辣椒抗疮痂病基因Bs2和Bs3双重PCR体系的建立及应用

以栽培辣椒和野生型辣椒为试验材料,采用双重PCR体系构建的方法,建立了辣椒抗疮痂病基因Bs2和Bs3的双重PCR反应体系,以期利用该反应体系提高辣椒抗疮痂病种质资源鉴定和育种分离世代材料分子标记辅助筛选的效率。结果表明:抗疮痂病基因Bs2和Bs3的双重PCR反应体系,以Bs2-For/Bs2-Rev和Bs3-For/Bs3-Rev为特异引物,在退火温度为52℃时,具有很好的多态性和稳定性。此外,用该体系对不同辣椒种材料进行抗病性鉴定,与接种鉴定的结果一致,进一步验证了该体系的可靠性。该双重PCR反应体系可用于辣椒抗疮痂病品种选育。     

辣椒种质的抗性基因分子标记检测

利用已发表的与辣椒抗细菌性疮痂病Bs2、Bs3基因,抗根结线虫Me1、Me3/Me4基因,抗病毒病L4、Pvr4、Tsw基因,抗白粉病PMR1基因,抗疫病Phyto5.2位点连锁的分子标记,对209份辣椒种质进行分子标记检测。结果表明,209份辣椒种质中携带Bs2基因的种质1份、携带Bs3基因的种质4份;携带Me1基因连锁标记16880-1-V2片段的纯合位点种质48份、杂合位点种质12份,携带Me3/Me4基因连锁标记片段SCAR_B94的种质1份;携带抗TMV L~4/L~4基因型的纯合抗病材料11份,L~4/L~0基因型的杂合抗病材料1份;携带抗PVY Pvr4基因连锁标记CSO片段的纯合位点种质30份,杂合位点种质8份;携带抗TSWV Tsw位点连锁标记SCAC_(568)片段的种质4份;携带PMR1基因连锁标记ZL1_1826片段的种质3份;携带Phyto5.2位点连锁标记OpD04.717片段的种质38份,初步明确了209份供试辣椒种质的抗性基因型,为辣椒抗病育种提供材料选择依据。     

辣椒疮痂病抗性研究进展

辣椒疮痂病是辣椒生产中最为严重的细菌性病害之一,对辣椒的产量和品质影响较大。从病原菌的特征、分类、生理小种鉴定、抗疮痂病基因及其分子标记等几个方面总结了目前国内外的研究现状。     

几个抗疫病性不同的辣椒材料抗病基因同源序列的分离与比较

 根据已克隆抗病基因的保守序列设计简并引物, 对9 个不同抗、感疫病的辣椒种质材料基因组DNA 进行抗病基因同源性序列的特异PCR 扩增, 经序列测定和同源性分析发现14 个抗病基因同源性序列(RGAs) 与辣椒抗疫病作用相关, 其中B 引物扩增的8 个RGAs 与烟草抗花叶病基因N 、拟南芥抗丁香假单菌基因RPS2 和亚麻抗锈病基因L6 的同源性较高, 属于广谱(细菌、病毒、真菌) 抗病基因同源序列; C 引物扩增的6 个RGAs 与番茄抗叶霉病基因Cf2 和Cf9 有较高的同源性, 与抗疫病作用密切相关。研究还发现, 高感疫病的辣椒基因组中也存在抗疫病相关RGAs , 这与已报道的辣椒抗疫病微效QTLs 位点则来于感病亲本基因组的研究结论一致。     

鄂西高山地区辣椒细菌性疮痂病生理小种鉴定

采用辣椒疮痂病菌鉴别寄主谱,于2011-2013年对鄂西高山辣椒种植区疮痂病菌生理小种进行分析鉴定。采集到的32份辣椒疮痂病菌菌株为生理小种P0和P2,其中生理小种P0为优势小种。在以后的育种工作中可以根据生理小种的鉴定结果合理选用抗源基因,培育抗疮痂病辣椒新品种。     

辣椒抗黄瓜花叶病毒育种研究进展

黄瓜花叶病毒(CMV)是一种严重危害辣椒生产的病毒,抗黄瓜花叶病毒育种是辣椒育种的主攻目标之一。经过多年攻关,我国筛选鉴定出一批抗病种质资源,但仍存在抗源材料遗传背景狭窄、抗性不高、转育难等问题。随着现代分子技术的快速发展,利用分子标记、基因组学、生物信息学、基因工程等手段,可以加深对抗性遗传规律的认识,结合分子标记辅助选择的方法,提高育种效率。从辣椒上黄瓜花叶病毒的株系划分、种质资源的筛选鉴定、抗病遗传规律和基因定位研究、抗病品种选育、病害防治方面介绍了辣椒抗黄瓜花叶病毒的研究进展,以期为深入研究辣椒抗CMV和抗病育种提供参考。     

甜椒抗番茄斑点萎蔫病毒的种质创新

番茄斑点萎蔫病毒病是我国辣椒生产的一种新兴和潜在重大威胁病害。利用引进的中国辣椒(Capsicum chinense Jack.)抗源材料PI152225,通过种间杂交和分子标记辅助回交选育,历时10年,将抗性基因Tsw转育到中椒系列骨干亲本一年生辣椒(Capsicum annuum L.)大果甜椒自交系0516中,创新材料0516(Tsw)的生长势和果实长度超过对照0516,商品性和配合力与骨干亲本0516差异不显著。     

辣椒疫病及白粉病抗性基因的分子标记检测

为筛选携带抗病基因的辣椒种质资源,加快辣椒抗病育种进程,本文利用与辣椒疫病和白粉病相关的分子标记对121份辣椒种质资源进行检测,并对筛选材料的疫病及白粉病田间发病情况进行调查。结果发现,115份辣椒材料中含有Y1抗疫病基因,其中3份辣椒材料在田间感染疫病;43份含有Y2抗疫病基因,田间均未感染疫病;7份含有B3抗白粉病基因,田间均未感染白粉病;6份同时含有Y1、Y2抗疫病基因和B3抗白粉病基因,且田间未感染疫病和白粉病。结果表明,分子标记检测结果准确性较高,筛选的6份同时含有抗疫病和抗白粉病基因的辣椒材料,可为后续选育具有综合抗疫病和抗白粉病的辣椒新品种提供种质资源。     

选育抗病优质高产番茄品种的途径及方法

(一) 一个优良的番茄品种,首先要高产,而高产的基础是抗病,尤其是抗病毒病。根据有关文献记载,抗TMV基因来自野生番茄秘鲁,醋栗和多毛。这些野生番茄与栽培番茄多次回交,育成各种抗TMV番茄品种。秘鲁番茄对TMV具有生理抗性,醋栗番茄可延缓病毒病感染,多毛番茄因茎叶有浓密的茸毛,可避免病毒传播者蚜虫的接触。因此,都可作为杭TMV的育种材料,或作为引入抗病基因材料进行转育。     

与黄瓜霜霉病抗性相关基因连锁的分子标记研究

以黄瓜抗霜霉病和感霜霉病亲本组合(Q9×Q10)的F2分离群体为试材,采用BSA法筛选到了1个AFLP引物组合P11M70在抗病池和感病池间表现多态,抗病池和抗病亲本均具有大小约304 bp的特异谱带,感病池和感病亲本均扩增出了大小约为301 bp的特异片段。经F2单株验证及连锁分析,该特异片段与霜霉病抗病相关基因相连锁,连锁距离为5.22 cM。对特异片段的测序结果显示,两片段的大小分别为304 bp和301 bp,且2个片段的差异仅为3个"A"碱基的插入或缺失以及1个"C-T"的碱基突变。将该AFLP标记成功地转换为了简单实用的SCAR标记。     

国外引进辣椒种质的农艺性状及抗性评价

通过田间性状调查和人工接种鉴定,对从国外引进的53份辣椒种质进行了农艺性状和抗病性评价。结果表明,53份辣椒种质在调查的21个农艺性状中均具有丰富的遗传变异类型;通过表型性状的聚类分析能够将上述材料划分为两类,分别为栽培辣椒种和茸毛辣椒种;对53份辣椒材料抗疮痂病小种P0、抗疫病、抗黄瓜花叶病毒病(CMV)性状进行鉴定,共筛选出抗疫病材料1份、中抗疫病材料4份,中抗CMV辣椒材料6份。     

黄瓜/酸黄瓜渐渗系‘IL77’抗蔓枯病主效QTL定位及候选基因鉴定

以黄瓜/酸黄瓜渐渗系‘IL77’为抗病亲本,栽培种‘8419’为感病亲本,通过亲本及F2:6群体筛选,构建了包含137对SSR标记和6对InDel标记的遗传图谱,结合2017年春、秋两季F2:6群体表型统计结果对抗蔓枯病主效QTL进行定位;同时构建极端混池并进行QTL-seq,最终将抗病基因定位到1号染色体24.6～27.1 Mb范围内;通过与参考基因组9930比对发现该区段存在13个基因在外显子区域发生非同义突变,其中Csa1G654870参与RNAi抗性反应,可能与抗蔓枯病过程相关。通过qRT-PCR验证发现,接种前后Csa1G654870在抗病亲本‘IL77’中表达量明显高于感病亲本‘8419’,由此进一步推断Csa1G654870是抗蔓枯病基因。     

辣椒白粉病抗性QTL 定位分析

以辣椒（Capsicum annuum）白粉病抗、感病亲本H3 和83-60 构建的包含142 个重组自交系的RIL（H3×83-60） F8 群体为试验材料,基于亲本重测序数据设计KASPar 引物,构建了包含16 个连锁群的辣椒遗传连锁图谱,总图距1 356.5 cM,标记间平均图距为4.69 cM。基于2016 年和2017 年重组自交系群体白粉病发病表型数据,获得了PMR6.1、PMR9.1、 PMR11.1、PMR11.2 和PMR5.1 等5 个白粉病抗性QTL 位点,其中PMR6.1、PMR9.1 在两年中均被检测到,表型贡献率在 10.8%～21.4% 之间。通过辣椒白粉病抗性QTL 定位,开发与白粉病抗性基因连锁的SNP 分子标记,对于辣椒抗病辅助育 种有重要参考价值。     

辣椒主要病害抗性的配合力分析

本文用6个亲本,按(1/2)n(n-1)双列杂交法配制15个杂交组合,对辣椒TMV、CMV、疫病、疮痂病抗性进行了配合力分析。结果表明,不同亲本、不同病害抗性的一般配合力效应和不同杂交组合的特殊配合力效应差异较大,疫病抗性显性方差所占份量较大,加性方差所占的份量较小;CMV和疮痂病抗性是加性方差所占份量较大,显性方差所占份量相对较小;TMV抗性介于二者之间。不同病害抗性间所有一般配合力的相关系数均未达到显著水平;特殊配合力是CMV与疮痂病阃的相关达到了极显著水平,TMV与CMV间和疫病与疮痂病间的相关系数达到显著水平。     

我国辣椒抗病育种研究进展

概述了我国辣椒抗病种质资源、抗病毒病、抗真菌病、抗细菌病、抗根结线虫病的研究进展,并对今后的辣椒抗病育种工作提出了建议。     

南方根结线虫辣椒Me3毒性群体适合度代价及专化性分析

 将南方根结线虫自然群体在含有Me3抗线虫基因的辣椒HDA149上连续选择15代,获得了一对针对辣椒（Capsicum annuum L.）抗线虫基因Me3的南方根结线虫毒性和无毒近等基因系。通过将Me3毒性线虫接种在抗病辣椒HDA149、感病辣椒茄门以研究适合度代价,结果显示,南方根结线虫Me3毒性群体在感病辣椒上存在适合度代价,适应值仅为76%。将Me3毒性线虫接种在含有其它抗线虫基因（Mi、Me）的番茄和辣椒上研究南方根结线虫Me3毒性的专化性,结果表明Me3毒性线虫不能在含有Mi抗线虫基因的番茄上产生根结和卵块,但是可以在含有其它Me基因的辣椒上产生卵块。说明南方根结线虫Me3毒性对抗性基因Me 存在专化性。     

辣椒主要病害抗性的配合力分析

本文用6个亲本,按(1/2)n(n-1)双列杂交法配制15个杂交组合,对辣椒TMV、CMV、疫病、疮痂病抗性进行了配合力分析.结果表明,不同亲本、不同病害抗性的一般配合力效应和不同杂交组合的特殊配合力效应差异较大,疫病抗性显性方差所占份量较大,加性方差所占的份量较小;CMV和疮痂病抗性是加性方差所占份量较大,显性方差所占份量相对较小TMV抗性介于二者之间.不同病害抗性间所有一般配合力的相关系数均未达到显著水平;特殊配合力是CMV与疮痂病间的相关达到了极显著水平,TMV与CMV间和疫病与疮痂病间的相关系数达到显著水平.     

辣椒主要病害抗性的配合力分析

本文用6个亲本，按(1／2)n(n-1)双列杂交法配制15个杂交组合，对辣椒TMV、CMV、疫病、疮痂病抗性进行了配合力分析。结果表明，不同亲本、不同病害抗性的一般配合力效应和不同杂交组合的特殊配合力效应差异较大，疫病抗性显性方差所占份量较大，加性方差所占的份量较小；CMV和疮痂病抗性是加性方差所占份量较大，显性方差所占份量相对较小；TMV抗性介于二者之间。同病害抗性间所有一般配合力的相关系数均未达到显著水平；特殊配合力是CMV与疮痂病间的相关达到了极显著水平，TMV与CMV间和疫病与疮痂病间的相关系数达到显著水平。     

黄瓜褐斑病抗源鉴定与抗性遗传分析

通过苗期人工接种抗病性鉴定方法,对34份黄瓜种质资源进行了褐斑病抗性鉴定,从中筛选出5份高度抗褐斑病资源、2份抗病资源、3份中抗资源,其余均为感病和高度感病资源。鉴定结果说明现有黄瓜种质资源中蕴涵着潜在的改良黄瓜褐斑病抗性基因。通过对高抗/高感亲本杂交F1、F2代及回交世代的抗病性分离观察表明,符合孟德尔的1∶2∶1和1∶1的分离规律,认为抗病性由1对单隐性基因控制,感病相对于抗病为不完全显性。研究结果对黄瓜抗褐斑病育种具有重要的应用价值。     

抗枯萎病西瓜新品种“京抗1号”

抗枯萎病西瓜新品种“京抗１号北京市农林科学院蔬菜研究中心周凤珍京抗１号为高抗枯萎病西瓜品种,该品种是用国外抗病材料做为抗病供体,与国内优良品种采用杂交、回交等手段进行抗病基因转育,并逐代进行人工接种,抗病鉴定筛选及多代经济性状选择后,选育出的优良、抗...