中药与抗菌药物联用对猪源大肠杆菌耐药性的抑制作用

为了探讨中药与抗菌药物联用对大肠杆菌耐药性的作用效果,本研究对河南部分地区采集的样品(50份)进行分离鉴定、生化试验及致病性试验,对分离鉴定后的致病性猪大肠杆菌选用12种中药采用K-B法进行耐药性检测,将筛选出来的中药与抗生素进行中西联用对致病性大肠杆菌做体外抑菌试验,并分析中西药联用对大肠杆菌的抑制作用。结果显示,采集的50份样品有23株菌符合大肠杆菌的分离培养特性和生化特性,且23株菌均为致病性大肠杆菌;通过耐药性检测,23株试验菌株对测试的中药均有不同程度的耐药性,其中试验菌株对甘草耐药率最高(82.6%),其次为生地(78.2%),而对黄柏(17.3%)和白头翁(21.7%)耐药性较低,具有一定的敏感性;体外抑菌试验结果发现,中药与抗生素联用均有不同程度的抑菌效果,其中黄柏、白头翁与抗菌药物联用的抑菌效果最明显。以上结果说明中药与抗菌药物联用不仅可以抑制大肠杆菌的耐药性,还可以延缓大肠杆菌耐药性的产生。     

猪致病性大肠杆菌耐药性与整合子-基因盒的相关性

为了解猪致病性大肠杆菌耐药性与整合子-基因盒的相关性,本研究采用腹腔注射法测定52株大肠杆菌对昆明小鼠的致病性;采用K-B法测定致病性大肠杆菌对15种抗菌药物的敏感性;对致病性大肠杆菌Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型整合子及其基因盒进行PCR检测及测序分析,并分析其整合子-基因盒与耐药性的相关性。结果显示,52株大肠杆菌对小鼠均具有较强致病性,96.15%分离株对15种抗菌药物表现为多重耐药性,61.54%分离株耐药性均在八重耐药以上。Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型整合子阳性率分别为84.62%,15.38%和3.85%。Ⅰ型整合子检测到dfrA17-aadA5(18.18%)、dfrA12-orfF-aadA2(4.55%)和dfrA1-catB3-aacA4(4.55%)基因盒,Ⅱ型整合子检测到dfrA1-sat2-aadA1(50.00%)基因盒,Ⅲ型整合子未检测到基因盒,基因盒阳性率与细菌耐药性不存在相关性。     

江川县鸡大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

为了解江川县不同地区鸡源大肠杆菌对临床常用抗生素的耐药情况,从不同乡(镇)的6个鸡场采集疑似鸡大肠杆菌病的17份病料进行病原菌分离鉴定、形态学观察、小白鼠致病性试验和耐药性分析。结果显示,从6个鸡场共分离到大肠杆菌17株,分离株对小白鼠有强致病性,均为强致病性菌株;分离株对15种常用抗生素显示出严重的多重耐药性,12耐1株,11耐2株,9耐3株,8耐4株,8耐以下共7株。青霉素、氨苄西林、头孢噻吩、头孢氨苄、卡那霉素、氧氟沙星、诺氟沙星、链霉素和磺胺甲恶唑的耐药率均在58.8%(10/17)以上。痢特灵、头孢呋辛钠、头孢他啶、氟苯尼考的耐药率低于17.6%(3/17),可作为江川县鸡大肠杆菌病治疗的首选药物。     

皖北地区禽源大肠杆菌的血清型鉴定与耐药性分析

为了掌握皖北地区家禽致病性大肠杆菌的优势血清型及耐药性表现,从皖北4个市8个县区32个规模化养殖场采集疑似家禽大肠杆菌病的病料64份,通过常规分离培养纯化获取31株致病性大肠杆菌,对31株致病性大肠杆菌进行血清学鉴定和耐药性分析。试验结果表明:31株致病性大肠杆菌分别属于O_(78)、O_(18)、O_(88)、O_2、O_1、O_(143)、O_4、O_(35)、和O_(141)血清型,其中O_(78)9株、O_(18)7株、O_(88)5株,共计21株,占分离株的67.74%,属于本地区的优势血清型。致病性试验结果表明,所分离的31株致病菌中,83.9%具有高致病性,12.9%具有中致病性,3.2%具有低致病性,不同血清型致病性没有明显差异。分离菌株对11种抗生素表现不同程度的耐药性,对复方磺胺甲基异噁唑、磺胺二甲嘧啶、恩诺沙星表现严重耐药,耐药比例在70%以上;对阿莫西林、链霉素、庆大霉素、卡那霉素、氟苯尼考、环丙沙星耐药比例在16%以上;对头孢噻肟、头孢唑肟、阿米卞星耐药性比例在10%以下。其中,对4、5、6种药物表现耐药比例较高,占分离株的60%以上,对3、7、8、9耐药性居中,所有菌株均表现为多重耐药性。研究结果为皖北地区家禽大肠杆菌病的疫苗防控、药物防治提供了科学依据。     

鸡源沙门菌的血清型鉴定与耐药性分析

为了解湖北省鸡源沙门菌的血清型分布及耐药性规律,对分离的56株鸡源沙门菌进行了血清型鉴定。结果显示:鸡白痢沙门菌所占比例最高(62.5%),为优势血清型;肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌所占比例也较高,分别为16.1%、10.7%。采用纸片扩散(K-B)法检测分离菌株对15种药物的敏感性,56株鸡源沙门菌对呋喃妥因均敏感,对磺胺异恶唑和阿莫西林表现为较高的耐药性(大于80%),对其他12种抗菌药物表现出不同程度的耐药性(14.3%~75%);同时多重耐药现象严重,三重以上耐药菌株占分离菌株的96.4%,其中5耐最为严重,占28.5%。     

胶东地区肉鸡大肠杆菌耐药性研究

试验通过CLSI推荐的K-B药敏纸片法,对胶东地区分离的肉鸡大肠杆菌进行耐药性研究。结果显示:169株肉鸡大肠杆菌分离株对17种抗菌药物均有不同程度的耐药性,对四环素、多西环素、阿莫西林耐药的菌株数量较多,耐药率分别为94.08%、94.08%、92.90%;对多黏菌素B耐药菌株数量最少,耐药率仅为0.59%;耐药率低于30%的有4种,依次为磷霉素、大观霉素、丁胺卡那霉素、多黏菌素B;其余10种药物耐药率在36.09%~79.89%。169株大肠杆菌中仅有一株大肠杆菌表现单一耐药性,其余168株分离菌均对抗菌药物表现出多重耐药,耐药范围在3~15种,其中对9~13种抗菌药物具有多重耐药性的分离菌共106株,占全部分离菌的62.72%。     

中药与抗菌药物联用对猪源大肠杆菌耐药性的抑制作用

为了探讨中药与抗菌药物联用对大肠杆菌耐药性的作用效果，本研究对河南部分地区采集的样品（50份）进行分离鉴定、生化试验及致病性试验，对分离鉴定后的致病性猪大肠杆菌选用12种中药采用K-B法进行耐药性检测，将筛选出来的中药与抗生素进行中西联用对致病性大肠杆菌做体外抑菌试验，并分析中西药联用对大肠杆菌的抑制作用。结果显示，采集的50份样品有23株菌符合大肠杆菌的分离培养特性和生化特性，且23株菌均为致病性大肠杆菌；通过耐药性检测，23株试验菌株对测试的中药均有不同程度的耐药性，其中试验菌株对甘草耐药率最高（82.6%），其次为生地（78.2%），而对黄柏（17.3%）和白头翁（21.7%）耐药性较低，具有一定的敏感性；体外抑菌试验结果发现，中药与抗生素联用均有不同程度的抑菌效果，其中黄柏、白头翁与抗菌药物联用的抑菌效果最明显。以上结果说明中药与抗菌药物联用不仅可以抑制大肠杆菌的耐药性，还可以延缓大肠杆菌耐药性的产生。     

牛乳源致病性大肠杆菌分离鉴定、耐药性分析及快速鉴定方法的建立

为了解福建省南坪地区某规模化奶牛场乳源致病性大肠杆菌的耐药性，本研究采用K-B纸片扩散法药敏试验分析了牛乳源大肠杆菌的耐药性，并针对大肠杆菌PhoA基因设计特异性扩增引物，通过特异性和灵敏检测，建立牛乳源致病性大肠杆菌的快速鉴定方法。结果显示，75份隐性乳房炎牛乳样本中，共分离出9株致病性大肠杆菌，分离率为12%；所有菌株对β-内酰胺类、四环素类和糖肽类共6种抗菌药物具有较强的耐药性，对氨基糖苷类和喹诺酮类抗菌药物高度敏感；PhoA基因特异性引物能准确鉴定出致病性大肠杆菌，最低检定DNA浓度为0.5ng/μL。综上，本研究建议使用庆大霉素和环丙沙星对该场奶牛进行隐性乳房炎治疗，同时建立了牛乳源致病性大肠杆菌的快速鉴定方法。     

中国鹿源性大肠杆菌的耐药性监测及血清定型

为了调查鹿致病性大肠杆菌的耐药性及流行血清型,从吉林、辽宁的16个鹿场采集321份病料进行细茵的分离和生化鉴定,结果分离到大肠杆茵302株,其中致病性大肠杆菌112株.对112株致病性大肠杆菌进行了15种抗生素敏感性试验,发现分离菌株对15种药物均有不同程度的耐药性.青霉素G对其完全没有抑制作用;先锋霉素V抑制作用最强(97.3%),其次为呋喃妥因(78.6%)、痢特灵(71.4%)、环丙沙星(68.8%)、诺氟沙星(65.1%).112株茵中,有47种耐药谱型.多数为6耐以上的菌株(80株),占供试菌株的71.4%.应用微量平板凝集试验,对分离的112株致病菌进行了血清型鉴定,鉴定共有72种血清型,其中优势血清型10种,占能定型分离致病菌株的53.7%.     

山东省禽源致病性大肠杆菌流行病学监测及耐药模式分析

禽大肠杆菌病是养禽业广泛存在的细菌性疾病,是造成禽肉产品废弃及药物治疗费用高的重要原因。为了解近年来山东省禽源致病性大肠杆菌的流行及其耐药性演化情况,对2016—2020年疑似患病禽进行致病性大肠杆菌分离鉴定和耐药性检测。从山东省12个地市的105份病料中共分离到93株致病性大肠杆菌。PCR检测发现,禽致病性大肠杆菌与其他呼吸道病原的混合或继发感染较严重,其中与H9亚型禽流感病毒等病原的二重感染率为67.74%,多重感染率为11.83%,而禽致病性大肠杆菌单一感染率仅为20.43%。耐药检测发现:分离菌株对阿莫西林、氨苄西林和多西环素的耐药率较高,分别为100%、98.21%和94.59%;对丁胺卡那霉素和阿奇霉素的耐药率较低,分别为20.43%和13.33%;对复方药物氨苄西林/舒巴坦和阿莫西林/棒酸的耐药率也相对较低,分别为40.91%和17.86%;94.62%的分离菌株对3种及以上药物产生耐药。研究表明,山东省禽源致病性大肠杆菌流行形势严峻,且耐药程度严重,应加快新抗菌药物及复合型抗菌药物研发,减少并合理使用抗菌药物,禁止滥用。     

江苏省如皋地区母猪子宫内膜炎大肠杆菌的进化分群和耐药特性

为了分析江苏省如皋地区母猪子宫内膜炎大肠杆菌(E.coli)致病性、系统进化分群和耐药情况，本试验于2019—2021年从如皋地区猪场采集疑似患子宫内膜炎母猪的阴道分泌物和脓性分泌物样品204份，采用常规的细菌分离鉴定方法和PCR方法进行E.coli分离鉴定，通过人工感染试验、三重PCR法和K-B药敏纸片法分析其致病性、系统进化分群和耐药性。结果显示，共分离得到108株E.coli,其中87株对小鼠具有致病性，致死率介于40%～100%,87株致病性E.coli中A群有12株(13.8%)、B1群有13株(14.9%)、B2群有32株(36.8%)、D群有30株(34.5%),以B2+D群流行为主(71.3%);87株致病性E.coli对阿莫西林、氨苄西林、链霉素等10种药物耐药率介于51.7%～100%,对其他药物耐药率介于9.2%～28.7%,呈现多重耐药性，以耐10(18.4%)、耐11(16.1%)和耐12(14.9%)种药物菌株为主。结果表明，从该地区分离的87株致母猪子宫内膜炎E.coli以B2+D群流行为主，呈现严重多重耐药性。本试验结果为母猪子宫内膜炎大肠杆菌流行病学调...     

鸭源大肠杆菌耐药表型及耐药基因分析

为了解鸭致病性大肠杆菌耐药表型及耐药基因的情况,选取信阳地区分离的11株致病性大肠杆菌,采用药敏纸片法对17种抗菌药物进行药敏试验,并对29种耐药基因进行PCR检测。结果显示:11株鸭源致病性大肠杆菌均表现为多重耐药,耐6、8、9种药物的现象最为普遍。在检测的29种耐药基因中,最为流行的基因是AacC4和FloR基因,两种基因检出率均为100%。耐药基因与相关耐药菌株检出率基本呈正相关。表明11株鸭源致病性大肠杆菌耐药性高,耐药谱广,携带耐药基因现象普遍,结果为鸭致病性大肠杆菌的耐药现状与临床用药提供理论指导。     

河南省濮阳市犊牛腹泻大肠杆菌分离鉴定及生物学特性分析

为了解河南省濮阳市致犊牛腹泻大肠杆菌的致病性、血清型、生物被膜形成能力及耐药性等生物学特性,对2018—2020年采集的243份腹泻犊牛肛拭子以及粪便、肝脏等病料样品进行大肠杆菌分离鉴定,采用人工感染小鼠试验、玻板凝集试验以及结晶紫微孔板法和K-B药敏纸片法,对分离的致病性大肠杆菌进行相关特性检测。结果显示：从243份病料样品中分离到87株致病性大肠杆菌,致病性大肠杆菌分离率为35.8%（87/243）;分离的致病性大肠杆菌分属于14种血清型,其中O101（18.4%）、O38（17.2%）和O142（14.9%）为优势血清型;分离的致病性大肠杆菌中,被膜形成能力强的24株（26.6%）,中等的34株（43.6%）,弱的17株（19.5%）,不形成的12株（15.4%）;分离的致病性大肠杆菌对阿莫西林、氨苄西林、链霉素10种药物的耐药率较高,均在49.4%以上。结果表明：致病性大肠杆菌在濮阳市可能呈地方性流行,O101、O38、O142为犊牛源优势血清型;该地的致病性大肠杆菌外界生存能力较强,且对多种临床常用药物产生了耐药性。因此,应采取综合防控措施,科学使用敏感抗菌药物,研制优势血清型多价疫苗,加强犊牛大肠杆菌性腹泻的防控。     

致羔羊腹泻大肠杆菌血清型鉴定与耐药性分析

为了分析白城地区致羔羊腹泻大肠杆菌流行的血清型与耐药性,从采集的腹泻羔羊粪便样品127份中分离鉴定得到了56株为致病性大肠杆菌。采用玻板凝集法和K-B药敏纸片法分别检测56株致病性大肠杆菌分离株的血清型分布和耐药性情况。结果显示,56株致病性大肠杆菌分离株属于9个血清型,致病性大肠杆菌分离株以O119、O101、O24为流行的优势血清型;56株致病性大肠杆菌分离株且呈现多重耐药性,对头孢克肟、头孢曲松两种药物的耐药率最低,在12.4%~28.6%之间;对阿米卡星、新霉素、多西环素等7种药物的耐药率在50.0%~78.6%之间;对大观霉素、环丙沙星、氧氟沙星等5种药物的耐药率在82.1%~96.4%之间。     

肠致病性大肠杆菌的分离鉴定和耐药性分析

为了给临床合理用药提供正确的指导,对江苏南京、扬州、镇江、泰州、盐城及安徽天长等地区送检的病死猪、羊、鸡、鹅等动物进行细菌分离和鉴定,调查肠致病性大肠杆菌对常用抗菌药物的耐药情况。结果分离出78株大肠杆菌,经过血清型鉴定,其中17株为肠致病性大肠杆菌,共属于8种血清型。通过对这17株肠致病性大肠杆菌进行耐药性分析,发现分离的肠致病性大肠杆菌对15种药物存在不同程度的耐药性。对多西环素、诺氟沙星、洛美沙星高度耐药,耐药率分别为100%、94.12%、94.12%,对头孢曲松钠、阿米卡星敏感性较高,敏感率分别为52.94%、41.18%。研究结果显示肠致病性大肠杆菌在动物感染的大肠杆菌病例中占有一定的比例,同时分离菌株的耐药性较为严重,给治疗增添了难度,因此应重视对肠致病性大肠杆菌的监测,根据药敏结果选用合适的药物进行治疗。     

鸡胚源大肠杆菌的分离鉴定及其致病性和耐药性分析

为了解鸡胚来源大肠杆菌的致病性和耐药性情况，本试验对山东省某白羽肉鸡孵化场6个不同批次种蛋孵化后随机抽检的174枚啄壳未出壳死胚的卵黄和胎粪进行了大肠杆菌分离。通过细菌培养、形态观察、生化试验方法鉴定大肠杆菌；通过小鼠攻毒试验和毒力基因PCR检测确定大肠杆菌分离株的致病性；利用纸片扩散法药敏试验检测大肠杆菌分离株的耐药性。结果显示，共分离鉴定大肠杆菌28株；小鼠攻毒试验结果显示，27大肠杆菌分离株对小鼠的致死率达到了50.0%以上，其中有24株超过了83.0%;在检测的14种毒力基因中，papA、papC、eaeA和vat四种基因未检出，fimC检出率最高(85.7%),另外9种毒力基因检出率介于3.6%～64.3%;菌株的致病性与携带的毒力基因数量大致呈正相关；耐药性检测结果显示，大肠杆菌分离株对10种抗菌药物具有不同程度的敏感性，耐药率介于17.9%～89.3%。结果表明，本试验分离的鸡胚源大肠杆菌绝大多数具有致病性，对临床常见抗菌药物存在不同程度的耐药。本试验结果为种鸡场加强大肠杆菌垂直传播的管理和控制以及临床用药的选择提供了参考依据。     

火烈鸟腹泻沙门菌分离鉴定、致病性及耐药性检测

为了分析火烈鸟(Phoenicopterus ruber)腹泻沙门菌(Salmonella)的致病性及耐药性情况,2016—2020年采集动物园中患腹泻火烈鸟的粪便、肛拭子和死亡火烈鸟的肝脏等病料组织102份,采用细菌分离鉴定和PCR方法进行沙门菌鉴定,采用人工感染小白鼠致病性试验和K-B药敏纸片法分别检测分离菌株的致病性和耐药表型情况。结果显示:从102份病料组织中分离得到89株沙门菌,其中75株沙门菌对小白鼠具有致病性,这75株沙门菌分离菌株对链霉素、阿莫西林、氨苄西林等14种药物耐药率在45.3%以上,对其他药物的耐药率为13.3%～22.7%,且呈现多重耐药性,耐12、11、10种药物的分离菌株最多,分别占分离菌株的16.0%、18.7%和17.3%。说明该动物园分离的火烈鸟腹泻沙门菌对小白鼠具有致病性,耐药性严重且呈现多重耐药性。     

泉州地区猪源致病性大肠杆菌的分离鉴定血清型检测与耐药性分析

为了解泉州地区猪源致病性大肠杆菌流行血清型分布及耐药性,无菌采集的患病仔猪肝脏、肛拭子和粪便等病料组织样品87份,通过细菌的分离鉴定得到了42株大肠杆菌,其中,30株为致病性大肠杆菌。利用玻板凝集法和K-B药敏纸片法分别检测30株猪源致病性大肠杆菌分离株的血清型和耐药性。结果显示,30株猪源致病性大肠杆菌分离株属于9个血清型中,定型的猪源致病性大肠杆菌分离株27株,定型率为90%(27/30),2株未鉴定出来,占分离菌菌株的64.3%(27/42),以O147和O141为该地区流行的优势血清型;30株猪源致病性大肠杆菌分离株对新霉素、环丙沙星、恩诺沙星等5种药物的耐药率在80.0%~100%之间,对克林霉素、多西环素、丁胺卡娜霉素等5种药物的耐药率在60.0%~73.3%之间;对其他的药物耐药率在33.3%~53.3%之间,且呈现多重耐药性。本研究为该地区的猪源致病性大肠杆菌病的防治提供了重要的参考价值。     

规模化猪场大肠杆菌的耐药性监测及血清流行病学调查

为了调查猪致病性大肠杆菌的耐药性及流行血清型 ,从湖北、河南、江西、安徽、浙江等省的 33个猪场采集 32 1份仔猪黄、白痢病料进行细菌的分离和生化鉴定 ,结果分离到大肠杆菌 30 2株 ,其中致病性大肠杆菌 2 76株。对 112株致病性大肠杆菌进行了 15种抗生素敏感性试验 ,发现分离菌株对 15种药物均有不同程度的耐药性 :青霉素 G对其完全没有抑制作用 ;先锋霉素 抑制作用最强 (97.3% ) ,其次为呋喃妥因 (78.6 % )、痢特灵 (71.4 % )、环丙沙星(6 8.8% )、诺氟沙星 (6 5 .1% )。 112株菌中 ,有 4 7种耐药谱型 ,多数为 6耐以上的菌株 (80株 ) ,占供试菌株的 71.4 %。应用微量平板凝集试验 ,对分离的 2 76株致病菌进行了血清型鉴定 ,鉴定共有 72种血清型 ,其中优势血清型 10种 ,占能定型分离致病菌株的 5 3.7%。     

仔猪腹泻致病性大肠杆菌分型鉴定及耐药性分析

为了解贵州省规模化养猪场腹泻仔猪致病性大肠杆菌流行情况及耐药性变化,本研究运用凝集试验、PCR和药敏纸片琼脂扩散法等方法对分离的78株致病性大肠杆菌进行血清型、毒力基因及耐药性分析。结果显示,78株致病性大肠杆菌以O138、O87血清型为主,占定型菌株的60.8%;其中62株致病性大肠杆菌检出毒力基因,检出率为79.5%,可分为8种毒力基因类型,分属肠致病性大肠杆菌(EPEC)、肠产毒性大肠杆菌(ETEC)和肠聚集性大肠杆菌(EAEC),毒力基因eaeA、elt和escV检出率较高,分别为38.5%、28.2%和21.8%;分离到的致病性大肠杆菌对β-内酰胺类药物高度耐药,均为多重耐药株,耐药种类可达8种以上。结果表明,当前贵州省规模化养猪场腹泻仔猪致病性大肠杆菌的毒力基因检出率较高且基因型复杂,耐药性严重。本试验结果可为规模化养猪场防控仔猪腹泻提供基础资料及理论依据。