镉致体外培养鸡脾淋巴细胞膜蛋白损伤

为了探讨镉对体外培养鸡脾淋巴细胞膜蛋白损伤的影响。通过对体外培养的鸡脾淋巴细胞以终浓度为10μmol／LCdCIz进行染毒,培养12、24、36、48、72h后,收集细胞并提取细胞膜,聚丙烯酰胺梯度电泳分析膜蛋白组分。结果显示,试验组膜蛋白I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅸ的含量有升高趋势,蛋白区带V、Ⅵ、Ⅶ的百分含量有降低趋势,蛋白区带V、Ⅷ的含量变化不明显。说明镉能对鸡脾淋巴细胞膜蛋白造成损伤,使其膜蛋白组分含量改变,膜蛋白功能受抑制。     

氟对牛脾淋巴细胞内抗氧化功能和NO代谢的影响

采用常规方法分离培养健康牛脾脏淋巴细胞,用不同浓度氟化钠（NaF）染毒24 h。检测牛脾淋巴细胞内谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮合酶(NOS)活性及丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）的含量。结果表明,与对照组相比,淋巴细胞内GSH-Px、SOD活性不同程度的降低,而其余各指标均不同程度的升高,且存在着剂量效应关系。由此得出,氟能够导致体外培养牛脾淋巴细胞内抗氧化功能下降,脂质过氧化程度加重,自由基含量增多,对淋巴细胞造成损伤。     

氟对牛脾淋巴细胞膜ATP酶活性的影响

取健康牛脾脏,常规方法分离培养淋巴细胞,用不同浓度氟化钠（NaF）染毒24h。低渗溶胞法提取细胞膜,检测膜上ATP酶活性。结果显示,与对照组相比较,染氟组淋巴细胞膜ATP酶活性降低,组间差异显著或极显著。表明：氟能抑制牛脾淋巴细胞膜ATP酶活性。     

牛体外胚胎生产技术的影响因素

体外胚胎生产技术对于家畜的繁殖潜力挖掘、快速扩繁以及种质资源保护具有重要的价值。自上世纪80年代起,科研人员围绕牛体外胚胎生产开展了广泛而深入的研究,并取得了良好的进展。目前牛胚胎体外生产的基本体系已经确立,在体外培养条件下能够稳定的获得囊胚,但是在牛胚胎体外生产过程中仍然有许多因素和机制没有被彻底阐释,从而限制着牛胚胎体外生产水平。本文综述了牛卵母细胞体外成熟、体外受精及早期胚胎体外培养的相关技术环节的研究进展,并对包括培养液的添加物质、培养过程中的氧化应激等相关影响因素进行了探讨,以期为进一步提高牛胚胎体外生产水平提供依据。     

镉对鸡脾淋巴细胞膜磷脂组分和膜流动性的影响

随着镉资源开发和利用的增加,镉的污染也随之加重,严重威胁着人畜的健康.镉吸收入血后并随血流分布到各器官,对人和动物造成多器官组织损伤、细胞毒性[1].细胞膜是镉进入细胞,发挥其生物毒性作用所必须经过的第一道关卡,镉的毒性可能归结于使膜结构和功能发生改变,这种改变与膜脂质的改变密切相关[2],但镉对淋巴细胞膜磷脂的损伤和膜流动性的影响还未见报道,因此本试验以体外培养鸡脾淋巴细胞为研究对象,探讨镉对膜磷脂组分和膜流动性的影响,为进一步认识镉的毒理提供依据.     

九种中药成分对体外培养小鼠淋巴细胞功能的影响

为进一步探索黄芪多糖等9种中药成分免疫增强活性的作用机理并比较各成分之间免疫增强活性的强弱，在体内试验的基础上，用脾淋巴细胞增殖反应和抗体夹心酶联免疫吸附试验测定了它们对体外培养的小鼠淋巴细胞功能的影响。结果表明，人参皂甙、蜂胶黄酮、黄芪多糖、淫羊藿黄酮、淫羊藿多糖都能显著地直接或协同ConA刺激脾和外周血淋巴细胞增殖，也能显著增加LPS诱导的脾淋巴细胞增殖活性和显著升高体外培养的小鼠脾淋巴细胞产生的IgG水平；当归多糖能协同ConA和LPS的诱导活性，提高小鼠脾淋巴细胞体外培养系统的IgG水平；黄芪皂甙能直接和协同LPS刺激淋巴细胞增殖，板蓝根多糖则仅能促进LPS的诱导活性，蜂胶多糖的作用则均不明显。     

蕨麻多糖对小鼠淋巴细胞增殖和一氧化氮分泌的影响

为探讨蕨麻多糖（Potentilla anserine polysaccharide，PAP）免疫调节的作用机理，观察了PAP对小鼠脾淋巴细胞体外增殖和分泌一氧化氮的影响。结果显示，50mg／L PAP配合ConA或LPS（lipopolysaccharide，脂多糖）能使小鼠脾淋巴细胞在体外显著增殖（P〈0．05）；100、200及400mg／L PAP配合ConA或LPS可使小鼠脾淋巴细胞在体外极显著增殖（P〈0．01）；与对照组相比，PAP以不同浓度（50～400mg／L）处理小鼠脾淋巴细胞后一氧化氮分泌量均显著升高（P〈0．05）。试验结果表明，蕨麻多糖能明显促进体外培养的小鼠脾淋巴细胞增殖和分泌一氧化氮，与ConA或LPS有协同作用。     

天门冬多糖对猪脾淋巴细胞体外增殖的影响

试验旨在研究不同浓度的天门冬多糖(ASP),在ConA或LPS的协同刺激下对猪脾淋巴细胞体外增殖的影响。猪脾淋巴细胞体外培养体系中加入不同浓度的天门冬多糖使其终浓度为400、200、100、50、25、12.5μg/ml,在ConA(5μg/ml)或者LPS(10μg/ml)的协同刺激作用下,细胞培养24、48、72 h时,观察猪脾淋巴细胞增殖情况。结果表明,天门冬多糖及其协同ConA或LPS能显著或极显著的促进猪脾淋巴细胞体外增殖(P<0.05或P<0.01)。     

牛磺酸对染镉鸡脾淋巴细胞膜氧化损伤的保护作用

体外培养鸡脾淋巴细胞,加入10μmol/L CdCl2后,在加入不同浓度的牛磺酸(1,5,10 mmol/L),分别培养12、24和36 h时收集细胞,提取脾淋巴细胞膜,检测了细胞膜谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性、膜丙二醛(MDA)的含量,观察牛磺酸对镉致鸡脾淋巴细胞膜氧化损伤的保护效果。结果:与对照组相比,CdCl2能明显降低细胞膜GSH-Px、SOD的活性,使MDA含量增加;添加牛磺酸各组中细胞膜GSH-Px、SOD的活性明显恢复,MDA含量降低,其影响较为显著的是浓度10 mmol/L的牛磺酸组。研究表明牛磺酸可以拮抗镉中毒引起鸡脾淋巴细胞膜氧化损伤作用。     

维生素E缺乏对雏鸡淋巴细胞膜蛋白的影响

用低维生素E(VE)和添加不饱和脂肪酸的日粮饲喂雏鸡,建立VE缺乏雏鸡模型.分离全血淋巴细胞,制备淋巴细胞膜蛋白,用SDS-PAGE凝胶电泳法检测淋巴细胞膜蛋白组分变化.结果表明,VE缺乏组雏鸡淋巴细胞膜蛋白带Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ含量高于对照组,带Ⅳ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ含量低于对照组,组间差异显著或极显著,带Ⅴ无显著变化.提示VE对维持雏鸡淋巴细胞膜结构起重要作用.     

鸡和猪脾转移因子活性组分的提取及免疫活性研究

采用Sephadex G-25柱层析法分离提取鸡、猪脾转移因子(Transfer Factor,TF)各组分。利用环磷酰胺建立小鼠免疫抑制模型,通过MTT法比较鸡脾TF各组分及TF原液对免疫抑制小鼠和正常小鼠的淋巴细胞转化的作用,同时比较了不同来源的鸡脾和猪脾TF各组分及原液对正常小鼠淋巴细胞转化的作用。结果表明鸡脾和猪脾TF均由三大组分构成,其中鸡脾TF三大组分及原液均对免疫抑制小鼠的外周血淋巴细胞转化具有明显的免疫增强作用,与对照组相比均表现差异显著(P<0.01),其中组分Ⅲ的淋巴细胞转化最佳,组分Ⅰ与组分Ⅱ接近,但均优于原液。而对正常小鼠的外周血淋巴细胞转化却表现不同的结果,其中组分Ⅰ和原液具有显著的免疫增强作用(P<0.05),组分Ⅱ作用不显著,组分Ⅲ则起到极显著的抑制作用(P<0.01)。而不同来源的猪脾和鸡脾TF各组分及原液对正常小鼠的淋巴细胞均表现出一致的免疫活性。     

氟中毒与氧化应激相关性的研究进展

为探究氟中毒的发病机理,文章从自由基医学的角度概述了氟中毒与脂质过氧化作用的研究情况。资料显示,氧化应激并非氟中毒所特有,它受很多因素影响,因此,它并不是氟中毒早期诊断的特异性生物学标志。氧化应激只是氟致机体多种损伤效应之一。     

银杏叶提取物对小鼠脾淋巴细胞体外增殖和分泌功能的影响

为分析银杏叶提取物(EGB)对小鼠脾淋巴细胞体外增殖和分泌功能的影响。无菌分离小鼠脾,制备淋巴细胞,并用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养,在培养液中分别加入刀豆蛋白A(Con A)或脂多糖(LPS)及8、16、32和64μg/m L不同质量浓度的EGB,经过不同时间培养后,采用MTT法检测淋巴细胞的增殖,ELISA法检测淋巴细胞分泌IL-4和IL-12的水平,流式细胞仪检测淋巴细胞的细胞周期和细胞膜表面标志。结果表明:EGB能够促进小鼠脾淋巴细胞增殖,不能与Con A或LPS协同促进小鼠脾淋巴细胞增殖;能增强IL-4和IL-12的分泌;能提高小鼠脾淋巴细胞CD4~+/CD8~+的比值;能提高脾淋巴细胞周期中细胞进入S期细胞的百分率。结果提示:EGB能增强小鼠脾淋巴细胞的免疫调节活性。     

镉对体外培养鸡脾淋巴细胞膜物理特性的影响

为了探讨镉对鸡脾淋巴细胞膜物理特性的影响,以终浓度为10 μmol/L CdCl2对体外培养淋巴细胞进行染毒,培养12、24、36、48、72 h后,收集细胞上清液,提取细胞膜,分别检测乳酸脱氢酶(LDH)的活性、淋巴细胞膜偏振度与微黏度和唾液酸(SA)含量.结果显示,淋巴细胞内的LDH漏出率增加(P＜0.01),淋巴细胞膜荧光偏振度和微黏度增加(P＜0.01或P＜0.05),SA含量降低(P＜0.01).研究结果表明,镉能改变淋巴细胞膜通透性,降低淋巴细胞膜的流动性.     

铝对体外培养鸡脾淋巴细胞钙稳态的影响

本研究通过对体外培养的鸡脾淋巴细胞进行染铝处理,检测细胞内游离钙离子浓度和CaM mRNA表达水平,以探讨铝对淋巴细胞钙稳态的影响,为探讨铝的免疫毒性机制提供基础资料.     

更换培养液对体外成熟和受精的牛卵母细胞发育的影响

用添加氨基酸的合成输卵管培养液培养体外成熟和受精的牛卵母细胞。密度为 3或 30个 /30μl,培养 1 53h。如果培养至 72 h时培养液发生改变 ,则培养至 1 53h后培养液中铵的浓度将显著降低。但如果不考虑胚胎密度 ,则改变培养液成份对牛胚胎的发育没有影响。如当 30个胚胎一组进行培养时 ,胚泡的形成和铵的产量都会增加。本研究结果表明 ,牛的胚胎发育至胚泡期时 ,培养体系中铵浓度降低产生的影响可忽视不计。即在目前的条件下 ,采用体外培养技术使胚胎发育至胚泡的过程中 ,不必更换培养液更换培养液对体外成熟和受精的牛卵母细胞发育的影响@…     

胸腺组织注射液提高母猪淋巴细胞转化率的试验

体外培养的 T 淋巴细胞,在抗原的刺激下,有转化为淋巴母细胞的特点。采用植物血凝素(PHA)作为一种非特异性致有丝分裂原,刺激体外培养的外周血液淋巴细胞转化,以反映机体细胞免疫功能状态,已广泛应用。根据近年来胸腺在免疫学上参与机体免疫功能的研究基础,本试验采用对本动物注射胸腺组织液来测定淋巴细胞的转化,以了解对机体免疫功能的影响,为进一步临床防治仔猪白痢病提供试验依据,现将试验结果报道如下。     

猪圆环病毒2型对小鼠淋巴细胞发育的抑制作用

猪圆环病毒2型(PCV2)是引起仔猪断奶多系统衰竭综合征的病原微生物,该病毒可以降低免疫反应引起严重的免疫抑制,直接导致体内淋巴细胞的凋亡和耗竭。为研究PCV2对发育中淋巴细胞的影响,本文以小鼠为试验模型,用免疫荧光法统计骨髓、胸腺、脾CD3、CD19阳性淋巴细胞数,qPCR定量分析淋巴细胞发育相关基因转录水平,MTT法检测体外培养淋巴细胞增殖能力。结果表明:(1)PCV2造成感染早期小鼠外周血淋巴细胞不同程度减少,并抑制体外培养淋巴细胞的增殖;(2)PCV2导致骨髓和脾CD19阳性B淋巴细胞极显著降低(P0.01),并抑制淋巴细胞发育相关基因的转录;(3)PCV2对发育中淋巴细胞的凋亡也有一定促进作用。因此,PCV2抑制早期淋巴细胞的发育和促进发育中淋巴细胞凋亡可能是导致体内淋巴细胞大量耗竭的原因之一。     

关于毒氟磷安全性评价的彗星试验分析

为了研究毒氟磷致小鼠遗传毒性,试验将小鼠外周血淋巴细胞悬液随机分成5组,第1组为D-Hank’s阴性对照组;第2,3,4组为试验组,分别用30%毒氟磷可湿性粉剂按1 mg/L、5 mg/L、10 mg/L剂量进行体外染毒;第5组为10μmol/L阿霉素阳性对照组。通过MTT法测定毒氟磷对细胞的增殖抑制作用,并对DNA损伤进行彗星试验(SCGE)分析。结果表明:1 mg/L、5 mg/L、10 mg/L毒氟磷对细胞的抑制率分别为(6.751±0.021)%、(11.521±0.009)%、(16.254±0.022)%;5 mg/L毒氟磷可致小鼠外周血淋巴细胞DNA损伤,随着染毒剂量的增加DNA受损程度加剧,呈现剂量-效应关系。     

复方中药多糖对体外脾淋巴细胞增殖、NO生成和蛋白激酶G的影响

将5种不同浓度复方中药多糖(CPPS)加入到小鼠脾淋巴细胞中培养48 h,观察CPPS对小鼠脾淋巴细胞增殖、对体外培养的脾淋巴细胞中NO的生成和蛋白激酶G(PKG)活性的影响。结果显示,CPPS能显著提高淋巴细胞增殖,显著升高细胞培养液中NO的生成,细胞内PKG活性明显提高,且CPPS、NO和PKG与淋巴细胞增殖有一定相关性。CPPS可能通过NO介导信号通路,引起第二信使环化鸟苷酸(cGMP)生成,从而提高PKG活性促进淋巴细胞的增殖,发挥其免疫调节作用。