纯种肉羊超数排卵和胚胎冷冻技术的研究

试验对40只用于冷冻胚胎生产的无角多赛特羊、德国肉用美利奴供体羊分别在发情后6.5～7d进行子宫采胚,并进行冷冻胚胎。其结果:6.5d和7d采集的可用于冷冻的平均胚胎数(6.80±4.44)和(7.40±3.54)枚没有显著差异(P>0.05)。6.5d采集的胚胎所有胚胎均处于紧缩桑葚胚、早期囊胚、囊胚阶段。7d采集的胚胎中扩张囊胚占42.57%,孵化囊胚占18.92%。在该研究中共解冻92枚胚胎并进行移植,其结果:解冻后的24枚孵化囊胚和68枚有透明带的胚胎成活率和移植妊娠率分别为:37.50%、44.44%和91.18%、59.67%。因此冷冻羊胚胎时,采集胚胎的最佳时间是供体羊发情后的6.5d。     

季节对杜泊羊体内胚胎生产与移植效果的影响

为了研究季节对杜泊羊体内胚胎生产效率及胚胎移植妊娠率的影响,于2016年选取内蒙古赛诺草原羊业有限公司种羊场经产纯种杜泊母羊作为供体,采用同期发情、超数排卵及腹腔镜人工输精等方法对供体羊进行处理后,利用手术冲胚的方法获得纯种杜泊羊胚胎,同时对受体羊进行同期发情处理和胚胎移植。经统计分析,2016年全年该公司共有放栓供体4 241只,超排处理4 180只,配种供体4 131只,冲胚供体3 987只,供体可用率为94.01%;冲出胚胎总数为23 516枚,可用胚胎18 002枚,胚胎可利用率为76.55%,平均每只供体能获得可用胚胎4.52枚。供体在10月、11月、12月冲胚所获得的平均冲胚数和平均可用胚数明显高于4月、5月、6月(P<0.05),其中10月的平均冲胚数和平均可用胚数最高(P<0.01),分别为7.04枚和5.62枚。将获得的部分胚胎用于胚胎移植,移植单胚怀孕受体数为4 446只,妊娠率为53.67%;移植双胚怀孕受体数805只,妊娠率65.02%。此外,受体在1月、3月、6月、12月受胎率较其他月份高(P<0.05)。该研究可为杜泊种羊超数排卵、胚胎移植和肉羊的产业化生产提供一定的数据参考。     

泌乳期波尔山羊的重复超排及胚胎移植效果分析

对26只泌乳期波尔山羊实施2次重复超排处理。其结果如下:①第一次超排有效率为84.62%,平均排卵数为19.5±6.42(枚/只),平均采集胚胎数为15.86±1.84(枚/只),平均采集可用胚胎数为10.5±8.32(枚/只)。第二次重复超排处理时有1只羊推迟发情,超排有效率为96.15%,平均排卵数为28.36±5.26(枚/只),平均采集胚胎数21.48±7.42(枚/只),平均采集可用胚胎数为18.64±4.12(枚/只);②两次重复超排所获得的可用胚胎数差异极显著(P<0.01)。泌乳期供体羊第一次采集的可用胚胎数量[10.50±8.32(枚/只)]显著低于断奶后供体羊[18.64±4.12(枚/只)];③胚胎移植后的2组羊产羔率差异不显著(P>0.05)。     

龙陵黄山羊胚胎移植试验

从龙陵黄山羊的群体中选出20只供体和74只受体,分别用5.0 mg和6.0 mg国产FSH对供体羊进行超排处理。用阴道海绵栓 PMSG对受体羊进行同期发情处理,供体羊配种后第7天回收胚胎,按形态学将胚胎分级并对黄体记数,结果表明,5.0 mg、6.0 mg组黄体数分别为(11.90±0.32)枚、(9.80±0.69)枚,两组黄体数差异不显著;5.0 mg组的只均回收胚胎数为(7.40±0.34)枚,6.0 mg组为(4.50±1.24)枚,二者差异显著;把可用胚胎119枚移植给54只受体羊,移植产羔率为67%。     

萨福克羊超数排卵影响因素的研究

影响萨福克羊超排效果的因素较多,主要包括供体、激素及其它一些影响供体生理状态的因素。本试验以萨福克羊为研究对象、超排方法的选择,卵巢处于不同生理状态时期的超排、促排激素、超排季节、供体年龄、重复超排、饲养管理等因素对供体超排效果的影响情况进行了研究,结果表明:通过同一季节利用不同方案对萨福克羊的超数排卵处理发现,以国产FSH6～7mg和加拿大FSH250mg进行4d递减处理的排卵数和可用胚率最高,是超数排卵处理的最佳方案。由于进口激素价格高,故推荐使用国产FSH6～7mg进行4d递减处理方案进行萨福克羊超数排卵。在供体发情周期第10～14天中任何一天开始超排都能取得较好的超排效果,可用胚胎平均数为7.1(6.1～8.2)。供体发情配种时用LH/HCG促排激素比LHRH-A3更能使更多的卵泡排卵,但末受精的数量也相应增加,综合考虑,萨福克羊发情配种时用LHRH-A3促排激素的效果最佳。超排季节对供体超排效果没有显著影响(P>0.05)。供体羊的年龄对超数排卵效果没有显著的影响,对性成熟不久的供体羊初次诱导排卵时适当降低FSH剂量,可取得与成年经产母羊一样的较好的超排效果。供体羊重复超排处理时,平均排卵率无显著差异(P>0.05),但采集可用胚胎数量有显著差异(P<0.01)。补饲养条件下的绵羊供体羊平均采集可用胚胎数量显著高于不补饲供体羊可用胚胎数量(P<0.01)。     

波尔山羊超数排卵技术的研究

在山东、陕西部分地区,对放牧型波尔山羊进行了不同方法超数排卵处理试验,其结果显示①在山东实施波尔山羊超数排卵的最佳季节为10月中旬～¨月下旬;②供体羊自然发情和氯前列烯醇诱导发情所获得的胚胎总数和可用胚胎数量之间差异不显著(P＞0.05),但供体羊放置CIDR进行超数排卵后所采集的胚胎可利用率明显下降(P＜0.05);③在供体羊超数排卵前2个月进行补饲,可提高胚胎可用率.     

TH1细胞因子及NO含量对山羊胚胎移植妊娠的影响

为解决胚胎移植妊娠率低的问题,应用胚胎移植技术对8只供体波尔山羊进行超排处理,将获得的胚胎植入92只受体关中奶山羊,其中61只妊娠,妊娠率为66.3%;随机选择受体羊20只,于植入胚胎当日和40天时采集外周血样,并采集胚胎移植当日供体羊外周血样,用ELISA方法检测血浆中TNF-α、IFN-γ、IL-2的含量,用硝酸还原酶法检测NO含量.结果显示:植入胚胎当日受体妊娠羊血浆中各细胞因子和NO含量与供体羊差异不显著(P＞0.05),而受体返情羊则显著高于受体妊娠羊和供体羊(P＜0.05);植入胚胎40天时妊娠羊TNF-α含量显著低于返情羊(P＜0.05),IFN-γ、IL-2含量极显著低于返情羊(P＜0.01),NO含量显著低于返情羊(P＜0.05),但又显著高于植入胚胎当日妊娠羊和供体羊(P＜0.05).结论:植入胚胎当日,受体羊Th1细胞因子含量显著高于供体羊时妊娠失败;受体羊妊娠后Th1细胞因子适当下调利于妊娠维持;受体羊妊娠后NO含量适当升高为妊娠所必需,但含量过高时则妊娠失败.     

澳洲美利奴超细毛羊超数排卵与胚胎移植试验

利用从澳大利亚进口的澳洲美利奴超细毛羊69只(其中经产母羊48只,初产母羊21只)做供体,小尾寒羊320只做受体,进行胚胎移植试验,结果表明:经产母羊的发情率、采胚数、有效胚胎数和可用率(有效胚胎数/采胚数)均高于初产羊.69只处理供体羊有66只发情,收集到441枚有效利用胚胎,320只处理受体羊,有265只可用做胚胎移植,178只小尾寒羊产羔,产羔265只,受胎率和有效胚胎利用率分别为67.2%和60.1%,平均每1.7枚胚胎产1只羔羊,平均每只供体羊可获羔羊4只.     

国产药物、激素在羊超数排卵胚胎移植工作中的成功应用

国产SFH能否取代进口FSH而降低羊体内胚胎生产成本呢?本课题组于2019年6月中旬在内蒙古自治区赤峰市巴林右旗养羊户选取65只优秀蒙古羊为供体,采用同期发情、超数排卵及腹腔镜人工输精等技术,对进口和国产FSH在羊体内胚胎生产效果进行了对比,同时用生理盐水代替冲卵液进行冲卵并对移植后的产羔率进行了对比研究。在同一地区、同等饲养管理条件下,使用国产和进口FSH,按个体体重注射不同剂量FSH对供体羊进行超数排卵;试验结果显示使用国产FSH超数排卵的供体羊平均采集可用胚胎13.4枚/只、与使用进口FSH超数排卵采集可用胚胎13.5枚/只在统计学上没有显著差异(P0.05);同时用两种不同FSH超数排卵并用生理盐水冲出的部分A级胚胎分别移植到30只和18只受体羊体内,也同样获得了较好的产羔率分别为53.3%和61.1%,二者之间在统计学上无明显差异。通过该研究为国产药物代替进口药进行超数排卵,降低生产超数排卵成本提供了有力的理论和实践依据,值得在生产当中广泛推广应用国产FSH。     

影响黑萨福克绵羊体内原核胚生产的因素

为提高黑萨福克绵羊原核期胚胎的生产效率,通过CIDR+FSH+PMSG和CIDR+FSH+PG两种激素方案对供体进行超数排卵,将冲出的胚胎移植入同期发情处理的受体。其中CIDR+FSH+PMSG注射组供体平均黄体数、可用胚数和移植妊娠率均高于CIDR+FSH+PG注射组(P0.05)。同时,在CIDR+FSH+PMSG注射组,不同FSH剂量注射对黑萨福克绵羊超数排卵有影响。在180~240 IU剂量组,供体羊的平均黄体数、可用胚胎数高于另一组。繁殖季节(秋季)供体平均黄体数、可用胚胎数均显著高于春季(P0.05)。     

超排前有腔卵泡数对青年和牛体内胚胎生产效率的影响

为提高和牛体内胚胎生产效率,优化供体牛筛选标准,本实验选取68头青年黑毛和牛为供体,超排处理前使用B超检查两侧卵巢上直径为3～5 mm的有腔卵泡数,以卵泡总数10和20为临界值将其分为3组,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组有腔卵泡数分别为<10、10～19、≥20个,以CIDR+FSH+PG法进行超排处理后人工授精,比较不同组间胚胎生产效率。结果表明:Ⅲ组黄体数(15.44)、回收胚胎数(13.13)及可用胚胎数(9.56)均显著高于其他2组(P<0.05),Ⅱ组黄体数、回收胚胎数及可用胚胎数显著高于Ⅰ组(P<0.05),即随着供体牛超排前有腔卵泡数增多,回收胚胎数及可用胚胎数随之增多;Ⅲ组胚胎可用率显著低于Ⅰ组,退化率显著高于Ⅰ组和Ⅱ组(P<0.05)。综上,有腔卵泡数对和牛胚胎生产效率有影响,可以作为供体牛筛选标准之一。     

胚胎移植技术在圭山奶山羊新品系培育中的研究与应用

为加快圭山奶山羊新品种选育的进度,选择阿圭杂交一代母本为供体,分别使用比利时、西班牙和宁波三生生产的垂体促卵泡素(FSH)对供体进行超排处理。选用云上黑山羊和萨能奶山羊经产母羊为受体,采用“CIDR+PMSG法”进行同期发情处理。结果：26只供体回收可用胚胎449枚,比利时、西班牙和宁波三生生产的FSH超排可用胚胎分别为(16.50±5.95)枚、(17.91±11.84)枚、(17.40±11.97)枚,不同来源的FSH超排回收的可用胚胎数差异不显著(P>0.05)。受体羊同期发情处理220只,发情196只,发情率89%;移植受体羊169只,发情母羊利用率86.22%;产羔88只,产羔率52.07%。     

不同因素对胚胎生产效率的影响

现代繁殖生物技术是提高优质肉用种羊利用率、缩短生产周期、加速良种肉羊扩繁、促进肉羊产业化发展的必经之路。该技术是一个非常复杂的技术体系,供、受体的个体和遗传差异,生理生殖状况,环境及营养状况,超数排卵方案,药物和操作者的技术水平等因素都可能对胚胎移植的整个过程造成影响。以统一饲养管理的杜泊羊为研究对象,分析了不同操作人员、不同种公羊、不同手术冲胚次数对供体羊胚胎生产效率的影响。结果表明,经过培训后的操作人员,其平均冲胚数和平均可用胚数分别为3.73个和3.17个,不同操作人员之间无显著性差异(P>0.05)。供体羊的手术冲胚次数对于胚胎生产效率具有明显的影响。手术冲胚次数超过4次,供体羊所获的平均冲胚数和平均可用胚数显著降低(P<0.05)。除此之外,不同种公羊也对胚胎超数排卵生产效率影响显著(P<0.05),种公羊317获得可用胚4.11个,而种公羊D1402只获得3.88个。     

应用胚胎移植技术快速扩繁波尔山羊试验

以波尔山羊为供体．地方杂种奶山羊为受体，利用胚胎移植技术对波尔山羊进行快速扩繁试验。结果表明：13只供体羊共获可用胚胎186枚，每只羊平均14．3枚；对70只受体羊共移植胚胎146枚，有35只受体产羔，移植产羔率为50％，共获活羔53只，移植胚胎数／产活羔数为2．7：1。     

利用腹腔内窥镜方法比较不同输精时间对羊体内胚胎生产效率的影响

为提高供体绵羊胚胎生产效率,实验选取99只供体母羊,用FSH+CIDR法诱导发情超排。将正常发情的供体母羊随机分成两组进行输精,分别在超排撤栓后的第48 h和54 h利用腹腔内窥镜法输精。其中48 h输精组供体母羊51只,54 h输精组供体母羊48只。其结果显示:撤栓后54 h输精胚胎回收率极显著高于48 h输精组(P0.01);54 h输精组供体卵母细胞受精率(97.27%)极显著高于48 h输精组(87.02%)(P0.01);54 h组供体平均可用胚数显著高于48 h组(P0.05);撤栓后54 h利用腹腔内窥镜输精组可用胚比率(89.70%)显著高于48 h组(80.53%)(P0.05);移植后受体妊娠率,54 h组(70.44%)极显著高于48 h组(56.92%)。本研究结果显示,利用本实验超排方案,供体撤栓后54 h利用内窥镜一次定时输精相对于48 h输精显著提高了供体胚胎生产效率,对羊体内胚胎生产提供理论和技术支持。     

长途运输和体外保存对美利奴肉羊胚胎移植效果的影响

为研究远距离运输及鲜胚体外保存时间超过5h对胚胎移植效果的影响,将超数排卵供体羊与同期发情的受体羊两地饲养,并将取自供体羊的新鲜胚胎于体温下经直线距离超过300km的长途运输后,移植到受体羊体内。结果发现,供、受体羊经同期发情处理后,其发情率分别为100%和97.9%,供体羊输卵管冲胚获得胚胎数平均为13.5枚/只;受体羊产羔率为79.2%,略高于鲜胚直接移植的产羔率。由此可知,只要受体羊的营养状态良好、后期管理得当、胚胎体外保存方法适当,长途运输及体外保存时间超过5h对胚胎移植的效果无明显影响。     

羊胚胎移植中超数排卵及人工授精技术简介

羊胚胎移植技术是对生产性能优良和遗传性稳定的母羊经过超数排卵处理后,将多出自然排卵数几倍的受精卵取出,分别移植到受体母羊输卵管或子宫内,使之产出优良后代的技术。本文主要介绍供体羊的超数排卵及人工授精技术。     

不同品种肉羊鲜胚生产与移植效果比较

对20只纯种萨福克、道赛特、德国肉用美利奴供体羊进行超排处理,供体羊共计排卵255枚,平均每只羊12.75枚;共回收可用胚胎164枚,平均每只羊8.2枚。将164枚胚胎移植给164只受体羊,两个情期不返率53%。结果表明,不同品种间平均排卵数并无明显差异(P>0.05)。     

优质肉羊超数排卵优化组合方案应用研究

试验旨在探索优化超排方案,提高肉羊胚胎生产效率。在新疆哈密市牧祥合作社用FSH+PG递减4 d 8针注射法处理供体羊44只,冲胚数503枚、只均冲胚数11.43枚±0.79枚,可用胚数394枚、只均可用胚数8.95枚±0.95枚;同样的方法用FSH+PG+PMSG处理供体45只,冲胚数608枚、只均冲胚数13.51枚±1.04枚,可用胚数435枚、只均可用胚数9.67枚±1.06枚,差异均极显著(P0.01);对39只供体羊分别采用开膣器输精+自然交配+开膣器输精和自然本交方法配种,重复超排跟踪统计,重复超排和不同授精方式冲胚数无明显差异(P0.05);选用自然发情与人工诱情法处理,自然发情组可用胚胎数289枚,诱情组可用胚胎数221枚,两者差异极显著(P0.01);供体羊在不同营养状态下超排处理,营养良好者与营养中等者只均回收胚胎数分别为14.4枚和8.52枚,只均可用胚胎平均数分别为7.0枚和5.25枚,差异也极显著(P0.01)。该研究优化了绵羊超排方法和配种授精方案,初步建立了高效胚胎移植体系。     

影响绵羊超数排卵效果因素的研究

通过对绵羊超数排卵技术的主要环节进行研究,得出适用于规模化生产的一套简便、稳定、低成本、高效、实用的羊胚胎生产技术.其结果如下①超排处理的499只供体羊平均排卵、回收胚、可用胚分别是14.41枚±4.34枚、12.56枚±4.05枚、9.13枚±4.03枚,育成羊组的此3项指标均高于经产羊组(P＜0.01);②对6个品种的412只供体羊进行超排处理,罗米利希尔斯羊的排卵、回收胚胎及可用胚胎平均数均高于其他品种(P＜0.01),其他品种之间无显著差异(P＞0.05),帮德羊的可用胚胎平均数显著低于其他品种(P＜0.01);③舍饲和放牧条件下供体羊排卵黄体平均数没有显著差异(P＞0.05).但是,舍饲羊的回收胚和可用胚胎平均数显著高于放牧羊(P＜0.01);④3种方式发情羊的排卵黄体平均数无显著差异(P＞0.05),但是,自然发情羊的回收胚及可用胚平均数均明显高于其他两组(P＜0.01);⑤用宁波和加拿大生产的FSH制剂进行超排处理,黄体平均数并无差别(P＞0.05),但回收胚胎平均数前者低于后者(0.01＜P＜0.05),尤其是后者的可用胚胎平均数明显高于前者(P＜0.01);⑥宁波生产的FSH制剂分为4个剂量等级进行超数排卵,4组之间无显著差异(P＞0.05).150 u剂量组的回收胚胎平均数均低于其他剂量组(0.01＜P＜0.05),180 u剂量组可用胚平均数显著低于其他3个剂量组(P＜0.01); ⑦超排1次或2次,排卵数无显著差异(P＞0.05);但超排2次以上,黄体数明显下降(P＜0.01).超排3次以上回收胚胎数明显低于其他两组(P＜0.01);⑧精液质量直接影响超排效果,精液活力越高效果越好.