濒危植物香果树愈伤组织经长期继代后的6种同工酶研究

[目的]研究濒危植物香果树愈伤组织经长期继代后的6种同工酶酶谱的变化.[方法]采用非变性聚丙烯凝胶电泳技术对长期继代后的香果树愈伤组织的酯酶(EST)、酸性磷酸酯酶(ACP)、ATP酶(ATPase)、淀粉酶(AMY)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)6种同工酶进行分析.[结果]香果树的胚性愈伤组织和非胚性愈伤组织在6种同工酶水平上均有差异,均可作为鉴别2者的依据.非胚性愈伤组织中的EST、ACP和POD的表达量明显高于胚性愈伤组织.褐化的非胚性愈伤组织与正常非胚性愈伤组织相比,在AMY、SOD和POD同工酶水平上无差别,而EST、ACP和ATP同工酶含量减少;褐化的胚性愈伤组织与正常胚性愈伤组织相比,EST同工酶含量升高,其他5种同工酶含量降低.[结论]为研究香果树的长期组织培养过程中愈伤组织形态差异及褐化现象提供理论基础. Abstract： [Objective] The aim was to study the changes of zymography in 6 kinds of isozymes after long-term subculture of Emmenopterys henryi Oliv..[Method]Non-denaturing polyacrylamide gel electrophoresis was used to analyze isozyme patterns such as esterase (EST),acid phosphatase (ACP),ATP enzyme (ATPase),amylase (AMY),superoxide dismutase (SOD) and peroxidase (POD) in long-term subculture callus of Emmenopterys henryi Oliv. [Result] The research showed that there were differences among the 6 kinds of isozymes in embryogenic callus and non-embryogenic callus of Emmenopterys henryi Oliv.,and both levels could be taken as the basis for identification,the EST,ACP,and POD of non-embryogenic callus were significantly higher than embryogenic callus.The browning of non-embryogenic callus was non-level in the AMY,SOD and POD isozymes when was compared with normal non-embryogenic callus,while the EST,ACP and ATPase isozymes decreased;When the browning of embryogenic callus was contrasted with normal embryegenic callus,EST isozyme increased and the other 5 kinds of enzymes decreased. [Conclusion] The study provided theoretical basis for research morphological difference and browning of long-term tissue culture of Emmenopterys henryi Oliv..     

龙眼胚性愈伤组织长期继代培养及其染色体数目变异

从龙眼幼胚培养诱导并筛选出的松散型胚性愈伤组织，在继代培养基上已培养6a以上，所保持的若干愈伤组织仍具有强烈的体细胸胚胎发生能力，经细胞学检查，其中个别愈伤组织系的部分愈伤才发现有2n=3x=45或2n=4x=60，等染色体数目的变异细胞，这对于离体筛选龙眼细胞突变体很有价值。     

长期继代培养过程中楸树愈伤组织的分化能力

以长期继代培养的楸树愈伤组织和新诱导的楸树愈伤组织为试验材料,利用石蜡切片比较分析它们的组织形态特征,并测定过氧化物酶（POD）、超氧化物歧化酶（SOD）和淀粉酶的活性,以及可溶性蛋白与可溶性糖的含量,以探究楸树愈伤组织长期继代培养后分化再生困难的形成原因。组织形态学观察分析发现,继代培养7 a的白色颗粒状愈伤组织细胞中淀粉粒含量丰富,分布均匀,仍为胚性愈伤组织;新诱导的浅绿色愈伤组织存在明显的细胞分化中心,有均匀分布的淀粉粒,为早期胚性愈伤组织;新诱导的黄白色致密愈伤组织为非胚性向胚性转化的愈伤组织,新诱导黄白色疏松愈伤组织为非胚性愈伤组织。生理生化指标测定分析发现,继代培养7 a的楸树胚性愈伤组织中可溶性糖和可溶性蛋白的含量均显著高于新诱导出的3种愈伤组织,但其同工酶活性却较低,表明在长期继代培养的过程中,楸树愈伤组织的生理生化代谢活性降低。由此推测生理生化代谢活性的下降可能是造成楸树胚性愈伤组织长期继代培养后分化再生困难的重要因素。     

南方红豆杉愈伤组织诱导和继代培养体系的建立

以南方红豆杉为材料,建立了其愈伤组织诱导与保持的技术体系,主要为:(1)南方红豆杉侧芽是诱导愈伤组织的最佳外植体;(2)南方红豆杉愈伤组织诱导的最佳培养基为:B5+2.0 mg.L-12,4-D+1.0 mg.L-1NAA+0.2 mg.L-1IAA;(3)南方红豆杉愈伤组织增殖的培养基为:B5+4.0 mg.L-1NAA+0.5 mg.L-12,4-D+0.2 mg.L-1GA+500 mg.L-1AC+2000 mg.L-1LH.并在培养基中同时添加AC、LH和GA33种抗褐物质,取得较好的抗褐化效果.     

孜然芹子叶愈伤组织诱导及继代培养研究

探讨孜然芹种子表面消毒的适宜方法,以孜然芹无菌苗子叶为外植体,研究最适宜愈伤组织诱导及继代培养的激素种类及浓度.结果表明:孜然芹种子经70;酒精10 s+0.1;升汞50 s,20 d萌发率可达97.70;,污染率11.11;;子叶切段在光照时间16 h/d,MS+2,4-D 2 mg/L的愈伤组织诱导启动培养基中,30 d愈伤诱导率达100;, 继代培养在MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.2 mg/L培养基中光照16 h/d培养20 d,愈伤组织增殖率达67;,愈伤组织在同种继代培养基中暗培养20 d,增殖率达80;.     

龙眼胚性愈伤组织长期继代培养及其染色体数目变异

从龙眼幼胚培养诱导并筛选出的松散型胚性愈伤组织 ,在继代培养基上已培养 6 a以上 ,所保持的若干愈伤组织仍具有强烈的体细胞胚胎发生能力 .经细胞学检查 ,其中个别愈伤组织系的部分愈伤组织团发现有2 n=3x=4 5,或 2 n=4 x=6 0等染色体数目的变异细胞 ,这对于离体筛选龙眼细胞突变体很有价值     

渗透调节对水稻愈伤组织继代培养效应的研究

<正> 前言在离体继代培养中,多数愈伤组织丧失植株再生能力,从而大大地限制了突变体筛选。近年来继代培养方法的研究颇受重视,并取得一定的进展。赖光隆、Kishor等分别用一定浓度的蔗糖和甘露醇、山梨醇以及NaCl等加入继代培养基中,使水稻愈伤组织继代培养60多代(1500N)仍获高比例的再生植株。陈克贵等在培养到16代以上仍保持很高比例的植株再生能力。本文报道蔗糖和甘露醇、脯氨酸以及烟草愈伤组织分泌物对水稻愈伤组织继代培养的影响。材料与方法一、愈伤组织诱导供试品种:腾板5号,台北309、日本     

珍稀濒危植物掌叶木愈伤组织诱导与褐化抑制研究

以掌叶木[Handeliodendron bodinieri (Lévl.) Rehd.]的叶片、茎段为外植体,在含有不同植物激素的培养基上诱导愈伤组织。结果表明,最佳诱导培养基为MS+2,4-D1.0mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA0.5mg/L,最佳增殖培养基为3/4B5+NAA0.5mg/L+6-BA1.0mg/L+VC0.1%。2,4-D与NAA联合使用利于诱导率的提高;适量的6-BA、KT利于愈伤组织质量的改善;6-BA加KT的双因子组合没有单因子的诱导效果显著;采用B5培养基代替MS培养基,且将大量元素降为3/4,外加VC0.1%,并进行暗培养,能有效抑制愈伤组织的褐化。     

秋茄叶片愈伤组织褐变研究

[目的]建立红树秋茄的愈伤组织体系,为实现秋茄种质资源离体保存及其多样性研究提供科学依据.[方法]以红树林秋茄幼嫩叶片作为外植体,研究2,4-D和6-BA不同浓度配比下秋茄叶片愈伤组织的诱导率,以及不同激素水平对秋茄叶片和愈伤组织褐变情况的影响.[结果]2,4-D对秋茄叶片愈伤组织形成是必需的,添加一定量的6-BA有助于提高愈伤组织诱导率,最佳激素配比为MS+1.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L 6-BA,诱导率最高,达35.0％;秋茄叶片和愈伤组织均有褐变现象发生,21 d内,褐变率达33.3％～45.0％.[结论]初步明确了秋茄叶片愈伤组织的诱导条件及褐变影响因素.     

香果树种子萌发过程中酯酶和过氧化物酶同工酶分析

本研究采用聚丙烯酰胺凝胶电泳,对香果树种子萌发过程中酯酶（EST）和过氧化物酶（POD）同工酶进行分析与比较。结果表明：香果树种子萌发过程中,EST从第四天开始出现新的酶带,表明酯酶代谢合成的增强;POD酶表达先减少后增加,在萌发后期出现两条新的酶带。这些同工酶的变化最终导致种子的萌发。     

香果树苗木湿腐病的研究

近年来黄山、天目山一带发生1种新的香果树苗木湿腐病。经病原物分离、培养及接种试验证明,该病由立枯丝核菌第4融合群、腐霉菌、尖孢镰刀菌及禾谷镰刀菌侵染所致。主要表现湿腐型和立枯型症状。病害从5月上中旬开始发生,梅雨季(6月)发生盛期,7～8月后渐止。病害流行与圃地前作、梅雨及育苗措施关系密切。防治上以严格实施育苗技术措施为主。     

珍稀植物香果树植株再生体系的建立

通过不定芽直接再生和经愈伤组织诱导器官发生两种途径,建立了香果树快速、高频率发生的植株再生体系,探讨了不同外植体（幼叶切块、茎段、叶柄和根）、叶片放置方式、植物生长调节剂和培养条件对不定芽直接再生和愈伤组织诱导器官发生的影响.香果树愈伤组织诱导器官发生结果表明:不同外植体在MS附加1.0 mg/L 6-BA和1.0 mg/L 2,4-D的培养基上愈伤组织诱导率均为100%,其中叶片外植体叶面向下放置效果最好;愈伤组织在MS添加0.5 mg/L 6-BA和0.5 mg/L NAA的培养基上不定芽的分化率为94.35%.香果树不定芽直接再生结果显示:叶片外植体在MS添加6-BA或ZT的培养基上,不定芽直接再生率均高达100%,其中在MS附加2.0 mg/L 6-BA培养基上,产生的不定芽数目多,生长旺盛;附加1.0 mg/L ZT 培养基上,不定芽数目多达56.67个/cm[[sup]]2[[/sup]],但生长较弱.黑暗预培养有利于香果树叶片外植体不定芽的再生.两种途径得到的不定芽转到1/2 MS培养基上均可生根,生根率达100%,附加1.0 mg/L 的IBA和0.5%的活性炭有利于再生植株根的生长.      

香果树种子萌发过程中淀粉酶和超氧化物歧化酶同工酶分析

1材料和方法 1．1试材香果树种子由三峡大学生物技术研究中心保存提供,于2007年11月初采集于湖北神农架国家级自然保护区关门山．用脱脂纱布旬好埋进湿沙中后于4℃冰箱中贮藏。     

香果树种子萌发过程中淀粉酶和超氧化物歧化酶同工酶分析(英文)

[Objective] The study was to understand the changes of amylase(AMY) and superoxide dismutase(SOD) isozymes during the germination process of Emmenopterys henryi Oliv seeds.[Method] By employing polyacrylamide gel electrophoresis method,the expressions of AMY and SOD isozymes during seed germination process were analyzed.[Result] The main AMY bands remained strong during the whole period and a new band A2 appeared in the middle and late period of seed germination.Some new SOD bands occurred at the early stag...     

香果树种子萌发过程中淀粉酶和超氧化物歧化酶同工酶分析

[目的]研究香果树种子萌发过程中淀粉酶（AMY）和超氧化物歧化酶（SOD）同工酶的变化。[方法]采用聚丙烯酰胺凝胶电泳,对香果树种子萌发过程中AMY和SOD同工酶进行分析。[结果]香果树种子萌发过程中AMY同工酶主酶带颜色一直较深,萌发中后期出现新的酶带A2。萌发初期,有新的SOD同工酶合成;进入萌发中期,新合成的减弱或消失;萌发后期第6条酶带活性增强。[结论]香果树种子萌发过程中AMY和SOD的表达存在时间差异性。     

光照和黑暗条件下香果树种子萌发过程中蛋白酶及蛋白含量的研究

研究了光照和黑暗条件下香果树的萌发过程中种子的萌发率、蛋白酶活性及可溶性蛋白含量的变化。结果表明：香果树种子属于典型的光敏感性种子;在光照条件下萌发的香果树种子蛋白酶活性和可溶性蛋白含量的变化趋势都是先急剧上升后逐渐下降;在黑暗中香果树种子完全不能萌发,整个培养过程中蛋白酶活性和可溶性蛋白含量一直都很低,可能导致种子不能萌发。     

香果树芽的生长发育与花芽分化

香果树为我国的二类保护树种,其花芽为混合芽着生于春梢上部,当年分化,当年开花。在浙江临安4月中旬到5月底为花序分化期,6月上旬至7月中旬为小花各花器分化期,7月中旬至8月上旬为大小孢子分化发育期,8月上中旬开花。从开始分化到开花历时4个月左右。在同一花序上主、侧轴顶花先分化,下部侧生花后分化,属向心式分化,花序为圆锥状聚伞花序。     

香果树营养器官的解剖学研究

对香果树营养器官进行解剖学研究,结果表明,香果树在初生茎、次生茎的皮层、髓及根的韧皮部中,许多薄壁细胞具有明显的网状结构.茎初生构造中,皮层和髓生活薄壁细胞丰富.次生木质部为散孔材,导管为单穿孔,导管端壁略倾斜,木薄壁细胞稀少.在老根中,中央无髓.叶为异面叶,气孔仅分布于下表皮,栅栏组织发达.属于中生型植物构造特征.