大花蕙兰组培快繁技术研究

大花蕙兰多为杂交品种,种子繁殖无法保持其品种特性,且分株能力弱,因而繁殖系数低,繁殖速度慢,故特采用组培技术以提高大花蕙兰的繁殖率。在初代培养过程中,以MS为基本培养基,附加0.5mg/LBA+1.5mg/LNAA作为诱导原球茎培养基,培养效果最佳。在继代培养中,以MS为基本培养基,附加0.5mg/LBA+1.0mg/LNAA作为原球茎增殖培养基,3～4周后,增殖数可以达到64.5。另外,培养基中附加0.5～1.0g/L活性碳,对吸附培养基中的杂质和在培养过程中分泌的醌、酚类物质以及防止外植体褐变,有显著效果。     

大花蕙兰原球茎增殖影响因素的研究

[目的]为探明组培过程中大花蕙兰原球茎增殖生长的影响因素。[方法]以大花蕙兰茎尖诱导的原球茎为外植体,研究了MS培养基浓度、BA浓度及培养方式对原球茎增殖和生长的影响。[结果]1MS基本培养基适合大花蕙兰原球茎培养;在振荡培养时MS培养基中加入BA1．5mg／L时,原球茎生长良好,显著好于其他浓度处理;在液体培养基中培养原球茎明显优于在固体培养基中培养,液体培养基培养的原球茎鲜重和增殖系数均为固体培养的1．75倍。[结论]培养基配方为Ms＋BA1．5mg／L＋NAA0．2mg／L＋蔗糖30g／L且振荡培养时,大花蕙兰原球茎增殖及生长效果较好。     

组培获得大花蕙兰叶色突变体的RAPD分析

从大花蕙兰的组培苗中获得了白色条纹和黄色条纹两种叶色突变体,突变发生的总频率约为0.12%。利用100条UBC随机引物将它们与对照进行RAPD分析和对比。引物P17或P31可在对照和黄色条纹突变体间检测出多态性,黄色条纹突变体具有大小分别约为995bp或1320bp的多态性片段;而引物P84或P86则可在对照和白色条纹突变体间揭示出多态性,白色条纹突变体具有大小分别约为1120bp或1315bp的特异性条带。RAPD分析结果表明这两种突变体的基因组DNA都发生了变化,但发生突变的位点不同。     

大花蕙兰组培快繁技术研究

采用原球茎增殖的方法对大花蕙兰"水晶宫"组培快繁技术进行研究。结果表明:原球茎诱导培养基为MS 6-BA1.0 mg/l(单位下同) NAA0.2 香蕉汁100g/l;原球茎增殖及幼苗分化培养基为MS 6-BA1.5 NAA0.5 香蕉汁150 g/l;壮苗生根培养基为1/2MS NAA1.0 香蕉汁150 g/l,以上培养基均加入活性炭0.5 g/l。试管苗移栽基质为南方树皮,成活率在95%以上。     

大花蕙兰的组培快繁技术

大花蕙兰是兰科兰属中的一部分大花附生种类及其杂交种．是世界上栽培最普及的洋兰之一．仅次于卡特兰和蝴蝶兰。它是一种名贵的气生兰．具有雍容华贵的外貌．色彩鲜艳的花朵．享有“兰花皇后”的美誉。大花穗兰株型紧凑美观，花色有洁白色、金黄色、黄色、绿色、粉红色、玫瑰色等适合不同层次人的品味需要。花型艳丽多姿。豪华壮观。气派非凡。花期在冬、春季节适逢农历春节．观赏期可长达3个月左右。深受人们喜爱。鉴于此。加强大花蕙兰离体培养繁殖技术的研究．探索通过组织培养加快大花蕙兰繁殖速度和提高繁殖系数．解决目前市场供不应求很重要。我们通过研究试验现已探索出了一套比较成熟的组织培养快繁体系．能在较短的时间内培育大批商品苗．促进大花蕙兰的工厂化生产。现将技术介绍如下。     

植物激素和复合添加物对大花蕙兰组织培养的影响

以大花蕙兰开花植株茎尖和试管苗茎段或叶切段为外植体,诱导原球茎,并获得再生植株,筛选出原球茎诱导培养基:KC+5mg/L BA+0.5(或1.0)mg/L NAA+0.5%~1%蔗糖;原球茎增殖培养基:KC+5 mg/L BA+0.1(或0.5)mg/LNAA+0.2%蛋白胨;分化及育苗培养基:KC+0.1 mg/L NAA+10%香蕉匀汁+0.1%活性炭。     

激素和添加物对大花蕙兰组培快繁的影响

为了实现大花蕙兰优良个体的快速繁殖,本文采用外源激素配合肌醇与椰汁的方法研究了大花蕙兰茎段的不定芽分化、增殖及试管苗的生根。结果表明：MS＋6-BA1．5mg／L＋NAA0．5mg／L＋肌醇100mg／L＋活性炭1g／L＋蔗糖3％有利于大花蕙兰不定芽的分化,并可实现一步成苗;在1／2MS＋6-BA0.3mg／L＋NAA...     

外源激素对大花蕙兰花箭高度的影响

以大花蕙兰(Cymbidium)品种红霞(Cymbidium Royal Red‘Princess Nobuko’)作为试验对象,在花箭上均匀喷施不同浓度的油菜素内酯(BR)、赤霉素(GA3)、生长素(IAA),研究不同种类激素在喷施花箭时对花箭高度生长的影响。结果表明:不同激素种类对大花蕙兰花箭生长的促进作用不相同;BR喷施时,最佳浓度为0.005 mg/L,此时大花蕙兰花箭高度与CK差异极显著;GA3、IAA共同处理时,GA3浓度为400 mg/L且IAA浓度为100 mg/L时效果最好,大花蕙兰花箭高度与CK差异极显著;IAA处理时,100 mg/L是最理想的浓度。BR组的油菜素内酯是整个试验中绝对浓度最低的,但它处理的大花蕙兰花箭最大值是整个试验中最高的。IAA、GA3喷施的绝对浓度都比较大,因此可以使用混合喷施的方法,效果比单独喷施的更好。     

不同培养方式对大花蕙兰试管苗生长的影响

以大花蕙兰(Cym bidium)试管苗为试验植物材料,以树脂膜容器(CP)和玻璃培养瓶作为培养容器,比较不同培养方式对大花蕙兰试管苗生长的影响.结果表明,与常规玻璃培养容器相比,以岩棉块作为培养基支持体,并配合CP使用的培养方式(CP.RW)对促进大花蕙兰试管苗生长效果显著.     

大花蕙兰组织培养快繁技术

对大花蕙兰进行组织培养研究表明:适合供试品种原球茎诱导培养基为MS+BA1.0+NAA0.01+Acc0.3%;原球茎增殖培养基为MS+BA1.0+NAA0.1+Acc0.3%;萌芽壮苗培养基为MS+BA2.0+NAA0.1+Acc0.3%;生根培养基为MS+NAA1.0;移栽基质为1/4沙土+1/4草炭+1/4腐殖土+1/4松针。     

大花蕙兰组织培养的初步研究

以茎尖、侧芽和茎段作为外植体，研究了大花蕙兰(Cymbidium grandi florum)的组织培养。结果表明，在MS培养基中，当细胞分裂素／生长素的比值为3．0时，愈伤组织的诱导率最高，可达60％。愈伤组织诱导及芽苗分化适宜的6-BA与IBA的浓度分别为1．5mg／L和0．5mg／L，而添加IBA0．1mg／L与6-BA0．5mg／L的1／2MS培养基对于外植体的继代增殖及壮苗生根较为有利。茎尖的总体诱导率高于侧芽和茎段，上部侧芽优于基部侧芽。     

大花蕙兰组织培养和试管苗移栽技术的研究

利用组织培养技术对大花蕙兰的芽进行诱导，从4种培养基中筛选出1／2MS NAA0．4mg/L 6-BA1．5mg/L的培养基为最优的芽诱导培养基。同时，利用不同基质和营养液进行试管苗的移栽和速生栽培，得出以苔藓为移栽基质的大花蕙兰的成活率最高，达100％。无土栽培中用大量元素为Ca(NO3)2 472mg/L KNO3 809mg/L (NH4)2HPO4 153mg／L MgSO4 493mg／L的营养液配方浇灌大花蕙兰，明显促进大花蕙兰的生长。     

大花蕙兰原球茎增殖条件研究

采用原球茎（PLB）进行繁殖是大花蕙兰-种重要的再生方式。本研究以大花蕙兰原球茎为外植体进行研究,比较不同基本培养基（1／3MS、1／2MS、MS）、有机添加物（椰乳、香蕉泥、苹果汁）、活性炭和植物激素（6-BA、NAA）等因子对大花蕙兰原球茎增殖效果的影响。结果表明：1／2MS为基本培养基有利于PLB的增殖;有机添加物对PLB的增殖也有影响,其中,以椰乳的增殖效果最好,其次为香蕉泥、苹果汁;1．5g·L。活性炭可以有效减少褐变的发生;低水平的NAA（O．2mg·L-1）和较高水平的6-BA（1．0mg·L-1）对大花蕙兰PLB的增殖具有显著的促进作用。     

大花蕙兰快速繁殖技术的研究

应用组织培养技术对大花蕙兰原球茎的诱导、增殖以及丛生芽的增殖进行了研究,结果表明:随着6-BA浓度的提高,原球茎增殖率上升,以6-BA8.0mg/L处理的增殖率最高;添加6-BA5.0mg/L+NAA1.0mg/L+KT1.0mg/L可将增殖控制在丛生芽阶段;添加100g/L香蕉汁和0.5g/L活性炭有利于提高增殖率与丛生芽的生长势,降低褐化;添加1g/L活性炭有助于生根且根系生长健壮。     

大花蕙兰原球茎培养基激素配比试验初报

采用改良的配方诱导增殖大花蕙兰原球茎，不同激素配比的多个培养基配方比较试验，筛选出适于原球茎生长发育的液体和固体配方，使继代时间缩短5－10d，更有利于原球茎生长发育及分生复壮。     

不同培养基对大花蕙兰组织培养和快速繁殖的影响

以大花蕙兰初生腋芽为外植体,采用不同培养基对其进行组织培养和快速繁殖的研究。结果表明,在附加BA6、NAA1和20%CM的培养基上诱导原球茎效果较好;在1/2MS+BA10+AD10+GA1+苹果酸30+蛋白胨1g/L的培养基上原球茎增殖最佳;原球茎开始增殖后,其他成分不变,BA浓度降为2时,去除AD原球茎增殖系数最大,保留AD原球茎分化效果最好。     

大花蕙兰组织培养与快繁技术

[目的]研究大花蕙兰组织培养与快繁技术,寻求最佳培养基。[方法]以大花蕙兰的原球茎为接种材料,以MS为基本培养基,设计不同生长调节物质浓度的组合、不同激素配比,探讨了不同培养基对大花蕙兰原球茎增殖、诱导芽及生根的影响和不同激素配比对形成根的影响。[结果]大花蕙兰组织培养原球茎增殖以MS+0.1 mg/L NAA+2.0 mg/L 6-BA培养基配方最好;适合大花蕙兰组织培养原球茎诱导分化的培养基配方为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,诱导出芽率可达130%;适合大花蕙兰诱导生根的培养基配方为1/2 MS+0.2 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA,试管苗移栽后成活率为78%。[结论]6-BA浓度的增加,可明显提高原球茎的增殖,高浓度6-BA与低浓度NAA的配比较适合大花蕙兰的原球茎增殖;6-BA在1.5 mg/L时最有利于原球茎的诱导分化。     

大花蕙兰的组织培养和次生代谢物质的调控

以茎尖、茎段、叶片、根尖作为外植体,研究了大花蕙兰组织培养,同时也对次生代谢物质的调控因素进行了探讨。结果表明,茎尖是最佳的外植体;培养基MS 6-BA1.0mg/L NAA0.1mg/L对大花蕙兰愈伤组织和原球茎的诱导最好;培养基MS 6-BA1.0mg/L NAA0.5mg/L对大花蕙兰原球茎的增殖较好;激素积累和温度都能增加次生代谢物质的分泌。     

大花蕙兰原生质体分离的影响因素研究

本文以大花蕙兰为材料，采用正交试验的方法进行了取材部位，纤维素酶浓度，甘露醇浓度以及酶液各成分的浓度等不同因素对其原生质体分离影响的研究。结果表明，以叶片为材料，在１％纤维素酶＋０．３％果胶酶＋０．２％半纤维素酶＋１１％甘露醇的组合中酶解，经２５±１℃，３０ｒ／ｍｉｎ，筛网过滤，离心洗涤，漂浮纯化，获得的原生质体产量最高，可达到１０￣６个鲜重。     

大花蕙兰组织培养

山东省胶州市建立了60多公顷（1000亩）的大花蕙兰基地，前几年大花蕙兰小苗依赖韩国进口，自2003年开始，我们自己利用植物组织培养技术，成功地组培繁殖了大花蕙兰，并成功地进行大规模商品化栽培生产，现将组培方法简介如下：[第一段]