小熊猫源铜绿假单胞菌耐药性和耐药基因的研究

为了鉴定小熊猫(Ailurus fulgens)肺源致病菌并研究其耐药性和耐药基因,从死亡小熊猫肺部组织中无菌分离培养致病菌,进行革兰氏染色及16S rDNA测序鉴定。采用纸片扩散法(K-B法)进行细菌药敏试验和小鼠致病性试验,应用PCR法检测分离株的28种β-内酰胺酶相关基因、6种氨基糖苷类修饰酶基因(AMEs)、外膜蛋白D2基因(oprD2)、磺胺耐药基因(qacE△1-sul1)、3种整合子基因(intⅠ1、2、3)和主动外排泵调节基因(mexR)等共40种耐药基因。肺组织样品中分离培养的1株菌鉴定为铜绿假单胞菌,革兰氏染色阴性,药敏试验对氯霉素敏感,对β-内酰胺类、头孢类、氨基糖甙类、大环内酯类、硝基咪唑类、喹诺酮类和利福霉素等均具有耐药性,小鼠表现与小熊猫相似的症状而死亡。5种耐药基因TEM、aac(3)-Ⅱ、ant(3″)-Ⅰ、qacE△1-sul1、intⅠ1为阳性,其他35种为阴性。该小熊猫肺源铜绿假单胞菌具有较强的致病性和多药耐药性,其耐药机制与5种耐药基因有关。     

铜绿假单胞菌oprH基因DNA疫苗的构建与检测

研究旨在构建铜绿假单胞菌oprH基因的DNA疫苗。试验根据GenBank中已发表的铜绿假单胞菌的oprH基因序列,设计合成了一对特异性引物,利用PCR技术由铜绿假单胞菌基因组DNA中扩增获得该目的基因,进行胶回收纯化并与T载体进行连接,经双酶切和PCR鉴定后将重组质粒进行酶切回收目的基因片段,并将其亚克隆于真核表达载体pCAGGS-HA中,以双酶切和PCR方法进行鉴定。结果显示：PCR成功扩增出约600 bp的oprH基因,连接T载体后的重组质粒经双酶切和PCR鉴定,均可获得大小正确的目的基因片段。真核重组载体鉴定结果显示,oprH基因成功克隆于真核表达载体pCAGGS-HA中。研究表明,试验成功构建了oprH基因的DNA疫苗,为进一步研究其免疫效果及铜绿假单胞菌新型疫苗的研制提供参考。     

狮铜绿假单胞菌的分离与鉴定

从狮子患处分离出 1株G- 杆菌 ,根据形态观察、培养特性 ,API 2 0E测试结果 ,鉴定为铜绿假单胞菌。动物实验证明 ,分离株对小鼠有较强的致病性 ,并从死亡鼠内脏中分离到相应细菌     

铜绿假单胞菌flgE基因PCR检测方法的初步建立

为建立一种基于铜绿假单胞菌flgE基因的PCR检测方法,本试验根据GenBank中已发表的铜绿假单胞菌flgE基因序列,设计合成了1对特异性引物,由铜绿假单胞菌基因组DNA中扩增获得了目的基因。从退火温度、循环次数、Mg2+浓度、dNTPs浓度和引物浓度5个方面优化了反应条件,并检测了该方法的特异性和敏感性。结果成功扩增出了铜绿假单胞菌1 400 bp的flgE特异性基因片段,最佳退火温度、循环次数、Mg2+浓度、dNTPs浓度和引物浓度分别为56℃、30个循环、1.6 mmol/L、0.2 mmol/L和0.3μmol/L。特异性试验表明,仅铜绿假单胞菌中可扩增出目的片段,而多杀性巴氏杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、志贺氏菌、致病性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌中均未扩增出相应片段。敏感性试验结果表明,本方法可检测到最低10 pg/μL的铜绿假单胞菌基因组DNA以及100 CFU/mL的病原菌。     

乌骨鸡铜绿假单胞菌病的诊治

以一例乌骨鸡铜绿假单胞菌病病例为例,从发病情况、临床症状、剖检变化、实验室诊断、治疗等方面对铜绿假单胞菌病做了详尽阐述,并对该病进行了讨论.     

宠物源铜绿假单胞菌耐药性调查

调查广东地区宠物源铜绿假单胞菌的耐药情况,为宠物临床抗菌药物的合理选择和使用提供科学依据.对临床采集的宠物源样品进行铜绿假单胞菌分离培养,通过PCR方法鉴定菌种,采用纸片扩散法和琼脂稀释法进行药物敏感性分析.结果显示,49株铜绿假单胞菌对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、萘啶酸、氯霉素和氟苯尼考的耐药率极高均高于85%,对阿米卡星、庆大霉素、头孢他啶、恩诺沙星、哌拉西林和头孢哌酮/舒巴坦敏感性较好,耐药率均低于20%,全部菌株对亚胺培南敏感.结论:犬猫铜绿假单胞菌的耐药性问题比较严重,应加强宠物源细菌的耐药性调查.     

铜绿假单胞菌生物膜研究进展

条件致病菌铜绿假单胞菌（PA）是一种能形成生物膜的革兰氏阴性菌,作者综述了PA生物膜形成的生物学机制,包括菌体黏附、胞外多糖Psl和Pel、藻朊酸盐等参与细菌生物膜成熟的过程及群体感应系统调节相关因子表达,从而调控细菌形成生物膜应对不良环境。此外还概括了将生物膜作为靶点开发的药物等生物膜相关的研究进展。生物膜是菌体逃避有害刺激的护盾,研究其结构、形成及致病机理,了解PA产生耐药性的分子机制,对于通过调节生物膜形成或调控生物膜相关因子的表达进而优化PA的抗感染治疗有十分重要的意义。     

狍子铜绿假单胞菌感染病理学诊断

文章以北京动物园1例死亡狍子为研究对象,采用血液生理生化试验、病原菌分离培养及分子生物学鉴定、临床病理变化及系统病理学观察等技术进行诊断.结果表明,狍子发病后,血常规检测白细胞计数、淋巴细胞比率降低,中性粒细胞比率升高,提示该狍子发生细菌感染.动物死后,剖检可见口腔溃烂、主要脏器发生坏死性病变.无菌取肺脏组织经细菌分离...     

肉鸽铜绿假单胞菌分离与鉴定

从南京某肉鸽养殖场死亡病鸽肝脏中分离到1株细菌,经分离培养、形态染色镜检、生化试验、药敏试验、实验动物致病性试验和16S rDNA基因片段PCR检测及基因测序试验,结果表明,该菌可以在普通营养琼脂和SS琼脂平板上生长,革兰染色镜检为革兰阴性菌,生化试验检测结果鉴定值为1 655,符合铜绿假单胞菌生化特性;药敏试验表明,该菌对磷霉素、环丙沙星和阿米卡星高度敏感,接种小鼠能导致其死亡并分离出同一细菌,16S rDNA基因片段测序后与GenBank中登录的铜绿假单胞菌同源性为99%。综合以上结果鉴定该分离菌为铜绿假单胞菌。     

铜绿假单胞菌对消毒剂的敏感性试验

目前对于铜绿假单胞菌的消毒剂敏感性试验报道较少,因此,本研究从养殖场中一株绿脓杆菌的分离、纯化及消毒剂的筛选等方面进行试验.结果显示:安立消、三氯异氰尿酸对其消毒效果最理想,并将实验室结果应用于生产工作中,进一步印证消毒剂对绿脓杆菌的杀灭效果.     

肉鸡感染铜绿假单胞菌的微生物学诊断

某养鸡场所养鸡群在一段时间内饮食减少 ,增重缓慢 ,一部分卧地不起 ,甚至出现零星死亡。为此 ,送两只病情比较严重的病鸡到县畜牧中心化验室进行检查 ,现将检查的情况报告如下。1　病理变化1 1　外现变化送检鸡为 1 7日龄的白色肉鸡 ,颈部羽毛零乱竖立 ,无任何外伤 ,能正常走动 ,饮食正常 ,鼻、眼、喙及喙内、肛门及周围正常 ,无异样分泌物 ;分开羽毛可见整个腹部以及翅下和颈部皮肤呈绿色 ,触摸皮肤有滑动感 ,皮下有黏液样物质。放血处死 ,进行剖检。1 2　剖检变化切开腹部皮肤 ,可见绿色如胶胨样物质粘附在肌肉上 ,用镊子轻轻一刮 ,便…     

奶牛铜绿假单胞菌的分离与鉴定

从奶牛颈部脓肿中分离出一株革兰氏阴性杆菌,经生物学特性研究和生理生化试验鉴定为铜绿假单胞菌.该菌对小鼠有很强的致病性,药物敏感性试验对氟哌酸、氧氟沙星、先锋必等抗生素高度敏感;对庆大霉素、氨苄青霉素、链霉素等抗生素有耐药性.     

蟒蛇铜绿假单胞菌感染的诊断

蟒蛇 (Ｐｙｈｏｎｍｏｌｕｒｕｓ)属于蟒蛇科 ,为国家一级保护野生动物。 2 0 0 0年 12月 ,广东某野生动物保护站截获非法贩运的5条蟒蛇先后发生铜绿假单胞菌 (Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａ )感染 ,死亡 2条。报道如下。1　发病情况蟒蛇重 10～ 2 0ｋｇ ,头部、腹部、尾部均有大小不等的陈旧创口。创面恶臭 ,有灰黑色腐败物质粘附 ,清除后可见黄白色粘稠的液体渗出。蛇身腹部较大 ,按压有波动感 ,其中 2条蟒蛇腹部部分鳞片脱落。经简单创面消毒敷药后 ,观察到蟒蛇拒食 ,呕吐 ,呕吐物暗红色 ,粥状 ,腥臭 ;鼻腔有血色粘稠液体…     

铜绿假单胞菌致病作用及防治

绿脓杆菌是一种条件性致病菌,具有多种致病因子,是导致人和动物发病的重要原因之一.现就其致病因素和防治研究进展作一简要介绍.     

进口奶牛感染铜绿假单胞菌的微生物学诊断

从病死奶牛脏器中分离出1株革兰氏阴性短杆菌,通过染色镜检、培养特性分析及生化鉴定,证明为铜绿假单胞菌。动物试验证明,分离株对小鼠有较强的致病性,并从死亡鼠体内分离到相应细菌。药敏试验结果显示,铜绿假单胞菌对多种抗菌药物有耐药性。     

水貂铜绿假单胞菌鞭毛分型及分离株flic基因的克隆与序列分析

为分析铜绿假单胞菌(PA)分离株鞭毛蛋白基因(flic)之间的差异,本研究通过PCR方法扩增由山东地区发病水貂的肺脏组织中分离的29株分离株flic基因的部分片段,根据其片段长度确定PA的鞭毛类型。选取两种类型代表株(PASD01、PASD03),采用PCR方法扩增flic全基因进行序列分析。结果表明,PASD01分离株与国外A型PA flic基因序列同源性为99.6%～99.7%,PASD03分离株与B型PA flic基因的序列同源性为98.9%～99.5%,而两个分离株之间的序列同源性为76%。本研究首次从水貂病变组织中克隆得到两种鞭毛蛋白类型的flic基因,该基因在各型鞭毛菌株中高度保守,为进一步研制鞭毛亚单位疫苗提供实验依据。     

鸡源铜绿假单胞菌的生物学特性测定

2002年3月，贵阳市某农场孵化出壳28700只雏鸡，在接种马立克疫苗后出现大批发病死亡，1～3日龄雏鸡死亡率高达40％，4日龄以后死亡渐次停止。本实验室对送检的8只病死鸡进行了剖检，主要病变如下：颈部肌肉充血水肿，皮下出现胶冻样浸润；肝脏表面可见出血点或出血斑；十二指肠黏膜弥漫性出血，盲肠扁桃体肿大出血，泄殖腔可见血样或白色稀薄粪便。从病死雏鸡的肝脏和颈部皮下分离出8株细菌纯培养物，全部分离细菌在鲜血琼脂平     

鸡的铜绿假单胞菌病的研究

１９９８年６－１１月天津武清,蓟县,河北玉田等地出现一种以眼睑肿胀,流泪,瞎眼及喙端,眼,践爪结痂为特征的鸡传染病。病鸡主要为３０－６０日龄。经鼻感染３０日龄鸡复制出了与自然病例相同的临床表现,并分离到接种菌。对分离菌的系统鉴定表明所分离的４株菌均为铜绿假单胞菌。     

朱鹮铜绿假单胞菌的分离与初步鉴定

从发病死亡朱鹮肝、脾中分离出一株革兰阴性杆菌,经生物学特性试验和生理生化试验鉴定为铜绿假单胞菌.该菌对小鼠有很强的致病性,药物敏感性试验对氯霉素、氧氟沙星、环丙沙星、氧哌嗪青霉素、氟哌酸等抗菌药物高度敏感;对先锋噻肟、氨苄青霉素、复方新诺明等抗菌药物有耐药性.     

铜绿假单胞菌的分离及其生物学特性研究

对内蒙古呼和浩特地区３个养鸡场的鸡群进行铜绿假单胞菌的分离鉴定及其生物学特性的研究。实验结果表明,铜绿假单胞菌是引起入孵种蛋发生的原因之一,也可引起雏鸡的败血症,发病率和死亡率均高。