枣多糖提取物对环磷酰胺所致的蛋雏鸡肠黏膜机械损伤的修复作用

选取体质量相近且健康的1日龄京红1号蛋鸡750只,适应饲养6 d后随机分为5组,每组6个重复,每个重复25只鸡。Ⅰ组为空白对照组,在8~10日龄注射0.35 mL生理盐水,饲喂基础日粮。Ⅱ~Ⅴ组在8~10日龄时注射100 mg/kg环磷酰胺(Cy),1次/d,诱导肠黏膜机械屏障损伤,分别在基础日粮中添加0,400,800,1 600 mg/kg枣多糖提取物(jujube polysaccharide extract, JPE),试验期5周。结果显示,Cy可使闭合蛋白(Claudin-1)和咬合蛋白(Occludin)两种紧密连接蛋白表达量极显著降低(P<0.01),而JPE则可以通过抑制白介素(IL)-1β和肿瘤坏因子(TNF)-α的分泌,促进黏蛋白(Mucin)-2的表达来促进紧密连接蛋白的表达,且800~1 600 mg/kg效果较好。由此得出,JPE可以显著缓解Cy所致的肠黏膜机械屏障损伤,降低空肠的通透性,抑制有害物质进入肠道,保护肠道屏障的完整性,增强免疫屏障功能。     

L-精氨酸对脂多糖刺激断奶仔猪肠黏膜免疫屏障的影响

本试验旨在研究L-精氨酸(L-Arg)对脂多糖(LPS)刺激仔猪肠黏膜免疫的影响。选用24头21日龄断奶仔猪,随机分为4个处理,即对照组(基础日粮)、LPS组(基础日粮+LPS)、0.5%Arg组(基础日粮添加0.5%Arg+LPS)、1.0%Arg组(基础日粮添加1.0%Arg+LPS)。结果表明:LPS刺激损伤小肠黏膜结构;Arg则有效阻止LPS应激导致的肠道损伤,维持肠黏膜结构的完整性;LPS刺激显著增加仔猪小肠肥大细胞数(P<0.01);1.0%Arg则减少肥大细胞数(P<0.05);LPS刺激降低回肠IgA分泌细胞、CD4+、CD8+阳性细胞数(P<0.05),而0.5%Arg则增加IgA分泌细胞、CD4+、CD8+阳性细胞数(P<0.05)。这表明LPS刺激可导致仔猪小肠黏膜结构受损,免疫屏障功能降低,而日粮添加精氨酸可有效阻止LPS对肠黏膜屏障的损伤,促进及改善肠黏膜结构及免疫屏障功能。     

桦木酸对环磷酰胺致小鼠肠道氧化损伤的影响

旨在研究桦木酸(betulinic acid,BA)对环磷酰胺(cyclophosphamide,Cy)致小鼠肠道氧化损伤的影响。将健康雄性昆明小鼠随机分为5组:对照(NC)组、Cy组、0.5mg·kg~(-1) BA组、5.0mg·kg~(-1) BA组、50.0mg·kg~(-1)BA组。NC组和Cy组灌服1%的可溶性淀粉,其余各组按不同剂量的BA混悬于可溶性淀粉中灌服,1次·d-1,连续14d后,除NC组注射生理盐水外,其余4组均连续2d腹腔注射Cy(50mg·kg~(-1))诱导肠氧化损伤模型。检测肝、脾和胸腺指数,肠黏膜中分泌型免疫球蛋白α(secretory immunoglobulin a,SIgA)水平,血清和肠道中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量变化。结果表明:BA预处理后,能缓解Cy引起的肝、脾和胸腺指数下降,促进肠黏膜SIgA的分泌,不同程度缓解了Cy引起小鼠血清和小肠MDA、GSH含量的升高,以中剂量效果最佳,BA对SOD活力无影响。结果表明BA能改善Cy引起的小鼠肠道脂质过氧化及提高肠道中SIgA的分泌,对Cy诱导的肠道氧化损伤有预防性的保护作用。     

中链脂肪酸对脂多糖诱导的断奶仔猪肠黏膜免疫屏障损伤的保护作用

本试验旨在研究中链脂肪酸对脂多糖(LPS)诱导的断奶仔猪肠黏膜免疫屏障损伤的保护作用。将24头(21±1)d、体重为(9.0±0.7)kg的杜×长×大三元杂交断奶仔猪随机分为4个处理组,每个处理组6个重复,每个重复1头猪。试验采用2×2因子设计,2个主因子分别为日粮处理(中链脂肪酸或玉米油)和免疫应激(LPS或NaCl)。预试7 d,试验期为21 d。试验第21天,每个日粮组3个重复注射100μg/kg体重(BW)的LPS,另外3个重复猪注射等量的生理盐水,4 h后屠宰取肠道样品待测。结果表明:中链脂肪酸显著提高了空肠绒毛高度(P0.05),降低了空肠、回肠固有层细胞密度和回肠PP结细胞密度(P0.05);中链脂肪酸还缓解了LPS刺激导致的空肠杯状细胞数的升高和上皮间淋巴细胞数的减少。综上,日粮中添加中链脂肪酸有保护仔猪肠黏膜免疫屏障的功能。     

饲粮添加共轭亚油酸对肉仔鸡肠道黏膜免疫反应的影响

本试验旨在研究饲粮添加共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,CLA)对肉仔鸡肠道黏膜免疫反应的影响。试验选用72只1日龄健康、体重相近的爱拔益加(AA)雄性肉仔鸡,随机分配到对照组和CLA组,分别饲喂基础饲粮和在基础饲粮中添加1%CLA的饲粮,每组6个重复,每个重复6只鸡。21日龄屠宰取样。结果表明:CLA组肉仔鸡空肠食糜分泌型免疫球蛋白A(secretory immunoglobulin A,SIgA)含量(P<0.01)和空肠SIgA基因mRNA表达水平(P<0.01)均高于对照组;饲粮添加CLA显著提高肉仔鸡空肠过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因mRNA表达水平(P<0.01),但转化生长因子β4(transforming growth factor-β4,TGFβ4)基因mRNA表达水平在2组之间没有显著差异(P>0.05);CLA组肉仔鸡Peyer氏结CD8+T细胞亚群百分数(P<0.01)和淋巴细胞转化率(P<0.05)均显著高于对照组。由此可见,饲粮添加1%CLA提高了21日龄肉仔鸡空肠SIgA水平,激活PPARγ可能是CLA调节SIgA表达的途径之一。饲粮添加1%CLA影响21日龄肉仔鸡空肠黏膜细胞免疫功能。     

玉屏风煎剂对雏鸡十二指肠黏膜的免疫调节作用

为了研究玉屏风煎剂对雏鸡十二指肠黏膜的免疫调节作用,试验将120只1日龄雏鸡随机分成4组,分别为玉屏风煎剂低、中、高剂量组和对照组,每组30只。7日龄时,雏鸡采用滴鼻和点眼方法2倍量接种LaSota系疫苗,21日龄重复免疫一次。首次免疫前2天,玉屏风煎剂低、中、高剂量组分别按0.125,0.25,0.5 g/mL三个浓度灌服玉屏风煎剂1 mL/只,对照组灌服等量生理盐水,连续灌服5 d。各试验组于10,30,50日龄时分别剖杀10只并摘取十二指肠,测定各组雏鸡十二指肠单位面积IgA分泌细胞的阳性表达率以及分泌性免疫球蛋白A(SIgA)的含量。结果表明:与对照组相比,中、高剂量玉屏风煎剂能显著或极显著提高雏鸡十二指肠IgA分泌细胞的阳性表达率及SIgA含量(P0.05或P0.01)。说明玉屏风煎剂可增强雏鸡十二指肠黏膜免疫功能,以0.25,0.5 g/mL剂量为佳。     

饲料氮营养素水平对断奶仔猪回肠黏膜屏障的影响

为了检测日粮氮营养素水平对断奶仔猪肠道形态和黏膜免疫功能的影响选用健康杜×长×大三元杂交断奶25日龄仔猪12头,分别饲喂17.09%(低蛋白质组)和20.05%(NRC标准)的粗蛋白水平日粮,饲养至第25天采样。结果显示:低蛋白组和标准日粮组肠绒毛高度、隐窝深度、绒毛高度与隐窝深度比值,以及细胞连接蛋白(claudin-1和E-cadherin)的表达水平和绒毛中杯状细胞的数量差异均不显著(P0.05)。同时,低蛋白日粮组中回肠Ig A分泌细胞的面积和上皮内淋巴细胞(IELs)数量与高蛋白日粮组一致。结果表明:在NRC标准日粮基础上适当降低粗蛋白水平,不影响断奶仔猪的肠黏膜屏障功能和黏膜免疫水平。     

表皮生长因子和胰岛素样生长因子-Ⅰ对断奶仔猪免疫功能的影响

选取21日龄断奶长白仔猪37头,按表皮生长因子(EG F)、胰岛素样生长因子-Ⅰ(IG F-Ⅰ)、基础日粮、自然哺乳随机分为4组,每组3重复,每个重复3头。EG F和IG F-Ⅰ的剂量为17.86μg/d,研究其对早期断奶仔猪免疫功能的影响。结果表明:EG F组和IG F-Ⅰ组脾淋巴细胞转化率均极显著(P<0.01)高于基础日粮组,空肠后段肠黏膜SIgA含量极显著(P<0.01)高于基础日粮组而且EG F组脾淋巴细胞转化率高于IG F-Ⅰ组。EG F组小肠各段黏膜上皮间淋巴细胞数极显著(P<0.01)高于基础日粮组;IG F-Ⅰ组空肠和回肠黏膜上皮间淋巴细胞数极显著(P<0.01)高于基础日粮组;EG F组回肠黏膜上皮间杯状细胞数极显著(P<0.01)高于基础日粮组;IG F-Ⅰ组回肠黏膜上皮间杯状细胞数极显著(P<0.01)低于自然哺乳组。表皮生长因子和胰岛素样生长因子-Ⅰ能提高早期断奶仔猪的免疫功能。     

表面表达猪水肿病毒素保护性抗原重组大肠杆菌激发仔猪黏膜免疫反应的研究

以菌体表面表达猪水肿病毒素保护性抗原(SLT-ⅡeB)的重组大肠杆菌(PZBSPAX),对1日龄、15日龄仔猪口服免疫,用ELISA法对口服免疫后10 d、15 d、30 d仔猪肠黏液中特异性SIgA和血清中特异性IgA、IgG进行检测,结果显示口服免疫猪能产生较高水平的肠黏液特异性SIgA及血清特异性IgA和IgG,证明该重组菌能有效激发肠道黏膜免疫反应,同时也能激发全身性体液免疫反应.     

乳酸杆菌对鸡肠黏膜SIgA分泌的影响

试验采用体外培养和动物饲养试验,研究了乳酸杆菌对鸡肠黏膜SIgA分泌的影响。取0日龄SPF鸡剖杀,在无菌条件下取出肠黏膜,培养肠黏膜上皮细胞,使其与乳酸杆菌混合培养,然后镜检。1日龄AA肉鸡随即分为2组,试验组喂服菌液10d。试验组和对照组分别在10、20、30、40、50日龄时随机取15只剖杀,并用辣根过氧化物酶标记兔抗鸡IgA检测,TMB显色,测定SIgA滴度。结果表明:乳酸杆菌对鸡肠道上皮细胞具有较强的粘附作用,能够提高鸡肠黏膜SIgA的滴度,增强鸡的抗病能力。     

高锌对早期断奶仔猪肠黏膜屏障和肠上皮细胞紧密连接蛋白表达的影响

为研究高剂量氧化锌对早期断奶仔猪肠黏膜屏障的影响并探讨其作用机理,选取54头21日龄断奶仔猪按胎次一致、体质量相近和公母各半方法分为3组,每组3个重复,每个重复6头.哺乳组仔猪继续哺乳至35日龄,基础日粮组饲喂基础日粮(110 mg·kg~(-1)锌),高锌组饲喂基础日粮+3 000 mg·kg~(-1)锌(氧化锌).分别于28和35日龄取样测定血浆D-乳酸、内毒素含量和二胺氧化酶(DAO)活性、肠系膜淋巴结细菌移位率以及结肠内容物大肠杆菌数,并分析回肠上皮细胞紧密连接蛋白Occludin和ZO-1的表达.结果显示:与哺乳组相比,断奶仔猪饲喂基础日粮,28日龄时血浆中D-乳酸、内毒素含量和DAO活性显著升高(P<0.05),至35日龄时,肠黏膜仍维持较高的通透性;添加高锌抑制上述3个指标的升高,进而阻止肠黏膜通透性的增加,达到与哺乳组相同的效果;与哺乳组相比,基础日粮组和高锌组在28和35日龄时均存在肠系膜淋巴结细菌移位现象,但是高锌组低于基础日粮组(P>0.05);28日龄时,基础日粮组结肠内容物大肠杆菌数大于哺乳组(P<0.05),与高锌组比较差异不显著(P>0.05),35日龄时各组间差异不显著(P>0.05);与哺乳组相比,仔猪断奶后饲喂基础日粮使Occludin和ZO-1mRNA丰度以及ZO-1的表达下降(P<0.05),高锌组Occludin和ZO-1 mRNA丰度、ZO-1蛋白表达均显著高于基础日粮组(P<0.05).结论:仔猪断奶后肠黏膜通透性增加,肠上皮细胞紧密连接蛋白表达下降;而添加高剂量氧化锌可抑制细菌在肠道黏膜上的黏附,阻止上皮细胞渗透性增加,能保护肠黏膜屏障功能.     

肠粘膜免疫与元素硒关系的研究

实验选用24只1日龄健康xx鸡为动物模型,随机分成3组,每组8只,分别饲喂添加含有不同剂量的硒日粮45天后,观察日粮中不同硒水平互作下鸡肠黏膜结构及黏膜免疫相关细胞的形态、结构、数量和分布的变化,并探讨日粮中不同硒对鸡肠道消化吸收和免疫屏障功能的影响。本实验采用硒的3水平试验设计,各实验组日粮中硒含量分别0.08 mg/kg、0.15 mg/kg、5mg/kg。实验表明:饲料中加入常硒(0.15mg/kg)是维护正常的鸡肠道消化吸收和屏障功能的最佳剂量,而饲料中硒缺乏或过高时,对鸡肠道消化吸收和屏障功能有不同程度的损伤作用,低硒和高硒可加强其毒害作用,使肠道消化吸收和黏膜屏障功能的损伤加重。     

共生益生菌酵素制剂对断奶仔猪肠道形态和肠黏膜免疫能力的影响

试验旨在探究共生益生菌酵素制剂对断奶仔猪肠道形态和肠黏膜免疫能力的影响。选取28日龄断奶体重为(10.10±0.47)kg的杜×长×大三元杂交仔猪180头，随机分为对照组、共生益生菌酵素组(FAM组)、抗生素组，每组3个重复，每个重复20头。FAM组、抗生素组分别在基础日粮中添加0.1%FAM、复合抗生素，试验期30 d。结果表明：与对照组相比，添加0.1%FAM可以提高断奶仔猪小肠绒毛高度/隐窝深度比值(P<0.05)，改善断奶仔猪肠道形态，增强肠黏膜总抗氧化能力(P<0.05)；增加回肠派尔氏结节(PPs)数目以及CD4⁺T细胞和IgA⁺浆细胞数量(P<0.05)，提高回肠内容物分泌型免疫球蛋白A(SIgA)含量(P<0.05)，且部分效果优于抗生素。由此可见，FAM可以改善断奶仔猪肠道形态和肠黏膜免疫功能维护仔猪肠道健康，具有抗生素的同等功效。     

牛磺酸对热应激肉鸡肠道SIgA和细胞因子的影响

探索在热应激条件下日粮中添加牛磺酸对肉仔鸡分泌型免疫球蛋白A(SIgA)和细胞因子的影响。选用150只1日龄健康的艾维茵肉仔鸡,随机分成5组。I组饲喂基础日粮,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和V组分别在基础日粮中添加0.05%、0.10%、0.15%和0.20%的牛磺酸的试验饲粮。试验期28 d。在试验第14天、第28天和第42天,测定各试验组小肠黏膜SIgA、血浆中白介素-1(IL-1)和肿瘤坏死因子(TNF-α)含量。结果表明:日粮添加牛磺酸能够显著提高热应激条件下肉鸡小肠黏膜SIgA含量,降低血浆中IL-1和TNF-α含量(P0.05)。在日粮中添加一定水平的牛磺酸可改善热应激肉鸡肠道免疫性能。     

葡萄糖酸替代饲用抗生素对黄羽肉鸡免疫器官指数及小肠黏膜免疫的影响

本试验旨在研究基础日粮中添加葡萄糖酸替代饲用抗生素对黄羽肉鸡免疫器官指数及小肠黏膜免疫的影响。将180只1日龄体重相近的健康黄羽肉鸡随机分为5个处理组,每个处理3个重复,每个重复12只鸡。阴性对照组饲喂基础日粮;阳性对照组在基础日粮基础上添加饲用抗生素(0.3 g/kg那西肽+0.25 g/kg硫酸粘杆菌素预混剂);试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别在基础日粮基础上添加1、2、3 g/kg的葡萄糖酸。结果表明,基础日粮中添加葡萄糖酸替代饲用抗生素提高了十二指肠黏膜蛋白质中SIgA含量和十二指肠黏膜主动免疫功能;提高了77d黄羽肉鸡空肠、回肠肠黏膜蛋白质中溶菌酶含量及回肠内容物中乙酸、柠檬酸、琥珀酸、丙酸及总酸的浓度;对鸡免疫器官指数、小肠内容物中细菌总数总体影响不明显。由此可见,葡萄糖酸替代饲用抗生素改善了黄羽肉鸡肠黏膜免疫功能。     

分泌性免疫球蛋白A与肠道黏膜免疫的关系及其分泌的营养调控

分泌性免疫球蛋白A(SIgA)是由J链连接成的二聚体免疫球蛋白A(IgA)与分泌片段结合后形成的复合物。肠道内的SIgA是肠道黏膜免疫中的重要环节之一。SIgA可维持肠道黏膜内环境稳态,调控肠道内源微生态,并在黏膜上皮通过干扰病原体与上皮细胞受体结合,阻止病原体附着宿主细胞,影响病原菌毒力及免疫排异,从而阻止病原体的传播和进一步的感染,因而在免疫防御中起着非常重要的作用。营养因子(如脂肪酸、氨基酸、维生素等)在机体受到病原菌入侵或应激的情况下,可显著促进肠道SIgA的分泌,提高机体对病原菌的抵抗能力,在一定程度上改善应激动物的生产性能。     

玉屏风多糖对小鼠肠黏膜免疫应答和免疫损伤的调控作用

为研究玉屏风多糖对肠黏膜免疫应答和免疫损伤的调控作用,本试验以黄芪多糖为对照药物,以正常小鼠和免疫抑制小鼠为动物模型,150只SPF小鼠随机分为空白对照组、环磷酰胺免疫抑制对照组、玉屏风多糖治疗组、玉屏风多糖阳性对照组和黄芪多糖对照组,每组30只。多糖剂量为200mg/Kg/d,连续灌服7d,环磷酰胺剂量为80mg/Kg,隔日腹腔注射。检测SIgA、IL-2、TGF-β1和IL-6以及小肠黏膜相关淋巴组织的变化。结果发现,玉屏风多糖和黄芪多糖均可显著提高小鼠SIgA、IL-2、TGF-β1和IL-6水平(P<0.05或P<0.01),小鼠肠上皮细胞增生,杯状细胞增多,肠绒毛长度、宽度和隐窝深度均显著增加(P<0.05或P<0.01),肠上皮细胞间淋巴细胞和黏膜固有层淋巴细胞数量明显增多(P<0.05或P<0.01),PP结体积增大,淋巴细胞增生。与黄芪多糖比较,玉屏风多糖对肠黏膜免疫应答的正向调节作用更为明显。对免疫抑制小鼠,玉屏风多糖可有效拮抗环磷酰胺诱导的SIgA降低(P<0.05),并可通过调节TGF-β1(P<0.05)和IL-6(P<0.01)水平,调控Th1/Th2 漂移状态,缓解环磷酰胺所致的免疫损伤,对免疫抑制小鼠小肠黏膜相关淋巴组织也有明显的保护和恢复作用。结果表明,玉屏风多糖可从多方面调控小鼠肠黏膜的免疫应答,可有效增强肠黏膜免疫功能,缓解和改善免疫抑制小鼠肠黏膜免疫屏障的损伤。     

α-酮戊二酸对脂多糖应激仔猪肠黏膜能量代谢的影响

试验研究13粮添加1%α-酮戊二酸(AKG)对多次脂多糖(LPS)刺激仔猪肠黏膜能量代谢的影响.选用24头体重(7.25±0.23)kg健康杜洛克×长白×大白断奶仔猪,随机分成3个组(对照组、LPS组、AKG组),每组8个重复,每个重复1头猪.对照组和LPS组饲喂基础日粮+1%淀粉,AKG组饲喂基础日粮+1%AKG,在试验第10天、第12天、第14天和第16天分别在LPS组和AKG组仔猪的腹膜注射80 μg/kg LPS,对照组注射相应剂量的灭菌生理盐水.第17天仔猪麻醉后进行屠宰,刮取肠黏膜检测腺苷酸水平变化.试验结果显示,日粮中添加AKG可显著提高十二指肠黏膜二磷酸腺苷水平(P<0.05),并有效缓解LPS刺激导致的十二指肠和空肠黏膜的三磷酸腺苷和腺苷酸池水平的降低,提高空肠和回肠黏膜能荷水平.结果表明,仔猪日粮中添加1%AKG可以缓解LPS应激引起的肠黏膜能量代谢障碍,有利于肠黏膜屏障保护.     

甘露寡糖对坝上长尾鸡早期生长性能、免疫性能和肠道黏膜形态的影响

为研究甘露寡糖对坝上长尾鸡早期生长性能、免疫性能和肠道黏膜形态的影响,选择1日龄坝上长尾600只,随机分为4组。对照组饲喂基础日粮,试验1、2、3组分别在基础日粮中添加0.5 g/kg、1 g/kg、1.5 g/kg甘露寡糖。测定1～15日龄和16～30日龄日增重、日采食量和料重比,试验期末制作肠道切片,测定十二指肠、空肠和回肠黏膜绒毛高度、隐窝深度,计算绒毛高度与隐窝深度比值,测定血清IgA、IgM、IgG和肠道SIgA含量。结果显示:试验3组中的1～15和16～30日龄日增重分别比对照组提高15.04%和10.58%、料重比分别降低11.57%和4.81%;十二指肠、空肠和回肠绒毛高度极显著高于试验1组和对照组(P0.01);空肠和回肠V/C值极显著高于试验1组和对照组(P0.01);血清IgA、IgG及肠道黏膜SIgA含量极显著高于对照组(P0.01),IgM含量显著高于对照组(P0.05)。由此可见,日粮添加1.5 g/kg甘露寡糖能显著提高坝上长尾鸡早期的生长性能和免疫性能,降低料重比,对肠道黏膜具有保护作用。     

芪蓝四君子汤对雏鸡小肠IgA分泌细胞和SIgA(分泌型IgA)的影响

雏鸡在新城疫La Sota系冻干苗进行口腔免疫时,分别按0.125,0.250,0.500 g/mL 3个剂量灌服芪蓝四君子汤1 mL,连续10 d。于20,40,60日龄时剖杀摘取各段肠管,免疫组织化学方法检测十二指肠、空肠、Peyer's斑单位面积IgA分泌细胞的变化,同时通过ELISA方法测定空肠中SIgA的含量。结果表明,与对照组相比,芪蓝四君子汤能显著提高雏鸡小肠IgA分泌细胞的阳性表达率及空肠SIgA抗体水平,揭示芪蓝四君子汤能提高新城疫的免疫原性,增强雏鸡的黏膜免疫力,是有效的口服佐剂。