饲料中孔雀石绿和隐性孔雀石绿含量的液相色谱-串联质谱测定方法

建立了超高效液相色谱-串联四级杆质谱法测定饲料中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的含量.用乙腈提取,提取液经蒸干浓缩后用中性氧化铝和阳离子交换固相萃取柱净化,使用UPLC-MS/M进行检测.色谱条件: ACQUITY UPLCTM BEH C18柱(2.1 mm×100 mm i.d.,1.7 μm),流动相乙腈 0.1 %甲酸溶液,梯度洗脱流速0.3 mL/min.采用电喷雾串联四极杆质谱检测.结果表明,孔雀石绿和隐性孔雀石绿的浓度为1～500 ng/mL时线形良好,在1～100 μg/kg的添加水平条件下平均回收率为68.5 %～91.6 %,该方法的检测限为1.0 μg/kg.     

饲料中孔雀石绿和隐形孔雀石绿含量的液相色谱-串联质谱测定方法

建立了超高效液相色谱-串联四级杆质谱法测定饲料中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的含量。用乙腈提取,提取液经蒸干浓缩后用中性氧化铝和阳离子交换固相萃取柱净化,使用UPLC-MS／M进行检测。色谱条件：ACQUITY UPLC^TM BEHC18柱（2．1mm×100mm i．d．,1．7μm）,流动相乙腈0．1％甲酸溶液,梯度洗脱流速0．3mL／min。采用电喷雾串联四极杆质谱检测。结果表明,孔雀石绿和隐性孔雀石绿的浓度为1～500ng／mL时线形良好,在1～100μg／kg的添加水平条件下平均回收率为68．5％～91．6％,该方法的检测限为1．0μg／kg。     

高效液相色谱法测定水产品中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的残留量

采用高效液相色谱法测定鱼体组织中孔雀石绿及其代谢物隐性孔雀石绿的残留量,共检测不同水产品市场的样品559份(包括太阳鱼、桂花鲈、鲮鱼、边鱼、鳗鱼、多宝鱼).未检测到孔雀石绿阳性样品;而隐性孔雀石绿阳性率分别为:桂花鲈8.22%、边鱼5.79%、鳗鱼0%、太阳鱼7.88%、鲮鱼4.17%、多宝鱼为0,样品中隐性孔雀石绿的总检出率为5.01%.本试验的MG回收率范围在91.78%～99.87%,LMG的回收率范围在78.02%～94.97%.MG的相对标准偏差为0.89%～2.09%,LMG的相对标准偏差为1.27%～3.41%.检出限为2μg/kg.     

高效液相色谱法快速测定饲料中孔雀石绿和无色孔雀石绿的研究

本实验建立了高效液相色谱法同时快速测定饲料中孔雀石绿和无色孔雀石绿含量的方法。采用孔雀石绿快速检测前处理试剂盒提取试样,固相萃取小柱净化,用氰基柱串联氧化铅柱分离,用外标法进行定量。孔雀石绿和无色孔雀石绿的最低定量限均为10μg/kg。本方法快捷,前处理过程简单,易操作,2h内即可完成一批样品的检测,且本方法适合于大批饲料样品的筛选。     

液相色谱-串联质谱法测定饲料中孔雀石绿及其代谢物残留量

建立了液相色谱-串联质谱法同时测定饲料中孔雀石绿及其代谢物隐性孔雀石绿含量的方法。采用乙腈提取试样中的药物,经中性氧化铝柱和阳离子交换柱净化后,进行液相色谱-串联质谱法测定,分别以D5-孔雀石绿和D6-隐性孔雀石绿为内标进行定量分析。孔雀石绿和隐性孔雀石绿的检测限(LOD)均为0.5μg/kg,定量限(LOQ)均为1.0μg/kg,在0.25～40.0μg/l的范围内,线性相关系数r均在0.999以上,加标浓度在1.0～100μg/kg范围内,回收率在79.2%～117.0%之间,相对标准偏差≤7.7%。本方法可快速测定饲料中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的含量,操作简单,灵敏度高,结果准确性高,能满足日常检测需要。     

无色孔雀石绿免疫原的合成与鉴定

用化学方法合成了硝基无色孔雀石绿（NO2-LMG），还原为氨基无色孔雀石绿（NH2-LMG），经红外光谱扫描鉴定NH2-LMG为所需化合物。氨基无色孔雀石绿经重氮法处理后与兔血清白蛋白（RSA）载体蛋白相连，通过紫外分光光谱鉴定，偶联产物与其前体物相比吸收峰发生了飘移，说明偶联成功。通过动物免疫试验和ELISA抗体特异性试验对该人工合成抗原免疫原性和与无色孔雀石绿反应原性的鉴定，表明成功合成了无色孔雀石绿免疫原。     

高效液相色谱法测定水产品中孔雀石绿残留量方法的改进

水产品中残留的隐色孔雀石绿经后氧化铅柱氧化为显色孔雀石绿,采用高效液相色谱-紫外检测器对显色孔雀石绿进行了检测.样品提取净化采用乙腈在乙酸铵缓冲溶液条件下提取,10 000 r/min离心,上清液转入50 mL离心管,再加入15 mL蒸馏水,10 000 r/min离心,取上清液过固相萃取柱,再用3mL蒸馏水洗柱,1 ...     

孔雀石绿在水产品中的危害及常见检测方法

孔雀石绿具有抑菌效果,但其具有潜在的致癌、致畸、致突变的作用,是水产养殖中禁用药物。由于其代谢产物无色,并可在鱼体内长时间存留,致使人食用后存在健康隐患,因此它的检测越来越引起人们的重视。本文综述孔雀石绿对水产品的危害性,并对其常见的的检测方法进行介绍。     

孔雀石绿对小鼠血液生化指标的影响

将小鼠60只随机分为对照、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ5个组,分别以灌胃方式染毒孔雀石绿,染毒剂量分别为0mg／kg、10mg／kg、20mg／kg、40mg／kg,30d后观察血液生化指标的变化。结果表明：染毒后血清中谷丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶（GOT）活性随着染毒剂量的增加而升高,其中Ⅳ组和对照组相比差异显著：超氧化物歧化酶（SOD）活性随着染毒剂量的增加逐渐降低,且差异明显;血尿素氤增加,血肌酐在前三组降低,而最高剂量组增加明显。     

孔雀石绿胶体金检测样品前处理工艺的优化

为建立快速筛选孔雀石绿的前处理方法,对标行标水产品中孔雀石绿的快速检测胶体金免疫层析法（KJ201701）,用于水产品中药物残留的现场快速检测使用。试验采用提取、氧化、浓缩和复溶四个步骤,对氮吹、SPE柱、反萃取三种不同提取方式进行前处理优化和比较,通过胶体金免疫层析试纸条进行检测。结果表明：三种方法均能达到同时检测水产品中孔雀石绿的目的,检测时间为反向萃取法相似文献   

科技

孔雀石绿快速筛查法研究成功；云南建立首个生猪养殖射频管理系统。     

用于检测孔雀石绿的全抗原的合成与鉴定

采用重氮化法,将半抗原副品红(Pararosaniline,PA)分别与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)和卵清蛋白(OVA)偶联,反应得到免疫抗原和包被抗原,其偶联最佳结合比分别为8.8∶1,12.7∶1,6.9∶1,经紫外扫描光谱和蛋白电泳鉴定得到全抗原。用制备的抗原乳化后免疫小鼠获得了效价较高的多克隆抗体。为进一步制备抗孔雀石绿单克隆抗体打下基础。     

孔雀石绿及其代谢物在鲫亲子代间传递的研究

为研究孔雀石绿(MG)残留在亲鱼及其子代之间的传递作用以及鱼卵阶段违禁使用孔雀石绿的溯源分析,通过硼氢化钾将孔雀石绿还原成无色孔雀石绿,采用高效液相色谱-荧光检测法检测孔雀石绿及其代谢产物的总量。以浓度为0.5mg/L的孔雀石绿浸泡鲫亲鱼4h,分别跟踪检测雌雄亲鱼肌肉、内脏团以及生殖组织中药物残留变化。取第30天带有MG残留的雌雄亲鱼与空白亲鱼交叉繁殖,检测子代受精卵与鱼苗中药物残留情况,并与空白鱼卵浸泡0.15mg/L孔雀石绿溶液1h后的残留情况作比较。结果显示,各组织中孔雀石绿的残留分布情况在雌雄亲鱼之间无显著性差异;不同组织中残留浓度大小:内脏团肌肉精巢/卵巢,内脏团和肌肉中孔雀石绿残留浓度逐渐下降,精巢/卵巢从0.25h检测到药物残留,之后呈先增加后缓慢下降的趋势。污染孔雀石绿的亲鱼所产的受精卵中,药物残留初始浓度较低,分别为5.1μg/kg±0.8μg/kg、23.8μg/kg±1.3μg/kg、29.5μg/kg±1.1μg/kg,均缓慢下降。而空白受精卵浸泡孔雀石绿溶液后的初始浓度为1 265.8μg/kg±21.1μg/kg,在出苗前保持在较高的浓度,在鱼苗完全孵出后(第5天)残留浓度大幅度下降为163.4μg/kg±7.9μg/kg。因此,亲鱼体内残留的孔雀石绿及其代谢产物残留能够传递到子代,并可根据鱼卵中药物残留浓度变化的差异,区别判断受精卵污染孔雀石绿的来源途径,为养殖环节的孔雀石绿残留溯源分析提供参考。     

农业部下发通知要求全国严查“孔雀石绿”

针对孔雀石绿浸染有毒鲜鱼事件，7月7日，农业部办公厅特向全国各省、自治区、直辖市兽医（畜牧、农牧、农业）厅（局、办）、渔业行政主管部门下发了《关于组织查处“孔雀石绿”等禁用兽药的紧急通知》，在全国范围内严查违法经营、使用“孔雀石绿”的行为。通知称，近日，湖北省仙桃市、洪湖市和河南省郑州市等地违法经营、使用“孔雀石绿”问题严重。“孔雀石绿”是一种化工产品，具有高毒、高残留及“三致”（致畸、致癌、致突变）作用。     

孔雀石绿的毒性及其残留检测研究进展

孔雀石绿因其低廉的价格和良好的效果,被广泛应用于水产养殖业,但因其对动物及人体的严重毒害作用而受到越来越多的关注.文章就孔雀石绿的毒副作用、检测技术的研究进展及其在食品安全性检测中的应用前景进行了综述,旨在促进孔雀石绿检测技术的发展及提高大众食品安全意识.     

酶联免疫法检测饲料中的孔雀石绿方法的验证

目前饲料中违禁药物孔雀石绿的检测方法主要是酶联免疫法、液相色谱法、液相色谱-串联质谱联用法,酶联免疫法检测时间最短、操作最简单,但准确度相较与其他方法不高,而液相色谱-串联质谱联用法检测最准确,但检测时间也最长,操作最繁琐。本文对此做了酶联免疫法与液相色谱-串联质谱联用法同时检测饲料中孔雀石绿的方法比较,并以液相色谱-串联质谱联用法所检测出的结果验证酶联免疫法所检测出的结果,经试验:酶联免疫法与液相色谱-串联质谱联用法测定结果一致;对于饲料样品,所检批次试剂盒在1、10μg/kg孔雀石绿添加浓度处的准确度范围为:70.0%～84.0%,批内变异系数、批间变异系数均≤7.0%;酶联免疫试剂盒方法饲料中孔雀石绿检测限为0.4μg/kg;用酶联免疫法作为检测饲料中孔雀石绿的筛选方法,当出现阳性样品时再用液相色谱-串联质谱联用法进行确证,可缩短检测时间并可减少工作量,有一定的可行性。     

孔雀石绿间接竞争ELISA检测方法的建立

采用无色孔雀石绿(Leucomalachite green,LMG)单克隆抗体建立了水产品中孔雀石绿(Malachite green,MG)残留的间接竞争ELISA(ciELISA)检测方法。结果表明,LMG-McAb最佳稀释倍数为1∶80 000,包被抗原最佳质量浓度为0.80μg/mL;竞争反应时的LMG理想稀释液为40%乙腈水溶液;标准曲线呈线性相关,相关系数R2=0.9823,最适检测范围1 ng/mL~256 ng/mL,最低检测限为1.29 ng/mL,批内和批间变异系数分别为4.307%和4.566%;鳗鱼肉样的平均添加回收率为90%~110%;该检测方法与隐性结晶紫、孔雀石绿、结晶紫的交叉反应(CR%)分别为40.67%、13.50%和5.89%,与其他抗生素无交叉反应。     

韩海洋部将对所有香鱼、鳟鱼养殖场实施调查

随着在韩国国内36个淡水养殖场的香鱼、鳟鱼中检测出致癌物质——孔雀石绿，韩国海洋水产部决定对所有淡水香鱼、鳟鱼养殖场进行为期一个月的调查，确认是否含有有害物质，同时对这两个鱼种以外的其它鱼各淡水养殖场也进行渊查，确认是否含有孔雀石绿。     

HPLC荧光检测鱼肉中孔雀石绿残留量的不确定度

通过数学建模,对GB/T20361-2006 HPLC法荧光检测鱼肉中孔雀石绿残留量的不确定度进行分析。结果表明,合成标准不确定度U(X)=0.048,测量鱼肉中孔雀石绿残留量的不确定度为(2.00±0.19)μg/kg。