兽用“四味穿心莲散”中大青叶、穿心莲的薄层色谱鉴别研究

为了完善中药四味穿心莲散的质量标准,在显微鉴别的基础上,用薄层色谱法对组方中的大青叶和穿心莲进行了鉴别研究。结果表明,薄层色谱分离效果好,方法简便,准确,专属性强。     

RP-HPLC双波长法测定四味穿心莲散中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量

建立了反向高效液相色谱法检测四味穿心莲散中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯含量的方法。试验采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-0.2%磷酸溶液梯度洗脱,流速为1.0 m L/min,柱温30℃;穿心莲内酯检测波长226 nm,脱水穿心莲内酯检测波长252 nm;穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量测定范围分别为2.32~37.14μg/m L(r=1.0000),2.00~31.94μg/m L(r=1.0000);加样平均回收率分别为99.12%、98.84%;RSD分别为0.60%、0.62%;该方法方便、准确、可靠,适用于测定四味穿心莲散中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量。     

HPLC同步检测四味穿心莲散中绿原酸和芦丁的含量

为建立HPLC方法同步测定四味穿心莲散中绿原酸和芦丁的方法,本实验以甲醇为提取溶剂,乙腈-0.1％磷酸水为流动相进行梯度洗脱,C18色谱柱分离,355 nm波长检测.结果显示:绿原酸、芦丁浓度在0.1～0.9 mg/L内呈良好的线性关系,加样回收率分别为98.41％、98.12％;重复性良好,相对标准偏差<1％.可见本...     

四味穿心莲散中大青叶的薄层色谱定性鉴别方法

建立了四味穿心莲散中大青叶的薄层色谱(TLC)定性鉴别法。以大青叶为对照药材,采用环己烷-三氯甲烷-丙酮(4.8∶9∶0.5)为展开剂,对四味穿心莲散中大青叶进行薄层色谱法鉴别。供试品色谱中,在与对照药材薄层色谱相应的位置上,分别显相同的蓝色斑点和浅紫红色斑点,阴性对照无干扰。本方法简便、快速、准确,重现性好,可用于大青叶的质量控制。     

HPLC双波长法测定四味穿心莲散中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量

目的：建立HPLC双波长法同时测定四味穿心莲散中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量。方法：采用XBridge C₁₈色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),以甲醇-水(52:48)为流动相,流速1.0ml.min_-1^;柱温25℃;进样量10μL,检测波长分别为225nm(穿心莲内酯)和254nm(脱水穿心莲内酯)。结果：穿心莲内酯浓度在12.7375μg.mL_-1^～509.5μg.mL_-1^范围内,线性良好(r₂^=0.9996);脱水穿心莲内酯浓度在3.4μg.mL_-1^～136μg.mL_-1^范围内,线性关系良好(r₂^=0.9997)。穿心莲内酯加样回收率平均为98.8%,RSD 为1.0%;脱水穿心莲内酯回收率平均为99.9%,RSD 为0.8%。结论：该方法快捷、灵敏、准确、可靠,可用于四味穿心莲散中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯2个有效成分的同步测定,为四味穿心莲散的质量控制和评价提供科学依据。     

四味穿心莲散水煎剂防治禽致病性大肠杆菌病疗效研究

为考察四味穿心莲散水煎剂（DSCS）对禽致病性大肠杆菌（APEC）的抗菌活性,本试验用微孔-平板法测定最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）;用10日龄雏鸡制备APEC感染模型,随机分为5组,每组20只,设DSCS高、中、低三个剂量组,氟苯尼考阳性对照组和感染组,另设一组健康对照组,口服给药,连用5 d,观察疗效。结果显示：DSCS对APEC的MIC为7.82 mg/mL,MBC为31.25 mg/mL;DSCS组对APEC病的治愈率为50%～82%,与氟苯尼考组相当,DSCS高剂量组有效率显著高于氟苯尼考组（P <0.05）。由此表明,四味穿心莲散水煎剂能够有效治疗APEC病。     

四味穿心莲超微粉的薄层鉴别研究

为控制四味穿心莲超微粉的质量,分别对其所含的四味药材进行薄层鉴别研究。通过穿心莲对照药材、穿心莲内脂和脱水穿心莲内脂的鉴别对穿心莲进行质量控制;通过靛玉红的鉴别对大青叶进行质量控制;通过芦丁的鉴别对葫芦茶进行质量控制;通过槲皮素的鉴别对辣蓼和葫芦茶进行质量控制。试验筛选并优化了相关提取方法和色谱条件,并分别制备对应的阴性样品溶液进行对比。结果表明,四种薄层鉴别方法均无阴性干扰,且简单、稳定,可以有效控制四味穿心莲超微粉的质量。     

四味穿心莲散及其组分对沙门菌的体外抑菌效果观察

检测四味穿心莲散及其组分(穿心莲、辣蓼、大青叶和葫芦茶)对沙门菌的体外抑菌效果。试验选用穿心莲、辣蓼、大青叶、葫芦茶等10种中药,采用试管二倍稀释法测定各中药水提物、两药联合及市售四味穿心莲散和自制四味穿心莲散对沙门菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示,四味穿心莲散的4种组分中,大青叶对沙门菌的抑菌活性最强,MIC为12.5 mg/mL;4种组分杀菌活性一致,MBC均为400 mg/mL;在两药联合中,4种联合呈现相加作用或协同作用;市售四味穿心莲散MIC和MBC均为200 mg/mL,自制四味穿心莲散MIC为50 mg/mL,MBC为200 mg/mL。分析结果表明,大青叶抑菌效果最好,杀菌效果与其他3种组分一致;自制四味穿心莲散的抑菌效果更具优势,杀菌效果与市售方剂一致。     

催情散质量标准研究

为提高和完善催情散的质量标准,增加了方中君药淫羊藿的薄层鉴别方法,并采用HPLC法测定淫羊藿苷含量。薄层色谱斑点清晰,阴性无干扰。淫羊藿苷对照品浓度在0.0510~0.2550 mg/mL(r=0.9992,n=5)范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率为99.24%,RSD为0.29%。该方法简便、准确、重现性好、精密度高,可作为催情散的质量控制方法。     

复方中草药四味穿心莲益生菌发酵产物对鸡大肠杆菌作用

为探究复方中草药四味穿心莲益生菌发酵产物（FPSCS）对鸡大肠杆菌的作用,采用微孔-平板法测定其对O2型鸡大肠杆菌的最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）,以O2型鸡大肠杆菌半数致死量（LD50）感染SPF雏鸡制备病理模型,随机分为FPSCS高、中、低剂量组,硫酸新霉素组,四味穿心莲散组,益生菌组及对照组,统计总有效率、治愈率;ELISA试剂盒检测各组动物外周血液中炎症因子的含量。结果显示：FPSCS体外对O2型鸡大肠杆菌的MIC和MBC均为31.25 mg/mL,口服FPSCS剂量为0.1～0.5 g/（次·只）的总有效率为73.33%～83.33%、治愈率为70%～80%,均显著高于四味穿心莲散组和益生菌组（P <0.05）,且治疗初期可显著降低促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6的含量（P <0.05）,显著升高IFN-γ的含量（P <0.05）。由此表明,FPSCS可通过抑杀O2型鸡大肠杆菌和降低鸡外周血促炎因子的含量而发挥较好的抗菌活性。     

水飞蓟残渣配合饲料对猪肉品质的影响

试验选用体重相近的"杜×长×大"三元杂交仔猪,随机分成2个组(组间差异不显著),每组3个重复,每个重复10头猪。试验组中添加水飞蓟残渣,对照组添加土霉素,在试验实施中,其它的饲养条件和技术措施质量一致。结果表明:试验组十四烷酸、油酸、硬脂酸、棕榈油酸、十七烷酸、5,8,11,14-四烯二十烷酸、11-烷烯酸、花生酸、11,13-二烯二十烷酸含量都有所提高,且差异显著(P<0.05)。试验组棕榈酸比对照组减少了54.2%(P<0.01),从胆固醇含量的测定结果中,试验组比对照组降低9.1%,差异不显著(P>0.05)。试验说明,水飞蓟残渣配合饲料可替代抗生素配合饲料并比抗生素配合饲料更能改善猪肉品质。     

清脂胶囊质量标准研究

目的:建立清脂胶囊的质量控制方法。方法:对清脂胶囊中白术、白芍、柴胡进行薄层色谱鉴别;采用HPLC法对芍药苷进行含量测定。结果:薄层色谱斑点清晰,阴性对照无干扰;芍药苷进样量在0.104-1.040μg范围内线性关系良好(r=0.998 5),平均回收率为98.92%,RSD为0.61%(n=9)。结论:本研究建立的TLC和HPLC法专属性强、准确度高、重复性好,可用于清脂胶囊的质量控制。     

高效液相色谱法检测猪肉、羊肉中阿托品残留量的研究

为了检测阿托品在猪肉、羊肉中残留量,本研究通过实验条件的建立与优化,建立了其高效液相色谱分析方法。猪肉、羊肉中的阿托品经乙腈提取两次,用正己烷除脂两次,再经HLB柱净化后,用高效液相色谱仪分离,紫外检测器检测,外标法定量。结果表明:阿托品在0.5～20.0μg/mL的系列浓度范围内均呈良好线性关系,相关系数r均大于0.999。样品中阿托品的检测限为0.25 mg/kg,定量限为0.5 mg/kg。在0.5～5 mg/kg添加浓度范围内,阿托品的回收率均为80～110%,相对标准偏差(RSD)均小于10%。该方法具有简便快捷、灵敏度高、定性准确等特点。     

甜瓜蒂质量标准完善研究

完善甜瓜蒂质量标准并提高。采用薄层色谱法对甜瓜蒂进行定性鉴别,并采用高效液相色谱法测定葫芦素B的含量,色谱条件:Agilent HC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-0.1%磷酸溶液(60∶40)为流动相,流速为1.0 mL/min;检测波长为228 nm。结果表明,薄层色谱斑点清晰,分离度好,专属性强,重复性良好;高效液相色谱法测定葫芦素B的回归方程为:Y=1 367 962.09X+465.59,r=0.999 6,在0.0340~4.247 0 mg/mL线性关系良好;平均回收率为98.4%,RSD为1.6%。说明该研究建立的薄层色谱鉴别和高效液相色谱含量测定方法简便、快捷、结果准确、可靠,为甜瓜蒂质量标准的修订完善提供了可靠依据。     

猪肉中磺胺类药物残留检测能力验证分析

为了解我国食品检测实验室的磺胺类药物残留检测能力,中国合格评定国家认可委员会(CNAS)于2011年委托中国兽医药品监察所组织实施了猪肉中磺胺间甲氧嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲噁唑和磺胺二甲氧嘧啶四种磺胺类药物残留检测的能力验证工作。全国16个省、市、自治区的共37家实验室参加了本次能力验证,采用的测试方法主要是液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)和高效液相色谱法(HPLC)。结果显示:磺胺间甲氧嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲噁唑和磺胺二甲氧嘧啶实验室满意结果率分别为93.9%、93.9%、93.9%和94.1%,可疑结果率分别为3.03%、3.03%、0和0,不满意结果率分别为3.03%、3.03%、6.06%和5.88%,说明参加能力验证的绝大多数实验室可以准确检测以上四种磺胺类药物残留。     

复方茜草灌注液质量标准研究

目的：制定复方茜草灌注液质量标准。方法：采用薄层色谱法对制剂中的丹参、茜草、苦参进行鉴别;采用高效液相色谱法测定制剂中丹参酮ⅡA和隐丹参酮的含量。结果：隐丹参酮的回归方程Y=1×106 X＋744 462,r=0.999 5,平均回收率为98.5%,RSD为1.61%。丹参酮ⅡA的回归方程Y=2×106 X＋2×106,r=0.999 5,平均回收率为97.8%,RSD为2.05%。结论：建立的鉴别方法直观、简单、专属性强;含量测定方法准确、重现性好。可作为制定复方茜草灌注液质量标准的试验依据。     

贞苓增免散的质量标准研究

通过对贞苓增免散进行定性鉴别、定量分析,建立该制剂的质量控制方法。本研究采用薄层色谱法对女贞子、茯苓进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定贞苓增免散中特女贞苷的含量,条件为:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂、甲醇-水(40:60)为流动相、检测波长224 nm、流速1.0 mL/min、柱温室温、进样量10μL;同时采用硫酸-蒽酮法测定贞苓增免散中茯苓多糖的含量,以葡萄糖为对照品,硫酸-蒽酮溶液为显色剂,在620 nm处测定OD值。结果显示:薄层色谱斑点清晰、无阴性干扰、专属性强、分离度高,能有效鉴别女贞子、茯苓;加样回收试验测得特女贞苷与茯苓多糖的含量分别在0.03~0.30 g/L、0.052~0.100 g/L呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.28%、99.20%,RSD分别为2.17%、2.22%;高效液相法测得贞苓增免散中特女贞苷含量为12.3 mg/g;硫酸-蒽酮法测得0.1 g/L中贞苓增免散中茯苓多糖含量为0.077 8 mg。本研究建立的方法简便易行、稳定性、重复性好,可有效控制贞苓增免散的质量。     

日粮中添加沼渣对猪肌内脂肪酸组成及含量的影响研究

试验选择18头杜×长×大三元杂交猪为试验材料,研究了日粮中添加沼渣对猪肌内脂肪酸组成及含量的影响。结果显示,除背最长肌中油酸含量有显著差异外,其余脂肪酸的含量无显著差异。通过分析认为,日粮中添加沼渣不会从肌内脂肪酸组成及含量上对猪肉风味及其他肉质性状产生不利影响,但需要注意日粮中添加过高比例的沼渣可使猪肉中多不饱和脂肪酸增多,有导致肉品质变差的倾向。