及3次克隆化后,获得3株(P-15—36—6,P-15—45—51,P—15—52—28)能持续稳定分泌抗 PPV 单克隆抗体的杂交瘤细胞株,3株杂交瘤细胞的染色体数均在95条以上,经分类测定,其免疫球蛋白均属 Ig G,且均为 IgG_1亚类。阻断试验证明单抗具有抗 PPV 的特异性。利用间接 ELISA 抑制试验进行了单抗在诊断上应用研究。     

贵州3种马铃薯病毒的DAS-ELISA检测与分析

应用DAS-ELISA法对从贵州省马铃薯种植区采集带症状的202份马铃薯叶片分别进行了PVX、PVY、PLRV 3种马铃薯病毒的检测。结果表明,3种马铃薯病毒在贵州马铃薯种植区表现出比较显著的田间症状,其病毒的发生与气候类型、种薯品种来源、种植方式存在相关性,并结合马铃薯实际生产对其病毒防治措施做了简要讨论。     

犬瘟热病毒单克隆抗体的制备及特性鉴定

用纯化的犬瘟热病毒免疫Balb/C小鼠,采用问接ELJSA方法筛选分泌阳性抗体的杂交瘤细胞株,挑选阳性孔进行亚克隆,用Vero细胞交叉反应试验及间接免疫荧光试验检测单抗的特异性.结果获得6株能稳定分泌抗犬瘟热病毒的单克隆抗体细胞株,分别命名为AD7、AE2、CE3、EH5、GG6和GF1.交叉反应试验及间接免疫荧光染色检测表明,6株单抗的特异性良好;经过体外连续传代及反复冻存、复苏,杂交瘤细胞均能稳定分泌特异性单抗.培养上清液及小鼠腹水ELISA效价分别为26～211和104～107.相加试验表明:单抗AE2、CE3、GG6和GF1具有共同的表位,而单抗AD7和EH5识别的位点与其他4株不同.     

间接ELISA 与中和试验检测O 型FMDV 疫苗免疫猪血清抗体的比较研究

血清中和抗体滴度的高低,体现了血清对病毒感染的中和能力,是评价疫苗免疫效果的重要指标.对国内3个大型猪场共120头猪的血清样品分别进行O型口蹄疫病毒ELISA和病毒中和试验,并分别比较两种方法的符合率和阳性检出率.结果表明,两种方法的阳性符合率和阴性符合率分别为77.3％和72.2％,总符合率为75％,均能有效检测猪血清中的口蹄疫抗体水平,但是采用间接ELISA检测血清抗体,存在一定比例的假阳性或假阴性.病毒中和试验更适合进行口蹄疫血清学的检测.     

哈尔滨地区大麦黄矮病毒株系鉴定

从黑龙江省哈尔滨地区田间采集典型小麦黄矫病株２５份，用无毒麦二叉蚜，禾谷缢管蚜传毒，经生物学分离并用ＢＹＤＶ－ＧＡＶ，ＰＡＶ，ＲＰＶ，ＳＧＶ四种抗血清静 进行酶联免疫吸附测定。结果表明：２５份标样中由麦长管蚜和麦二叉物有２２份，与ＧＡＶ抗血清有强反应，而与ＰＡＶ，ＲＰＶ，ＳＧＶ抗血清无反应。     

猪细小病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初步应用

用经超滤浓缩、PEG沉淀、氯化铯密度梯度离心纯化的猪细小病毒（PPV）免疫BALB／C小白鼠、，取免疫鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2／O在PEG存在下融合，经HAT筛选、ELISA测定及3次克隆化后，获得3株（P－15－36－6，P－15－45－51，P－15－52－28）能持续稳定分泌抗PPV单克隆抗体的杂交瘤细胞株，3株杂交瘤细胞的染色体数均在95条以上，经分类测定其免疫球蛋白均属IgG，且均为IgG1亚类，阻断试验证明单抗具有抗PPV的特异性，利用间接ELISA抑制试验进行了单抗在诊断上应用研究。     

四(4-三甲胺苯)卟啉抗原抗体的制备与抗体效价的测定

利用邻硝基苯甲醛和吡咯合成Ｈ２Ｔｎｏ２ＰＰ，再还原成Ｈ２ＴａｍＰＰ，最后合成四（α，α，α，α－Ｏ－三甲胺苯）卟啉。用它免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，酶联免疫吸附法测定抗体效价达６４０。表明该半抗原加载体，可以诱导抗体产生。     

用酶联免疫吸附试验检测马传染性贫血病毒抗体

用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测马、骡传染性贫血抗体,并与琼脂扩散沉淀试验(AGID)相比较,结果ELISA检出率为84.26％—96.45％,AGID相应为25.67％—47.87％,前者检测效果优于后者。     

金霉素多克隆抗体的制备与鉴定

    研究制备能有效用于金霉素残留检测的特异性多克隆抗体采用戊二醛法和混合酸酐法合成2种不同的金霉素-BSA完全抗原,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,应用ELISA法鉴定抗金霉素多克隆抗体结果表明,2种血清的抗体效价最高均达32×105,而戊二醛法制备的抗原产生的抗体具有更高的亲和力,抑制率为50%时的金霉素的质量浓度(IC50)为962 μg·mL-1,金霉素的最低检测限为667 ng·mL-1,金霉素和四环素的交叉反应率为77%研究结果为畜产品中四环素类抗生素残留的检测奠定了较好的基础     

辣椒病毒的酶联免疫吸附法检测

辣椒病毒的酶联免疫吸附法检测程秉铨，周俊，孙晓陆，肖英，彭湘儒，刘文朴（新疆农科院中心实验室，乌鲁木齐，８３００００）（乌鲁木齐市蔬菜研究所）酶联免疫吸附试验技术（ＥＬＩＳＡ）是７０年代发展起来的用于检测抗原或抗体的新方法。１９７１年由瑞典的Ｅｎｇｖ...     

甲状腺功能亢进合并病毒性肝炎6例

甲状腺功能亢进合并病毒性肝炎６例汤炽良（湛江市第二人民医院）甲状腺功能亢进（简称甲亢）合并病毒性肝炎的临床表现复杂，病情重，易发展为重症肝炎，因此病死率较高，在诊断和治疗上均有其特殊性。现将我科近年收治的６例报道如下。１临床资料本组男性２例，女性４例...     

蛋鸭病毒性肝炎防治浅析

鸭病毒性肝炎是由不同型鸭肝炎病毒引起雏鸭的一种高度致死性传染病,该病因为传染性比较高,死亡率也高,给养殖户带来了很大的损失,也制约了当地畜牧产业的发展。本文基于作者多年的工作经验,在参考前人文献的基础上,对蛋鸭病毒性肝炎防治进行了分析,总结了其诊断方法,并提出了几个防治措施,希望能为相关养殖户带来一定的参考价值。     

PPA-ELISA与常规方法诊断奶牛结核病的比较研究

应用Mycobacterum bovis SAg_2抗原的PPA—ELISA检测了32例奶牛血清样本,其中20例呈阳性反应,12例阴性反应。应用牛PPD变态反应检查这20例ELISA阳性奶牛,全部呈阳性反应,另12例则为阴性反应。病理学检查,20例中18例发现结核病理变化,细菌学检查,其中17例呈阳性反应,另12例阴性奶牛,经病理学,细菌学检查,全部阴性。     

某规模猪场猪圆环病毒2型感染抗体检测与防制

应用ELISA方法检测广西南宁某猪场在不同时段血清样品的猪圆环病毒2型抗体(PCV2),同时制定一系列详细、科学饲养管理制度、生物安全体系以及免疫防治的措施,经过一年半时间的净化,猪群中猪圆环病毒2型抗体阳性率由35％下降到7.5％.结果表明,该猪场制定的防制商品猪和种猪群PCV2的综合措施行之有效,值得规模化猪场借鉴.     

用酶联免疫吸附试验检测马铃薯卷叶病毒

本文介绍用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法快速检测马铃薯叶片及块茎内的马铃薯卷叶病毒(PLRV),检测叶片的最高稀释倍数为1/128,检测块茎的最高稀释倍数为1/64。马铃薯病株的顶部叶片和底部叶片的病毒含量不同,而又没有一定的规律性。马铃薯感染PLRV后可表现为底叶卷叶、部分全株卷叶或顶叶卷叶,有的品种无症;还有一部分植株虽然表现出各种卷叶症状,但并不是由PLRV所致。我院马铃薯育种圃内常用的杂交亲本的带毒率为31.21％;在黑龙江省的几个主栽品种上均可检测到PLRV。