紫菜降压肽酶膜耦合反应制备工艺RBF神经网络优化

以条斑紫菜为原料,利用建立的酶膜反应器制备紫菜降压肽,为获得最大蛋白转化率,采用径向基人工神经网络模型(RBF-ANN)对该工艺进行优化,并采用交互验证的方法优化并建立最优模型。通过模型的模拟及优化,得到间歇式酶膜耦合制备紫菜降压肽的最佳工艺条件：底物质量浓度1.0 g/mL、加酶量4%、反应温度50℃、pH值9.0、循环泵转速300r/min的条件下反应60min。其蛋白转化率为55.67%,多肽得率为22.27%,单位酶产肽量为13.91,IC50质量浓度为0.492 mg/mL。在优化工艺条件基础上进行连续酶膜耦合研究,结果表明：与传统酶解反应相比,蛋白转化率提高21.98%,多肽得率提高8.79%,单位酶肽产量比间歇反应提高     

了哥王总黄酮的纤维素酶提取及其抗氧化活性研究

优化纤维素酶提取了哥王总黄酮的工艺条件及研究其抗氧化活性。结果表明:了哥王总黄酮的最佳提取条件为液料比12mL/g、pH值4.4、酶浓度0.6%、酶解温度45℃和酶解时间90min,此时总黄酮得率为0.860%;在质量浓度13.14～78.82μg/mL和10.67～127.97μg/mL的范围内,其对DPPH自由基和羟基自由基的清除率分别为20.43%～70.89%和18.56%～66.05%,且清除效果与质量浓度之间都存在明显的量效关系。     

酶法制备竹笋短肽的工艺优化

为提高竹笋短肽得率(TCA-NSI)及水解度(DH),本文对Protamex和Papain同步复合酶解竹笋蛋白制备竹笋短肽的方法进行了系统研究。在单因素试验基础上,进行了四因素五水平的二次正交旋转组合试验,建立了TCA-NSI及DH与各种影响因素的回归模型。结合实际生产,确定了Protamex和Papain酶解竹笋蛋白的最适条件为:复合酶比例1:2、pH值7.0、温度58℃、酶用量9000U/g、酶解时间179min、底物浓度2%。在此条件下,体系TCA-NSI为70.69±0.57%,水解度为25.07±0.71%。     

超声波预处理对燕麦蛋白制备ACE抑制肽的影响

利用燕麦蛋白制备ACE抑制肽时先利用超声波对燕麦蛋白原料进行预处理研究.以ACE抑制活性和水解度为指标,考察了超声波功率、处理时间、超声波工作/间歇时间对燕麦蛋白预处理效果的影响.结果表明,超声波预处理的最佳工艺参数为:超声波功率500 W,处理时间20 min,超声波工作时间2 s、间歇时间2 s,该条件下酶解产物对ACE的半抑制浓度IC50值从0.533 mg/mL降到0.299 mg/mL,酶解时间由常规酶解的90 min缩短到60 min;超声波预处理参数变化虽然对水解度影响不显著,但对ACE抑制活性的影响显著;验证了超声波引起的蛋白疏水性增加是导致酶解产物ACE抑制活性显著改善的重要因为之一.     

条斑紫菜ACEI抑制肽的超滤分离与离子交换纯化

对条斑紫菜ACEI抑制肽进行了超滤分离和离子交换纯化的试验研究。先后采用截留分子量分别为10 kDa和3 kDa的超滤膜对条斑紫菜ACEI抑制肽超滤,分子量小于3 kDa的组分对ACE活性抑制最高,多肽的IC50值从超滤前的0.844 mg/mL下降到0.523 mg/mL。南开D61阳离子树脂对分子量小于3 kDa的ACEI抑制肽组分吸附率最大,用不同浓度氨水阶梯洗脱,得到第2个洗脱峰的蛋白回收率和活性回收率最高,分别为45.2%和61.5%,其IC50值最低,为0.127 mg/mL,比纯化前下降了75.7%。     

低分子量骨胶原肽酶解制备工艺优化和特性分析

酶解工艺参数不仅会影响畜禽骨蛋白的酶解效率,而且会改变骨胶原肽产物的肽分子量分布、氨基酸组成和微结构性能,从而影响其高值高效化利用。以制备均一性低分子量骨胶原肽为目的,以牛骨粉为研究对象,以水解度为主要评价指标,考察碱性蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶和风味蛋白酶对牛骨粉的酶解效果,探究双酶分步酶解工艺、脂肪酶预处理的单独与组合应用对酶解效果的提升作用,选定最优的低分子量骨胶原肽制备工艺;结合酶解过程中各项指标的变化、产物表征分析和Person相关系数法分析不同复合酶解工艺对产物特性的影响及作用机制。研究发现：经脂肪酶预处理-碱性蛋白酶-复合蛋白酶酶解工艺制备的骨胶原肽产物具有最佳的理化性质,优化的工艺参数为：底物质量浓度为0.09 g/mL、初始pH值7.5的牛骨粉溶液加入碱性脂肪酶（加酶量0.08%）在40℃下反应4 h,再加入碱性蛋白酶（加酶量0.36 U/g）在60℃下反应5 h后,最后加入复合蛋白酶（加酶量0.36 U/g）在55℃下反应5 h,此时,水解度可达16.12%,总游离氨基酸含量可达171.571 mg/g,其M_w、M_w/...     

Ultrafiltration and Ionic Exchange Purification of ACE Inhibitory Peptides from Hydrolysate of Porphyra yezoensis Protein

对条斑紫菜ACEI抑制肽进行了超滤分离和离子交换纯化的试验研究.先后采用截留分子量分别为10 kDa和3 kDa的超滤膜对条斑紫菜ACEI抑制肽超滤,分子量小于3 kDa的组分对ACE活性抑制最高,多肽的IC50值从超滤前的0.844 mg/mL下降到0.523 mg/mL.南开D61阳离子树脂对分子量小于3 kDa的ACEI抑制肽组分吸附率最大,用不同浓度氨水阶梯洗脱,得到第2个洗脱峰的蛋白回收率和活性回收率最高,分别为45.2％和61.5％,其IC50值最低,为0.127 mg/mL,比纯化前下降了75.7％.     

酪蛋白水解物的酶法修饰优化与抗氧化活性改善

利用木瓜蛋白酶对酪蛋白水解,并对所得到的水解物进行类蛋白反应修饰,制备高活性抗氧化肽.以水解物的游离氨基含量变化为响应值,利用响应面分析法对类蛋白反应条件进行优化,得到适宜条件为:酶添加量为500 U/g,温度30℃,底物质量分数50%,反应时间5.6 h.毛细管电泳分析确认,水解物经类蛋白反应修饰后肽分子组成发生变化.抗氧化活性分析结果表明,所制备的3个修饰产物对3种自由基的清除能力显著提高.     

Protamex酶解马铃薯蛋白粉制备抗氧化肽工艺优化

以马铃薯蛋白粉为原料,利用Protamex复合蛋白酶对其进行酶解制备抗氧化肽。以总抗氧化力为指标,采用Box-Behnken响应面设计对酶解工艺进行优化。结果表明,最佳酶解条件:底物质量浓度5%,加酶量4 000 Ug,酶解时间165 min,在此优化条件下得到的酶解产物的总抗氧化力为0.751 mmolL,回归得出的模型预测效果较好。      

纤维素酶提取银杏叶总黄酮的工艺优化

为了探讨纤维素酶对银杏叶中总黄酮提取的影响,试验采用单因素试验和响应曲面法对其提取工艺进行了研究,建立并分析了各主要影响因子与银杏叶总黄酮得率关系的数学模型。单因素试验结果表明:液料比对银杏叶总黄酮得率影响显著、酶浓度影响不显著、酶解时间影响极显著。通过RSM响应曲面法的进一步分析显示,回归方程P=0.0010<0.01,R2Adj为0.8831和Adeq.Precision为11.329,说明所建模型与试验值的拟合度很好。银杏叶总黄酮的纤维素酶提取工艺参数为液料比14.3mL/g、酶浓度0.41%和酶解时间48min;经试验验证,在此条件下得率为1.32%,与理论计算值1.30%基本一致。