地鳖肽提取物对H2O2刺激C2C12细胞肌调节因子基因表达的影响

探究地鳖肽提取物(Eupofyphaga sinensis peptide extract, ESP)对过氧化氢(H₂O₂)刺激的C2C12细胞肌调节因子基因表达的影响。体外培养C2C12细胞其中培养基分别添加ESP和叔丁基对苯二酚(TBHQ)处理细胞诱导其分化融合9 d,除对照组外所有组细胞在试验结束前8 h培养基添加H₂O₂处理细胞;采用RT-qPCR和免疫荧光法检测肌调节因子基因和蛋白表达,细胞染色和显微镜观察细胞形态。对照组可见诱导分化融合9 d的C2C12细胞出现成熟多核肌管,随着细胞培养时间延长肌调节因子MyoG基因表达增加;与对照组比较,H₂O₂组C2C12细胞增殖调节因子(Pax7、Myf5、MyoD)基因表达显著降低,在细胞分化不同时间C2C12细胞分化调节因子(MyoD、MyoG、Myf6)mRNA表达显著下调,表达MyoG细胞阳性率和肌管融合率比对照组明显降低;与H₂O₂组比较,ESP组C2...     

白细胞介素18及其在禽类中的研究进展

白细胞介素18 (Interleukin- 18,IL-18)主要由单核-巨噬细胞系分泌,在结构上属于IL-1家族[1],在功能上与IL-12相似,而且与IL-12有协同效应,是重要的调节先天性免疫和获得性免疫的因子.IL-18除了能够明显诱导Th1、NK及NKT细胞产生IFN-γ外,还可诱导诸如IL-2、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及肿瘤坏死因子(TNF-α)等其它多种细胞因子的产生[2].     

基于因子分析和聚类分析的矿产资源储量研究

本文以我国各地区的矿产资源储量为研究对象,选取12个指标,由因子分析法提取得到四个公因子,计算其综合得分进行排名,然后利用快速聚类法,分析各个地区在各个因子上的得分及排名情况,研究各地区矿产资源的储存情况。     

广灵大尾羊HSD17B12基因克隆、生物信息学分析及表达规律的研究

本研究旨在克隆广灵大尾羊HSD17B12基因CDS，预测HSD17B12蛋白及其基因启动子区的结构和功能特性，探究HSD17B12基因在前体脂肪细胞分化过程中的表达。采用PCR法克隆HSD17B12基因CDS全长序列；生物信息学软件分析HSD17B12蛋白的理化性质、结构、功能位点和结构域，并进行亚细胞定位、序列相似性分析及其基因核心启动子区和转录因子潜在结合位点的预测；采用实时荧光定量PCR检测HSD17B12基因以及部分转录因子在前体脂肪细胞分化过程中的相对表达量。结果显示，广灵大尾羊HSD17B12基因CDS全长939bp，编码312个氨基酸；HSD17B12蛋白主要定位于内质网，有3个跨膜结构域和33个磷酸位点，二级结构主要由α-螺旋和无规则卷曲组成，其氨基酸序列与山羊相似性最高；HSD17B12基因有5个潜在的核心启动子区，存在SP1、ATF2和CREB1等10个转录因子的结合位点；在前体脂肪细胞分化过程中，SP1、ATF2和HSD17B12基因的mRNA表达均呈上升趋势，说明ATF2和SP1可能正向调控HSD17B12基因的表达，促进脂质沉积。本研究为进一步揭示HSD17B...     

温度与开食时间对初生雏卵黄吸收与增重速度的影响试验

为探讨育雏温度与开食时间对雏鸡卵黄吸收与增重的影响,选用同一来源,正常孵化,同时出壳的健康白色来航初生雏540只,随机分为9组,试验期为5周。采用二因子三水平正交试验设计,开食时间因子为雏出生后12、24、48小时三个水平;育雏初始温度因子为29、32、35℃三个水平;开食前随机剖解雏鸡10只,测其初生卵黄重(6.05±1.52克),由笫三日龄开始,每隔12天为一期,各组屠宰4只     

小鼠成肌细胞培养方法的建立与优化

通过对小鼠成肌细胞C2C12细胞培养,优化细胞的培养方法和培养条件,提出了培养C2C12细胞的最佳条件.获得大量贴壁培养的小鼠成肌细胞C2C12,将广泛地应用于生物医学、肌肉再生临床医学、动物肉质性状相关研究及多种与骨骼肌相关的因子机制研究.     

玉米赤霉烯酮对IPEC-J2细胞炎症相关因子mRNA表达和活性的影响

本试验旨在探讨玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)对仔猪空肠上皮细胞(IPEC-J2)炎症相关因子m RNA表达和活性的影响。试验选取不同浓度(0~80μg/m L)ZEN处理IPEC-J2细胞12、24、48 h,CCK-8法检测细胞存活率并计算得出半数抑制浓度(IC50)。根据IC50选取用不同浓度ZEN(0、5、10、15μg/m L)处理细胞12、24、48 h,倒置显微镜下观察细胞形态,RT-PCR法测定炎症相关因子NF-κB、COX-2、PGES、IL-6、IL-8m RNA的表达量,ELISA方法检测炎症相关因子的活性。结果表明:ZEN以时间和剂量依赖性降低IPEC-J2细胞存活率,12、24、48 h ZEN的IC50分别为41.09、28.54、19.85μg/m L;随ZEN浓度升高和处理时间的延长,细胞形态被逐渐破坏;除COX-2的m RNA表达量和活性在12 h随ZEN浓度升高而升高外(P0.05),炎症相关因子m RNA表达量和活性均随ZEN浓度的升高呈先升高后降低(P0.05);ZEN浓度和处理时间对炎症相关因子m RNA表达量和活性的影响均有极显著的交互作用(P0.001)。以上结果表明,ZEN能降低细胞存活率,破坏细胞形态,ZEN对细胞炎症相关因子m RNA表达和活性具有双向调节作用。     

柞蚕主要性状主成分聚类分析与综合评价

以12份不同类型的柞蚕品种为供试材料,采用随机区组设计,春秋两季各3次重复,估算12个柞蚕品种(品系)产量、生命力和品质等7个经济性状的主成分,并以前3个主成分和欧式距离为基础作聚类分析。结果显示,在12份柞蚕种质中,前3个主成分累计贡献率达93.97%。第1主成分为产卵量构成因子,贡献率为64.19%,第2主成分为孵化率构成因子,贡献率为15.12%,第3主成分为生命力构成因子,贡献率为14.66%。综合排序的结果,"582B"、"辽蚕426"和"KV"综合得分较高,说明这3个品种在产卵量、孵化率和生命力方面性状较为优良。聚类分析结果表明,12份柞蚕品种可分为3大类群,形态特征是造成柞蚕品种间遗传距离远近的关键因素。     

松嫩草地虎尾草光合与蒸腾作用的研究

松嫩平原盐碱化草甸上的虎尾草叶片光合与蒸腾作用的日变化均呈单峰曲线，且在午间12时均达到最高峰。单因子相关分析得出，虎尾草叶片净光合速率与光强呈显著正相关。蒸腾速率与光强、叶面温度、大气温度均呈极显著正相关。在生态因子中，光强是影响虎尾草叶片净光合速率与蒸腾速率的主要因子。     

温度和光照时间对虎纹捕鸟蛛的捕食影响

为寻找人工饲养繁殖虎纹捕鸟蛛最适宜的生态因子,采用正交试验法,研究了温度和光照时间对虎纹捕鸟蛛捕食作用的综合影响。依据捕食数量进行正交设计的方差分析得知,最有利于虎纹捕鸟蛛捕食的因子组合为温度27℃,光照时间12 h。     

IL-12及其免疫调节作用

IL-12是一种具有多种生物学活性的免疫细胞生长刺激因子,它能促进T淋巴细胞和NK细胞的分化与增殖,调控细胞免疫,提高NK/LAK细胞的杀伤功能和特异性CTL细胞的应答能力,诱导γ干扰素产生;能与其他细胞因子协同成为重要的免疫治疗因子。     

白三叶HD-Zip类转录因子TrATHB-12的克隆及表达分析

HD-Zip转录因子是高等植物中特有的一类转录因子,在高等植物的生长发育以及生物和非生物胁迫等逆境应答中起着重要的调控作用。本试验以白三叶品种‘拉丁诺’（Trifolium repens ‘Ladino’）为试验材料,通过同源获取和cDNA末端快速扩增技术（Rapid amplification of cDNA ends,RACE）得到白三叶HD-Zip类转录因子TrATHB-12全长序列,并利用相关软件分析其生物信息学特性,使用荧光定量的方法研究其对非生物胁迫、信号分子和激素的响应,从而为后续构建载体转染白三叶以研究其在各种胁迫下的响应提供一定的基础。试验结果表明,TrATHB-12全长cDNA为1 175 bp,开放阅读框（Open Reading Frame,ORF）包括744个核苷酸序列,编码248个氨基酸,有2个保守结构域,仅包含HD和LZ,属于HD-Zip I类转录因子。同源分析和进化树结果显示,TrATHB-12基因核苷酸和蛋白质序列与其他豆科植物相似度较高,是较为保守的基因。生物信息学分析发现TrATHB-12编码的蛋白理论分子量为28 738,等电点为5.18,无信号肽和跨膜结构,是不稳定亲水蛋白。表达模式结果显示,TrATHB-12基因在根系和叶片中的表达量有所差异。其中,干旱可以显著诱导叶片中TrATHB-12基因的表达,盐胁迫则可以显著诱导根系中TrATHB-12基因的表达,TrATHB-12对其他逆境均有不同程度的响应;脱落酸（Abscisic acid,ABA）和吲哚乙酸（Indole acetic acid,IAA）处理下叶片中TrATHB-12的表达量显著上升;TrATHB-12对于H₂O₂和NO信号分子有较明显的响应。综上,本试验可为继续深入研究TrATHB-12基因,从而提高白三叶抗逆性奠定一定的基础。     

基于PCA和SVM算法的滑坡稳定性分析研究

滑坡稳定性的计算方法是滑坡研究的关键问题。本文选取了24个影响滑坡稳定性的因子,运用主成分分析对这些影响因子进行属性约简,去掉冗余的影响因素小的因子,得到12个核心的影响因子,并以此作为支持向量机的输入特征值,构建主成分分析与支持向量机结合的滑坡稳定性分析模型。通过对212组滑坡数据进行分析与验证,结果表明应用主成分分析-支持向量机模型不仅可以大幅度降低数据之间的相互影响,同时提高了稳定性分析准确性。     

鸡白细胞介素-12有望用于体内抗病毒治疗

为研究新的抗人兽共患病病毒的策略,澳大利亚动物健康实验室、新英格兰大学和墨尔本大学的科学家把研究重点集中在鸡白细胞介素-12上（IL-12）,由于IL-12在诱导IFN-γ产生方面的作用成为抗病毒反应的关键性调节因子,因而生产治疗剂量的IL-12有望成为一种新的抗病毒策略。他们将单链的鸡IL-12基因克隆进入pET32b表达载体中,转化BL-21大肠杆菌,采用IPTG诱导表达。     

IL-12的分子生物学及功能的研究近况

IL-12是B细胞、吞噬细胞以及中性粒细胞等在受到各种刺激时释放的一种细胞因子。它是一种不同于IL-2的，在体外能与IL-2协同促进小鼠CTL应答的细胞因子。1982年，Wagner等在丝裂原刺激小鼠淋巴细胞的条件培养液中首先发现了此细胞因子，后来Gubler从B淋巴细胞瘤细胞株NC-37克隆了IL-12cDNA基因，命名为细胞毒淋巴细胞成因子(Cytotoxic Lymphocyte maturation factor，CLMF)；与此同时，Wolf也从EB病毒转化的B细胞株中克隆了此基因，     

滇西亚种树类风湿因子的测定及初步分析

为了测定滇西亚种树血清中类风湿因子的含量,试验选择滇西亚种树20只(雌雄各半),禁食12 h后,非麻醉状态下心脏采血0.8~1.0 mL,装入灭菌离心管中用于分离制备血清并用全自动生化分析仪(型号为Roche cobas c311)进行测定,采用SPSS统计软件对试验数据进行统计分析。结果表明:雄性滇西亚种树血清中类风湿因子含量显著高于雌性(P0.05),滇西亚种树类风湿因子测定值在人的参考值范围内。     

山羊痘病毒双向启动子序列的克隆与鉴定

为鉴定山羊痘病毒(GPV)基因组中的启动子序列,本研究预测GPV基因组中早期转录因子VETF-l和中期转录因子VITF-3基因序列之间56 bp的一段序列为双向启动子,并将其命名为Pb56。通过PCR技术将该启动子序列的两个方向(Pb56+,Pb56-)分别与绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因融合,构建重组转移重组质粒,分别命名为pUC-TK12-Pb56(+)-EGFP和pUC-TK12-Pb56(-)-EGFP。用脂质体转染法将2个转移重组质粒以及阴性对照pUC-TK12-EGFP及阳性对照pUC-TK12-P7.5-EGFP分别转染GPV预感染的BHK细胞;采用EGFP报告基因的表达水平评估双向启动子的活性。结果表明该基因序列的两个方向均能启动EGFP的表达,初步证实了该基因序列为GPV的双向启动子;Pb56+和Pb56-的转录活性均高于痘苗病毒的P7.5启动子。     

牛血清中非特异性因子对貉传染性肠炎病毒增殖的抑制作用

7例从丹麦进口的成牛血清,5例本地成牛血清、3例初生犊牛血清及1例胎牛血清对貉传染性肠炎病毒核内包涵体形成抑制率(平均值)分别为71.6％、77.1％、5.8％及23.4％,30例从丹麦进口成年牛血清、12例本地成年牛血清、12例初生犊牛血清及1例胎牛血清对REV的红细胞凝集抑制价平均分别为1:72.4、1:68、1:54.6及1:64。在有牛血清存在的情况下,应用组织培养增殖病毒时,REV的红细胞凝集价明显下降。牛血清中的抑制因子对猫胎肾细胞株具有亲和性。该抑制因子不是来自抗REV或者与REV有交叉反应的某种病毒的抗体,而是种非特异性抑制因子。     

紫花苜蓿光能及叶片水分利用效率影响因子分析

大田条件下,利用C 340df光合仪,对12个紫花苜蓿Medicago sativa品种(初花期)的净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)及生态因子(光合有效辐射、大气温度、大气湿度)和生理因子(胞间CO2浓度、气孔导度、叶温)进行测定,探讨影响其光能利用效率（LUE）和叶片水分利用效率（WUE）的主要因子。结果表明：1)品种胖多单株干质量最高,且LUE、WUE显著高于其他品种(P＜0.05),属于高光合、低蒸腾、高水分利用品种;2)影响LUE的主要是生理因子(胞间CO2浓度、气孔导度),而影响WUE的则为外界环境因子(光合有效辐射、大气温度、大气湿度)。     

奶牛早孕因子重组蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备

本研究旨在表达、纯化奶牛早孕因子重组蛋白及制备多克隆抗体.本试验构建奶牛早孕因子重组蛋白原核表达载体pET32a-EPF,转化至大肠杆菌BL21(DE3)内进行诱导表达,SDS-PAGE切胶纯化的早孕因子重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,并用Western blotting和ELISA对重组蛋白及抗体进行检测.结果显示,成功表达并纯化了奶牛早孕因子重组蛋白,重组蛋白分子质量约37 ku,表达量约占菌体总蛋白的48.6%,纯化后目的蛋白纯度可达93%,重组蛋白可与所制备的多克隆抗体结合,ELISA测定的抗体效价为1:12 800.结果表明,本研究成功表达并纯化了奶牛早孕因子重组蛋白,为研究奶牛早孕诊断奠定基础.