超声辅助酶解茶渣蛋白制备抗氧化活性肽

利用食源蛋白制备具有抗氧化能力的天然活性肽是当前的研究热点。为了优化超声辅助酶解茶渣蛋白制备抗氧化活性肽工艺,本研究以茶渣为原料,以酶解液DPPH清除率为指标,在单因素逐级优化基础上,选定酶解pH值、温度、时间、加酶量进行4因素3水平正交试验设计和分析。结果表明,碱性蛋白酶较好,在p H值为7.5、温度50℃、时间20 min、加酶量为400 U/g、超声功率为105 W的优化条件下酶解,酶解液对DPPH清除率达为85.36%,比对照活性提高了为31.87%。可见,在本试验条件下低功率超声能有效提高碱性蛋白酶酶解茶渣蛋白效率,增加抗氧化活性肽得率,为开辟茶渣高值化利用的新途径提供实验依据。     

海马抗氧化活性肽制备工艺研究

旨在建立海马寡肽的制备工艺,探究寡肽的抗氧化活性。采用酶解法将海马原料制备成海马蛋白酶解肽,将游离氨基酸含量、DPPH·清除率及还原力作为考核指标,在获得制备海马酶解寡肽的最佳蛋白酶的基础上,选取酶添加量、pH、酶解温度及时间为因素,通过单因素和正交试验设计制备海马蛋白酶解肽,对其酶解工艺进行优化。最终获得海马抗氧化活性肽的最佳工艺条件为:风味蛋白酶添加量6000 U/g,酶解温度45℃,酶解时间9 h;在此工艺条件下,酶解产物的游离氨基酸含量为4.198 mg/m L,DPPH·清除率为92.758%,还原力为1.091。试验获得制备海马抗氧化活性肽最优酶解工艺,为进一步研发成保健食品提供坚实的基础。     

鸡血红蛋白抗氧化肽的制备工艺研究

以新鲜鸡血为原料,研究[E]/[S]、时间、温度和pH值对鸡血红蛋白抗氧化肽制备的影响,实验结果表明鸡血红蛋白抗氧化肽制备的最佳工艺条件为[E]／[S]3．0％、时间3h、温度41℃、pH值为1．5,此条件下制备的鸡血蛋白抗氧化肽的还原力最强为0．948。     

Protamex酶解玉米蛋白质制备生物活性玉米肽的研究

利用Protamex蛋白酶控制玉米蛋白水解,制备有利于消化吸收,具有降血压和抗氧化等特定生理功能的玉米肽。适度变性的玉米蛋白易被Protamex蛋白酶水解,热处理的时间和温度均影响玉米蛋白的变性程度,经温度85℃热处理60min的玉米蛋白的水解度最大。相同的水解时间,在pH值为9.0,温度60℃时,该酶对变性玉米蛋白的水解度最大,在此条件下酶解60min,消耗NaOH（5mol/L）16.3mL,玉米的水解度为32.5%,肽的得率为51.2%。SephadexG-25对玉米蛋白水解产物的分离结果表明,Protamex蛋白酶水解玉米蛋白可生成分子量不同的5个组分。     

蚕蛹蛋白抗氧化肽的制备及其纯化

以DPPH自由基清除率为指标,采用正交试验,优化Alcalase酶解蚕蛹蛋白制备抗氧化肽的工艺条件;采用超滤、DEAE-52纤维素柱层析,以及Sephadex G-50柱层析分离纯化蚕蛹蛋白抗氧化肽。试验结果表明,酶解液制备蚕蛹蛋白抗氧化肽的最优工艺条件为:酶解温度30℃,pH值7.5,时间20min,底物质量分数3%,加酶量3.5%。Mr≤5ku时,组分有很强的体外抗氧化活性,从Mr≤5ku组分中获得了5个抗氧化肽组分,它们的体外抗氧化活性大小依次为:组分Ⅱ>组分Ⅲ>组分Ⅰ>组分Ⅴ>组分Ⅳ。     

Protamex~酶解玉米蛋白质制备生物活性玉米肽的研究

利用Protamex~蛋白酶控制玉米蛋白水解,制备有利于消化吸收,具有降血压和抗氧化等特定生理功能的玉米肽。适度变性的玉米蛋白易被Protamex~蛋白酶水解,热处理的时间和温度均影响玉米蛋白的变性程度,经温度85℃热处理60min的玉米蛋白的水解度最大。相同的水解时间,在pH值为9.0,温度60℃时,该酶对变性玉米蛋白的水解度最大,在此条件下酶解60min,消耗NaOH(5mol/L)16.3mL,玉米的水解度为32.5%,肽的得率为51.2%。SephadexG-25对玉米蛋白水解产物的分离结果表明,Protamex~蛋白酶水解玉米蛋白可生成分子量不同的5个组分。     

酶解鹰嘴豆蛋白制备ACE抑制肽的研究

ACE抑制肽对血压调节起重要作用,对抑制ACE活性发挥着重要作用。为开发降血压多肽,以鹰嘴豆分离蛋白为原料,在碱性蛋白酶作用下水解,选择温度、pH值、酶与底物浓度比和水解时间4个因素,以ACE抑制率为评价指标,在单因素试验基础上,采用Box-Behnken响应面分析法优化酶解鹰嘴豆分离蛋白制备ACE抑制肽的条件。结果表明,最优水解条件为:温度50℃,pH值8.0,酶底比4%,水解时间4.0 h,在此条件下,ACE抑制率可以达到58.84%,验证试验ACE抑制率为(59.01±0.58)%,与理论值相符合。     

乳酪蛋白肽的固定化酶法制备工艺研究

以壳聚糖为载体,戊二醛溶液为交联剂,制备固定化木瓜蛋白酶。试验分析了壳聚糖浓度、给酶量、交联时间及戊二醛浓度对木瓜蛋白酶固定化效果的影响,并初步探讨了固定化木瓜蛋白酶水解制备乳酪蛋白肽的工艺。     

响应面优化超声波辅助酶解法制备樱桃核抗氧化多肽的研究

以樱桃核为原料,在单因素试验的基础上,以·OH清除率为评价指标,通过响应面法优化超声波辅助酶解法制备樱桃核抗氧化多肽工艺。结果表明,5%的樱桃核蛋白液在超声波功率170 W,30℃下预处理20 min后,在p H=7条件下加入碱性蛋白酶和胃蛋白酶(1∶1)4 500 U/g协同酶解,酶解温度50℃,酶解时间120 min,在此条件下,樱桃核酶解多肽的·OH清除率为51.98%,与预测值相近。     

鹰嘴豆短肽的分步酶解法制备及其营养价值评价

以鹰嘴豆蛋白为原料,建立复合酶分步酶解法制备鹰嘴豆短肽的工艺。在鹰嘴豆蛋白碱性蛋白酶Alcalase水解的基础上,进一步采用中性蛋白酶和风味蛋白酶Flavourzyme继续水解鹰嘴豆蛋白碱性蛋白酶Alcalase酶解物,并对各影响因素进行研究,建立短肽得率与各影响因素的回归模型,利用高效液相色谱法和氨基酸自动分析仪等测定鹰嘴豆短肽的相对分子质量、氨基酸组成、一般营养成分,评价鹰嘴豆短肽的营养价值。结果表明,中性蛋白酶和风味蛋白酶Flavourzyme制备鹰嘴豆短肽的最佳工艺参数为:复合酶添加量5 678 U/g,pH 7.0,水解时间216 min,水解温度55℃,在此条件下,短肽得率为63.79%,与碱性蛋白酶Alcalase单独酶解相比明显提高,水解度为26.74%;大部分水解产物的相对分子质量低于1 000、脂肪含量低,蛋白质、必需氨基酸等含量丰富,与FAO/WHO推荐的成人需求量模式相比,其第一限制氨基酸是蛋氨酸和半胱氨酸,与学龄儿童需求量模式相比,其第一限制氨基酸是苏氨酸,氨基酸分分别高达138.18和103.25;必需氨基酸与非必需氨基酸比值(EAA/NEAA)为0.73,接近FAO/WHO参考标准值0.6。该研究为进一步开发利用和工业化生产鹰嘴豆短肽奠定了基础。     

菌酶联合反应制备兔血抗氧化低聚肽

以兔血为原料,依次采用枯草芽孢杆菌发酵和碱性蛋白酶水解制备兔血抗氧化低聚肽,选取ABTS⁺·清除率和多肽含量作为评价指标,通过响应面试验优化发酵工艺和酶解工艺,确定最优发酵工艺参数和最优酶解工艺参数。结果表明,最优发酵工艺参数为:接菌量5.5 CFU/mL,底物浓度10 g/mL,发酵温度35℃,发酵时间3.5 d,此条件下,兔血低聚肽ABTS⁺·清除率为84.42%,多肽含量为2.84 mg/mL;最优酶解工艺参数为:酶底比200 U/g,酶解时间2.5 h,pH 10.4,酶解温度60℃,此条件下制备得到的兔血低聚肽的ABTS⁺·清除率为87.22%,与单一发酵工艺比较,差异不显著,而多肽含量为3.81 mg/mL,较单一发酵提高了1.34倍。综上,菌酶联合反应制备兔血抗氧化低聚肽法优于传统单一发酵法。     

Protamex(R)酶解玉米蛋白质制备生物活性玉米肽的研究

利用Protamex(R)蛋白酶控制玉米蛋白水解,制备有利于消化吸收,具有降血压和抗氧化等特定生理功能的玉米肽.适度变性的玉米蛋白易被Protamex(R)蛋白酶水解,热处理的时间和温度均影响玉米蛋白的变性程度,经温度85℃热处理60 min的玉米蛋白的水解度最大.相同的水解时间,在pH值为9.0,温度60℃时,该酶对变性玉米蛋白的水解度最大,在此条件下酶解60 min,消耗NaOH(5 mol/L)16.3 mL,玉米的水解度为32.5%,肽的得率为51.2%.SephadexG-25对玉米蛋白水解产物的分离结果表明,Protamex(R)蛋白酶水解玉米蛋白可生成分子量不同的5个组分.     

花生蛋白肽抗氧化能力稳定性研究

采用过氧化氢—碘化钾和邻二氮菲-Fe2+两种体系,研究了花生蛋白酶解产物(花生蛋白肽)在加热、冷冻、不同pH值条件下抗氧化特性的稳定性。结果表明,加热及冷冻对花生肽抗氧化特性的影响甚微,碱性环境中花生肽的抗氧化特性优于酸性环境。     

固定化酶制备大豆肽的研究

应用固定化碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白,并对制备大豆肽的工艺条件进行正交试验,结果表明,应用固定化碱性蛋白酶制备大豆肽的最佳工艺条件的底物浓度为3.8 mg/mL、温度60℃、pH值为8.8、时间为3 h,制得的大豆肽的水解度为39.20%,可溶性蛋白溶解指数（NSI）为0.995 7.     

固定化酶制备大豆肽的研究

应用固定化碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白,并对制备大豆肽的工艺条件进行正交试验,结果表明,应用固定化碱性蛋白酶制备大豆肽的最佳工艺条件的底物浓度为3.8 mg/mL、温度60℃、pH值为8.8、时间为3 h,制得的大豆肽的水解度为39.20%,可溶性蛋白溶解指数(NSI)为0.995 7.     

固定化酶制备大豆肽的研究

应用固定化碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白,并对制备大豆肽的工艺条件进行正交试验,结果表明,应用固定化碱性蛋白酶制备大豆肽的最佳工艺条件的底物浓度为3.8mg/mL、温度60℃、pH值为8.8、时间为3h,制得的大豆肽的水解度为39.20%,可溶性蛋白溶解指数(NSI)为0.9957。     

超声预处理对米渣酶解制备抗氧化肽的影响

为提高米渣酶解制备抗氧化肽的反应效率,采用超声预处理米渣。以酶解液对1,1-二苯基-2-苦基苯肼(DPPH)自由基的清除率作为评价指标,研究超声功率、超声时间、超声温度对米渣酶解产物抗氧化活性的影响。通过单因素和正交试验,得出超声预处理最佳工艺条件为超声功率150 W,超声时间15 min,超声温度50℃。在最佳条件下,酶解液对DPPH自由基的清除率为75.41%,抗氧化肽的得率为35.55%。与未经超声预处理比较,抗氧化肽得率提高了39.86%,酶解液对DPPH自由基清除率、·OH清除力和还原力吸光度的增长率分别为54.06%,64.87%和82.27%。     

杂色蛤酶解制备ACE抑制肽的工艺优化

杂色蛤酶解产物对ACE活性的抑制作用采用马尿酸法测定。以ACE抑制率和水解度为指标,通过单酶筛选,得出对杂色蛤肉酶解效果最佳的酶是木瓜蛋白酶。通过单因素试验和正交试验,确定木瓜蛋白酶酶解杂色蛤肉制备ACE抑制肽的最优工艺为料液比1∶10,加酶量1.5%,酶解温度45℃,p H值6.0,酶解时间1.5 h。酶解产物(10 mg/m L)对ACE的抑制率为86.7%,水解度为27.75%。酶解液经超滤,小于6 k Da部分(2 mg/m L)抑制率最高为52.3%,IC50为1.738 mg/m L。