肥城桃多酚氧化酶的部分纯化及其特性

经（ＮＨ４）２ＳＯ４分级沉淀、透析等步骤，使肥城桃多酚氧化酶部分纯化，纯化倍数为５．１１倍。该酶对邻苯二酚、焦Ｐｅｉ酚和ＤＬ－二羟基苯丙氨酸显示活性，其中焦Ｐｅｉ酚是最佳底物。这种多酚氧化酶的最适ＰＨ值为６．８，在３５℃下放置３０ｍｉｎ基活性不会降低。     

桃多酚氧化酶的纯化及其特性

为延长桃果实货架寿命及提高贮藏保鲜技术,以5年生早花露桃果实为试材,对桃多酚氧化酶的纯化及其特性进行了研究,结果表明采用疏水柱层析,透析与PEG浓缩,纯化了早花露桃的多酚氧化酶.所得的酶液经薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳,显示单一条带,等电点为3.0.经SDS-PAGE分析,它由2条主要多肽(相对分子质量(MW)分别为3.98×104,6.59×104)和2条含量较少的多肽(MW为6.67×104,6.76×104)所组成.纯化酶液的最高吸收峰在波长272.5nm处,300nm以上几乎无吸收.该酶对邻位二元酚有较高亲和力,几乎不能催化一元酚和三元酚的氧化.以儿茶酚为底物,其最适pH为7.0,最适反应温度20℃.在果实生长发育过程中,多酚氧化酶活性呈下降趋势,中期有一活性相对较小的峰,同时,多酚氧化酶疏水特性增强.     

杏多酚氧化酶动力学研究

对影响杏多酚氧化酶活性的因素研究表明，２５℃、ｐＨ６．８对杏ＰＰＯ活性最强；８５℃和１００℃下，杏ＰＰＯ完全失活的时间分别为１５０ｓ和３５ｓ，抗坏血酸和Ｌ－半胱氨酸对杏ＰＰＯ活性有抑制作用，抑制程度随浓度增加而增强。     

鸭梨果肉多酚氧化酶的活性研究与纯化

对鸭梨(Pyrus bretschneideri Rehd.)果肉多酚氧化酶的活性进行研究并对其进行纯化。以鸭梨果肉为试材,采用邻苯二酚为底物测定氧化产物的方法,就pH值、温度、热稳定性、抑制剂、不同成熟期及果肉不同部位等因素对PPO活性的影响进行了研究;酶粗提液经30%硫酸铵沉淀去杂和80%饱和度硫酸铵析出、Sephadex G200柱层析及HiPrepTM16/10 QXL离子柱层析等步骤进行了纯化,经SDS-PAGE进行了验证。结果表明:鸭梨果肉中的PPO最适pH值为6.4;最适温度为25℃;20～25℃时热稳定性较高;不同成熟期的活性不同;34 mmol/L的NaCl为较好的抑制剂;果肉近果心处活性最高,中部活性最低。经纯化,获得均一的PPO,分子量约43 kD。为鸭梨果肉PPO的性质研究以及控制梨果PPO酶促褐变提供了依据。     

中华寿桃多酚氧化酶的特性研究

 【目的】对分离纯化后的中华寿桃果肉多酚氧化酶的酶学性质进行研究,探讨中华寿桃果肉褐变机理。【方法】以邻苯二酚为作用底物,用分光光度法在420 nm下测定不同pH、反应温度、底物浓度条件下桃果肉的多酚氧化酶（PPO）活性。【结果】中华寿桃果肉66 kD的PPO最适pH约为6.5,最适反应温度为60℃左右,该酶对温度有较强稳定性;该酶最适作用底物为绿原酸、儿茶酚和对羟基苯甲酸;FeSO4、EDTA和抗坏血酸等化合物可以抑制PPO活性,CaCl2、CuSO4和MnSO4等则起促进作用。【结论】该酶耐热能力强,适度低温、酸性条件、抗坏血酸处理等可以抑制该酶活性。     

马铃薯多酚氧化酶的特性研究

多酚氧化(PPO)酶是导致切分马铃薯变色的主要原因。以大西洋马铃薯为材料,采用分光光度法研究其PPO的特性。结果表明:该酶仅作用于邻苯酚,与对苯酚、间苯酚和一元酚无作用。以邻苯二酚为底物,该酶的最适pH值为5.5,最适温度为5℃。除氯化钠和EDTA外,供试的其它5种浓度为0.01mol/L的抑制剂均可不同程度地对该酶产生抑制。     

大久保桃果实多酚氧化酶某些特性的研究

以邻苯二酚为底物,分析了大久保桃多酚氧化酶(PPO)的最适pH、最适作用温度、酶促动力学参数Km值及其抑制剂。结果表明,大久保桃多酚氧化酶的最适pH值为6.0,最适作用温度34℃,Km=9.7×10-2mmol/L;偏亚硫酸钠、抗坏血酸、谷胱甘肽、巯基乙醇对大久保桃PPO的活性有较强的抑制作用。     

桑尺蠖多酚氧化酶的分离纯化

多酚氧化酶是昆虫初生新表皮硬化过程中的关键酶。为了研究桑尺蠖(Phthonandria atrineata)多酚氧化酶的功能与性质,探讨了桑尺蠖多酚氧化酶的分离纯化方法。以桑尺蠖五龄幼虫为材料,用磷酸盐缓冲液提取多酚氧化酶粗提液,再经80%饱和度硫酸铵沉淀、透析及SephadexG-100凝胶过滤进一步分离纯化,得到了部分纯化的多酚氧化酶,其酶纯化倍数为6.28倍,酶得率为3.34%,酶比活力为812.8 U/mg。     

乌贼墨中多酚氧化酶的分离及纯化

用pH7.2磷酸提取缓冲液从乌贼墨汁澡提取多酚氧化酶，提取的粗酶液经30%-80%饱和度硫酸铵分级沉淀、透析、DEAE-SepharoseCL-6B柱层析和SephadexG-150柱层析后，得到纯化的多酚氧化酶，纯化们数为10.78，纯化后的酶液经聚丙烯酰胺凝胶电泳，分别采用银染色和多酚氧化酶活性染色均显示一条电泳带。     

乌贼墨中多酚氧化酶的分离及纯化

用pH7.2磷酸提取缓冲液从乌贼墨汁澡提取多酚氧化酶，提取的粗酶液经30%-80%饱和度硫酸铵分级沉淀、透析、DEAE-SepharoseCL-6B柱层析和SephadexG-150柱层析后，得到纯化的多酚氧化酶，纯化们数为10.78，纯化后的酶液经聚丙烯酰胺凝胶电泳，分别采用银染色和多酚氧化酶活性染色均显示一条电泳带。     

赛买提杏多酚氧化酶特性的研究

[目的]多酚氧化酶(PPO)会对杏加工生产产生重大影响,它不仅影响杏加工产品如杏酱等的色泽,而且也影响其品质,特别是在制作杏茶、杏汁饮料的过程中更为突出.所以,准确测定PPO活性,具有重要的生理和现实意义.[方法]以新疆主栽赛买提鲜杏为原料,对杏组织中PPO的特性进行了研究.[结果]杏多酚氧化酶最适反应pH为6.0,最适反应温度为25℃;杏多酚氧化酶的最适反应波长为400 nm,最适反应时间为6 min,当酶加入量为0.4 mL时,酶活性最大;60～80℃处理10 min,酶基本失活.[结论]丙酮粉与pH为6.0的磷酸缓冲液反应6 min,离心后制得粗酶液;一定量的磷酸缓冲液和邻苯二酚在25℃下保温10 min,添加0.4 mL酶液,在400 nm波长下,测定的PPO活性较为准确.     

菊芋块茎多酚氧化酶特性

采用分光光度法,研究了菊芋组织中多酚氧化酶(PPO)的活性,以及PPO的最适pH、最适温度、热稳定等特性和不同化学物质对PPO的抑制效果.结果表明,其最适pH为7.4,pH 3.5环境可有效抑制酶活性;最适温度为45 ℃,在70 ℃以下,其热稳定性较强,大于80 ℃时,热稳定性急剧下降,生产上可采用80 ℃热处理2 min使酶失活;0.04 mol·L-1的柠檬酸和亚硫酸氢钠对PPO活性都有较强的抑制作用.     

不同因子对梨多酚氧化酶活性的影响

对控制梨多酚氧化酶(PPO)活性的方法进行了研究,以氯化钠、柠檬酸、抗坏血酸为PPO活性抑制因子,通过三因子二次回归组合设计建立回归方程,从而准确地反映因子和PPO活性之间的关系,预示抑制因子用量的多少对PPO活性的影响程度和趋势,得出三个因子在抑制酶活性作用中的最佳配比,并分析了各因子间的交互效应.     

草菇多酚氧化酶及过氧化物酶活性的抑制研究

研究了柠檬酸、苹果酸、酒石酸、Ｖｃ、ＥＤＴＡ－２Ｎａ、ＳＯ２、ＨＣｌ对多酚氧化酶（ＰＰＯ）及过氧化物酶（ＰＯＤ）最适抑制沈度、最适抑制ｐＨ,并对这几种抑制剂的作用机理进行了探讨,结果表明：草菇采收后,尽快用０．１ｇ／ｋｇＥＤＴＡ－２Ｎａ＋３．０ｇ／ｋｇ Ｖｃ＋５．０ｇ／ｋｇ柠檬酸处理草菇８～１０ｍｉｎ,于１１～１２℃贮藏效果较好。     

石榴果皮多酚氧化酶褐变性质的研究

研究了石榴在贮藏期间褐变多酚氧化酶(PPO)的变化趋势,对石榴果皮PPO的酶学特性研究表明:石榴果皮PPO的最适酶活温度为30℃,最适pH值为6.0,单宁与石榴果皮PPO的亲和力较强,Vc对石榴果皮PPO活力的抑制作用最强,石榴果皮褐变与PPO活性、总酚(TP)含量、单宁含量之间有显著的相关性,初步确定PPO是作用酶系.     

小麦多酚氧化酶特性及褐变控制研究

[目的]研究小麦多酚氧化酶(PPO)的特性及其褐变的控制方法,为提高小麦品质提供试验和理论依据。[方法]对洛阳地区5个品种小麦籽粒PPO的催化特性、热稳定性和pH值稳定性等性质进行了研究,同时考察了抑制剂对PPO的褐变抑制作用。[结果]小麦PPO活性的最适温度为40℃,最适pH值为6.0;柠檬酸、抗坏血酸、半胱氨酸等抑制剂均可有效抑制PPO的活性,且随着抑制剂浓度的增大PPO活性降低越明显。[结论]可通过调节合适的温度、pH值和添加一定浓度的抑制剂有效地防止PPO褐变的发生。     

苦瓜多酚氧化酶特性研究

采用分光光度法以邻苯二酚为底物研究了苦瓜多酚氧化酶的酶学特性及一些抗褐变剂对酶活性的影响。结果表明:苦瓜多酚氧化酶作用的最适温度为20℃和80℃,最适pH值为5,米氏常数Km=0.0519 mol/L,Vmax=74.0741U。Vc、L-半胱氨酸和亚硫酸氢钠对苦瓜多酚氧化酶有明显的抑制作用,硫代硫酸钠、柠檬酸有一定的抑制作用,而氯化钠的抑制作用比较弱。     

澳洲青苹多酚氧化酶特性的研究

以邻苯二酚为底物,对澳洲青苹中的多酚氧化酶进行了探讨。分别研究了pH值、温度、底物浓度及抑制剂等因素对多酚氧化酶活性的影响,结果表明:澳洲青苹多酚氧化酶最适pH值为6.5;最适温度为35℃;90℃处理3min,多酚氧化酶活性基本被抑制;添加浓度为125mg/kg抗坏血酸或者浓度为600mg/kg的柠檬酸或者浓度为50mg/kg的亚硫酸氢钠后,多酚氧化酶活性分别为对照的36%,38%和23%。澳洲青萍多酚氧化酶的米氏方程参数为:Km=0.137mol/L,Vmax=0.460U/min。     

台湾青枣多酚氧化酶特性的研究

采用分光光度法,对台湾青枣多酚氧化酶(PPO)的催化特性、最适波长、最适反应时间、最适温度、最适pH值、热稳定性等性质进行了研究,同时研究了抗坏血酸、柠檬酸、L-半胱氨酸3种添加剂对台湾青枣多酚氧化酶活性的影响,以寻求在果品的保鲜以及果肉初加工过程中抑制PPO活性的各控制手段与果品加工的有机结合方法,为防止褐变提供有效、合理的措施。实验结果表明:以邻苯二酚为反应底物时,台湾青枣多酚氧化酶催化氧化产物的最适波长为420 nm,最佳反应时间为20 min,最适反应温度为30℃,最适pH值为6.8。90℃水浴处理5 min该酶已基本失活。3种抑制剂对该酶均表现出不同的抑制效果。单一抑制剂对台湾青枣多酚氧化酶酶促褐变抑制效果的强弱次序为:L-半胱氨酸>抗坏血酸>柠檬酸。其中L-半胱氨酸的有效抑制浓度为0.100 0%。     

阿魏菇中多酚氧化酶特性及其抗褐变剂的研究

针对阿魏菇储运保鲜中的褐变问题，以分光光度法研究了阿魏菇组织中多酚氧化酶(PPO)的特性，还研究了柠檬酸、抗坏血酸、亚硫酸钠等抗褐变剂对PPO活力的影响，研究结果表明：阿魏菇中多酚氧化酶测定的最大吸收波长为418nm，最适温度为55℃，最适pH值为6．6，在此条件下亚硫酸钠可强烈地抑制PPO的活性，有效防止褐变，抗坏血酸也有较强的抗褐变效果，而柠檬酸只有在高浓度时才有一定的抑制作用。