蝙蝠蛾拟青霉高产腺苷液体培养基优化

为了提高蝙蝠蛾拟青霉菌株RCEF0936腺苷的代谢量,以腺苷含量为指标,采用高效液相色谱法(HPLC),在单因子试验的基础上通过正交试验对其高产腺苷的液体培养基进行优化研究。结果表明,在培养温度25℃、摇床转速140rpm/min、摇瓶装液量100ml/250ml、接种量5%、培养时间6d的条件下,蝙蝠蛾拟青霉菌株RCEF0936的高产腺苷的最佳液体培养基配方为:葡萄糖2%,酵母浸出粉2%,硫酸锰0.05%,硫酸锌0.05%;试验中选择的4种因子对蝙蝠蛾拟青霉菌株RCEF0936菌丝体中腺苷含量的影响由大到小依次是硫酸锌酵母浸出粉硫酸锰葡萄糖,且均达到极显著水平(P0.01)。利用优化的培养基培养的蝙蝠蛾拟青霉菌株RCEF0936菌丝体中腺苷含量可达到2.85mg/g,比优化前提高了390%,经统计学分析,两者差异极显著(P0.01)。     

樟芝胶囊生产工艺中发酵液与醇沉多糖中腺苷含量的测定

利用高效液相色谱法建立了樟芝胶囊生产工艺中发酵液与醇沉多糖中腺苷含量的测定方法。采用色谱柱Agilent Eclipse XDB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm),磷酸盐缓冲溶液(pH 6.47)-甲醇(90∶10)为流动相,流速1.0 ml/min,检测波长260 nm,柱温为室温。结果表明,腺苷的线性方程为Y=29160X-4972,在1.17～37.5 mg/L范围内线性关系良好,r=0.9999。平均回收率为102.8%,RSD=1.29%。本方法简单、快速、准确,可作为樟芝胶囊生产过程中腺苷含量测定的一种有效方法。     

树舌深层发酵菌丝体和发酵液中腺苷含量HPLC分析

以已知腺苷为标样,利用反相高效液相色谱法对树舌深层发酵菌丝体和发酵液中腺苷进行分析。结果表明,菌丝体和发酵液中的腺苷含量较高。因此,树舌液体发酵菌丝体和发酵液是一个具有开发价值的资源,值得深入研究。     

人红细胞胞浆液中腺苷脱氨酶的分离

腺苷脱氨酶是机体重要腺苷代谢酶之一,能催化腺苷嘌呤环上6-位氨基脱氨,从而生成肌苷的氨解反应,与腺苷激酶、5′-核苷酸酶及 S-腺苷同型半胱氨酸水解酶共同使机体腺苷水平保持相对稳定。文献报道人体组织中的腺苷脱氨酶分子有多种形式,其表观分子量分别为36000、114000、200000和298000。本文报告一种用亲和层析法,从人红细胞胞浆液中分离腺苷脱氨酶的新的简便快速方法。所采用的亲和层析胶,为 N~6-(6-氨己基)腺苷-Sepharose4 B 凝胶,是由N~6-(6-氨己基)腺苷与经溴化氰活化的 Sepharose4 B 胶偶联而成。人红细胞胞浆液中的腺苷脱氨酶,经两次亲和层析分离后,比活性提高了197倍,酶活性回收率为49%。高效液相凝胶排阻层析分析的结果表明,分离出的酶蛋白制剂含有表观分子量分别为36000、72000、114000和64000的四种蛋白质组分。其中前三种组分的表观分子量与文献报道基本相符。     

高效液相色谱法测定龙眼果实腺苷含量

建立了测定龙眼果实腺苷含量的高效液相色谱(HPLC)法,并用此方法测定了5个龙眼品种果实不同部位的腺苷含量.色谱柱采用Phenomenex C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇和0.001 mol.L-1KH2PO4,梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,检测波长285 nm,柱温40℃.结果表明,腺苷含量为5-80μg.mL-1时,腺苷含量与峰面积呈良好的线性关系,相关系数为0.9999,平均回收率为98.01%,相对标准误为1.19%,最低检出限为0.013μg.mL-1.不同品种龙眼果实及果实不同部位的腺苷含量存在差异,假种皮含量最高,果皮次之,种子最低.所建立的方法简便、快速、灵敏、准确.     

HPLC法同时测定地顶孢霉培养物中腺苷、虫草素和麦角甾醇含量

为建立同时测定地顶孢霉培养物中腺苷、虫草素和麦角甾醇含量的高效液相色谱法,选择色谱柱为Waters C₁₈柱(4.6 mm×250 mm, 5μm),流动相为水-乙腈,梯度洗脱,检测波长270 nm,流速1 mL·min^-1,柱温30℃,进样量20μL。结果表明：腺苷、虫草素和麦角甾醇在浓度20～640μg·mL^-1(X)范围内与峰面积(Y)呈良好的线性关系,腺苷、虫草素和麦角甾醇的回归方程分别为Y=98.53X+586.26 (R²=0.999 3)、Y=124.16X+277.69 (R²=0.999 7)、Y=57.652X+107.47 (R²=0.999 6)。腺苷、虫草素和麦角甾醇的加标回收率分别为95.96%～99.95%、97.43%～99.94%和96.31%～99.95%。该方法准确度高、重复性好、灵敏度高,适用于地顶孢霉培养物中腺苷、虫草素和麦角甾醇含量的测定,为其质量监控提供了技术支撑。     

北冬虫夏草发酵液中虫草素和腺苷含量的HPLC分析

试用高效液相色谱法同时检测了5株北冬虫夏草菌株发酵液中虫草素和腺苷的含量,并系统地研究了各种发酵条件对虫草素和腺苷含量的影响.结果表明,虫草素和腺苷在所设色谱条件下得到了很好的分离,二组分的线性关系良好,回收率满意,其中虫草素峰保留时间为11.443min,腺苷峰保留时间为9.054min;虫草素的回收率为103.22%,RSD=4.4%,腺苷的回收率为98.42%,RSD=3.2%;虫草素和腺苷的线性范围分别为0.49～98μg/mL,0.46～92μg/mL.5株待测菌株发酵液中的菌丝干重第5天都达到了最大值,其中Cordycepsmilitaris G5124菌株的虫草素含量第9天达最大值,腺苷含量第1天达最大值.试验结果还表明,不同菌株发酵液中的虫草素和腺苷含量具有明显差异,这可能与菌株本身的遗传特性有关.其中C.militaris G（04）5f菌株的虫草素含量最高,可用作发酵生产虫草素的高功能菌株,进一步试验表明,当起始pH值为9时该菌株的虫草素含量达到最高.     

瓜蒌中腺苷的分离制备及标准样品研制

[目的]分离制备高纯度腺苷单体成分并研制国家标准样品.[方法]采取大孔树脂色谱、凝胶柱色谱与制备液相色谱相结合,建立了从瓜蒌皮中大量分离制备高纯度腺苷单体成分的方法,通过UV、IR、MS和NMR等技术进行结构鉴定及确证,按照ISO Guide 35和GB/T 15000.3-2008规程,对腺苷进行了均匀性、稳定性检验...     

宁夏大枣中环磷酸腺苷的提取与定量检测

对宁夏3个品种大枣中的环磷酸腺苷进行了提取与定量检测分析.采用甲醇-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液超声提取大枣中的环磷酸腺苷.选用高效液相色谱-紫外检测器、Agilent-ZORBAX SB-C18色谱柱,以甲醇-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液为流动相进行等度洗脱,在254 nm波长处对环磷酸腺苷进行定量检测....     

模拟酸雨胁迫及施肥与遮荫对半夏主要药用成分质量分数的影响

模拟酸雨,改变施肥与遮荫条件,利用紫外分光光度法和高效液相色谱法测定半夏中总生物碱、鸟苷和腺苷质量分数的变化.结果表明:酸雨胁迫在一定程度上降低了半夏块茎的鲜物质量及总生物碱、鸟苷和腺苷质量分数,pH值为2.0和3.5时较为显著;在施肥与遮荫处理条件下,施肥(每株施肥量为NH4NO3:2 g,NaH2PO4:2 g,K2SO4:2 g)与1层遮荫(自然全光照的20%)的复合处理对半夏块茎鲜物质量的增长及总生物碱、鸟苷和腺苷质量分数的提高最为显著.     

高效液相色谱法同时检测虫草制品中腺苷和虫草素含量的研究

对已有方法和规范中样品前处理方法和色谱条件进行了优化和对比研究,建立检测虫草制品中腺苷和虫草素含量的反相高效液相色谱方法。样品经水超声提取40 min,离心过滤后进行分析。采用C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以水-甲醇(85:15,V/V)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为260 nm。本方法检测限为0.2 μg/mL,定量限为1.0 μg/mL。以所建立的方法对虫草制品进行分析,样品加标回收率在94%~103%,相对标准偏差均小于3%。该检测方法简便、准确,并能同时测定腺苷和虫草素。     

广东不同产地南板蓝根药材中腺苷含量的测定

[目的]测定广东不同产地南板蓝根药材中有效成分腺苷的含量。[方法]建立南板蓝根药材中腺苷的HPLC含量测定方法;色谱条件为:ZORBAX Extend-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为无水甲醇-水(7∶93,V/V);检测波长为260 nm;流速为1.0ml/min;柱温为30℃。[结果]在4.65～232.6 ng/ml范围内,腺苷浓度与峰面积有良好的线性关系,加样回收率为100.3%,RSD为2.2%(n=6);广东从化市样品中的腺苷含量最高,2种野生品种含量最低。[结论]该方法操作简便、准确快速、重现性好,可有效控制南板蓝根药材的质量。     

高效液相色谱法测定噻虫嗪含量的研究

[目的]建立高效液相色谱法测定噻虫嗪含量的方法。[方法]以C18为色谱柱,以磷酸溶液（pH2.5）∶乙腈=70∶30（V∶V）为流动相,在263 nm波长下采用高效液相色谱法测定了噻虫嗪含量。[结果]利用高效液相色谱法测定噻虫嗪含量的线性回归方程为Y=1 133.8X-0.358 4,相关系数为0.999 7,方法回收率在99.89%～100.10%,相对标准偏差为0.20%,在0.05～0.25 mg/ml范围内该方法测定噻虫嗪含量的线性相关性较好。[结论]该方法具有操作简便、快速、峰形好、精密度高和准确度高等优点,是一种较为理想的噻虫嗪含量检测方法。     

白藜芦醇浸提及纯化过程在线检测方法研究

[目的]比较并筛选出适用于白藜芦醇在线检测的方法。[方法]通过试验对比了高效液相色谱(HPLC)和紫外分光光度(UV)法测定花生根白藜芦醇的异同。[结果]从线性相关性看,R(UV)=0.999 6,R(HPLC)=0.999 8,2种方法都有良好的线性度,都适用于花生根白藜芦醇的检测;从精密度[RSD(HPLC)=1.87%,RSD(UV)=2.52%]和回收率[HPLC 98.8%～101.2%,RSD为1.25%;UV法97.8%～103.5%,RSD为2.25%]看,HPLC法优于紫外分光光度法;从平均测得结果看,紫外分光光度法测得白藜芦醇含量为0.699 1%、RSD=2.52%(n=4),HPLC法测得白藜芦醇含量为0.690 4%,RSD=1.87%(n=4),2种方法结果相近。[结论]本着在线监测和仪器的普适性,紫外分光光度法更有优势,更适用于花生根白藜芦醇的检测。     

布洛芬缓释片中布洛芬含量测定方法的优化

[目的]建立布洛芬缓释片的含量测定的最佳方法。[方法]采用紫外分光光度法(检测波长为263 nm)和高效液相色谱法(色谱柱为Agilent C18,流速为1.0 m L/min,检测波长263 nm)测定布洛芬缓释片中布洛芬的含量,最终确定布洛芬缓释片中布洛芬含量的最佳质量控制方法。[结果]以流动相为乙酸铵缓冲液∶乙腈(40∶60)的HPLC方法最佳,布洛芬质量在1.05~6.30μg范围内线性关系很好(r=1.000 0),平均回收率为99.71%,RSD=1.14%,重现性好。[结论]采用高效液相色谱法测定布洛芬缓释片含量最佳,该方法操作简单、分离效果好、重现性好、灵敏度高。     

阿维菌素在蚯蚓体内的残留检测研究

 建立了阿维菌素B1a在土壤生物蚯蚓体内的高效液相色谱荧光检测方法。匀浆后的蚯蚓样品用乙腈提取，经碱性氧化铝SPE柱和C18SPE柱净化，减压蒸干，与1-甲基咪唑（1-MIZ）和三氟醋酸酐（TFAA）衍生化反应后, 进行HPLC 荧光检测分析，激发波长为365 nm, 发射波长为475 nm。 添加法测定结果表明，当添加水平分别为5、50和500 ng·g-1时，平均回收率分别为104.8%、86.6%和83.0%。变异系数在2.99%～7.34%之间。在蚯蚓组织中的检测限为0.5 ng·g-1。