地被菊花‘珍粉’组织培养与植株再生体系的建立

研究不同因子对地被菊‘珍粉’品种再生体系建立的影响,为地被菊的推广种植打下技术基础。以地被菊‘珍粉’二年生茎段为试材,研究不同消毒时间梯度下2%NaClO和0.1%Hg Cl2对茎段消毒效果、6-BA:NAA和6-BA:KT激素组合对不定芽诱导、不同浓度IBA和NAA对不定根发生,半开瓶和全开瓶两种炼苗方式对移栽成活率的影响。结果显示,2%NaClO消毒效果优于0.1%Hg Cl2,且在6 min时萌发率最高,达到90.00%;外植体腋芽诱导率在6-BA 0.1 mg/L+KT 0.1 mg/L组合最高,达到97.67%,出芽指数为6.33,优于6-BA:NAA组合;不同浓度IBA诱导不定根发生率均达100%,高于NAA,但在根系质量和后期成活率上,IBA浓度为0.5 mg/L时最优;试管苗在半开盖炼苗5 d后的移栽成活率达到了100%,且植株长势健壮。     

新疆杨组培再生体系建立

以新疆杨叶片为外植体,研究新疆杨组织培养再生体系建立的主要影响因素。结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基组合为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D;愈伤组织分化的最佳培养基组合为MS+0.1 mg/L TDZ+0.3 mg/L IBA,不定芽增殖的最佳培养基组合为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IBA,诱导生根的最佳培养基组合为1/2MS+0.5 mg/L IBA,新疆杨组培苗在生根培养基上形成的根条数多,苗体健壮,生根率达到100%。本研究成功建立了新疆杨组织培养再生体系,为其转基因研究工作奠定了基础。     

铁线莲‘Polish Spirit’组培快繁体系的建立

本研究以铁线莲波兰精神(Clematis viticella‘Polish Spirit’)为实验材料,以带芽茎段为外植体,利用正交试验,完成‘Polish Spirit’初代培养消毒方式筛选并对其叶片、叶柄和无芽茎段进行愈伤组织诱导研究。通过研究不同外植体、不同消毒方式、不同激素种类和浓度配比对腋芽诱导、增殖培养及不定根诱导的影响,建立了铁线莲波兰精神的组培快繁体系。实验结果表明最佳的外植体为带芽茎段,最好的消毒方法是2%洗衣粉溶液浸泡10 min流水冲洗1 h,75%的酒精消毒20 s,0.1%HgCl2消毒6 min。诱导腋芽的最佳培养基为1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+0.05 mg/L NAA+1.5%蔗糖,pH值为5.8,增殖培养基添加椰汁150 m L/L可有效提高丛生芽诱导率,添加20 mL/L香蕉泥可有效壮苗,生根最适诱导培养基为1/2MS+0.02 mg/L NAA,生根率为85%,组培苗移栽成活率达90%以上。本研究结果为铁线莲优良品种‘Polish Spirit’快速扩繁提供了理论基础。     

挪威槭‘缤纷秋色’组培快繁再生体系的建立

以带腋芽茎段为试验材料,采用不同浓度和种类的试剂及培养基进行组培的方法,研究杀菌剂、培养基、生长激素对外植体灭菌、芽萌发、组培苗生根和移栽的影响,为构建全面、高效的‘缤纷秋色’快繁体系提供参考。结果表明,外植体最佳灭菌方法为10%NaClO溶液消毒12 min,污染率减少至19.6%,萌芽数为8.76个。最适启动培养基为WPM+0.2 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L TDZ+2.0 mg/L PVP+30 g/L蔗糖;壮苗培养基为WPM+0.8 mg/L ZT+1.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/L PVP+30 g/L蔗糖;生根培养基为1/2WPM+0.8 mg/L IBA+0.2 mg/L NAA+0.5 g/L活性炭+15 g/L蔗糖,用草炭土和珍珠岩混合比例2:1移栽效果最好,移栽成活率为89%。研究建立的‘缤纷秋色’快速繁殖体系可为优良种质扩大培养和推广应用提供技术参考。     

3个铁线莲品种组培快繁体系的建立

本试验以铁线莲'卡西斯'(ClematisCassis)、'大河'(Clematis Taiga)、'倾盆大雨'(Clemotis Cloud-burst)为外植体,研究在3、4月外植体的消毒最佳时长时间,结果表明,3、4月中,'卡西斯'的最佳消毒时长分别是3 min和4min,'大河'的最佳消毒时间均为4 min,'...     

海州常山组培再生体系的建立

为建立高效的海州常山组培再生体系,以海州常山扦插苗的叶片为外植体,对叶片愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、壮苗培养及生根培养过程的主要因素进行探讨。研究结果表明,叶片愈伤组织诱导和分化的最适培养基为1/2MS+0.5 mg/L TDZ+0.05 mg/L NAA,诱导率为86.67%,不定芽增殖系数为2.34,苗高增长量为1.41。壮苗的最适培养基为1/2MS+0.2 mg/L TDZ+0.1 mg/L NAA,不定芽增殖系数为1.84,苗高增长量为1.82;诱导试管苗生根的最适培养基为：1/2MS+1.6 mg/L IBA,生根率为100.00%,平均每株试管苗生根7.86条,平均根长2.22 cm,并且植株生长良好,利于后期栽培。     

‘杂花’薰衣草再生体系的建立

为了获得高效稳定的薰衣草再生体系,本研究以‘杂花’薰衣草叶片为试材,研究了不同激素及浓度对愈伤组织诱导、不定芽分化及不定根形成的影响。结果表明：6-BA与NAA及6-BA与2,4-D组合均能诱导愈伤组织形成,最佳培养基配方分别为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L和MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L,出愈率分别为95.2%、92%;6-BA与NAA组合诱导不定芽的效果显著优于6-BA与2,4-D的组合,适合诱导再生芽分化的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.4 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L,分化率为68.1%;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L,生根率为91.1%。本研究建立了‘杂花’薰衣草的再生体系,为利用转基因技术培育高产优质的薰衣草新品种提供技术支持。     

草原龙胆‘阿琳娜’高效再生体系的建立

草原龙胆(Eustoma grandiflorum)花色典雅、花型丰富,是全球最受欢迎的切花之一。本研究以草原龙胆‘阿琳娜’叶片为外植体,研究了6-BA、NAA、GA₃和IBA不同组合对其出芽、壮苗、增殖、生根的影响。结果表明:最佳不定芽诱导培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L,不定芽诱导率达90.0%,平均出芽数为4.52个;MS培养基可实现壮苗;最佳增殖培养基为MS+6-BA 0.2 mg/L+IBA 0.2 mg/L+GA₃0.3 mg/L,增殖系数为6.41;培养基1/2MS+IBA 0.5 mg/L有利于生根。初步建立了草原龙胆‘阿琳娜’高效再生体系,为草原龙胆优良品种快速繁殖及基因工程研究提供了依据。     

牵着儿时记忆的铁线莲‘阿拉贝拉’

我有一个大园子,种了各式各样的花花草草。这么爱花,大概是与生俱来的天性和后天熏陶混合作用的结果。     

热敏型生菜‘GRAND RAPIDS TBR’高效再生体系的建立

本试验以热敏型生菜‘GRAND RAPIDS TBR’为材料,分别探讨不同消毒试剂及时间对种子消毒的影响及不同生长调节剂对愈伤组织诱导、不定芽再生的影响,初步建立了高效的再生体系。结果表明：种子消毒的最适配比为75%的酒精45 s+3%的次氯酸钠12 min,种子成活率可达97.8%;愈伤组织诱导与不定芽分化的最适培养基为MS+0.1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,愈伤组织诱导率100%,平均不定芽再生27.7个,且不定芽生长健壮;最适生根培养基为不添加NAA的纯MS培养基,生根率为97.8%;炼苗移栽后,植株成活率100%。本研究初步建立了‘GRAND RAPIDS TBR’的高效再生体系,为生菜基因功能研究和耐高温新品种培育提供基础。     

微型月季小仙女茎段快繁体系建立的研究

本研究以微型月季小仙女(Rosa The Fairy)优良的茎段为外植体,筛选最适灭菌条件,发现采用1/2MS可以进行有效的芽诱导;MS+0.4 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA培养基可以有效诱导微型月季组培苗的增殖,增殖系数最高可达7.33;培养基1/2MS+0.1mg·L-1IBA可以有效诱导组培苗生根,生根率达到83.33%,平均每株根数为14.67。初步建立了小仙女快繁体系,以期为小仙女育种研究提供技术支撑。     

南美水仙组培外植体再生体系建立中的关键技术研究

以南美水仙的鳞茎、叶片和叶柄等营养器官作为外植体进行组织培养,着重研究南美水仙最佳外植体、最佳培养基配方的关键技术.研究结果表明,诱导的最佳培养基为MS 6-BA 2.0mg/L NAA 3.0mg/L,培养45d可获得较多的小鳞茎.外植体分化能力的研究表明,南美水仙的不同类型外植体能力大小为:鳞茎＞叶柄＞叶片;从鳞茎的不同部位来看,基部鳞茎盘＞内层鳞片下部＞外层鳞片下部＞内层鳞片上部＞外层鳞片上部.     

油菜薹茎段髓部原生质体培养再生植株

以油菜品种“蜀杂6号”的薹茎段髓部为材料分离原生质体,产量一般在每g鲜重2×10~6个左右。在每L附加1.5mgBA、0.4mgNAA、1.5mg2,4-D、200mg水解酪蛋白、250mg木糖、0.3M蔗糖和0.1M葡萄糖的Nitsch培养基中,对原生质体进行液体浅层静置培养。2～7天内原生质体出现第一次分裂,分裂频率最高可达49.2％。培养15天后逐渐形成肉眼可见的小愈伤组织。21天时将培养基改换成每L附加2mgBA、0.2mg 2,4-D和3％蔗糖的MS扩增培养基,45天后可形成5mm左右的愈伤组织。大于2mm的愈伤组织可在每L含有1.0mgBA/3.0mgZT和0.1mgNAA的MS琼脂培养基上分化出芽,分化频率可达36.7％。在1/2MS无激素培养基中,1cm左右的分化芽有85.9％生根,形成完整的植株。     

芳香型矮牵牛‘Carpet Blue’高效再生体系的建立

矮牵牛(Petunia hybrida)是研究植物芳香性状的理想材料,但目前有关芳香型矮牵牛转基因技术体系的研究较少,为建立芳香型矮牵牛的高效再生体系,本研究以特异挥发苯环类物质的芳香型品种‘Carpet Blue’为材料,进行了表面消毒、愈伤组织诱导与不定芽分化、不定芽增殖、不定芽生根等研究。结果表明:先用75%酒精(C₂H₅OH)漂洗30 s,再用5%次氯酸钠(NaClO)消毒8 min,表面消毒效果最好,无菌外植体获得率可达93.75%;愈伤组织诱导与不定芽分化最适培养基为:MS+1.5 mg/L 6-苄氨基嘌呤(6-BA)+0.3 mg/L萘乙酸(NAA),诱导率可达100%,且能分化出健壮的不定芽;最适不定芽增殖培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA,增殖系数可达14.67倍;最适生根培养基为1/2MS+0.05 mg/L吲哚丁酸(IBA),生根率为100%,平均根数达37.67条,平均根长达2.61 cm,生根指数最高,达9.82,单条不定根最长可达5.22 cm;炼苗移栽后,成活率高达92.50%。本研究初步建立了芳香型矮牵牛‘Carpet Blue’的高效再生体系,为后续通过转基因手段研究苯环类挥发物质的代谢规律奠定了坚实基础。     

‘中黄1号’茶树带腋芽茎段组培快繁体系建立

本研究以‘中黄1号’茶树带腋芽茎段为外植体,探索外植体的取样时间和消毒条件、最佳萌发和增殖培养基、生根和壮苗培养基配方以及炼苗移栽条件。结果表明:最佳外植体取样时间为4月份,茎段经75%酒精浸泡60 s,0.1%升汞浸泡12 min,外植体存活率为91.3%,污染率为2.7%,以MS+2 mg/L 6-BA+1 mg/L GA_3作为腋芽萌发培养基,培养40 d出芽率为91.7%,以MS+4 mg/L 6-BA+1 mg/L IBA作为增殖培养基,培养45 d增值系数可达3.8。以MS+1 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA作为壮苗培养基进行壮苗,经45 d可培养至约4～5 cm后诱导生根,在50 mg/L IBA无菌溶液中浸泡5 min后,转至1/2MS+1.5 mg/L IBA生根培养基中,生根率可达82.5%。自然光条件下开瓶室温炼苗5 d,移栽到以营养土和蛭石2∶1比例基质中,成活率最高,移栽成活率为66.7%。本研究建立‘中黄1号’带腋芽茎段组培快繁体系,为‘中黄1号’茶树工厂化育苗提供技术支持。     

‘异株’荨麻组织培养技术体系的建立

‘异株’荨麻是一种一年生或多年生的草本植物,既有食用价值,也具药用价值,研究‘异株’荨麻组织培养快繁技术体系很有意义。本研究以‘异株’荨麻的嫩梢茎段为外植体,采用次氯酸钠配合乙醇灭菌技术对异株荨麻的嫩梢茎段进行灭菌,在对异株荨麻外植体的初代培养、增殖培养和生根培养条件进行研究的基础上,建立了‘异株’荨麻快速繁殖的组织培养技术体系。该体系为:2%次氯酸钠5 min+75%乙醇0.5 min为最适灭菌方法;最适初代培养基为MS+0.25 mg/L 6-BA+0.25 mg/L IBA+0.25 mg/L KT+0.25 mg/L反-ZT+0.7%琼脂+3%蔗糖;最适继代增殖培养基为2/3MS+0.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IBA+0.25 mg/L反-ZT+0.7%琼脂+3%蔗糖;最适生根培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.7%琼脂+3%蔗糖。     

‘T13’号桉树再生体系的建立

以尾巨桉‘T13'的单芽茎段为外殖体进行离体培养和快速繁殖.结果表明,再生芽诱导分化适宜培养基为EU BA0.5 NAA0.2;增殖适宜培养基为EU BA1.0 NAA0.2,每个芽可产生5～6个芽;壮苗适宜培养基为EU附加活性炭(AC)0.5‰～1.0‰;生根较适培养基为1/2MS附加NAA0.2或IBA0.2,生根率95%以上.     

山葡萄“双优”再生系统建立的研究

以山葡萄"双优"茎段、叶柄和叶片为材料,采用不同的激素浓度进行再生体系的建立。结果表明,以山葡萄茎段为外植体,MS为培养基,激素浓度2.0 mg/L的BA和0.02～0.05 mg/L的IBA再生,获得了山葡萄再生芽,分化率达到6.67%～8.36%,激素浓度为0.2mg/L的IBA进行生根培养,经过15～20 d培养,生根率可达100%,获得了山葡萄再生植株。     

不同激素浓度对柠条茎段组织培养及植株再生的影响

以小叶锦鸡儿茎段为外植体，MS为基本培养基，设计不同浓度的6-BA，IAA，NAA，IBA，KT等单因子和不同比例的细胞生长素和细胞分裂素组合试验。结果表明：在芽的诱导增殖过程中，添加有6-BA0．5mg／L，IAA 0．01mg／L的MS培养基效果最好，诱导率为90％。在生根培养过程中，添加有IAA 0．5mg／L的I／2MS培养基效果较好，生根率为86％。