庄河地区出口水产品微生物检验分析

对庄河地区2012—2017年60余家水产品加工企业的出口水产品进行了金黄色葡萄球菌、菌落总数、大肠杆菌/大肠菌群、沙门氏菌、副溶血性弧菌、单核细胞增生李斯特氏菌、霍乱弧菌的检测,共检验鱼类制品146 775批,贝类制品3 786批。结果表明,鱼类制品和贝类制品的金黄色葡萄球菌、菌落总数、大肠杆菌/大肠菌群的检验合格率均较高分别为99.9%,99.8%,99.9%,99.9%和99.9%,99.6%,99.7%,99.9%;沙门氏菌、副溶血性弧菌、单核细胞增生李斯特氏菌、霍乱弧菌均未检出。庄河地区出口水产品微生物检验情况令人满意。     

ACAS-PT404(2017)奶粉中总砷的测定能力验证结果分析

通过参加实验室比对的能力验证活动,对实验室检测能力进行综合性考核。2017年4月,中心参加了中国检验检疫科学研究院测试评价中心组织的奶粉中总砷的测定能力验证计划,通过电感耦合等离子体质谱法、原子荧光光度法2种不同的方法进行结果验证,最终得出奶粉中总砷的含量为0.27 mg/kg,结果满意。     

单核细胞增生李斯特菌生物学毒理特性及防控方法研究进展

单核细胞增生李斯特菌是一种能引起人畜共患的食源性致病菌。人们食用被单核细胞增生李斯特菌污染的食物后能引起李氏杆菌病,会导致胃肠炎、脑膜炎、败血症等疾病。与其他食源性疾病相比,单核细胞增生李斯特菌具有较高的致死率,可达20%～30%,严重阻碍了食品工业的发展。因此,对单核细胞增生李斯特菌的研究日益受到人们的关注。对单核细胞增生李斯特菌的生物学特性、流行病学、主要毒力因子和防控方法进行综述,为单核细胞增生李斯特菌的研究提供理论依据。     

单核细胞增生李斯特菌 sRNA 伴侣分子 hfq的基因克隆、表达及纯化

为克隆、表达单核细胞增生李斯特菌sRNA分子伴侣蛋白hfq基因,并纯化重组蛋白,通过PCR的方法从单核细胞增生李斯特菌基因组DNA中扩增出hfq基因,将扩增产物克隆于pMD18-T载体中,测序验证后,再将hfq基因亚克隆至表达载体pET-32a（＋）中,成功构建pET-32a（＋）-hfq原核表达载体。然后,转化至大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞中,通过IPTG进行诱导表达,对表达蛋白进行可溶性分析,并采用Ni-NTA纯化目的蛋白。结果显示：克隆的hfq基因全长234 bp,编码77个氨基酸,通过SDS-PAGE可以检测到27 kDa的蛋白特异性条带;并从上清中纯化得到了Hfq融合蛋白。为进一步研究该蛋白的生物学功能奠定了基础。     

肉制品中产细菌素乳酸菌的分离及鉴定

从北京市售肉制品中分离筛选出1株具有抑菌活性的乳酸菌菌株L5-6,对单核细胞增生李斯特氏菌ATCC54003的生长具有良好的抑制作用。排除有机酸、过氧化氢的干扰后,确定该抑菌物质为蛋白类物质,即细菌素。16SrRNA序列同源性分析鉴定L5-6为戊糖片球菌。对L5-6中编码细菌素的结构基因进行克隆,推断L5-6所产的细菌素是片球菌素。片球菌素应用于肉制品防腐具有潜在的开发价值和广阔的市场前景,课题组对L5-6进行了初步的研究,为开发天然安全的食品保鲜防腐剂奠定基础。     

砀山梨黑斑病分子检测技术研究

黑斑病是砀山梨上最重要的病害之一,建立一套砀山梨黑斑病的分子检测技术对该病害的早期及时防治及口岸检验检疫具有重要的意义。本研究通过分析比较砀山梨黑斑病菌与其他19种不同真菌的ITS序列,设计了1对特异性引物,能够从该病菌中特异性地扩增出1条398 bp的条带,而其他测试真菌中不能扩增出该条带。在灵敏度检测中,该菌的基因组DNA检出限为10 pg/μL,同时在发病的砀山梨果实组织样品和接种梨黑斑病菌的梨果实组织样品中检测出梨黑斑病菌。因此,可以将该对引物用于梨黑斑病早期诊断及病菌的PCR检测,为指导果农及时进行药剂防治提供有效的技术支撑。     

国内外水产品药物残留检测能力验证比对分析与发展建议

为进一步促进中国水产品药物残留检测能力验证的发展,提高中国水产品药物残留检测能力验证的水平、促进国际及国内各部委间组织的能力验证互认,笔者概述了国际著名权威机构FAPAS、APLAC及国内CNCA、中国合格评定委员会(CNAS)、中国检科院测试评价中心(ACAS)、农业部等对水产品药物残留检测能力的验证情况,比对分析了中国与国际权威机构在能力验证考核项目、样品制备方法、检测方法要求、结果反馈等方面的差异,并针对中国在水产品药物残留检测能力验证方面存在的问题提出了加强新参数项目研究、丰富样品制备考核手段、改进结果评定方法、加强技术交流等建议,以期为完善中国水产品药物残留检测能力验证活动提供参考。     

快速检测三聚氰胺激光仪问世

中国检验检疫科学研究院2月28日宣布，该院利用激光拉曼技术，自主研发了用于现场快速检测三聚氰胺的激光拉曼光谱仪以及配套试剂。使用该仪器和配套试剂，能定量检测出液态奶中高于含量5×10^-7的三聚氰胺，准确率达100％，每个样品检测仅需0．5min。     

北京口岸首次截获检疫性有害生物入侵果实蝇

<正>从国家质量监督检验检疫总局获悉,近日,北京首都机场检验检疫局从一名入境中国旅客携带的芒果中截获了检疫性有害生物——入侵果实蝇,经查询,这是北京口岸首次截获和检出该种外来有害生物。在首都国际机场旅检现场,检验检疫人员从这名旅客随身携带的行李中查获芒果2公斤,在对截获物进行现场检疫时发现,芒果有明显的虫害痕迹,并发现幼虫数十头;后取样送北京检验检疫局检验检疫技术中心植物检疫实验室进行饲养和鉴定。实验室饲养为成虫后鉴定并经专家复核,确定为检疫性有害生物——入侵果实蝇。     

我国首次截获芦笋茎枯病菌

<正>日前,吉林检验检疫局持续加大邮包查验力度,截获花卉、牛奶、肉制品等多批禁止进境物,并从截获的样品中检出4份致病性真菌,其中芦笋茎枯病菌为全国首次检出。据介绍,该局邮检工作人员截获来自韩国的4份(花卉、柿子、梨)和香港的1份(活体植物枝条)样品中,有4份检出致病性真菌,其中包括检疫性真菌——大丽轮枝菌(又名棉花黄萎病菌,从韩国花卉中检出)、串珠镰孢霉、炭疽菌、果生链核盘菌、梨形毛霉、芦笋茎枯病菌、球黑孢。经查询,以上病菌均为吉林检验检疫局首次检出,其     

噬菌体裂解酶结构域重构及其裂解功能分析

为了获得广谱噬菌体裂解酶,根据裂解酶结构及种属特异性,将金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶Ply187CHAP及酶K的SH3b重新合成,并同时将末端引入单核细胞增生性李斯特菌噬菌体裂解酶LysZ5结合结构域,构建具有能够裂解金黄色葡萄球菌及李斯特菌的多功能裂解酶。SDS-PAGE结果表明,融合结构域的重构酶蛋白Ply187KS-Z5大小约为58 kDa,其在金黄色葡萄球菌及李斯特菌平板表面能够形成透明裂解圈。分析对金黄色葡萄球菌及李斯特菌在生肉表面的裂解活性表明,嵌合酶蛋白Ply187-KS能够有效裂解金黄色葡萄球菌,作用1 h后菌落数降至2.16 log,而重构酶Ply187KS-Z5不仅裂解金黄色葡萄球菌并同时能够裂解李斯特菌,且重构酶针对金黄色葡萄球菌噬菌体的裂解活性与Ply187-KS裂解效果相当,从而表明裂解酶结合结构域重组将是获得高效广谱裂解酶的新途径。     

国际植保公约履约研讨会在京召开

<正>由全国农技中心组织的国际植保公约履约专家研讨会于2012年12月18日在北京召开。来自中国农业科学院、中国检验检疫科学研究院、中国林业科学院、中国农业大学、华中农业大学、南京农业大学、上海出入境检验检疫局、山东省植物保护总站、山西省植保植检站、北京市植物保护站及广东省农业植物有害生物预警控制中心等科研、教学、推广单位的专家共20多人参加了会议。全国农技中心张跃进首席专家与会并对会议进行总结。     

我国口岸首次截获木薯细菌性萎焉病菌

<正>据国家质检总局动植物检疫监管司通报,日前,深圳皇岗检验检疫局工作人员从入境旅客携带的木薯上截获木薯细菌性萎焉病菌,这在全国口岸尚属首次。据悉,该批木薯由一名来自南非的旅客携带入境,重55公斤。经现场检疫,该批木薯表面有大量虫孔,部分木薯已经发芽。实验室技术人员从截获的该批木薯样品中,检出了木薯     

食品微生物DNA能力验证样品的均匀性和稳定性研究

食品微生物DNA能力验证,是利用DNA检测方法,通过实验室间微生物检测结果的比对来确定实验室检测能力的活动。以沙门氏菌(Salmonella)基因组DNA为测试目标,开展了实验室间食品微生物DNA检测能力验证样品的制备,研究了DNA检测能力验证中样品的均匀性和稳定性,以期为食品微生物DNA能力验证的运作提供指导。     

云南省烟草青枯病的侵染动态

为了指导烟草青枯病的测报和防治,采用定期挖根调查采样和ELISA检测方法,对云南省烟草青枯病的侵染动态进行了研究。移栽后每周挖根调查结果和根、茎部样品的检测结果表明,在文山州青枯病重病田块,移栽后第5周根部样品首先检测出青枯雷尔氏菌（Ralstonia solanacearum,简称青枯菌）阳性,个别烟株根部出现黑色坏死症状;移栽后第7周根部样品青枯菌检出率达到50%左右、根部黑色坏死发病率开始快速上升,茎部无明显症状;移栽后第9周,根部发病率达到50%左右、个别烟株茎部出现黑色坏死症状。移栽后第12周,茎部青枯菌检出率、根发病率和茎部发病率均达到80%以上。根部样品青枯菌检出阳性、烟株根部显症、烟株茎部显症表现出一定的时间顺序（先后间隔约21d）。根青枯菌检出阳性时期和根黑色坏死的始发期可作为确定第一次施药时期的依据。对ELISA检测的验证试验结果表明,ELISA检测为青枯菌阳性的样品,可分离到典型青枯菌菌落,分离物ELISA检测同样为青枯菌阳性。     

食品（水产品）中副溶血性弧菌的能力验证及分析

通过能力验证,能够提升试验人员水平,加强对淡水养殖中副溶血性弧菌污染防治指导。前处理方法按照组织方发放的参试指导书,后续检测依据GB 4789.7—2013定性法。结果表明,18-R696及18-T441均未检出。符合组织方要求,结果评价满意,已收到证书。     

梨小食心虫实时荧光PCR检测技术的建立与验证

梨小食心虫（Grapholitha molesta）为我国常见蛀果性害虫,与其他梨果害虫的组织形态非常相似,仅凭形态学特征难以区分,需建立实时荧光PCR检测方法在基因水平上进行鉴定。通过样品核酸提取与质控,设计并验证荧光探针特异性,进一步通过优化反应条件和反应体系,结合特异性分析、灵敏性比对和盲样测试开发了梨小食心虫实时荧光定量PCR检测方法。结果表明：方法特异性强,重复性好（重复间变异系数为0.055~0.359）,可靠性高（标准曲线中的R2值为0.991）,检出限低（最低检出限3 pg/μL）,盲样测试结果与形态学鉴定结果一致,能满足日常检验检疫需求。该操作方法简单易行,检测时限短（约3 h）,通量高,特别适合于大批量的抽样检查,可应用于梨小食心虫的检疫工作。     

新疆枸杞农药残留及重金属污染物风险评估

开展新疆枸杞农药残留及重金属污染物风险评估研究,为枸杞消费、农药残留监管和重金属污染水平修订提供科学依据,并提出相应的预防措施。对采自主产区的25个枸杞样品进行农药残留及重金属检测,检测的34种农药中有12种农药被检出残留,检测的25个样品中有12个样品被检出农药残留,汞、砷、铅、镉均未超过国家相关标准最大允许限量值,明确砷、铅、镉为重点防控因子。     

香菜根提取液在秋葵饮料中的应用

研究了香菜根提取液在秋葵饮料中的应用,结果表明,香菜根提取液以添加量1%加入秋葵饮料最佳,秋葵饮料中抗坏血酸≥1.4 mg/100 m L (以AA计),可溶性固形物≥7.5%(以20℃折光法计)。检测结果表明,秋葵饮料中菌落总数的数值≤100 CFU/m L,大肠菌群的数值≤3 MPN/100 m L,金黄色葡萄球、菌沙门菌及志贺菌不允许检出。     

副猪嗜血杆菌病原夹心ELISA检测方法的建立及应用

为了建立一种准确、快速的副猪嗜血杆菌病原夹心ELISA检测方法,以副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5的特异性单克隆抗体1E2作为捕获抗体,兔抗副猪嗜血杆菌多克隆抗体作为检测抗体,通过方阵滴定优化夹心ELISA检测方法最佳反应条件,并对该检测方法进行特异性、敏感性验证以及临床样品的检测应用。结果显示,该检测方法中单克隆抗体1E2最佳包被浓度为3.434μg/m L,兔抗副猪嗜血杆菌多抗的最佳稀释浓度为3.350μg/m L,用10 mg/m L明胶37℃封闭1 h优于其他封闭液,辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔多体最佳使用浓度为1∶4 000。该检测方法的特异性试验结果显示可检测出15个血清型的副猪嗜血杆菌病原,而与其他病原菌的检测结果均为阴性。敏感性试验结果显示该方法能够检测出副猪嗜血杆菌的最低菌落浓度为1×106cfu/m L。利用该检测方法对临床115份副猪嗜血杆菌可疑病料进行检测结果显示可检出83份阳性样品,检出的阳性样品数高于细菌分离及PCR鉴定方法。上述结果表明所建立的副猪嗜血杆菌病原夹心ELISA检测方法特异性强、敏感性好并可应用到临床样品的检测。